生物工程专业XX生物技术公司研发实习报告

生物工程专业XX生物技术公司研发实习报告一、摘要

2023年6月5日至8月22日，我在XX生物技术公司研发部门担任助理工程师，参与重组蛋白表达体系优化项目。通过8周实践，完成表达载体构建12个，蛋白表达量最高提升至原水平的3.2倍（原表达量0.8mg/L，优化后2.5mg/L），成功筛选出最佳诱导条件（IPTG浓度0.4mmol/L，诱导温度28℃）。运用分子克隆技术构建融合表达载体，结合蛋白质纯化系统，建立了一套标准化表达流程。掌握PCR、酶切、测序等实验技能，将实验室标准操作规程（SOP）应用于日常实验，误差率控制在5%以内。通过数据记录与统计分析，验证了甘油浓度（20%）对菌体生长及蛋白表达的影响系数达0.72。形成可复用的表达系统优化方法论，包含载体改造、发酵参数调控、蛋白纯化等关键步骤，为后续研究提供直接参考。

二、实习内容及过程

实习目的主要是将学校学的分子生物学知识用到实际项目中，了解生物技术公司研发部门的运作模式，熟悉重组蛋白表达的全流程。

实习单位是家专注于单克隆抗体制备的公司，主要做研发和市场推广两条线，我的实习部门是研发，负责新产品的工艺开发和优化。

6月5号开始实习，第一个月跟着导师熟悉实验室环境和标准操作。主要任务是学习蛋白表达载体的构建和改造，动手做了6个表达载体的构建实验，包括PCR扩增目的基因、酶切连接、转化大肠杆菌、平板筛选。7月2号开始独立负责重组蛋白表达优化项目，项目目标是提高某个靶点蛋白的表达量。我用了公司提供的工程菌，尝试了不同的IPTG诱导浓度和温度，6月15号到7月20号期间，做了9组平行实验，记录了菌体OD值和蛋白表达量。通过SDSPAGE电泳和WesternBlot验证，发现0.4mmol/L的IPTG浓度和28℃的诱导温度效果最好，蛋白表达量从0.8mg/L提升到2.5mg/L，是原来的3.2倍。遇到的最大困难是第一次做蛋白质纯化，7月10号第一次上样的时候，目标蛋白纯度只有30%，跑胶发现杂质很多。导师教我用NiNTA亲和层析，调整了洗脱曲线，第二次纯化纯度提升到了65%，最终产率达到0.3mg/mL。8月1号开始学习数据分析，用Excel和R语言整理了发酵数据，发现甘油浓度在20%时对蛋白表达影响最大，相关系数是0.72。实习期间还参与了细胞系筛选实验，用CCK8法检测细胞活性，对比了三种不同的培养基配方，最终选择了成本较低的配方，为公司节省了大概15%的实验费用。

实习最大的收获是掌握了重组蛋白表达优化的完整流程，从载体构建到发酵表达再到纯化鉴定，每一步都能独立操作。学会了看文献和写实验报告，之前写报告总是写不好，现在知道怎么组织语言。最大的挑战是刚开始对实验流程不熟悉，经常忘记加试剂或者步骤搞错，后来每天列好实验清单才好很多。公司管理上我觉得培训机制可以再完善，比如新来的实习生没人带的时候挺懵的，建议可以建立师徒制。岗位匹配度方面，我的工作主要是实验操作，跟文献阅读和数据分析接触少，希望以后能有更多机会参与项目讨论。这段经历让我更确定自己想进研发，但也很清楚自己的不足，接下来打算多看综述和专利，提升自己的理论水平。

三、总结与体会

这8周实习，从6月5号到8月22号，像把书里的理论搬到了手上，感觉跟生物工程这门专业有了实打实的联系。刚开始做实验的时候挺手忙脚乱的，比如7月10号那个NiNTA纯化，第一次上样纯度才30%，看着跑出来的胶心里挺慌的，导师说优化蛋白表达没点耐心不行，教我调整洗脱曲线参数，第二次纯化纯度就到65%，最后那个2.5mg/L的表达量数据，其实都是一点点摸索出来的，这个过程让我明白做研发就是得有股钻研劲儿。

实习最大的价值是让我看清了自己想干什么，之前对研发、生产、销售都挺模糊的，现在觉得做工艺开发最对胃口，特别是看到自己调出来的参数能让表达量翻3倍多的时候，那种成就感特别真实。公司那个重组蛋白优化的项目虽然最后没完全搞定，但我在其中负责的发酵参数调整部分确实帮了点忙，导师后来跟我说甘油浓度从15%加到20%那个决策挺关键，产率直接上去了，这让我觉得学到的东西真能用上。

行业现在好像挺看重单抗和细胞治疗这些，公司用的工程菌发酵、蛋白纯化这些技术都是前沿的，我实习期间接触到的亲和层析、蛋白质印迹这些，在学校实验室都没做过这么多，感觉跟外面差距还是挺大的。比如8月15号那个WesternBlot验证，我花了两天才把背景搞干净，学校做实验哪有这么多波折，这让我意识到职场环境跟学校完全两样，得学着自己解决问题。

心态转变挺明显的，以前做实验失败了就觉得这不行那不行，现在觉得是得分析哪一步出了问题，导师教我的那个“失败也是数据”的观点真的很有用，比如7月20号那组IPTG浓度实验，虽然28℃不如30℃高一点点，但综合考虑下游纯化难度，选28℃更实际，这种权衡能力是在学校里学不到的。

接下来打算好好啃啃《单克隆抗体工艺开发》，把那个表达量提升的案例再复盘下，9月准备去考个PMP证书，虽然跟技术没直接关系，但感觉对项目管理有帮助，希望能有机会再进这种公司试试，这次实习让我觉得，光会做实验不够，还得懂点流程和成本控制才行。

四、致谢

感谢在XX生物技术公司研发部门实习的8周时间里给予指导和帮助的各位。特别感谢导师，在蛋白表达优化项目中，从实验设计到结果分析都给了我很多具体建议，比如7月10号NiNTA纯化遇到问题时，您指导我重新检查洗脱曲线参数，最终纯度提升到65%，这个过程中学到的调试方法对我帮助很大。感谢部门里其他同事，8月15号WesternBlot背景一直拖后腿，是小张帮我找了个新的封闭液配方才解决，还有李哥分享的发酵罐操作注意事项