热炎宁合剂改善急性咽炎的作用研究

目录TOC\o"1-3"\h\u正文 摘要目的：探讨热炎宁合剂对氨水诱导的急性咽炎大鼠的抗炎作用。方法：本研究采用15%氨水喷雾法来构建大鼠急性咽炎模型，把实验动物随机划分到6个处理组，分别是空白对照组、模型对照组、阿莫西林阳性对照组以及热炎宁合剂低剂量组、中剂量组、高剂量组，除了空白对照组之外，其余各个组都要接受连续3天的15%氨水咽喉喷雾处理，以此来建立急性咽炎模型。在模型成功构建完成后，各个组的动物分别接受对应的药物干预，每天给药1次，持续3天，在实验进行的过程中系统观察大鼠咽炎症状的变化情况，并且在末次给药之后实施麻醉处死，采集血液样本用于后续的分析。取大鼠咽部黏膜及黏膜下组织，通过苏木素-伊红（HE）染色观察咽部组织黏膜层病理组织形态学变化情况。采用酶联免疫吸附试验法（ELISA法）测定各组血清炎症因子；利用全自动血液细胞分析仪来针对受试者外周血样本展开操作，以此对其中白细胞的总数、中性粒细胞的绝对值以及淋巴细胞的绝对值给予定量检测。结果：实验得出的结果显示，和对照组相比较而言，模型组的实验动物在咽部这个区域，出现了黏膜以及黏膜下层组织厚度有所增加的情况，出现大量炎性细胞浸润，颜色加深，表明造模成功；与模型组相比，热炎宁合剂中、高剂量组出现症状减轻，表现为咽部组织黏膜层变薄，炎性细胞浸润减少，颜色变浅。运用酶联免疫吸附试验即ELISA检测得出，模型组实验动物血清里肿瘤坏死因子-α也就是TNF-α的含量，相较于空白对照组有明显上升，经统计学分析有较大意义（P<0.01），白细胞介素-10即IL-10的水平则出现明显下降（P<0.01）。经高剂量热炎宁合剂干预之后，模型动物血清IL-10浓度相较于未治疗模型组有明显回升（P<0.01），全血细胞计数分析结果显示，模型组与空白组在外周血白细胞总数方面虽未呈现出明显差异，然而模型组中性粒细胞比例明显高于对照组（P<0.05），而淋巴细胞比例则明显低于对照组（P<0.01）；与模型组相比，热炎宁合剂中剂量组和高剂量组大鼠淋巴细胞计数均显著升高（P<0.001，P<0.05）。结论：热炎宁合剂可以明显减轻急性咽炎大鼠的一般症状及病理改变，抗炎效果良好。关键词：急性咽炎；热炎宁合剂；大鼠急性咽炎模型正文引言1.1急性咽炎急性咽炎（acutepharyngitis，AP）是发生在咽部黏膜及粘膜下组织的急性炎症ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[1,2]，常累及咽部淋巴组织，多为上呼吸道感染，中医称之为“急喉痹”ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[3-5]。AP的主要病因包括病毒感染（如柯萨奇病毒、腺病毒、副流感病毒等）、细菌感染（如链球菌、葡萄球菌等）以及环境因素（如高温、粉尘、烟雾、饮食等）等几大类ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[4,6-9]。AP的典型临床表现主要包括咽痛、咽干、咽痒、咽喉水肿、吞咽困难、咳嗽咳喘、、呼吸困难等局部症状，以及发热、头痛、乏力等全身症状ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[4-7,10]。急性咽炎在我国的发病率可高达17.6%，且呈不断上升趋势ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[4]；AP起病急，且病情发展迅速，若未及时就医，将会引起中耳炎、鼻窦炎和喉炎等一系列疾病,甚至会发展为慢性咽炎ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[4,5,7,8]。在儿童及青少年群体中，其发病率可高达19.3%~20.1%，明显高于其他年龄段ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[11]；造成AP的病因有很多，如：现代社会的发展使工业化程度越来越高、环境污染、季节因素、职业因素、心理因素以及不良生活习惯等因素都会显著增加疾病发生的几率ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[5,12]。AP的这些特征为临床诊断和治疗提供了重要的参考依据。目前急性咽炎的治疗大多数会使用糖皮质激素以及抗生素来进行治疗，这些药物虽然短期内快速有效，但若长期使用，则会导致耐药菌的形成，增加了治疗难度和治疗成本ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[5,6]。目前较为常见治疗咽炎的药物有很多，例如：杨顺通过观察患病志愿者服用药物后的临床表现得出结论，西瓜霜润喉片具有显著的消炎止疼和生津解渴的的临床效果，且副作用小ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>杨顺</Author><Year>2021</Year><RecNum>32</RecNum><DisplayText>[13]</DisplayText><record><rec-number>32</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="res5txfxd0z9e6e0vvzprszastzzvar9spee"timestamp="1746370056">32</key></foreign-keys><ref-typename="