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文档简介
专题强化演练十九基因工程
1.[2023•广东卷]中外科学家经多年合作研究,发现circDNMTl(一种RNA分子)通过
与抑癌基因戌3表达的蛋白结合诱发乳腺癌,为解决乳腺癌这一威胁全球女性健康的重大问
题提供了新思路。下列叙述错误的是()
A.质3基因突变可能引起细胞癌变
B.虎3蛋白能够调控细胞的生长和增殖
C.circDNMTl高表达会使乳腺癌细胞增殖变慢
D.circDNMTl的基因编辑可用于乳腺癌的基础研究
2.[2023•湖北卷]
用氨羊青霉素抗性基因(力磔力、四环素抗性基因(足力作为标记基因构建的质粒如图所
示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质
粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是()
A.若用〃,加1H陶切,目的基因转录的产物可能不同
B.若用尸酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因
C.若用SphI酹切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D.若用即方I酶切,携带FI的基因的受体菌在含Amp(氨茉青霉素)和Tet的培养基中能
形成菌落
3.[2023・浙江6月]紫外线引发的DNA损伤,可通过“核昔酸切除修复(NER)”方式修
复,机制如图所示。着色性干皮症(XP)患者的NER酶系统存在缺陷,受阳光照射后,皮肤出
现发炎等症状。患者幼年发病,20岁后开始发展成皮肽癌。下列叙述错误的是()
紫外线
51~I-I~I~I_I~I~I~I~I~I~I~I-I3
3IIIIIIIIIIIII5'
51rn।।।।Ir^n13
⑥/切口c切口
5TTIIIIIlliTH3,
3'11I111111111115'
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3」1।।।।।।।।।।5,
.......伊―........
5'1"I"I"I_I"I~I~I~I~I~I~I~I~I3
3"l।।।।।।।।।।।।5,
A.修复过程需要限制酶和DNA聚合酶
B.填补缺口时,新链合成以5,到3'的方向进行
C.DNA有害损伤发生后,在细胞增殖后进行修复,对细胞最有利
D.随年龄增长,XP患者儿乎都会发生皮肤癌的原因,可用突变累积解释
4.[2023•浙江6月]某研究小组利用转基因技术,将绿色荧光蛋白基因(G例整合到野
生型小鼠血给3基因一端,如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠
各1只,交配以期获得伞必3—如基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的
基因型,设计了引物1和引物2用于PCR扩增,PCR产物电泳结果如图乙所示。
Gata3
编码区非娴区3,
下列叙述正确的是()
A.而加3基因的启动子无法控制。孑基因表达
B.翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP蛋白
C.2号条带的小鼠是野生型,4号条带的小鼠是—基因纯合子
D.若用引物1和引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和纯合子
5.[2023•天津卷]基因工程:制备新型酵母菌
(1)已知酵母菌不能吸收淀粉,若想使新型酵母菌可以直接利用淀粉发酵,则应导入多
步分解淀粉所需的多种酶,推测这些酶生效的场所应该是(填“细胞内”或“细胞
外”)o
A目的基因B
Ps-
(2)----同源切割是一种代替限制酶、DNA连接前将目的基因导入
基因表达载体的方法。当目的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时,就可以
发生同源切割,将目的基因直接插入。研究人员运用同源切割的方式,在目的基因两端加上
一组同源序列A、B,已知酵母菌体内DM有许多A-B序列位点可以同源切割插入。构建完
成的目的基因结构如图,则应选择图中的引物对目的基因进行PCR。
(3)已知酵母菌不能合成尿喘咤,因此尿喘嗡合成基因(UGA)常用作标记基因,又知尿喘
咤可以使5-氟乳清酸转化为对酵母菌有毒物质。
①导入目的基因的酵母菌应在_______的培养基上筛选培养。由于需要导入多种酶基因,
需要多次筛选,因此在导入一种目的基因后,要切除UGA基因,再重新导入。研究人员在
UGA基因序列两端加上酵母菌DNA中不存在的同源C、C'序列,以便对UGA基因进行切除。
C、C'的序列方向将影响切割时同源序列的配对方式,达而决定DNA片段在切割后是否可以
顺利重连,如图,则应选择方式________进行连接。
②切去UGA基因的酵母菌应在_______的培养基上筛选培养。
(4)综上,目的基因、标记基因和同源序列在导入酵母菌的基因表达载体上的排列方式
