2026年医学知识库竞赛题集生物化学检测方法与技术问题

2026年医学知识库竞赛题集生物化学检测方法与技术问题一、单选题（共10题，每题2分）题型说明：下列每题只有一个最佳答案。1.某医院生化实验室采用酶法测定血清谷丙转氨酶（ALT）活性，结果偏高，但质控在控。可能的原因是？A.试剂过期B.仪器未校准C.样本溶血D.仪器光源老化2.高效液相色谱（HPLC）法测定药物代谢产物时，常使用哪种检测器？A.紫外-可见检测器（UV-Vis）B.质谱检测器（MS）C.火焰离子化检测器（FID）D.放射免疫检测器（RIA）3.在全自动生化分析仪上检测血糖时，邻甲苯胺法与葡萄糖氧化酶法的主要区别是？A.响应速度B.干扰物质C.反应原理D.灵敏度4.电泳技术中，聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）最适用于分离哪种物质？A.蛋白质B.糖类C.脂类D.核酸5.酶联免疫吸附试验（ELISA）中，固相包被抗体后需用何种方法封闭非特异性位点？A.高温干燥B.甲醇洗涤C.5%脱脂奶粉溶液孵育D.荧光标记6.毛细管电泳（CE）分离氨基酸时，常使用哪种缓冲液体系？A.磷酸盐缓冲液B.硼酸缓冲液C.Tris-HCl缓冲液D.乙酸盐缓冲液7.原子吸收光谱法（AAS）测定血清钙时，干扰最严重的是哪种离子？A.钠离子（Na⁺）B.钙离子（Ca²⁺）C.镁离子（Mg²⁺）D.钾离子（K⁺）8.在蛋白质印迹（WesternBlot）实验中，一级抗体与二级抗体之间常用何种试剂连接？A.过氧化物酶B.生物素C.辣根过氧化物酶（HRP）D.辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素9.荧光偏振免疫分析（FPIA）的原理基于？A.抗原抗体结合的荧光猝灭B.电化学信号放大C.质谱成像D.同位素标记10.氨基酸分析仪测定混合氨基酸时，采用何种方法消除离子抑制？A.离子交换色谱B.等度洗脱C.柱前衍生化（FD）D.毛细管电泳二、多选题（共5题，每题3分）题型说明：下列每题有多个正确答案，错选、漏选均不得分。1.影响分光光度法测定准确性的因素包括？A.仪器波长漂移B.样品浊度C.试剂纯度D.溶液pH值E.读取时间延迟2.毛细管电泳（CE）技术的优点有？A.分离效率高B.样品消耗量少C.分析速度快D.适用于手性分离E.无需固定相3.酶联免疫吸附试验（ELISA）的常见类型包括？A.直接法B.间接法C.双抗体夹心法D.竞争法E.时间分辨荧光法4.色谱法中，影响保留时间的主要因素有？A.柱温B.洗脱剂极性C.固定相性质D.样品浓度E.流动相流速5.原子吸收光谱法（AAS）测定金属元素时，需采取的措施包括？A.使用空心阴极灯B.空气-乙炔火焰燃烧C.加入释放剂消除干扰D.使用石墨炉法E.消除背景吸收三、判断题（共10题，每题1分）题型说明：判断下列说法的正误。1.高效液相色谱（HPLC）法测定生物碱时，常用反相柱进行分离。（×）2.酶法测定肌酐时，肌酐酶的活性越高，结果越准确。（√）3.琼脂糖凝胶电泳适用于大分子DNA的分离。（√）4.原子吸收光谱法（AAS）可直接测定生物样品中的重金属含量。（×）5.免疫印迹（WesternBlot）实验中，一抗为兔抗人抗体，二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体。（√）6.毛细管电泳（CE）分离氨基酸时，需使用紫外检测器，因为氨基酸本身无荧光。（√）7.分光光度法测定血糖时，邻甲苯胺法比葡萄糖氧化酶法更灵敏。