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文档简介

第三节DNA的复制一、对DNA复制的推测

半保留复制全保留复制半保留复制的假说:沃森和克里克DNA是肉眼看不可见的,如何区分亲代和子代DNA呢?二、DNA半保留复制的实验证据梅塞尔森斯塔尔1958年同位素标记技术大肠杆菌(繁殖快,20min一代)资料:15N和14N是N元素的两种稳定的同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。实验过程分裂一次大肠杆菌在含15NH4CL的培养液中生长若干代转移到14NH4CL中再分裂一次提取DNA离心提取DNA离心提取DNA离心得到的大肠杆菌DNA几乎都是15N标记的???哪个位置假设DNA是半保留复制,离心后试管中DNA应处在什么位置?假设DNA是全保留复制,离心后试管中DNA应处在什么位置?【实验预期】14N/15N-DNA15N/15N-DNA14N14N14N14N/

14N-DNA14N/15N-DNA提取DNA离心密度低高15N/15N-DNA提取DNA离心14N/15N-DNA14N/15N-DNA提取DNA离心14N/15N-DNA14N/14N-DNA亲代如果是半保留复制【实验预期】15N/15N-DNA14N14N14N14N/

14N-DNA15N/15N-DNA14N/14N-DNA15N/15N-DNA密度低高15N/15N-DNA15N/15N-DNA14N/14N-DNA15N/15N-DNA14N/14N-DNA提取DNA离心提取DNA离心提取DNA离心如果是全保留复制密度低高15N/15N-DNA15N/15N-DNA14N/14N-DNA15N/15N-DNA14N/14N-DNA提取DNA离心提取DNA离心提取DNA离心全保留复制提取DNA离心密度低高15N/15N-DNA提取DNA离心14N/15N-DNA提取DNA离心14N/15N-DNA14N/14N-DNA半保留复制亲代第一代第二代【实验结果】低高15N/15N-DNA细胞分裂一次大肠杆菌在含15NH4CL的培养液中生长若干代转移到含14NH4CL细胞再分裂一次14N/15N-DNA14N/15N-DNA14N/14N-DNA实验结果与半保留复制的假说吻合,说明DNA的复制是以半保留复制的方式进行的提取DNA离心提取DNA离心提取DNA离心二、DNA半保留复制的实验证据(假说-演绎法)

材料:大肠杆菌运用技术:

(密度梯度)离心法14N/14N—DNA15N/14N—DNA15N/15N—DNA轻带中带重带同位素标记法15N14N转移到含14NH4Cl的培养液中15N/15NDNA15N/14N

DNA14N/14NDNA15N/14N

DNA大肠杆菌在含15NH4Cl的培养液中生长若干代15N14N亲代第一代第二代第三代15N15N类推第五代时在离心管中,上中下层的比例如何?15N15N14N14N14N14N14N14N(1)解旋:能量,解旋酶,氢键断裂,双链解开CGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATACGTATACGGCTAGCCGTA3'5'CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ATP解旋酶DNA复制过程(2)合成子链:DNA聚合酶,每一条母链为模板,游离的4种脱氧核苷酸为原料,碱基互补配对原则,合成子链CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTTACGCAAGCTAGTCATTA5'3'TATGCATGATCGAGCTT5'3'DNA聚合酶注:氢键形成不需酶,磷酸二酯键形成需DNA聚合酶(3)重新螺旋:每条新链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATAA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT5'3'TAGCCGTATAGCCGATAT3'5'TTACGCGTATATATA5'3'注:子链合成方向是

,因此两条子链的延伸方向相反特点:①边解旋边复制②半保留复制5’→3’端三、DNA复制的过程1、概念:

以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程2、时间:

细胞分裂前的间期3、场所:真核:细胞核(主)、线粒体、叶绿体原核:拟核(主)病毒:宿主细胞内4、条件:①模板:亲代DNA的两条链②原料:4种游离的脱氧核苷酸③能量:ATP④酶:解旋酶(催化氢键断裂)

DNA聚合酶(催化磷酸二酯键形成)5、过程:

解旋→合成子链→形成子代DNA6、特点:

边解旋边复制

半保留复制多起点复制模

链:3’→5’子链合成方向:5’→3’7、DNA复制的方向:9、意义:将遗传信息从亲代细胞传给子代细胞,从而保持了遗传信息的连续性8、DNA准确复制的原因:①独特双螺旋结构提供精确模板②碱基互补配对原则亲代第一代第二代第三代15N15N类推第五代时在离心管中,上中下层的比例如何?15N15N14N14N14N14N14N14N四、相关计算一个DNA连续复制n次后:1、DNA分子数=2n2、脱氧核苷酸链数=2n+13、母链数=子链数=22n+1﹣24、含母链的DNA分子数=25、一个DNA分子中含某碱基m个,DNA分子复制n次,则需游离的该碱基数为:m(2n-1)第n次复制时,需游离的该碱基数为:m·

