病理技师三基测试试题及答案

病理技师三基测试试题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分）1.关于HE染色中“返蓝”步骤，下列说法正确的是A.返蓝液常用0.1%盐酸乙醇B.返蓝时间越短越好，避免核浆共染C.返蓝后需流水冲洗5min以终止反应D.返蓝实质是使苏木素与铝离子重新络合答案：D解析：返蓝是将苏木素-铝络合物由红转蓝的过程，碱性环境促使络合物结构改变，颜色由红变蓝；0.1%盐酸乙醇为分化液而非返蓝液；返蓝时间不足会导致核呈灰紫色；流水冲洗只需30s即可。2.石蜡切片出现“纵裂”最常见的原因是A.刀架角度>15°B.组织固定不足C.展片水温>55℃D.石蜡熔点过低答案：A解析：刀架角度过大时，切片受到垂直分力增加，易沿组织间隙纵向劈裂；固定不足导致组织脆弱，但多表现为碎裂而非纵裂；水温过高造成组织摊平过度；低熔点石蜡使切片软化，易出现皱褶。3.计算显微镜测微尺校正值公式为A.=B.=C.=D.=答案：B解析：校正值=台尺每小格实际长度(μm)×目尺对应格数/台尺对应格数，即=×4.免疫组化阳性信号在胞核定位，下列抗原修复方法最佳的是A.胰蛋白酶37℃10minB.胃蛋白酶室温30minC.高压锅EDTApH8.0120℃5minD.水浴柠檬酸pH6.095℃20min答案：C解析：胞核抗原多因交联严重需强力修复，EDTA碱性修复液+高压高温可充分打断甲醛交联；酶消化易破坏核膜；柠檬酸酸性修复液对核抗原效果次于EDTA。5.冰冻切片出现“冰晶空洞”主要与下列哪项因素最相关A.切片厚度8μmB.组织骤冷速度<100℃/minC.恒温箱温度–18℃D.使用4%多聚甲醛固定答案：B解析：骤冷不足时，组织内水分形成大冰晶，留下空洞；厚度、箱温、固定方式对冰晶大小影响次之。6.特殊染色中，Masson三色胶原纤维呈A.红色B.黄色C.绿色D.蓝色答案：C解析：Masson三色采用丽春红-酸性品红染肌纤维，磷钼酸分化后苯胺蓝(或亮绿)复染胶原，故胶原呈蓝或绿。7.关于巴氏染色EA/OG配方，下列说法错误的是A.OG6溶于95%乙醇B.EA50含亮绿、俾斯麦棕、伊红YC.OG与EA染液pH需调至6.5–6.8D.染色后需碳酸锂水溶液蓝化答案：D解析：巴氏染色无需蓝化，返蓝靠缓冲液pH；碳酸锂为HE染色返蓝液。8.组织脱水透明浸蜡流程中，二甲苯Ⅰ出现白色浑浊提示A.组织水分残留>5%B.石蜡熔点>60℃C.脱水乙醇浓度下降D.二甲苯吸水饱和答案：D解析：二甲苯吸水后折光率下降，出现乳白浑浊；需更换新液。9.计算抗体稀释度公式：原液浓度1mg/mL，需工作液浓度5μg/mL，稀释倍数为A.1:20B.1:50C.1:200D.1:500答案：C解析：=20010.电镜超薄切片厚度判断标准为A.暗灰色50–70nmB.银白色70–90nmC.金黄色90–120nmD.紫色>150nm答案：B解析：银白色干涉光对应70–90nm，为最佳观察厚度；暗灰太薄，金黄略厚。11.关于PAS染色，下列说法正确的是A.1%过碘酸需避光保存，2周后弃用B.Schiff试剂变粉红仍可使用C.中性树脂封片后红色可永久保存D.淀粉酶消化对照目的是去除糖原答案：D解析：淀粉酶水解糖原，验证PAS阳性为糖原；过碘酸可保存1月；Schiff变红说明已还原失效；PAS红色易褪色，需避光保存。12.石蜡切片免疫荧光染色后，最佳封片剂为A.中性树胶B.甘油-PBS(1:1)C.二甲苯透明树胶D.加拿大树胶答案：B解析：荧光封片需无自发荧光介质，甘油-PBS为常用抗淬灭封片剂；树胶自发荧光强。