（×）8.酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标板需用酸洗液浸泡以封闭非特异性位点。（×）9.色谱法中，柱效越高，分离度越小。（×）10.荧光偏振免疫分析（FPIA）的灵敏度高于放射免疫分析（RIA）。（√）四、简答题（共5题，每题4分）题型说明：简述相关技术原理或操作要点。1.简述分光光度法测定吸光度的原理。2.简述蛋白质印迹（WesternBlot）实验的主要步骤。3.简述高效液相色谱（HPLC）法测定药物代谢产物的原理。4.简述酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标板洗涤的注意事项。5.简述毛细管电泳（CE）分离氨基酸的原理及关键条件。五、论述题（共2题，每题6分）题型说明：结合实际应用，分析技术优缺点或操作要点。1.比较原子吸收光谱法（AAS）与电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定血清重金属的优缺点。2.结合临床实际，分析酶联免疫吸附试验（ELISA）在传染病检测中的优势及注意事项。答案与解析一、单选题答案与解析1.C解析：溶血会导致游离血红蛋白干扰ALT测定，使结果假性升高。其他选项（试剂过期、仪器未校准、光源老化）均可能导致结果系统性偏差，但质控在控排除了仪器或试剂系统性问题。2.B解析：药物代谢产物结构复杂，质谱检测器（MS）具有高灵敏度和高选择性，适用于复杂混合物分析。UV-Vis仅适用于有紫外吸收的物质；FID主要用于有机物检测；RIA灵敏度虽高但已较少使用。3.C解析：邻甲苯胺法基于还原糖与试剂反应显色，而葡萄糖氧化酶法基于酶催化氧化葡萄糖产生过氧化氢，再氧化显色剂。两者反应原理不同。4.A解析：PAGE具有高分辨率，适用于蛋白质分离和纯化，可依据分子量和电荷差异分离。糖类、脂类、核酸分离常使用其他技术（如离子交换色谱、薄层色谱、凝胶电泳）。5.C解析：5%脱脂奶粉溶液可封闭未结合的抗体位点，防止非特异性结合。高温干燥会使抗体变性；甲醇洗涤仅去除杂质；荧光标记是检测手段，非封闭方法。6.B解析：硼酸缓冲液可分离氨基酸，因其与氨基酸的亚氨基或羧基形成络合物，影响迁移速度。磷酸盐、Tris-HCl、乙酸盐缓冲液适用于其他生物分子或离子分离。7.A解析：钠离子（Na⁺）在AAS中易干扰钙测定，需通过释放剂（如镧）竞争性结合Na⁺。Ca²⁺自身无干扰；Mg²⁺干扰较弱；K⁺影响较小。8.D解析：链霉亲和素（Streptavidin）可与生物素标记的二抗结合，再通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素放大信号。其他选项（过氧化物酶、生物素、HRP）仅部分参与反应。9.A解析：FPIA利用抗原抗体结合后荧光偏振度增加的原理，通过偏振滤光片检测信号变化。电化学信号放大是电化学免疫分析原理；质谱成像用于组织分析；RIA使用同位素标记。10.C解析：氨基酸分析仪通过柱前衍生化（如FD或ED）使氨基酸产生可检测的荧光或吸收特性，消除离子抑制。离子交换色谱、等度洗脱、毛细管电泳均不直接解决离子抑制问题。二、多选题答案与解析1.A、B、C、D、E解析：波长漂移影响读数准确性；浊度导致散射干扰；试剂纯度影响反应速率；pH值改变酶活性或离子解离状态；读取时间延迟引入系统误差。2.A、B、C、D解析：CE分离效率高（理论上可达百万级）；样品消耗量少（纳升级）；分析速度快（分钟级）；适用于手性分离（利用手性selectors）；但需固定相（如毛细管壁涂层）。