应该如图________O
目的目的
CYGA△软9F.£U.A姿因Fp
图1图2
6.[2023•广东卷]种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥(2〃=10)
进行诱变筛选到一株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序,发现野生型DA\基因发生一
个碱基G到A的替换,突变后的基因为隐性基因,据此推测突变体的表型与其有关,开展相
关实验。
回答下列问题:
(1)拟采用农杆菌转化法将野生型〃川基因转入突变体植株,若突变体表型确由该突变
造成,则转基因植株的种子大小应与________植株的种子大小相近。
⑵用PCR反应扩增l)A\基因,用限制性核酸内切能对PCR产物和进行切割,
用DNA连接酶将两者连接。为确保插入的DA\基因可以正常表达,其上下游序列需具备
(3)转化后,T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可
以同时插入多个位点。在插入片段均遵循基因分离及自日组合定律的前提下,选出单一位点
插入的植株,并进一步获得目的基因稳定遗传的植株(如图),用于后续验证突变基因与表型
的关系。
启动子J基因V5编码序列终止子
―------—a链条带[.■条带]
_■____I_h链条带2-
R]R2____
注:Fl、F2、RI、R2碗引物抗J蛋抗\5抗体
白抗体
图甲图乙
(1)与图甲中启动子结合的酶是。除图甲中标出的结构外,作为载体,
质粒还需具备的结构有(答出2个结构即可)o
(2)构建重组质粒后,为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确,需进行PCR检测,
若仅用一对引物,应选择图甲中的引物o已知J基因转录的模板链位于b
链,由此可知引物Fl与图甲中J基因的(填“a链”或“b链”)相应部分
的序列相同。
(3)重组质粒在受体绢胞内正确表达后,用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白
是否表达以及表达水平,结果如图乙所示。其中,出现条带1证明细胞内表达了
,条带2所检出的蛋白(填“是”或“不是”)由重组质粒
上的J基因表达的。
9.[2023•全国乙卷]GFP是水母体内存在的能发绿色荧光的一种蛋白。科研人员以GFP
基因为材料,利用基因工程技术获得了能发其他颜色荧光的蛋白。丰富了荧光蛋白的颜色种
类。回答下列问题。
(1)构建突变基因文库。科研人员将GFP基因的不同突变基因分别插入载体,并转入大
肠杆菌制备出GFP基因的突变基因文库。通常,基因文库是指
⑵
构建目的基因表达载体。科研人员从构建的GEP突变基因文库中提取目的基因(均为突
变基因)构建表达载体,如模式图所示(箭头为GFP突变基因的转录方向)。图中①为
②为,其作用是_____________________________________________________
图中氨节青霉素抗性基因是一种标记基因,其作用是
(3)目的基因的表达。科研人员将构建好的表达载体导入大肠杆菌中进行表达,发现大
肠杆菌有的发绿色荧光,有的发黄色荧光,有的不发荧光。请从密码子特点的角度分析,发
绿色荧光的可能原因是(答出1点即可)。
(4)新蛋白与突变基因的关联性分析。将上述发黄色荧光的大肠杆菌分离纯化后,对其
所含的GFP突变基因进行测序,发现其碱基序列与GFP基因的不同,将该GFP突变基因命名
为YFP基因(黄色荧光蛋白基因)。若要通过基因T程的方法探究YFP基因能否在真核细胞中
表达,实验思路是___________________________________________________________________
10.[2023•山东师范大学附中模拟]下列关于基因工程及其应用的叙述,错误的是
()
A.花粉管通道法可以用微量注射器将含有目的基因的DNA溶液直接注入子房中
B.只要从转基因棉花中检测到股抗虫蛋白,就代表转基因抗虫棉培育成功
C.Bt抗虫蛋白被分解为多肽后与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合,导致细胞膜穿孔
D.干扰素是一种糖蛋白,科学家用基因工程方法从大肠杆菌细胞内获得了干扰素
11.[2023•湖南郴州一中模拟]《诗经》中有“投我以木瓜,报之以琼瑶”的诗句。番
木瓜易感染番木瓜环斑病毒(英文缩写为PRSV)o我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌
转化法,成功培育出转基因番木瓜“华农一号”,大致流程如图所示。下列分析错误的是()
抗PRSV基因
农杆菌一^
番木瓜愈伤组织转基因番
木瓜植株
A.过程①称为逆转录,此过程中用到的酶有逆转录酶等
B.过程②用限制酶Ba漏I在Ti质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团
C.过程③将重组质粒转入农杆菌之前,需先用Ca?-载体处理农杆菌
D.过程⑤产生的木瓜植株即使有抗PRSV基因也不一定具有抗PRSV的性状
