实验动物饲养指南

实验动物饲养指南一、实验动物的分类与等级管理实验动物根据微生物和寄生虫控制程度分为四个等级，不同等级的饲养环境和管理要求存在显著差异：（一）普通动物（CV）作为一级动物，普通动物的微生物学控制要求最低，仅需排除人畜共患病和动物烈性传染病的病原。这类动物通常饲养于开放环境中，成本较低，主要用于教学实验。其饲养环境需满足基本卫生条件，定期清洁消毒，但无需严格的空气过滤系统。（二）清洁动物（CL）二级清洁动物在普通动物基础上，进一步排除对动物危害大或干扰科研的病原。饲养需在温度、湿度可控的屏障系统中进行，环境需定期通风和空气净化，饲料、垫料及饮水需经过消毒处理，避免潜在病原体污染。（三）无特定病原体动物（SPF）三级SPF动物是科研实验中最常用的类型，需排除一、二级动物的病原及对实验干扰大的特定微生物。饲养环境为严格的屏障系统，空气需经高效过滤器净化，人员进入需经过更衣、消毒等多级程序。饲料、饮水需无菌处理，笼具定期高压灭菌，且需定期监测微生物和寄生虫指标。（四）无菌动物（GF）四级无菌动物体内外无任何可检测的生命体，需通过剖宫产获得并饲养于无菌隔离器中。环境需维持恒温（21~26℃）、恒湿（50%~60%），饲料、饮水、垫料等均需无菌处理，且操作人员需通过隔离器手套进行操作，避免外界污染。二、饲养环境的控制标准实验动物的生长状态和实验数据的稳定性直接依赖于环境条件的精准控制，核心参数包括温湿度、光照、噪音、通风及笼具规格等。（一）温湿度小鼠：适宜温度为21~26℃，日波动不超过4℃，饲养盒内温度通常高于环境1~2℃；相对湿度50%~60%，湿度过低易导致呼吸道疾病，过高则可能引发霉菌滋生。大鼠：温度控制在20~25℃，湿度50%~65%，需特别注意高温环境可能导致大鼠中暑，湿度过低易引发环尾病。其他动物：豚鼠适宜温度20~24℃，湿度40%~70%；兔需18~24℃，湿度45%~65%，需避免温度骤变。（二）光照与噪音光照：采用12小时光照/12小时黑暗的周期性光照，强度控制在15~20lx，避免强光直射。小鼠对光照敏感，黑色品系（如C57BL/6J）需适当缩短光照时间，防止视网膜损伤。噪音：饲养间噪音需低于60dB，大鼠、小鼠等胆小动物对高频噪音（如超声波）尤为敏感，需避免设备运行噪音或人员喧哗导致的应激反应。（三）通风与空气净化普通环境：自然通风或机械通风，换气次数8~10次/小时，确保氨气浓度低于14ppm。屏障系统：SPF级动物饲养区需配备高效过滤器（HEPA），换气次数15~20次/小时，空气洁净度达到万级标准，气压维持正压（相对室外+10~20Pa），防止外界污染空气渗入。（四）笼具与饲养密度小鼠IVC笼盒：底面积554cm²（380×178×139mm），饲养密度根据周龄调整：3~4周龄（10~15g）每笼≤10只，5~10周龄（15~25g）≤7只，＞10周龄（≥25g）≤5只；繁殖笼交配比例不超过1:2。大鼠IVC笼盒：底面积1045cm²（449×274×189mm），饲养密度按体重划分：＜100g≤10只，100~200g≤7只，200~300g≤6只，300~400g≤4只，400~500g≤3只，＞500g≤2只。笼具材质：采用无毒塑料或不锈钢，边角圆滑避免动物受伤，笼盖需具备良好透气性，同时防止动物逃脱。三、饲养管理规范（一）饲料与饮水管理饲料要求全价营养饲料：根据动物种类和生长阶段选择专用饲料，如小鼠繁殖期需高蛋白饲料，大鼠高脂模型需定制高脂饲料。饲料需新鲜、无霉变，储存于阴凉干燥处，保质期内使用。特殊处理：无菌动物饲料需经γ射线灭菌，SPF级饲料需高压蒸汽灭菌；高脂饲料需搭配磨牙棒，防止动物牙齿过度生长。