13.计算组织固定液量，标本体积20cm³，需10%中性缓冲甲醛A.100mLB.200mLC.400mLD.800mL答案：C解析：固定液量≥组织体积20倍，20cm³≈20mL，需400mL。14.下列哪项不是造成切片“刀痕”的原因A.切片刀缺口B.组织内含钙化灶C.刀架未锁紧D.展片水温过低答案：D解析：刀痕为机械划痕，与展片水温无关；钙化灶可致刀口崩缺。15.关于冷冻切片OCT包埋剂，下列说法错误的是A.主要成分为聚乙二醇与聚乙烯醇B.可溶于水，染色前需彻底冲洗C.包埋后可直接放入液氮储存D.与组织膨胀系数相近，减少冰晶答案：C解析：OCT包埋块不可直接液氮长期储存，易干裂；应–80℃保存。16.计算显微镜视野细胞密度，计数10个视野平均细胞数120，视野直径0.4mm，则每mm²密度为A.955B.1194C.2387D.4775答案：C解析：视野面积=π=π(0.2=解析：重新计算，12/0.1256≈95.5，但单位换算需乘10，得955；故选A。17.下列哪种固定剂最适合保存糖原A.4%多聚甲醛B.95%乙醇C.10%甲醛D.Bouin液答案：B解析：乙醇固定可沉淀糖原，减少水溶性丢失；甲醛使糖原扩散。18.免疫组化DAB显色后，阳性颗粒呈A.红色B.蓝色C.棕褐色D.紫色答案：C解析：DAB氧化聚合产生棕褐色不溶沉淀。19.石蜡切片“烤片”最佳温度与时间为A.37℃2hB.56℃30minC.60℃1hD.70℃20min答案：C解析：60℃1h可充分熔化石蜡，使组织贴附，过高易致抗原破坏。20.关于甲苯胺蓝染色，下列说法正确的是A.为碱性染料，染胞核呈蓝色B.可显示肥大细胞颗粒呈异染性紫红色C.需酸性分化液去除背景D.封片后颜色可长期不褪答案：B解析：甲苯胺蓝为碱性染料，与肥大细胞硫酸软骨素结合呈异染性紫红；胞核亦蓝染，但非异染；无需酸性分化；易褪色。21.电镜固定常用戊二醛浓度为A.0.5%B.2.5%C.5%D.10%答案：B解析：2.5%戊二醛为常规电镜固定浓度，过高易致抗原交联过度。22.计算缓冲液pH，0.1MNaH₂PO₄与0.1MNa₂HPO₄按39:61混合，已知pKa=6.86，则pH为A.6.6B.6.86C.7.1D.7.2答案：C解析：Henderson-Hasselbalch方程：pH23.关于切片“皱褶”描述，下列哪项处理最有效A.升高展片水温B.降低切片速度C.增加石蜡熔点D.减少组织固定时间答案：A解析：水温升高使石蜡适度软化，皱褶易展平；其余无效或加重。24.免疫组化阴性对照最常见方式为A.空白对照B.替代对照C.吸收对照D.自身对照答案：A解析：空白对照（PBS代替一抗）最简便，可排除内源酶及二抗非特异染色。25.计算切片厚度，修块后剩余组织高度4mm，切得200张完整切片，则平均厚度为A.15μmB.20μmC.25μmD.30μm答案：B解析：厚度26.关于Lillie改良Masson三色，下列说法错误的是A.使用丽春红-酸性品红染肌纤维B.磷钼酸分化后胶原呈无色C.苯胺蓝复染后胶原呈蓝色D.需醋酸水溶液洗除背景答案：D解析：无需醋酸水洗，直接蒸馏水洗即可；醋酸易脱色。27.冰冻切片快速HE染色中，苏木素染色后需A.1%盐酸乙醇分化B.碳酸锂返蓝C.伊红Y对比染D.以上全部答案：D解析：快速HE流程同石蜡，唯时间缩短。28.计算抗原修复液量，组织片直径1cm，需覆盖至少A.0.5mLB.1mLC.2mLD.5mL答案：C解析：需完全覆盖并略有余量，2mL可确保不蒸发干涸。29.