[答题区]
题号12341011
答案
12.[2023•湖北武汉校联考模拟]胶原蛋白是一种生物性高分子物质,应用领域包括生
医材料、化妆品、食品工业、研究用途等。随着科技的不断进步,可运用基因工程技术等进
行胶原蛋白的生产重组,在先进技术驱动下,重组胶原蛋白生产量有所提升。回答下列问题:
(1)胶原蛋白由多个原胶原构成,由胶原蛋白基因控制合成。人胶原蛋白基因主要是从
cDNA文库中获取,简要概述cDNA文库的构建过程:
(2)从理论上看,可利用转基因鼠来获得大量重组胶原蛋白。科学家已将aSl•乳腺酪
蛋白基因片段及胶原蛋白基因片段进行基因工程重组,获得重组DNA分子。后续的操作是
,再将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物,转基
因的雌鼠进入泌乳期后,可通过分泌乳汁来获得所需的重组胶原蛋白0
(3)当前基因工程技术生产重组胶原蛋白,存在动植物细胞成本高、难度高的限制,无
法实现规模化胶原蛋白生前,故从产业发展角度来看,宿主细胞选择微生物较为合适。微生
物作为基因工程宿主细胞的优点有(写两项)。利用
大肠杆菌作宿主细胞,首先要用Ca"处理,这一处理是否完成了转化?,原因是
(4)目前,通过基因工程获得的胶原蛋白与天然胶原蛋白相比,羟脯氨酸含量低。为此,
可以通过蛋白质工程对进行改造,生产出与天然胶原蛋白一样的胶原蛋白,满足人
们的生产和生活需求。
13.[2023•安徽合肥一中校考模拟]1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗
虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收
节支社会经济效益450亿元。
(1)培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤:、基因表达载体的构
建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
(2)研究表明,苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因,是培育转基因抗虫棉较为合适的目的
基因,其控制合成的Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的性环境中才能表现出毒性。
Bt抗虫蛋白被分解为多肽后,与害虫肠上皮细胞的结合,导致
细胞膜穿孔,最后造成害虫死亡。
(3)明确了目的基因后,获取目的基因的方法有多种,其中,利用PCR获取是常用的一
种方法。以下关于PCR说法正确的是(多选)。
A.PCR过程需提供DNA模板
B.PCR过程中新链的合成只能从5,端端
C.PCR过程需打开磷酸二酯键
D.可以利用PCR技术进行目的基因扩增
(4)在基因工程的基础上,延伸出来了第二代基因工程一一蛋白质工程。天然蛋白质合
成的过程是按照中心法则进行的,蛋白质工程的基本思路与之(填“相同”或“相
反“)。蛋白质工程是指以__________________________________________________________
—作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,
以满足人类生产和生活的需求。
专题强化演练十九基因工程
1.答案:C
解析:质3基因是抑癌基因,这类基因突变可能引起细胞癌变,A正确;。53基因是抑
癌基因,抑癌基因表达的蛋白质能抑制细胞的生长和增殖,或促进细胞凋亡,B正确;依据
题意,circDNYTl通过与抑癌基因。53表达的蛋白结合诱发乳腺癌,则circDNMTl高表达会
使乳腺癌细胞增殖变快,C错误;circDNMTl的基因编辑可用于乳腺癌的基础研究,D正确。
2.答案:D
解析:若用〃力Kiin睡切,目的基因可能正向插入,也可能反向插入,转录的产物可能
不同,A正确:若用户小1酶切,重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因(7ed),因此在含
Tet(四环素)培养基中形成的菌落,不一定含有目的基因,B正确:DNA凝胶电泳技术可以
分离不同大小的DNA片段,重组质粒的大小与质粒不同:能够鉴定重组质粒构建成功与否,
C正确;前方I的酶切位点位于四环素抗性基因中,若用劭力1酶切,重组质粒中含氨节青霉
素抗性基因(W),因此携带目的基因的受体菌在含力如(氨羊青霉素)的培养基中能形成
菌落,在含Tet的培养基中不能形成菌落,D错误。
3.答案:C
解析:由图可知,修复过程中需要将损伤部位的序列切断,因此需要限制酶的参与;同
时修更过程中,单个的脱氧核苜酸需要依次连接,要借助DNA聚合酶,A正确:填补缺口时,
新链即子链的延伸方向为5,到3,的方向进行,B正确;DNA有害损伤发生后,在细胞增殖
中进行修复,保证DNA复制的正确进行,对细胞最有利,C错误;癌症的发生是多个基因累
积突变的结果,随年龄增长,XP患者儿乎都会发生皮肤癌的原因,可用突变累积解释,D
正确。
4.答案:B
解析:分析题图可知,启动子在左侧,GW基因整合尚53基因的右侧,启动子启动转