中文文献">40</ref-type><contributors><authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">杨顺</style></author></authors><secondary-authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">杨顺</style></author></secondary-authors></contributors><auth-address><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">宁波口腔医院</style><styleface="normal"font="default"size="100%">;</style></auth-address><titles><title><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">西瓜霜润喉片治疗咽喉口腔疾病的疗效观察</style></title><secondary-title><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">中国医学文摘</style><styleface="normal"font="default"size="100%">(</style><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">耳鼻咽喉科学</style><styleface="normal"font="default"size="100%">)</style></secondary-title></titles><periodical><full-title>中国医学文摘(耳鼻咽喉科学)</full-title></periodical><pages>103-105</pages><volume>36</volume><number>05</number><keywords><keyword>西瓜霜润喉片</keyword><keyword>咽喉口腔疾病</keyword><keyword>治疗效果</keyword></keywords><dates><year>2021</year></dates><isbn>1001-1307</isbn><call-num>11-2249/R</call-num><urls><related-urls><url>/doi/10.19617/j.issn1001-1307.2021.05.103</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.19617/j.issn1001-1307.2021.05.103</electronic-resource-num><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[13]；杨雪等人基于网络药理学和分子对接技术探讨了蒲地蓝消炎口服液是通过作用于IL-6、CXCL8、IL-10等核心基因表达的蛋白上，从而参与了AP的治疗ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[14]；李根通过实验发现，银马解毒颗粒可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，减轻大鼠炎症反应，进而发挥对急性咽炎的治疗作用等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>李根</Author><Year>2023</Year><RecNum>28</RecNum><DisplayText>[15]</DisplayText><record><rec-number>28</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="res5txfxd0z9e6e0vvzprszastzzvar9spee"timestamp="1746359751">28</key></foreign-keys><ref-typename="中文文献">40</ref-type><contributors><authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">李根</style></author></authors><secondary-authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">李根</style></author></secondary-authors><tertiary-authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">张丹</style><styleface="normal"font="default"size="100%">,</style></author></tertiary-authors></contributors><titles><title><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">银马解毒颗粒治疗急性肺损伤和急性咽炎的作用及机制研究</style></title></