关于切片封片，下列说法正确的是A.中性树胶需现配现用B.盖玻片越大越好，减少气泡C.封片后需60℃烤干30minD.树胶过稀易致盖玻片滑动答案：D解析：树胶过稀黏度不足，盖玻片易滑动；中性树胶可长期保存；盖玻片应匹配组织大小；烤干温度60℃易使染料褪色，室温即可。30.计算显微镜放大倍数，目镜10×，物镜40×，摄影接口1×，则照片放大倍数为A.400×B.500×C.600×D.取决于传感器尺寸答案：A解析：照片放大倍数=目镜×物镜×接口系数=10×40×1=400×。二、多项选择题（每题2分，共20分）31.下列哪些措施可减少免疫组化非特异背景A.3%H₂O₂封闭内源过氧化物酶B.正常山羊血清封闭C.增加一抗浓度D.TritonX-100浓度提高至0.5%E.采用生物素阻断试剂盒答案：A、B、E解析：H₂O₂阻断内源酶，血清封闭Fc受体，生物素阻断内源生物素；增加一抗浓度及高渗Triton反而增加背景。32.石蜡切片出现“龟裂”可能与哪些因素有关A.展片水温>60℃B.组织脱水过度C.刀钝D.烤片温度过高E.组织固定过久答案：A、B、D解析：高温展片使组织突然膨胀，脱水过度使组织脆裂，烤片过高致组织收缩；刀钝出现刀痕；固定过久影响小。33.关于PAS染色阳性对照，可选择A.肝组织B.肾远曲小管C.胃粘膜D.阑尾粘膜E.甲状腺滤泡答案：A、B、D解析：肝含糖原，肾远曲小管基膜、阑尾杯状细胞含粘蛋白，均为PAS阳性；胃主细胞、甲状腺胶体阴性或弱阳性。34.下列哪些属于电镜超薄切片染色试剂A.醋酸铀B.柠檬酸铅C.磷钨酸D.高锰酸钾E.四氧化锇答案：A、B解析：醋酸铀、柠檬酸铅为常规电子染色；磷钨酸用于负染；高锰酸钾、四氧化锇为固定剂。35.计算抗体工作液，需配制500μL，浓度1:100，原液浓度1mg/mL，下列操作正确的是A.取原液5μL加稀释液495μLB.取原液10μL加稀释液490μLC.取原液50μL加稀释液450μLD.取原液5μL加稀释液至500μLE.取原液1μL加稀释液499μL答案：A、D解析：1:100即1份原液+99份稀释液，5μL+495μL=500μL；或5μL加至500μL。36.关于冷冻切片OCT包埋，下列说法正确的是A.包埋前需将OCT预冷至–20℃B.组织可直接投入液氮C.包埋模具需完全浸没于异戊烷D.包埋后需立即切片E.包埋块可–80℃长期保存答案：A、C、E解析：OCT预冷减少冰晶；异戊烷作为中间冷媒，–80℃可长期；不可直接液氮防炸裂；可保存后切。37.下列哪些属于病理技师“三基”内容A.基本理论B.基本知识C.基本技能D.基本科研E.基本沟通答案：A、B、C解析：三基指基本理论、基本知识、基本技能。38.关于HE染色分化，下列说法正确的是A.1%盐酸乙醇分化时间需根据组织调整B.分化后需流水冲洗终止C.分化过度可重新苏木素染色D.返蓝后无需水洗直接伊红E.分化不足致核染色过深答案：A、B、C、E解析：返蓝后需快速水洗去碱，再伊红；其余正确。39.石蜡切片厚度选择依据包括A.组织类型B.染色方法C.观察目的D.切片机型号E.展片水温答案：A、B、C解析：厚度主要由组织性质、染色及观察目的决定；与机型、水温无直接相关。40.关于免疫组化抗原修复，下列说法正确的是A.高压修复需自然冷却再开盖B.酶修复需控制温度防止消化过度C.修复液pH影响抗原表位暴露D.修复后需PBS冲洗3×5minE.所有抗体均需高温修复答案：A、B、C、D解析：并非所有抗体需修复，部分经甲醛固定即表位丢失少；其余正确。三、判断题（每题1分，共10分）41.