DNA的粗提取和鉴定课件-2025-2026学年高二下学期生物人教版选择性必修3

DNA的粗提取与鉴定学习目标1、说出DNA的理化特性2、阐明DNA粗提取与坚定的基本原理3、掌握破碎细胞、去除杂质、析出DNA的操作技能，提升实验设计、操作实施、现象描述与结果分析能力思考：1、从哪里提取DNA？2、从细胞中提取DNA有哪些困难？如何提取？DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法去除其他成分，对DNA进行提取。细胞内成分复杂，且真核生物的DNA和蛋白质结合形成染色体，难以分离提纯。细胞一、实验原理

利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精DNA能溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液在一定温度下，DNA被二苯胺试剂染成蓝色初步分离DNA和蛋白质溶解DNA鉴定DNA（1）了解DNA的物理和化学性质，理解DNA粗提取和鉴定的原理。（2）学会DNA粗提取的方法以及用二苯胺试剂对DNA进行鉴定。二、实验目的三、材料用具【思考1】能否选用牛、羊、马、猪等哺乳动物成熟的红细胞做实验材料？不能，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，几乎不含DNA。【思考2】能否选用鸡血细胞做实验材料？能，鸡是鸟类动物，需加入3g柠檬酸钠（抗凝剂），防止血液凝固DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菜花和猪肝等。1、选材：【思考3】动物细胞是否需要研磨破碎细胞？动物细胞无细胞壁,可直接吸水涨破(省去研磨步骤)，释放DNA。2、试剂：①研磨液②体积分数为95%的酒精③2mol/L的NaCl溶液④二苯胺试剂⑤蒸馏水——溶解并提取DNA——析出DNA——溶解DNA——鉴定DNA，要现配现用研磨液成分作用SDS使蛋白质变性EDTA抑制DNA酶活性Tris-HCl缓冲液稳定DNA三、材料用具洗洁精（可以溶解脂质和蛋白质，破坏细胞膜、核膜）1、取材研磨取半根去皮香蕉，放入保鲜袋捏碎。取20ml蒸馏水，5ml洗洁精（可以溶解脂质和蛋白质，破坏细胞膜、核膜），2g食盐（中和DNA中的负电，使其溶解）混匀加入保鲜袋，轻轻搅拌均匀，静置3—5min。2、过滤取上清液多层纱布过滤研磨液，弃去残渣，收集滤液3、无水乙醇析出DNA沿杯壁缓慢靠日等体积的预冷的酒精溶液，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA四、实验步骤——DNA的粗提取四、实验步骤——DNA的溶解与鉴定注：DNA越多，溶液蓝色越深DNA+二苯胺蓝色沸水浴思考回答下列问题1.过滤能否用滤纸代替纱布？

不可以。因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失，影响最终提取的DNA量。2.本次离心或者过滤选择的是上清液还是沉淀物？3.提取出来的DNA可能含有哪些杂质呢？选择上清液，因为在研磨液体系中DNA可溶解，过滤或者离心DNA都位于上清液核蛋白、多糖等杂质思考回答下列问题4.预冷酒精的目的？

①低温可抑制核酸水解酶的活性，防止DNA降解。②低温可减缓分子的运动，使DNA易于形成沉淀析出。③低温有利于增加DNA分子的柔韧性，减少断裂。④因DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出，悬浮于溶液中。本实验只是对DNA进行了粗提取，有没有其它方法可以提取纯度较高的DNA呢？【进一步探究】1.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题：(1)右述图示中，该实验的正确操作顺序是__________________________

(用序号与箭头表示)。(2)步骤④中使用2mol/LNaCl溶液的目的是

。③→②→①→④→⑤溶解DNA课堂小练(3)步骤①的目的是

，其依据的原理是

。析出并获得DNADNA不溶于酒精(4)步骤①中所得到的丝状物为

色，若要鉴定其主要成分为DNA，可滴加________试剂，

后，如果出现

则证明该丝状物的主要成分为DNA。白二苯胺沸水浴加热蓝色(5)由于鸡血较难找到，某学