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文档简介
病原生物学实验病原生物学教研室张莹实验一一、革兰染色二、细菌特殊结构(示教)一、革兰氏染色1、原理G-:肽聚糖层薄且缺五肽交联桥,交联度低,外膜层含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时,外膜中类脂质融解,增加了细胞的通透性,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫和碘复合物溶出,菌体呈现复染后的红色。G+:细胞壁厚肽聚糖网层多且交联致密,用脱色剂处理时,肽聚糖层孔径缩小,且不含类脂,通透性降低,结晶紫和碘复合物牢固结合在细胞壁上,菌体呈现初染时的紫色。初染---媒染---脱色---复染2、步骤
(1)涂片(2)干燥(3)固定
取菌NS①初染:结晶紫1分钟,水冲甩干;②媒染:卢戈氏碘液1分钟,水冲甩干;③脱色:95%酒精30秒钟,水冲甩干;④复染:稀释复红1分钟,水冲甩干;(5)滤纸吸干,油镜观察(4)染色3、结果柠檬色葡萄球菌:蓝紫色G+变形杆菌:红色G—
变形杆菌革兰染色X1000
柠檬色葡萄球菌革兰染色X10004、意义鉴别细菌指导临床用药研究细菌的致病性G+G-G+:青霉素、头孢类等G-:链霉素、卡那霉素等G+:外毒素G-:内毒素注意事项革兰氏染色成败与否与许多因素有关
1、菌龄
2、涂片厚薄
3、脱色时间(最为关键)二、细菌的特殊结构鞭毛芽胞荚膜变形杆菌鞭毛鞭毛染色X1000
炭疽杆菌芽胞
革兰染色X1000
炭疽杆菌荚膜
革兰染色
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