CN117865888B 一种塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物及制备方法和用途 （中国科学院新疆理化技术研究所）

一种塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物及本发明涉及一种塔城翠雀花中二萜生物碱法、制备薄层层析法或高效液相色谱法中的两物1名称为塔城翠雀宁A；化合物2名称为塔城翠雀宁B。并对所述两个化合物进行了电压门控钾花中分离的塔城翠雀宁A和塔城翠雀宁B对电压备具有抑制电压门控钾离子通道电流活性药物21.一种从塔城翠雀花中分离的二萜生物碱类化合物，其特征在于该化合物的结构式2.根据权利要求1所述的塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于3.根据权利要求2所述的塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于将得到的A组分继续用正相硅胶柱层析或反相硅胶柱层析法进行进一步分离，用体积比20:1,10:1,5:1,2:1,1:1和0:1的石油醚_丙酮+0.2％二乙胺或体积比5:95_100:0的甲醇个组分A_1到A_4；组分A_3经半制备高效液相色谱法纯化，经体积比20:80_47:53的乙腈_将得到的C组分继续用正相硅胶柱层析或反相硅胶柱层析法进行进一步分离，用体积比20:1,10:1,5:1,2:1,1:1和0:1的石油醚_丙酮+0.2％二乙胺或体积比5:95_100:0的甲醇个组分C_1到C_4；组分C_2经半制备高效液相色谱法纯化，体积比22:78_35:65的乙腈_4.根据权利要求2所述的塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于将得到的总生物碱浸膏经过正相硅胶柱层析或反相硅胶柱层析进行分离，用体积比340:1,20:1,10:1,5:1和1:1的氯仿_甲醇为洗脱剂或体积比为5:95_80:20的甲醇_水为洗脱将得到的A组分用反相硅胶柱层析或正相硅胶柱层析进一步分离，用体积比5:95_80:20的甲醇_水或体积比为10:1,5:1,2:1,1:1和0:1的石油醚_丙酮+0.2％二乙胺为洗脱剂进将得到的C组用葡聚糖LH_20凝胶柱层析进一步分离，用体积比1:1或0:1的氯仿_甲醇5.根据权利要求2所述的塔城翠雀花中二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于将得到的总生物碱浸膏用葡聚糖凝胶LH_20柱层析进行分离，经体积比为1:1或0:1的6.根据权利要求1所述的从塔城翠雀花中分离的二萜生物碱类化合物在制备抑制电压4和翠雀属植物中，具有抗心律不齐和镇痛等多种生物活性。塔城翠雀花(Delphinium翠雀花二萜类生物碱的提取分离和结构鉴定及其相关的药理学研究尚处于初始阶段。因对电压门控钾离子通道电流(IKv)的抑制作用呈剂量依赖性趋势，且两个化合物抑制电压5[0016]将得到的A组分继续用正相硅胶柱层析或反相硅胶柱层析法进行进一步分离，用体积比20:1,10:1,5:1,2:1,1:1和0:1的石油醚_丙酮+0.2％二乙胺或体积比5:95_100:0的甲醇和水为洗脱剂进行梯度洗脱，经硅胶薄层层析和高效液相色谱分析后合并相同流份，[0017]将得到的C组分继续用正相硅胶柱层析或反相硅胶柱层析法进行进一步分离，用体积比20:1,10:1,5:1,2:1,1:1和0:1的石油醚_丙酮+0.2％二乙胺或体积比5:95_100:0的甲醇和水为洗脱剂进行梯度洗脱，经硅胶薄层层析和高效液相色谱分析后合并相同流份，得到4个组分C_1到C_4；组分C_2经半制备高效液相色谱法纯化，体积比22:78_35:65的乙比40:1,20:1,10:1,5:1和1:1的氯仿_甲醇为洗脱剂或体积比为5:95_80:20的甲醇_水为洗80:20的甲醇_水或体积比为10:1,5:[0021]将得到的C组用葡聚糖LH_20凝胶柱层析进一步分离，用体积比1:1或0:16TLC和HPLC分析后合并相同流份，得4个组分A_1到A_4，组分A_3经半制备高效液相色谱纯油醚_丙酮+0.2％二乙胺为洗脱剂进行梯度洗脱，经硅胶薄层层析和高效液相色谱分析后[0026]所述从塔城翠雀花中分离的二萜生物碱类化合物在制备抑制电压门控钾离子通花中分离的二萜生物碱类化合物具有抑制电压门控钾离子通道电流(IKv)的活性，可用于宁A(aemulanineA)，其1H和13CNMR数据归属见表1[600MHz(1H)，150MHz(13C)，溶剂：78振用VarianVnmrs600/400型核磁共振仪(美国Varian公司)测100德国Sartorious公司)；旋转蒸发仪(N_1001D上海爱朗仪器有限公司)；高精度旋光仪院新疆生态与地理研究所冯缨研究员鉴定为毛茛科(Ranunculeceae)翠雀属(Delphinium)[0046]将得到的A组分继续用反相硅胶(ODS)柱层析法进行进一步分离，用体积比5:95_80:20的甲醇_水溶液梯度洗脱，经硅胶薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析后合并法纯化，体积比22:78_35:65的乙腈_0.1％甲酸水梯度洗脱，得到化合物塔城翠雀宁B9[0055]将步骤c得到的化合物塔城翠雀宁A和塔城翠雀宁B采取高效液相色谱分析法进行醇_水溶液梯度洗脱，经硅胶薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析后合并相同流份，的氨水饱和过的石油醚_丙酮为展开剂展开，以确定得到2个新的二萜生物碱类单体化合物碱浸膏1和总生物碱浸膏2得到总生物碱[0069]将步骤c得到的化合物塔城翠雀宁A和塔城翠雀宁B采取高效液相色谱分析法进行[0072]b、将步骤a得到的粗提物浸膏用质量分数为2％的硫酸分散，得到的酸水溶液用[0074]组分A经过反相硅胶(ODS)柱法进一步分离，用体积比5:95_80:20的甲醇_水溶液[0081]组分A经过反相硅胶(ODS)柱层析进一步分离，用体积比5:95_80:20的甲醇_水溶和高效液相色谱(HPLC)分析后合并相同流份，经硅胶薄层层析(TLC)和高效液相色谱[0084]本发明所述的从塔城翠雀花中分离的二萜生物碱类化合物在离子通道活性中的[0091]供试药工作液：用二甲基亚砜(DMSO)将塔城翠雀宁A(aemulanineA)和塔城翠雀[0092]细胞培养：小鼠心肌细胞株H9C2，完全培养基配制比例按照90％DMEM+10％FBS+[0094]通过全细胞膜片钳电生理记录塔城翠雀宁A和塔城翠雀宁B对小鼠心肌细胞H9C2