titles><keywords><keyword>银马解毒颗粒</keyword><keyword>脂多糖</keyword><keyword>急性肺损伤</keyword><keyword>炎症</keyword><keyword>氧化应激</keyword><keyword>JAK2/STAT1信号通路</keyword><keyword>银马解毒颗粒</keyword><keyword>氨水</keyword><keyword>急性咽炎</keyword><keyword>炎症</keyword><keyword>氧化应激</keyword><keyword>PI3K/AKT/mTOR信号通路</keyword></keywords><dates><year>2023</year></dates><work-type><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">硕士</style></work-type><urls><related-urls><url>/doi/10.27648/ki.gzxhu.2023.000675</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.27648/ki.gzxhu.2023.000675</electronic-resource-num><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[15]。热炎宁合剂有清热解毒以及退热的功效，在此基础上，本研究着重对该制剂在抗咽炎方面的潜在治疗效果展开考察。1.2动物急性咽炎模型动物急性咽炎造模常用的动物模型主要包括大鼠模型、小鼠模型以及家兔模型，为了模拟以环境污染或不健康的生活方式为因素而造成的急性咽炎，通常使用氨水、辣椒素等刺激物以及细菌感染来建立其模型，其中以大鼠急性咽炎模型最为常见ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[6,7,16]。表格SEQ表格\*ARABIC1大鼠造模方法造模方法操作步骤造模成功现象氨水造模法固定大鼠头部，用喉头喷雾器将15%氨水喷向大鼠咽部，每天2次，每次3下，连续3天ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[5,9,10]。大鼠出现搔抓口部，唾液分泌增多，流涎，咽部黏膜红肿，呼吸急促，咳喘，即形成了大鼠急性咽炎模型ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[17-19]。以无菌棉签蘸取2.5%氨水涂抹于咽部，每日1次，连续7天ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[20]。同上辣椒素造模法固定大鼠头部，使用喉头喷雾器将辣椒素溶液直接喷于咽部黏膜，每次喷雾量0.1-0.2mL，每日2次，连续3-5天ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[16]。同上细菌感染法使用灭菌止血钳翻开大鼠口腔，暴露上颌黏膜，用注射器吸取金黄色葡萄球菌溶液0.02mL（或乙型溶血性链球菌菌液0.15mL），注入大鼠上颌口颊部分的口腔黏膜咽部黏膜（或咽部黏膜）处，每天1次，连续造模3天ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[21-23]。大鼠的咽部黏膜出现红肿，伴随着呼吸急促，咳喘等针状，即造成大鼠咽部感染发炎ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[21,23]。参考以上几种方法，以及探究其操作难易程度和预实验的操作结果后综合考虑，本实验采取大鼠氨水造模法的第一种方法，将15%氨水用喉头喷雾器喷向大鼠咽部，以构建大鼠急性咽炎模型。1.3热炎宁合剂中医认为AP是肺阴亏虚、虚火上炎至咽所致，治疗时多以清热解毒为主要原则ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>王蓓</Author><Year>2019</Year><RecNum>30</RecNum><DisplayText>[24]</DisplayText><record><rec-number>30</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="res5txfxd0z9e6e0vvzprszastzzvar9spee"timestamp="1746366892">30</key></foreign-keys><ref-typename="中文文献">40</ref-type><contributors><authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">王蓓</style></author></authors><secondary-authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">王蓓</style></author></secondary-authors><tertiary-authors><author><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">傅旭春</style><styleface