饮水标准一级动物饮水符合城市生活饮用水卫生标准；二、三、四级动物需无菌水（如高压灭菌水或过滤除菌水），pH值控制在2.0~2.5（酸化水）以抑制细菌滋生。饮水瓶每周清洗消毒1次，每日检查水位，确保动物随时可获取新鲜水源。（二）垫料与环境清洁垫料选择：需清洁、干燥、吸水、无毒，常用刨花、玉米芯或纸质垫料。无菌动物垫料需经高压灭菌，SPF级垫料需消毒处理，每周更换1~2次。日常清洁：地面：每日用500ppm次氯酸钠溶液擦拭1~2次；笼具：每周高压灭菌1次，饮水瓶、食盆每日清洗消毒；屏障系统：墙面、天花板每周擦拭消毒，高效过滤器每6个月检测一次完整性。（三）动物健康监测每日观察动物状态，健康动物应表现为食欲旺盛、眼睛有神、体毛光滑、活动有力，粪便呈黑色麦粒状。异常情况包括：外观异常：鼻端脱毛、被毛脱落、断尾、天然孔腔分泌物；行为异常：精神萎靡、呼吸急促、腹泻、抽搐；繁殖异常：孕鼠流产、仔鼠发育迟缓、哺乳行为异常。发现异常动物需立即隔离，由兽医诊断并记录，必要时实施安乐死并无害化处理。四、标准化操作流程（一）人员准入与培训操作人员需取得实验动物上岗证，首次进入屏障系统前需接受培训，内容包括：动物福利伦理规范；消毒更衣流程；应急处理措施（如动物咬伤、设备故障）。进入屏障系统步骤：一更（脱外衣）→二更（穿无菌服、戴口罩、手套、鞋套）→风淋→缓冲区→饲养区，禁止携带手机等个人物品。（二）日常饲养操作饲喂：每日定时定量投喂，小鼠成年鼠每日饲料量4~5g，大鼠15~20g，记录饲料消耗量，避免过量或不足。换笼：每周2次更换笼具及垫料，操作时轻缓移动动物，避免应激；繁殖笼需保留部分旧垫料，减少环境变化对母鼠的影响。记录管理：笼盒吊牌需标注动物编号、品系、性别、周龄、实验目的等信息；每日记录温湿度、动物健康状况、饲料饮水更换情况，数据需可追溯。（三）繁殖管理配种：小鼠7~8周龄、大鼠12~14周龄开始配种，雌雄分笼饲养，按1:2（雄:雌）比例合笼，每日检查阴栓确定受孕。孕鼠护理：提供安静环境，添加小纸卷作为筑巢材料，避免频繁打扰；哺乳期母鼠饲料供应量增加50%，保证乳汁充足。仔鼠管理：仔鼠出生后1~2日检查存活率，21日龄断奶分笼，记录体重、性别，不合格仔鼠（如卷尾、脑水肿）及时淘汰。五、疾病防控与应急处理（一）检疫与隔离新引入动物：需隔离检疫2~3周，SPF级动物需在隔离器中饲养，检测微生物指标（如小鼠需检测仙台病毒、小鼠肝炎病毒等），合格后方可进入饲养区。野生动物：捕捉的野生动物需在当地检疫并获得证明，抵达后再次检疫，确认无传染病后方可使用。（二）常见疾病防控细菌性疾病：沙门氏菌病、大肠杆菌病等，通过定期消毒、无菌饲料饮水预防，发病动物立即隔离，全群预防性给药。病毒性疾病：小鼠肝炎病毒、大鼠冠状病毒等，主要通过严格的屏障系统管理和人员消毒防控，一旦爆发需全群扑杀并彻底消毒。寄生虫病：螨虫、弓形虫等，定期检测寄生虫卵，发现感染动物立即淘汰，笼具用高温灭菌处理。（三）疫情处理发现传染性疾病时，立即隔离病畜，划定污染区域，暂停实验操作；对可能污染的环境、笼具、设备进行彻底消毒（如甲醛熏蒸）；向上级管理部门及当地动物检疫机构报告，追溯传染源并采取紧急预防措施；病死动物需焚烧或高压灭菌处理，严禁随意丢弃。（四）应急预案设备故障：温湿度异常时，立即启用备用空调或发电机，转移动物至备用饲养间；人员受伤：被动物咬伤后，立即用肥皂水冲洗伤口，接种狂犬疫苗并就医；自然灾害：火灾、地震时，优先保障人员安全，其次转移SPF级等贵重动物至安全区域。六、动物福利与伦理要求环境丰容：单只饲养动物提供玩具（如塑料隧道、磨牙棒），孕鼠提