AKTA操作说明资料

一、AKTApure层析仪简明操作规程

1、开机

打开仪器的主电源，打开电脑电源。待仪器自检完毕（主机控制面板白灯常亮）。双击桌面上

UNICORN图标，进入操作界面。

2、准备工作溶液和样品

所有的工作溶液和样品必须经过0.45pm的滤膜过滤（样品也可高速黑心后取上清使用）。缓冲

液需在使用前用低频超声脱气15min0

3、清洗及管道准知

首先将A1管道入口放入平衡缓冲液（bindingbuffer）中，将B1管道入口放入洗脱缓冲液（e.ution

buffer冲在systemcon匚rol窗口点击工具栏内的manual选择executemanualinstructions-*pump

-*pumpAwash和pumpBwash,选中A1和B1入口，点击executeo泵洗完成后自动停止。

4、安装层析柱

在manualinstructicns里选择pump-systemflow,输入流速1ml/ml,insert;选择Alarms-*

alarmprecolumnpressure，设置highalarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到）,insert,

executeo待InjectionValve的1号位管道流出溶液后，将管路接入柱子的上端，稍微拧紧后将柱下

端的堵头卸掉接入管道，连上紫外流动池。

5、开始纯化：

1）选择检测波长，Monitors-Wavelength-UV1,UV2,UV3（可以只打开一个波长）等待柱子平

衡好了（观察UV、CONC.pH的数值和变化趋势）就可以准备上样。此时将紫外调零，选择Monitors

autozeroUV,exectue0

2)用样品环上样：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入，上样后不

要取下注射器。在manualinstructions里选择flowpath-injectionValve-*inject,execute。

3)用泵上样：将A2入口放入样品中,manualinstructions里选择flowpath—Ainlet-A2,insert,

flowpath-*injectmark,nsert,execute待样品上完后，在manualinstructions里选择flowpath—A

inlet-A1,使用平衡缓冲液继续清洗柱子。

2),3)任选一种方式

4)洗脱：上样后用平衡缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在manualinstructions里选择pump-*

gradient,按照自己的工艺选择targetB(100%)和length(10CV)。

5)设定收集：

选择Fractioncollection-Fractionation,选择收集管tubetype，输入每管收集体积,exectueo

结束固定体积收集选择Fractioncollection-Stopfractionation,exectueo

6、清洗泉及卸下层析柱:

将A1和B1人口放入纯水中，启动pumpwash功能冲洗A泵和B泵及整个管路。然后再将A1和

B1人口放入20%乙醇中，同样操作让乙醇充满整个管路。给系统一个慢流速，设置系统保护压力，然

后先拆柱子的下端接头，在滴水的状态下将堵头拧上。再拆柱子上端接头，拧上上端堵头。整个过程

防止气泡进入层析柱。

7、关闭电源：

从软件任一窗口File命令栏中点击退出。关闭AKTA主机电源，关闭电脑电源

通用电气医疗集团生命科学部

仪器常见维护保养

1.每日维护

1）系统（System）

•清洁擦拭外表，防止试剂或结晶的盐腐蚀设备

•使用完毕，须用水将系统冲洗干净，之后再用20%乙醇清洗系并保存所有的

流路

2）pH计（pHelectrode）

♦使用前校正（一定要先校正pH7）

・用后将pH计拆下放入保护液（1:1pH4buffer■和1MKNO3,或pH4.0的

饱和KQ溶液）。

3）系统泵（Pump）

•检查泵头周围是否渗漏，如果泵头有渗漏或是流量不准确，联系工程师。

•更换缓冲液时，需排尽泵头里的残存气泡，否则会影响流速的准确性。

2.每周维护

1）在线滤器（On-Unefilter）

•清洗过滤片，如有必要须更换过滤片，否则会形成很高的压力，流速降低。

2）缓冲液筛网（Inletfilters）

检查溶液入口的筛网是否很脏，如有必要须更换。

3)泵后腔冲洗系统

•更换泵后冲洗液(20%乙醇)。

•如果冲洗液瓶中液体量增加，说明泵头密封圈渗漏，须更换。

•如果冲洗液不循环，说明单向阀堵塞或损坏，需要清洗或更换。

3.每月维护

1)压力检测器(Pressure)

•零点校正(pressureoffset)o

2)紫外监测器(UVMonitor)

•用注射器推10%的表面活性剂(如Decon90,Deconex11,DBS25,SDS等)注

入紫外流动池，停留20分钟，用水冲洗。

•用注射器推甲醇或1MNaOH注入紫外流动池，停留20分钟，用水冲洗。

3)pH/电导检测器(pH/CMonitor)

•清洗流动池：拆下pH电极，用1MNaOH清洗pH和电导流动池30分