="normal"font="default"size="100%">,</style></author></tertiary-authors></contributors><titles><title><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">抗咽炎中药复方颗粒剂的研究</style></title></titles><keywords><keyword>咽炎</keyword><keyword>白花蛇舌草</keyword><keyword>蒲公英</keyword><keyword>浙贝母</keyword><keyword>木蝴蝶</keyword><keyword>颗粒剂</keyword><keyword>正交设计</keyword><keyword>质量标准</keyword><keyword>抗炎作用</keyword></keywords><dates><year>2019</year></dates><work-type><styleface="normal"font="default"charset="134"size="100%">硕士</style></work-type><urls><related-urls><url>/doi/10.27461/ki.gzjdx.2019.002939</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.27461/ki.gzjdx.2019.002939</electronic-resource-num><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[24]。热炎宁合剂是一种经典复方制剂，由虎杖、蒲公英、半枝莲以及北败酱这四味中药材配伍制成，在2020年版《中国药典》里明确记载，它有清热解毒的功效，这种制剂在临床上主要适用于外感风寒入里化热引发的各种症状，像风热感冒伴有发热、咽喉肿痛、口干口苦、咳吐黄痰，以及小便短赤、大便秘结等临床表现。并且对于化脓性扁桃体炎、急性咽炎、急性支气管炎以及单纯性肺炎等呼吸系统炎性疾病，也有着不错的治疗效果。其中，虎杖有清利湿热、止咳化痰之功效ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[25]，蒲公英入肝经、胃经，温病初起外感热邪，其可清解热毒散邪，且热邪易结于足阳明胃经ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[26]，半枝莲具有清热解毒、散瘀、止血、止痛等作用ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[27]，北败酱有解毒排脓，活血消痈之功效，这四味中草药结合起来，相辅相成，具有良好的抗咽炎作用。本研究借助氨水诱导生成的大鼠急性咽炎模型，全面评估热炎宁合剂的潜在治疗效果，着重探寻其对急性咽炎病理进程的干预作用以及可能存在的作用机制。材料与方法2.1实验药物表格SEQ表格\*ARABIC4实验药物药物名称生产公司批号热炎宁合剂清华德人西安幸福制药有限公司JX2410017阿莫西林胶囊珠海联邦制药股份有限公司中山分公司4A0021082.2实验动物此次研究选取了成都达硕实验动物中心所提供的SPF级雄性SD大鼠作为实验对象，这些大鼠初始体质量的范围是180±20g，在实验进行的期间，动物饲养的环境被严格把控在温度21±3℃、相对湿度50%±5%的条件之中，并且保持每天12h的光照周期，所有大鼠都可自由去摄取同一供应商所提供的大鼠专用饲料以及饮用水。值得注意的是，本研究里涉及的动物实验方案已经依靠了陕西中医药大学实验动物伦理委员会的审查并且被批准实施（伦理批准号：SUCMDL20250210002）。2.3实验试剂表格SEQ表格\*ARABIC5实验试剂试剂名称生产公司批号25%氨水天津新市富宇精细化工有限公司202411154%组织固定液陕西中晖赫彩生物医药科技有限公司BB1116肿瘤坏死因子α（tumornecrosisfactorα，TNF-α）Elisa检测试剂盒酶免生物科技有限公司MM-0180R1白细胞介素6（interleukin6，IL-6）Elisa检测试剂盒酶免生物科技有限公司MM-0190R1白细胞介素1β（interleukin1β，IL-1β）Elisa检测试剂盒酶免生物科技有限公司MM-0047R12.4实验仪器表格SEQ表格\*ARABIC6实验仪器仪器名称生产公司喉头喷雾器江苏平安医疗器械有限公司SynergyH1全功能酶标仪美国伯滕仪器有限公司2.5实验动物及分组60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、阿莫西林阳性药组（0.3g/kg）、热炎宁合剂低剂量组（热炎宁-L，2.5mL/kg）、中剂量组（热炎宁-Z，5mL/kg）和高剂量组（热炎宁-H，10mL/kg）。2.6实验方法实验流程图见图1。各组大鼠适应性饲养7天。第8天，除空白组外，其余组使用喉头喷雾器将15%氨水（V/V）喷于大鼠咽部构建急性咽炎大鼠模型（取30mL的25%氨水加蒸馏水至50mL配置成的15%氨水），在构建实验动物模型时，所采用的给药方案是每日进行两次给药操作，每一次鼻腔喷雾的剂量设定为0.5mL，持续进行3天的给药之后，借助对大鼠咽部黏膜充血肿胀程度的细致观察，以及如大鼠频繁挠抓口咽部这类行为学指标的监测，以此来确认模型是否成功建立。