抗体药物制备辅助技师考试试卷及答案

抗体药物制备辅助技师考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.抗原分子中能与抗体结合的最小单位称为______。2.单克隆抗体制备常用的细胞融合剂是______。3.杂交瘤细胞培养适宜温度为______℃。4.抗体基本结构含______条重链和______条轻链。5.抗体药物细胞株需经______鉴定确保安全。6.亲和层析纯化抗体常用配体是______。7.抗体药物质量控制指标含______、纯度、活性等。8.动物免疫常用佐剂有______和弗氏佐剂。9.杂交瘤筛选用______培养基。10.抗体可变区位于重链/轻链的______端。答案：1.抗原决定簇（表位）2.聚乙二醇（PEG）3.374.2；25.生物安全性6.ProteinA/G7.含量（效价）8.铝佐剂9.HAT10.N二、单项选择题（每题2分，共20分）1.单克隆抗体制备的免疫脾细胞是：A.骨髓瘤细胞B.淋巴细胞C.成纤维细胞D.干细胞2.杂交瘤细胞不具备的特点是：A.无限增殖B.分泌单一抗体C.免疫原性D.体外存活3.去除抗体药物内毒素常用方法：A.亲和层析B.离子交换层析C.疏水层析D.超滤4.单克隆抗体属于：A.天然抗体B.基因工程抗体C.多克隆抗体D.单特异性抗体5.细胞培养维持pH的气体是：A.5%CO₂B.10%CO₂C.5%O₂D.10%O₂6.抗体药物临床应用不包括：A.抗感染B.抗肿瘤C.自身免疫病D.降血糖7.杂交瘤克隆化常用方法：A.有限稀释法B.流式分选C.软琼脂克隆D.以上都是8.抗体Fc段功能不包括：A.结合补体B.结合Fc受体C.抗原结合D.延长半衰期9.抗体生产细胞株不包括：A.大肠杆菌B.CHO细胞C.昆虫细胞D.酵母细胞10.抗体活性检测常用方法：A.ELISAB.SDSC.HPLCD.内毒素检测答案：1.B2.C3.D4.D5.A6.D7.D8.C9.A10.A三、多项选择题（每题2分，共20分）1.单克隆抗体制备关键步骤：A.动物免疫B.细胞融合C.杂交瘤筛选D.克隆化2.抗体功能区包括：A.VHB.VLC.CH1D.CH23.细胞培养基本条件：A.温度B.CO₂浓度C.营养物质D.无菌环境4.抗体纯化常用方法：A.亲和层析B.离子交换层析C.疏水层析D.凝胶过滤5.基因工程抗体类型：A.嵌合抗体B.人源化抗体C.单链抗体D.双特异性抗体6.HAT培养基作用：A.抑制骨髓瘤DNA合成B.抑制脾细胞DNA合成C.选择杂交瘤D.促进融合7.抗体质量控制项目：A.纯度（SDS）B.活性（ELISA）C.内毒素D.宿主蛋白残留8.动物免疫途径：A.腹腔注射B.静脉注射C.肌肉注射D.皮下注射9.细胞培养常见污染：A.细菌B.真菌C.支原体D.病毒10.单抗与多抗区别：A.特异性B.均一性C.产量D.制备难度答案：1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.AC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.抗原决定簇只能是线性结构。（）2.杂交瘤细胞可分泌多种抗体。（）3.CHO细胞是抗体生产常用哺乳动物细胞株。（）4.抗体轻链分κ和λ两种。（）5.骨髓瘤细胞需是HGPRT缺陷型。（）6.ProteinA只结合IgG的Fc段。（）7.血清为细胞培养提供生长因子。（）8.抗体效价越高活性越强。（）9.双特异性抗体可结合两种抗原。（）10.弗氏完全佐剂可多次免疫使用。（）答案：1.×2.×3.√4.√5.√6.√7.√8.×9.√10.×五、简答题（每题5分，共20分）1.简述单克隆抗体制备主要步骤。答案：①动物免疫：用抗原免疫小鼠诱导B细胞；②细胞融合：脾细胞与骨髓瘤细胞经PEG融合；③HAT筛选：淘汰未融合/自身融合细胞，保留杂交瘤；④克隆化：有限稀释法获得单一克隆；⑤抗体检测：鉴定特异性、活性；⑥大规模生产：体外培养或腹腔接种获取抗体。2.抗体纯化常用方法及原理？答案：①亲和层析：ProteinA/G与Fc段特异性结合，洗脱得纯抗体；②离子交换：基于电荷差异，变pH/盐浓度分离；③疏水层析：高盐结合疏水区域，低盐洗脱；④凝胶过滤：按分子大小分离聚集体/杂质。常组合使用提升纯度。3.细胞培养无菌操作注意事项？答案：①超净台内操作，提前紫外线消毒；②穿无菌衣、戴口罩手套，酒精消毒双手；③器材高压灭菌，培养基过滤除菌；④避免说话咳嗽，动作轻柔；⑤无菌/污染物品分开，酒精擦瓶口；⑥定期检测污染，及时处理。4.抗体药物质量控制主要指标？答案：①纯度（SDS/HPLC，≥95%）；②活性（ELISA/细胞实验）；③含量（Bradford/ELISA定量）；④杂质（宿主蛋白、内毒素≤1EU/mg、核酸残留）；⑤稳定性（加速/长期试验）；⑥安全性（无支原体/病毒）。六、讨论题（每题5分，共10分）1.细胞培养污染类型及应对策略？答案：常见污染：细菌（培养基浑浊、pH快变）→丢弃+消毒环境；真菌（菌丝/孢子）→抗真菌药（两性霉素B）或丢弃；支原体（无外观变化）→支原体去除试剂（Plasmocin）或复苏无支原体株。预防：严格无菌操作，定期检测细胞/培养基，用无菌耗材；污染后隔离避免扩散。2.ADC与普通抗体的区别及优势？答案：ADC