3.A、B、C、D解析：直接法（固相包被抗原）；间接法（固相包被抗原，二抗检测）；双抗体夹心法（捕获抗体+检测抗体）；竞争法（待测物与标记物竞争结合抗体）；时间分辨荧光法（TRFIA）虽属ELISA范畴，但原理不同。4.A、B、C、E解析：柱温升高，保留时间缩短；洗脱剂极性影响分配系数；固定相性质决定分离模式；流速影响分析时间，但不改变保留时间；样品浓度影响峰高，不影响保留时间。5.A、B、C、D、E解析：AAS需空心阴极灯发射特征谱线；空气-乙炔火焰适用于碱金属和碱土金属；释放剂（如镧）消除干扰；石墨炉法适用于难挥发元素；背景吸收需通过氘灯校正或塞曼效应消除。三、判断题答案与解析1.×解析：反相HPLC（如C18柱）适用于非极性化合物，而生物碱极性较强，常使用正相柱或离子交换柱。2.√解析：肌酐酶活性越高，催化反应越完全，结果越准确。3.√解析：琼脂糖凝胶电泳孔径较大，适用于大片段DNA（>0.5kb）分离。4.×解析：生物样品需消化（酸消解或微波消解）后测定，直接测定易受有机物干扰。5.√解析：常用配置为兔抗人抗体（一抗）+羊抗兔HRP标记二抗。6.√解析：氨基酸无荧光，需紫外检测器（如254nm）或荧光衍生化后检测。7.×解析：葡萄糖氧化酶法特异性高，干扰少，优于邻甲苯胺法（易受其他还原糖干扰）。8.×解析：酸洗液会破坏抗体活性，正确方法是封闭液（如脱脂奶粉）。9.×解析：柱效越高，分离度越大。10.√解析：FPIA无放射性，灵敏度高于RIA，且可定量。四、简答题答案与解析1.分光光度法测定吸光度的原理答案：分光光度法基于朗伯-比尔定律（A=εbc），即吸光度（A）与样品浓度（c）、路径长度（b）和摩尔吸光系数（ε）成正比。通过测定样品对特定波长光的吸收程度，计算其浓度。2.蛋白质印迹（WesternBlot）实验的主要步骤答案：-蛋白质提取与电泳分离（SDS）；-转膜（PVDF或NC膜）；-封闭（封闭液封闭非特异性位点）；-一抗孵育（特异性结合）；-二抗孵育（放大信号）；-底物显色或化学发光检测。3.高效液相色谱（HPLC）法测定药物代谢产物的原理答案：HPLC通过色谱柱分离混合物，流动相携带样品通过柱子，各组分因与固定相作用力不同而保留时间不同，紫外或荧光检测器检测各组分，定量分析代谢产物。4.酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标板洗涤的注意事项答案：-使用洗涤缓冲液（含Tween-20）充分洗涤，防止背景干扰；-洗涤次数和时间一致；-避免洗脱抗体；-洗涤后及时吸干，防止残留影响反应。5.毛细管电泳（CE）分离氨基酸的原理及关键条件答案：原理：利用氨基酸在电场中泳动速度差异（电荷/质量比不同）进行分离。关键条件：-缓冲液（如硼酸）选择；-温度控制；-进样方式（压力或电进样）；-检测器（紫外或荧光）。五、论述题答案与解析1.比较原子吸收光谱法（AAS）与电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定血清重金属的优缺点答案：-AAS：优点：仪器成本较低，操作简便，适合常规检测单一元素（如铅、镉）；缺点：灵敏度较低，无法同时测定多种元素，易受基体干扰。-ICP-MS：优点：高灵敏度，可同时测定多种元素，基体效应小；缺点：仪器成本高，复杂样品需预处理，易受仪器维护影响。结论：选择取决于检测需求（单元素vs多元素）、成本及实验室条件。2.结合临床实际，分析酶联免疫吸附试验（ELISA）在传染病检