取热炎宁合剂低、中、高剂量组的灌胃药物，每日1次。取阿莫西林胶囊5粒（0.25g/粒），加蒸馏水25ml配成溶液0.05g/mL，用于阿莫西林阳性药组的灌胃给药。造模成功后早上连续灌胃给药3天，每日1次。大鼠在第13天灌胃处理完毕后，从21时开始进行禁食操作，到了第二天，先采用腹腔注射2%戊巴比妥钠溶液的方式使其麻醉，接着借助腹主动脉采血并分离出血清样本，获取咽部组织并将其放置于4%组织固定液中进行固定，以此来为后续开展HE染色病理学切片观察做准备。对大鼠咽部黏膜及黏膜下组织HE染色观察咽部组织黏膜层病理组织形态学变化情况；借助酶联免疫吸附试验，依据试剂盒的操作规范严格开展，对血清里的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-10以及白细胞介素-1β等炎症因子水平展开定量检测，利用全自动血液细胞分析仪，针对全血样本中的白细胞总数以及其亚群中性粒细胞和淋巴细胞数量进行精确的计数分析。图1实验流程图2.7统计学分析本研究运用SPSS19.0统计软件来开展数据分析工作，全部计量资料都以均数加上或者减去标准差的形式给予呈现，针对两组数据进行比较的时候采用独立样本t检验的方式，而在对多组数据间的差异进行比较时则运用单因素方差分析方法，统计较大性水平规定为P值小于0.05。实验结果3.1热炎宁合剂对急性咽炎大鼠咽部组织病理学影响从图1和图2可看出，运用HE染色法针对各实验组大鼠的咽部黏膜以及黏膜下组织展开观察与分析，实验所得到的数据说明，和正常对照组相比较而言，模型组动物的咽部黏膜以及黏膜下组织出现了较为十分突出的病理变化，具体体现为组织皮层较大增厚、表层细胞有较为十分突出的剥脱现象，同时还伴有大量炎性细胞浸润以及组织染色变深等特点。阳性对照组以及热炎宁合剂中、高剂量干预组均呈现出了不同程度的症状改善效果，其病理学特征主要是咽部黏膜层厚度减小以及炎性细胞浸润程度降低，颜色变浅。图2热炎宁合剂对各组大鼠咽部组织病理变化的影响（标尺：50μm）注：工艺变更前各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图3热炎宁合剂对各组大鼠咽部组织病理变化的影响（标尺：20μm）注：工艺变更前各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H3.2热炎宁合剂对急性咽炎大鼠血清中炎症因子的影响热炎宁合剂对急性咽炎大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10和IL-1β的影响见图4~7。与空白组相比，模型组大鼠血清中TNF-α水平显著性升高和IL-10水平显著降低（P<0.01，P<0.01）（图4、图6），IL-6和IL-1β水平无显著变化（图5、图7）；与模型组相比，热炎宁合剂低剂量组大鼠血清中TNF-α水平降低（P<0.05）（图4），热炎宁合剂高剂量组大鼠血清IL-10水平显著升高（P<0.01）（图6）。图4热炎宁合剂对各组大鼠血清中TNF-α的影响（n=6）注：与空白组相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图5热炎宁合剂对各组大鼠血清中IL-6的影响（n=6）注：与空白组相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图6热炎宁合剂对各组大鼠血清中IL-10的影响（n=6）注：空白组相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图7热炎宁合剂对各组大鼠血清中IL-1β的影响（n=6）注：与空白组相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H3.3热炎宁合剂对急性咽炎大鼠血清中血细胞的影响采集新鲜血液后，通过全血细胞分析仪测定各组大鼠血清中全血白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数目，结果如图8、图9和图10所示。与空白组相比，模型组大鼠全血白细胞计数无明显差异（图8），模型组大鼠中性粒细胞计数显著升高（P<0.05）（图9），淋巴细胞计数显著降低（P<0.01）（图10）；与模型组相比，热炎宁合剂中剂量组和高剂量组大鼠淋巴细胞计数均显著升高（P<0.001，P<0.05）（图10）。图8热炎宁合剂对各组大鼠血清中全血白细胞数目的影响（n=6）注：vs空白组，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图9热炎宁合剂对各组大鼠血清中中性粒细胞数目的影响（n=6）注：vs空白组，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H图10热炎宁合剂对各组大鼠血清中淋巴细胞数目的影响（n=6）注：vs空白组，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001；vs模型组，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；热炎宁合剂各剂量组：热炎宁-L，热炎宁-Z，热炎宁-H讨论急性咽炎（AP）是一种常见上呼吸道感染，其特征是急性、非特异性炎症，通常由化学刺激、细菌或病毒感染触发ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[3]。