录后,可以使67孑基因转录,曲g3基因的启动子能控制67孑基因的表达,A错误;因启动
子在左侧,转录的方向向右,合成的mRNA从左向右为5'-3',刚好是翻译的方向,所以
翻译时先合成Gata3蛋白,再合成GFP蛋白,B正确;整合。孑基因后,核酸片段变长,2
号个体只有大片段,所以是尚女3一行产基因纯合子,4号个体只有小片段,是野生型,C
错误;若用引物1和引物3进行PCR,杂合子和—G/T基因纯合子均能扩出条带,且
条带相同,仅有曲市3基因时无法扩出条带,不利于区分杂合子和纯合子,D错误。
5.答案:(1)细胞外
(2)R和P6
(3)缺乏尿喘咤2含有5-筑乳清酸
(4)3
解析:(1)由于酵母菌不能吸收淀粉,所以导入分解淀粉的酶发挥作用的场所在细胞外。
(2)根据题干信息“当H的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时,就可以
发生同源切割,将目的基因直接插入”可知,要保证目的基因两侧的小段序列与基因表达载
体上某序列相同,需要选择R和巳这对引物进行PCR。:3)①尿嚅嘘合成基因(UGA)常用
作标记基因,则应该将酵母菌放在缺乏尿喘咤的培养基上培养,如果导入成功,则形成.菌落;
如果没有导入,则缺乏尿啼咤,不能生存;方式1,C和C'方向相反,如果切割,则末端
在一条链上,不能连接,所以选择方式2,连接方向相同,切割后形成末端,便于连接。②
由于尿嘴咤可以使5-氟乳清酸转化为对酵母菌有毒物质,所以应该在含有5-氟乳清酸的培
养基匕如果切割成功,则不含尿喀味,形成菌落,如果切割不成功,则会产生有毒物质,
不能形成菌落。(4)根据前面分析,C和C,的中间插入UGA,A和B之间插入目的基因,所
以图3正确。
6.答案:(1)野生型
(2)运载体(Ti质粒)启动子和终止子
(3)为1基因和卡那霉素抗性基因75自交100
标准参照物野生型突变型
150bp
lOObp
50bp(bp指核甘酸对)
解析:(1)根据题干信息可知,突变后的基因为隐性基因,则野生型加1基因为显性基
因,因此采用农杆菌转化法将野生型Ml基因转入突变体植株后,若突变体表型确由该突变
造成,则转基因植株的种子大小应与野生型植株的种子大小相近。(2)利用PCR技术扩增
DA\基因后,应该用同种限制性核酸内切酶对DA\基因和运载体(Ti质粒)进行切割,再用
DNA连接酶将两者连接起来;在基因表达载体中,启动子位于目的基因的首端,终止了■位于
目的基因的尾端,因此为确保插入的加1基因可以正常表达,其上下游序列需具备启动子和
终止子。(3)①根据题干信息和图形分析,将T。代植株的花序浸没在农杆菌(T-DNA上含有
DA\基因和卡那霉素抗性基因)菌液中转化,再将获得的「代种子播种在选择培养基(含有
卡那霉素)上,若在选择培养基上有能够萌发并生长的阳性个体,则说明含有卡那霉素抗性
基因,即表示其基因组中插入DA\基因和卡那霉素抗性基因。②「代阳性植株都含有的1基
因,由于T-DNA(其内部基因在减数分裂时不发生交换)可在基因组单一位点插入也可以同
时插入多个位点,所以不确定是单一位点插入还是多位点插入,若是单一位点插入,相当于
一对等位基因的杂合子,其自交后代应该出现3:1的性状分离比,而题干要求选出单一位
点插入的植株,因此应该选择阳性率约75$的培养基中继续培养幼苗。③将以上获得的T2
代阳性植株自交,再将得到的%代种子按单株收种并播种于选择培养基上,若某培养基上
全部为具有卡那霉素抗性的植株即为需要选择的植株,即阳性率达到100%的培养基中的幼
苗即为目标转基因植株。根据图形分析,野生型和突变型基因片段的长度都是150bp,野生
型的基因没有限制性核酸内切酶X的切割位点,而突变型的基因有限制性核酸内切酶X的切
割位点,结合图中的数据分析可知电泳图中,野生型只有150bp,突变型有50bp和lOObp,
如图:
标准参照物野生型突变型
150bp
lOObp
50bp(bp指核甘酸对)
7.答案:(1)重组乙肝疫苗成分为蛋白质,无法独立在宿主体内增殖
(2)筛选RNA聚合酶
(3)基因组DNA被标记的目的基因的单链DNA片段
(4)从转基因酵母窗中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原一抗体杂交,观察是否有
杂交带出现
解析:(1)重组乙肝疫苗的成分是乙肝病毒表面的一种病毒蛋白。蛋白质注入人体后,
无法完成病毒遗传物质的复制与蛋白质的合成,无法独立增殖。(2)抗生素抗性基因作为标
记基因,用于转化细胞的筛选。RNA聚合酶能识别启动子并驱动目的基因转录。(3)目的基
因导入酵母细胞后,若要检测目的基因是否插入染色体中,可采用DNA分子杂交技术,即将
酵母细胞中的基因组DNA提取出来,在含有乙肝病毒表面抗原基因的单链DNA片段上用放射
性同位素等作标记,以此;乍为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显示出杂交带,就表明
目的基因已插入染色体DNA中。(4)若要通过实验检测巨的基因在酵母细胞中是否表达出目
的蛋白,应从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原一抗体杂交,若有杂交带出