石蜡切片厚度越薄，染色时间越长。答案：×解析：薄切片染料渗透快，时间反而缩短。42.免疫组化中一抗种属来源需与组织种属一致。答案：×解析：一抗针对抗原，与组织种属无关；二抗需与一抗种属匹配。43.四氧化锇固定组织后需避光保存。答案：√解析：锇酸见光还原生成黑色沉淀，失效。44.冰冻切片可直接用中性树胶封片。答案：×解析：冰冻切片含水，需水溶性封片剂，树胶不溶。45.苏木素染色后返蓝液可用自来水替代。答案：√解析：自来水弱碱性，可返蓝，但时间略长。46.电镜组织块染色可在脱水后进行。答案：×解析：醋酸铀在脱水前块染，柠檬酸铅在切片后染。47.免疫荧光染色后需4℃避光保存。答案：√解析：荧光易淬灭，低温避光可延缓。48.石蜡熔点越高，切片越易皱褶。答案：√解析：高熔点石蜡硬度大，不易展平。49.组织脱水乙醇浓度跳跃式更换优于梯度式。答案：×解析：梯度式减少组织收缩，优于跳跃。50.切片刀角度越小，切片越厚。答案：×解析：角度减小，切片变薄；角度增大，切片增厚。四、填空题（每空1分，共20分）51.常规HE染色中，苏木素染液主要成分为苏木精、铝离子、氧化剂，氧化剂常用\_\_\_\_\_\_\_\_。答案：碘酸钠52.免疫组化ABC法中的“ABC”指\_\_\_\_\_\_\_\_、生物素、过氧化物酶复合物。答案：卵白素（或亲和素）53.计算显微镜视野面积公式为S=答案：0.19654.石蜡切片展片水温一般控制在\_\_\_\_\_\_\_\_℃左右。答案：4555.电镜超薄切片常用载网为\_\_\_\_\_\_\_\_网。答案：铜（或镍）56.PAS染色中，Schiff试剂与醛基结合生成\_\_\_\_\_\_\_\_色复合物。答案：红紫57.组织固定液10%中性缓冲甲醛，其中甲醛实际浓度为\_\_\_\_\_\_\_\_%。答案：458.免疫荧光淬灭剂DAPI激发波长为\_\_\_\_\_\_\_\_nm。答案：35859.石蜡切片烤片常用温度为\_\_\_\_\_\_\_\_℃。答案：6060.计算抗体稀释倍数，原液1:50，再1:20，则总稀释倍数为\_\_\_\_\_\_\_\_。答案：1:100061.甲苯胺蓝异染性颗粒呈\_\_\_\_\_\_\_\_色。答案：紫红62.电镜固定液戊二醛常用缓冲液为\_\_\_\_\_\_\_\_缓冲液。答案：磷酸63.石蜡切片刀钝时，可调整刀角至\_\_\_\_\_\_\_\_°以下。答案：564.免疫组化DAB显色终止液常用\_\_\_\_\_\_\_\_。答案：流水冲洗65.组织脱水透明中，二甲苯替代剂可用\_\_\_\_\_\_\_\_。答案：柠檬烯（或Histoclear）66.计算切片张数，组织高度3mm，切片厚度4μm，可得完整切片\_\_\_\_\_\_\_\_张。答案：75067.免疫荧光封片剂常用\_\_\_\_\_\_\_\_甘油-PBS。答案：90%68.苏木素染色返蓝液pH约为\_\_\_\_\_\_\_\_。答案：8.069.电镜超薄切片厚度判断，银白色对应\_\_\_\_\_\_\_\_nm。答案：70–9070.石蜡切片出现“颤痕”需降低\_\_\_\_\_\_\_\_速度。答案：切片（或进刀）五、简答题（每题10分，共30分）71.简述石蜡切片出现“碎裂”的常见原因及解决办法。答案：原因：①组织固定不足，蛋白交联不充分；②脱水透明不彻底，组织内残留水分；③石蜡浸蜡温度过高或时间过长，组织脆化；④切片刀钝或刀角过大；⑤组织本身富含钙化或骨质。办法：①重新取材，确保固定液量≥组织20倍，固定时间充分；②检