AP广泛发生，伴有充血、水肿和咽喉痛等症状，这些症状以其持续性、季节性、复发性和多因素性为特点，对人类健康和日常生活产生重大影响ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[3,12,19]。中医药复方制剂在治疗急性咽炎方面表现出独特的优势，顾毅等人结合网络药理学和多组学研究出牛黄上清丸通过调节花生四烯酸代谢和TNF/p38-MAPK/NF-κB信号通路，从而有效改善了AP的机制ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[16]；黄海等人根据中国经典药方《伤寒论》配制出解庚汤，并研究其药理作用及机理，发现解庚汤是通过抑制NF-κB和MAPK信号通路，从而有效地改善AP症状ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[17]。热炎宁合剂是临床常用清热解毒的中药复方制剂，对治疗上呼吸道感染、感冒、发热、肺炎等多种呼吸道疾病具有良好效果，且抗病毒效果显著ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[28]。热炎宁合剂的网络药理学研究表明，它通过抑制促炎细胞因子的产生、调节关键靶点（如肿瘤坏死因子、干扰素-γ、肿瘤蛋白P53、C反应蛋白、过氧化物酶体增殖物激活受体γ）来抑制炎症、调节免疫功能并减少肺损伤，从而达到治疗炎症的目的ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[29]。尽管有证据表明热炎宁合剂治疗炎症的有效性，但评估热炎宁合剂对AP的疗效和安全性仍然缺乏对照临床试验。在这里，我们的研究结果提供了实验证据表明热炎宁合剂能够明显改善大鼠APADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Yajuan</Author><Year>2021</Year><RecNum>51</RecNum><DisplayText>[30]</DisplayText><record><rec-number>51</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="res5txfxd0z9e6e0vvzprszastzzvar9spee"timestamp="1747108903">51</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>LiYajuan</author><author>ZhangJingxia</author><author>LiShasha</author><author>LiFan</author><author>ZhaoChongbo</author><author>LiFang</author><author>WangWeifeng</author><author>WangWei</author></authors></contributors><auth-address>PharmacyCollege,ShaanxiUniversityofChineseMedicine,Xianyang;ShaanxiAcademyofTraditionalChineseMedicine,Xi’an,Shaanxi,China.</auth-address><titles><title>EfficacyandsafetyofReyanningmixturecombinedwithconventionalWesternmedicinefortreatingCOVID-19:Aprotocolforsystematicreviewandmeta-analysis</title><secondary-title>Medicine</secondary-title></titles><periodical><full-title>Medicine</full-title></periodical><pages>e24169-e24169</pages><volume>100</volume><number>3</number><dates><year>2021</year></dates><isbn>0025-7974</isbn><urls><related-urls><url>/kcms2/article/abstract?v=Zb3wS6iuiaNoETL0fiR0ls49fZuGP5fZkY7C0xGaGEGJ5om_8pW98Kr6aGi8hghjSgoDeboLSYed4ACbOWf-JgTRhJ-F8sB4G12lMtF_P77TASdiiVoYA7x9MrxmG1L5n11dBZhie-KD7QoBmp4k8uu1ge9Lr67bgAt4-grlHzkLTkuk-YD69kwbH9jHqmdQECMzcQUwxXzeBOzSfvJhfwt4A4G3Xj6N&uniplatform=NZKPT&language=CHS</url></related-urls></urls><remote-database-provider>Cnki</remote-database-provider></record></Cite></EndNote>[30]。