现,表明目的基因已形成蛋白质产品。
8.答案:(1)RNA聚合酶限制酶切割位点、标记基因、复制原点等
(2)F2和R或R与R2a链
(3)J-Y5融合蛋白不是
解析•:(1)基因表达载体的构建中启动子是为了启动下游基因的“表达”,表达首先需
要转录,因此RNA聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。作为运载体必须具备的条件:
①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于筛选;③能在宿主细
胞中稳定存在并复制;④是安全的,对•受体细胞无害,而且要易从供体细胞中分离出来。图
中甲有启动子和终止子等,因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制
原点等。(2)据图甲可知,引物F2与R1或F1与R2结合部位包含J基因的碱基序列,因此
推测为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确,进行PCR检测时,若仅用一对引物,应
选择图甲中的引物F2和E1或F1与R2。b是模板链,而根据图上启动子和终止子的位置可
知转录方向是从左向右,对应的模板链方向应该是3,一5,,非模板链(也就是a链)是
5'-3':考虑到DNA复制的方向是子链的5'-3',引物延伸的方向肯定是5'-3',
所以引物结合的单链其方向是3,一5,;图中F1是前引物,在左侧,所以其配对的单链是
3'-5’的b链,故其序列应该与a链相应部分的序列相同。(3)据图乙可知,用抗J蛋白
抗体和抗V5抗体分别检测,均出现条带1,说明条带1是J・V5融合蛋白。抗J蛋白抗体检
测出现条带2,抗V5抗体检测不出现条带2,说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的
J基因表达的。
9.答案:(1)将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,
各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因
(2)终止子启动子RNA聚合的识别和结合的部位,驱动基因转录鉴别受体细胞
中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来
(3)密码子具有简尹性
(4)选择合适的运载体,利用合适的限制酶和DNA连接酶将YFP基因和运载体连接起
来,构建基因表达载体,之后将基因表达载体导入酵母菌,检测其是否会发黄色荧光
解析:(1)将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个
受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。(2)一个基因表达载体的组成,除
了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等,且基因的转录方向为从启动子到
终止子,故图中①为终止子,②为启动子,启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因
的首端,它是RNA聚合醐识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得
所需要的蛋白质。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目
的基因的细胞筛选出来,如抗生素抗性基因就可以作为这种基因。(3)正常情况卜,GFP突
变基因应该不发绿色荧光,而大肠杆菌有的发绿色荧光,从密码子特点的角度分析,原因是
密码子具有简并性,即一种氨基酸可能由一个或多个密码子决定。(4)要通过基因工程的方
法探究YFP基因能否在真核细胞中表达,可将构建好的表达载体(含有目的基因YFP)导入
酵母菌中进行表达,如果酵母菌发出黄色荧光,说明YFP基因能在真核细胞中表达,反之则
不能在真核细胞中表达。
10.答案:B
解析:我国科学家用独创的花粉管通道法将Bt基因导入棉花细胞,如可.以用微量注射
器将含有目的基因的DNA溶液直接注入子房中,A正确;从转基因棉花中检测到Bl抗虫蛋
白,还需要进行个体生物学鉴定才能说明转基因抗虫棉是否培育成功,B错误:Bt抗虫蛋白
被分解成多肽后,多肽与某类昆虫肠上皮细胞的特异性受体结合,导致细胞膜穿孔,因而能
破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫,C正确;干扰素是一种糖蛋白,科学家利用大肠
杆菌代谢旺盛的特点,用基因工程方法从大肠杆菌细胞内获得了干扰素,D正确。
11.答案:C
解析:过程①是以RNA为模板合成DNA的过程,为逆转录,需要逆转录酶,A正确:质
粒为环状DNA分子,用限制随及41I在Ti质粒切开一
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