2n-11、DNA含500个碱基对,一条链上A:G:T:C=1:2:3:4,复制n次后,消耗游离的G4500个,则n=()42、100个碱基对的DNA,含40个T,复制3次,则需游离的C=()个4201.用15N标记含有100个碱基对的双链DNA分子,其中有胞嘧啶60个,该DNA分子在含14N的培养基中连续复制4次。下列有关叙述错误的是(

)A.含有15N的DNA分子占1/8B.复制过程中需游离的腺嘌呤脱氧核苷酸600个C.含有14N的DNA分子占7/8D.复制结果共产生16个DNA分子C2.某DNA分子含腺嘌呤(A)200个,复制数次后消耗周围环境中含A的

脱氧核苷酸3000个,该DNA分子已经复制了几次?()A.4次

B.3次

C.5次

D.6次A200×(2n-1)=3000,解得n=41.某研究小组进行“探究DNA的复制过程”的活动,结果如右图所示。其中培养大肠杆菌的唯一氮源是14NH4Cl或15NH4Cl,a、b、c表示离心管编号,条带表示大肠杆菌DNA离心后在离心管中的分布。下列叙述错误的是(

)A.本活动运用了同位素标记技术和离心技术B.a管的结果表明该管中的大肠杆菌是在含14NH4Cl的培养液中培养的C.b管的结果表明该管中的大肠杆菌的DNA都是15N/14N-DNAD.实验结果说明DNA分子的复制方式是半保留复制B当堂训练当堂训练2.细菌在含有15N的培养液中繁殖数代后,细菌DNA的碱基皆含有15N,然后再移入含有14N的培养液中培养,提取其子代的DNA进行离心分离,下图①~⑤为可能的结果。下列叙述错误的是(

)A.第一次分裂形成的子代DNA应为⑤B.第二次分裂形成的子代DNA应为①C.第三次分裂形成的子代DNA应为③D.亲代DNA应为⑤A3.把培养在含轻氮(14N)环境中的细菌,转移到含重氮(15N)环境中培养相当于复制一次的时间,然后放回原环境相当于连续复制两次的时间后,细菌DNA组成分析结果是(

)A.3/4轻氮型、1/4中间型B.1/4轻氮型、3/4中间型C.1/2中间型、1/2重氮型D.1/2轻氮型、1/2中间型当堂训练A(1)1条染色体(母链被15N标记,在含14N的培养基中培养)规律:复制一次,子染色体都带标记;

复制两次,子染色体一半带有标记。(2)2条染色体①②③④①②组合有

个子细胞带有标记①④组合有

个子细胞带有标记③④组合有

个子细胞带有标记234①②③④(2)2条染色体规律:复制一次,子细胞中每条染色体都带有标记;

复制两次,4个子细胞带有标记的有2、3、4个三种情况。如果是2n条染色体,4个子细胞带有标记情况如何?①②③④2或3或4如果是2n条染色体,4个子细胞中被标记的染色体最多(或最少)有多少条?①②③④0~2n规律:形成的4个子细胞中的每条染色体均带有标记。一对同源染色体15N标记同源染色体分离姐妹染色单体分离15N标记1对同源染色体上的两个DNA分子五、DNA复制与细胞分裂过程中染色体标记情况分析用15N充分标记细胞核DNA分子,再将该细胞放到含14N的培养液中进行两次有丝分裂,情况如下(展示细胞中一对同源染色体)1条染色体上的1个DNA1条染色体上的2个DNA1条染色单体上的1个DNA用15N充分标记细胞核DNA分子,再将该细胞放到含14N的培养液中进行两次有丝分裂,情况如下(展示细胞中一对同源染色体)第一次有丝分裂用15N标记1对同源染色体上的2个DNA分子每条同源染色体上的每条染色体单体均带有标记分裂形成2个子细胞,每个子细胞中的每条染色体均带有标记①有丝分裂第二次有丝分裂分裂形成4个子细胞,子细胞类型有4种组合方式①①有

的子细胞带有标记②②③有

的子细胞带有标记④④

子细胞带有标记③1/23/4全部②减数分裂15N标记1对同源染色体上的两个DNA分子同源染色体分离姐妹染色单体分离分裂形成4个子细胞,全部子细胞中的每条染色体均带有标记。思考:

如果是2n条染色体,4个子细胞带有标记情况?①②③④2或3或4思考:

如果是2n条染色体,4个子细胞中最多和组少有多少

条染色体被标记?①②③④0~2nDNA是染色体的组成成分,染色体是DNA的主要载体。ACTTGACGATGAACTGCTACTTGACGATGAACTGCTACTTGACGATGAACTG

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