动物AP造模方法有很多，如大鼠的15%氨水造模法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[5,9,10,20]，辣椒素刺激造模法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[16]，在咽部注射金黄色葡萄球菌（或乙型溶血性链球菌）菌液感染法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[21-23]；小鼠的乙型溶血性链球菌菌液滴鼻法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[23,31]，咽部注射腺病毒病毒液感染法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[32]；家兔的6%氨水造模法ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[33,34]，在咽部注射金黄色葡萄球菌菌液(或柯萨奇B4病毒液)感染法等ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[32]。这三种AP动物模型是目前使用最多的，并且15%氨水咽部干预法是公认的一种简便易行的方法，常用于临床前研究中评价抗AP药物的疗效和作用机制。因此，本研究采用15%氨水来建立AP大鼠模型ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[35]。实验结果表明，造模后的AP大鼠，出现搔抓口部，唾液分泌增多，流涎，咽部黏膜红肿，呼吸急促，咳喘等相关症状，HE染色显示AP模型大鼠咽部组织发生了黏膜上皮细胞脱落、黏膜下腺体增生、炎性细胞浸润以及粘膜下血管充血、扩张等病变，即表示AP大鼠建模成功ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[11]。袁东杰等人探究牡荆素治疗AP的作用机制，通过对比各组大鼠HE组织病理学染色结果，发现牡荆素各剂量组大鼠咽部组织损伤程度明显减轻牡荆素高剂量组改善最为显著ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[36]。同样，在本次研究中，相对于模型组，热炎宁合剂中、高剂量组大鼠咽部组织损伤程度有明显减轻，腺体数量减少，黏膜下血管充血、扩张现象减轻，炎症细胞浸润情况减少，表明热炎宁合剂能够明显改善AP大鼠咽部组织病理学改变ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[11,35-37]。现代医学研究表明，炎症细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-10与急性咽炎严重程度密切相关，其中，IL-6、IL-1β、TNF-α是促炎介质，当水平升高时，就能够增殖分化产生抗体，从而引发炎症。高语嫣等人通过探究发现六灵解毒丸能明显下调AP大鼠血清与组织中的IL-1β、IL-6、TNF-α水平，从而达到治疗AP的效果ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[9]。郭晴晴等人基于网络药理学与分子对接探讨牛黄利咽丸治疗急性咽炎的作用机制，发现牛黄利咽丸中的黄酮类化合物如山柰酚、黄芩素等，具有明显的抗炎作用，其中黄芩素是通过降低咽炎大鼠血清中的TNF-α、IL-1β、IL-6水平，以此发挥抗炎效果ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[38]。在本次实验中，通过炎症因子分析结果同样可以显示，相对于模型组，热炎宁合剂可明显抑制AP大鼠血清中TNF-α水平表达，并提升IL-10水平表达，发挥了抗AP作用ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[15,22,37]。全血细胞计数包括白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板，其中白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞在炎症和免疫反应中发挥重要作用。高蓉蓉等人认为炎症会诱导淋巴细胞凋亡，影响循环淋巴细胞的功能，减少淋巴细胞的数量，同时炎症释放的促炎症细胞因子、脂多糖和缺氧信号会延长中性粒细胞的寿命ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[39]。因此，提升淋巴细胞的数量，降低中性粒细胞的数量，就可以达到改善炎症的目的。在本研究中，通过观察全血细胞分析仪测定各组大鼠血清中各全血细胞的数目，可以明显发现，相对于模型组，热炎宁合剂可明显提升淋巴细胞的数目，降低中性粒细胞的数目，表明热炎宁合剂具有抗炎效果。综上所述，此研究通过实验，表明了热炎宁合剂可以明显改善AP大鼠的咽部组织的损伤程度，通过抑制AP大鼠血清中TNF-α水平表达，提升IL-10水平表达，增加淋巴细胞的数量，降低中性粒细胞的数量，以此达到改善大鼠咽炎的效果。结论本实验采用连续3天给大鼠咽部喷15%氨水，成功建立了大鼠急性咽炎模型，通过病理染色切片，ELISA试剂盒和全血细胞分析结果可知，热炎宁合剂可以明显减轻急性咽炎大鼠的一般症状及病理改变，具有很好的抗炎作用。参考文献ADDINEN.REFLIST[1] 权伟,刘畅,周英,等,基于NF-κB/STAT信号通路探究朱砂根治疗大鼠急性咽炎的作用机制[J].Journal,2022,53:6083-6092.