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文档简介

2026年病理技术基础试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1.最常用的组织固定液是A.乙醇B.10%中性福尔马林C.Bouin液D.Carnoy液答案:B2.HE染色中,苏木精染色后分化使用的试剂是A.75%乙醇B.1%盐酸乙醇C.伊红染液D.氨水答案:B3.石蜡切片常规厚度应为A.1-2μmB.3-5μmC.6-8μmD.10-15μm答案:B4.冰冻切片最适用于A.常规病理诊断B.快速术中病理诊断C.免疫荧光染色D.电镜标本制备答案:B5.免疫组织化学染色中,消除内源性过氧化物酶活性的常用试剂是A.3%过氧化氢B.10%甲醛C.TritonX-100D.PBS缓冲液答案:A6.组织脱水时,若脱水不彻底会导致A.切片易脱片B.组织发脆C.染色模糊D.透明不充分答案:D7.瑞氏染色主要用于A.细菌涂片B.血液或骨髓涂片C.组织切片D.真菌检测答案:B8.包埋时,组织面与包埋盒底面的正确方向是A.垂直B.任意方向C.紧贴底面D.倾斜45度答案:C9.病理标本接收时,重点核对的信息不包括A.患者姓名B.标本数量C.临床诊断D.患者联系方式答案:D10.防止切片刀卷刃的关键操作是A.增加切片厚度B.降低切片速度C.保持刀刃清洁D.提高固定液浓度答案:C二、填空题(每空1分,共15分)1.10%中性福尔马林的pH值应控制在______范围内。答案:7.2-7.42.HE染色中,伊红染色后需经______梯度乙醇脱水。答案:80%、95%、无水乙醇3.石蜡包埋的关键温度是______,需高于石蜡熔点______℃。答案:56-60℃;2-34.冰冻切片机的温度通常设置为______,切片厚度一般为______。答案:-18℃至-22℃;5-8μm5.免疫组化染色中,抗原修复的常用方法包括______和______。答案:热修复(微波/高压锅);酶消化修复6.组织透明的目的是______,常用透明剂为______。答案:置换脱水剂,便于石蜡渗透;二甲苯7.瑞氏染色时,染液与缓冲液的比例一般为______。答案:1:1-1:2三、简答题(每题5分,共20分)1.简述组织固定的主要目的。答案:①保持细胞与组织的形态结构;②防止组织自溶与腐败;③凝固或沉淀细胞内物质,便于染色;④使组织硬化,利于后续切片操作;⑤保存抗原性,为免疫组化等技术提供基础。2.列举HE染色质量控制的关键步骤。答案:①切片厚度(3-5μm)均匀无褶皱;②脱蜡彻底(二甲苯时间充足);③苏木精染色时间适宜(避免过深或过浅);④分化适度(盐酸乙醇分化至细胞核清晰);⑤蓝化充分(氨水或温水使核呈蓝色);⑥伊红染色浓度与时间控制(胞质着色均匀);⑦脱水透明完全(避免切片模糊)。3.简述冰冻切片的优缺点。答案:优点:①快速(10-30分钟完成制片);②保留酶活性和抗原性;③适用于术中快速诊断。缺点:①切片厚度较厚(5-8μm),细胞结构清晰度低于石蜡切片;②易出现冰晶、皱缩等artifact;③长期保存性差;④操作依赖技术经验,质量稳定性较低。4.分析组织石蜡包埋后出现“脆裂”的可能原因及解决方法。答案:可能原因:①固定过度(如甲醛固定时间过长);②脱水过度(无水乙醇处理时间过长);③透明剂(二甲苯)作用时间过久;④包埋温度过高(超过65℃);⑤组织本身含较多纤维或钙化成分。解决方法:①调整固定时间(常规组织固定6-24小时);②优化脱水流程(每级乙醇时间30-60分钟);③缩短透明时间(15-30分钟);④控制包埋温度(石蜡熔点+2-3℃);⑤对硬组织提前脱钙处理。四、案例分析题(共25分)案例1:某实验室在HE染色时,发现部分切片细胞核着色浅淡,胞质染色模糊。(1)分析可能原因(5分)。(2)提出解决措施(5分)。答案:(1)可能原因:①脱蜡不彻底(二甲苯时间不足或污染);②苏木精染液失效(保存时间过长或氧化);③分化过度(盐酸乙醇作用时间过长);④蓝化不充分(氨水浓度过低或时间不足);⑤伊红染液浓度过低或染色时间过短。(2)解决措施:①延长脱蜡时间(二甲苯Ⅰ10分钟,二甲苯Ⅱ10分钟);②更换新鲜苏木精染液(添加氧化剂如碘酸钠);③缩短分化时间(盐酸乙醇处理5-10秒);④延长蓝化时间(温水浸泡5分钟或氨水1分钟);⑤调整伊红浓度(0.5%-1%)或延长染色时间(30秒-2分钟)。案例2:某病理科进行CK(细胞角蛋白)免疫组化染色时,阳性对照无显色,阴性对照背景深。(1)分析可能原因(5分)。(2)提出改进方案(5分)。答案:(1)可能原因:①一抗失效(保存不当或过期);②检测系统试剂失效(如HRP-二抗或DAB显色液);③阳性对照选择错误(未使用含CK的组织);④封闭不充分(血清或BSA浓度过低);⑤洗涤不彻底(PBS冲洗次数不足)。(2)改进方案:①更换新鲜一抗(验证效期及保存条件);②检测系统试剂需同步更换并做阳性对照测试;③选择已知CK阳性的组织(如鳞状上皮)作为对照;④延长封闭时间(5%BSA室温30分钟);⑤增加洗涤次数(PBS洗3次,每次5分钟);⑥检查DAB显色液配置(现用现配,避免氧化)。案例3:某技术员在制作肝组织石蜡切片时,切片出现大量刀痕。(1)分析可能原因(5分)。(2)提出解决方法(5分)。答案:(1)可能原因:①切片刀不锋利(刃口有缺口或卷刃);②组织包埋方向不当(切面与刀刃不平行);③组织过硬(脱水或透明过度);④切片机螺丝松动(刀架或样品夹固定不牢

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