[2] A,S.E.,W.Vincent,B.M.M,etal.,Pharyngitis:Approachtodiagnosisandtreatment.CanadianfamilyphysicianMedecindefamillecanadien[J],2020.66(4):p.251-257.[3] Zhao,Q.,X.Wang,Y.Jin,etal.,TheeffectofYinhuangHanhuadroppingpillonacutepharyngitisviaasystematic“Compound-Target-Pathway”analysis.Phytomedicine[J],2025.139:p.156423-156423.[4] 翁永彩and吴勇,血清PGⅠ、PGⅡ及IL-1β在急性咽炎患者中的表达及意义[J].Journal:1-13.[5] 陈姣,王继森,郭亭君,等,基于网络药理学和实验验证探究青龙白虎汤改善急性咽炎的作用机制[J].Journal,2024,55:5875-5886.[6] 党兆岩,刘畅,何倩倩,等,基于网络药理学的山豆根调控白细胞跨内皮迁移通路改善急性咽炎的作用机制[J].Journal,2023,39:348-356.[7] 雷燕莉,唐焓嫣,时政,等,清肺饮治疗急性咽炎模型大鼠的药效及代谢组学研究[J].Journal,2024,49:568-578.[8] Bai,T.,S.Bao,Y.Li,etal.,ThestructuraldiscrepancybetweentheabilityoffructanandarabinogalactantocureacutepharyngitisinHostaplantaginea(Lam.)Aschersflowers.CarbohydratePolymers[J],2025.350:p.123059-123059.[9] 高雨嫣,束安梅,朱逸晖,等,六灵解毒丸对急性咽炎的治疗作用研究[J].Journal,2020,36:846-852.[10] 王媛媛,姜玲玲,闫洁,等,锦灯笼提取物片剂对急性咽炎大鼠的干预作用机制研究[J].Journal,2025,39:44-48.[11] 尹祥春,吴飞虎,刘钢,等,疏风解毒胶囊对急性咽炎模型大鼠TLRs/MyD88信号通路的影响[J].Journal:1-7.[12] Zhao,W.,J.Lu,H.Yan,etal.,TreatmentofacutepharyngitisinratswithseasonteadecoctionsfromtraditionalChinesemedicinethroughasynergisticandsubtleregulationofARNTLandBHLHE40.Journalofethnopharmacology[J],2024.337(P3):p.118924.[13] 杨顺,西瓜霜润喉片治疗咽喉口腔疾病的疗效观察[J].Journal,2021,36:103-105.[14] 杨雪,范秀东,任晓楠,等,基于网络药理学和分子对接技术探讨蒲地蓝消炎口服液治疗急性咽炎的作用机制[J].Journal,2022,49:157-161+226-227.[15] 李根,银马解毒颗粒治疗急性肺损伤和急性咽炎的作用及机制研究[J].Journal,2023.[16] Gu,Y.,M.Liu,N.Niu,etal.,Integrativenetworkpharmacologyandmulti-omicstostudythepotentialmechanismofNiuhuangShangqingPillonacutepharyngitis.Journalofethnopharmacology[J],2024.338(P3):p.119100.[17] Huang,H.,D.Wu,Q.Li,etal.,JiegengdecoctionamelioratedacutepharyngitisthroughsuppressingNF-κBandMAPKsignalingpathways.Journalofethnopharmacology[J],2024.332:p.118328-118328.[18] 孔庆新,东方,孙兰,等,荔枝草治疗急性咽炎有效部位筛选[J].Journal,2022,24:686-693.[19] Zhong,J.,X.Wu,C.Huang,etal.,NetworkPharmacologyandExperimentalValidationtoRevealthePharmacologicalMechanismsofGynostemmapentaphyllaagainstAcutePharyngitis.Currentcomputer-aideddrugdesign[J],2025.[20] 肖文喜,扶丽君,朱红霖,等,清热消炎宁对急性咽炎大鼠模型的抗炎作用[J].Journal,2024,22:2899-2904.[21] 高雨嫣,卢金福,吕高虹,等,六灵解毒丸抑制金黄色葡萄球菌致大鼠急性咽炎的作用机制研究[J].Journal,2023,34:1736-1742.[22] 王佳水,玉簪花抗咽炎的药效学及作用机制研究[J].Journal,2023.[23] 孙静,高英杰,郭姗姗,等,清热散结胶囊对细菌性呼吸道感染模型的作用研究[J].Journal,2020,17:449-454.[24] 王蓓,抗咽炎中药复方颗粒剂的研究[J].Journal,2019.[25] 俞洁东,虎射利咽方治疗湿热型咽炎的疗效及解热抗炎作用机制研究[J].Journal,2011.[26] 刘牧,蒲地蓝消炎口服液治疗成人细菌性急性咽炎、扁桃体炎的临床研究[J].