《尿液标本临床微生物实验室检验操作指南》考核试题及答案

《尿液标本临床微生物实验室检验操作指南》考核试题及答案一、单项选择题（每题5分，共25分）1.清洁中段尿标本采集时，以下操作正确的是（）A.先用碘伏消毒剂充分消毒外阴及尿道口，再留取尿液B.排尿过程中舍弃前段尿液，留取中间段约10~20mL于无菌容器中C.留取的尿液标本若不能及时送检，可加入防腐剂甲醛D.女性患者月经期留取标本需注明信息即可正常检测2.尿液标本采集后室温下放置需在多长时间内完成接种，无法及时接种的4℃冷藏最长不得超过多久（）A.1h，12hB.2h，24hC.4h，24hD.2h，48h3.尿液标本定量接种常规使用的接种环规格为1μL，接种后计数到菌落数为120个，换算为每毫升菌落数是（）A.1.2×10^3CFU/mLB.1.2×10^4CFU/mLC.1.2×10^5CFU/mLD.1.2×10^6CFU/mL4.以下哪种情况分离到的菌株可直接判定为尿路感染致病菌，无需考虑菌落计数阈值（）A.清洁中段尿分离到2种细菌，其中表皮葡萄球菌菌落数10^3CFU/mLB.导尿标本分离到念珠菌，菌落数5×10^2CFU/mLC.尿液标本分离到伤寒沙门菌D.中段尿分离到大肠埃希菌，菌落数8×10^3CFU/mL5.女性无复杂因素的下尿路感染患者，清洁中段尿培养革兰阴性杆菌的诊断阈值为（）A.≥10^2CFU/mLB.≥10^4CFU/mLC.≥10^5CFU/mLD.≥10^6CFU/mL二、多项选择题（每题6分，共30分）1.以下尿液标本采集操作错误的有（）A.留置导尿患者直接从集尿袋底部放取尿液送检培养B.留取24小时尿标本加入防腐剂后送检微生物培养C.耻骨上膀胱穿刺抽取的尿液标本为无菌操作采集，无需评估污染情况D.幼儿尿培养可使用尿袋贴于外阴处收集尿液2.以下提示尿标本可能存在污染的情况有（）A.培养分离到3种及以上不同种属的细菌，各菌株菌落数均<10^4CFU/mLB.同时分离出乳酸杆菌、类白喉棒状杆菌、表皮葡萄球菌，均为少量生长C.女性中段尿分离到单一大肠埃希菌，菌落数10^6CFU/mLD.导尿标本分离到2种革兰阴性杆菌，菌落数均≥10^5CFU/mL3.关于尿标本接种和培养操作，以下说法正确的有（）A.接种前需首先评估标本合格性，不合格标本需拒收并告知临床拒收原因B.常规接种血琼脂平板和麦康凯/中国蓝平板即可覆盖常见尿路感染致病菌C.接种后的平板需倒置放入35℃、5%~10%CO2环境中培养18~24hD.怀疑淋病奈瑟菌感染的标本需同时接种巧克力平板，置于CO2环境培养4.尿培养出现假阴性的常见原因包括（）A.留取标本前患者已使用抗菌药物B.尿液在膀胱内停留时间不足2h，病原菌未充分繁殖C.标本送检不及时，病原菌室温下长时间放置死亡D.感染病原菌为苛养菌、厌氧菌或L型细菌，常规培养条件无法生长5.以下尿培养结果需要报告药敏试验的有（）A.耻骨上膀胱穿刺标本分离到大肠埃希菌，菌落数10^3CFU/mLB.患者有明确尿路刺激征，中段尿分离到腐生葡萄球菌，菌落数10^4CFU/mLC.分离到3种细菌，分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌，菌落数均为10^3CFU/mLD.中段尿分离到念珠菌，菌落数≥10^3CFU/mL三、判断题（每题3分，共15分）1.尿液厌氧菌培养的标本可留取清洁中段尿送检，无需特殊运送条件。（）2.长期留置导尿患者的尿培养分离到凝固酶阴性葡萄球菌，无论菌落数多少都需要报告药敏结果。（）3.尿常规亚硝酸盐阳性、白细胞酯酶阳性，但尿培养阴性，可能是感染病原菌为不产亚硝酸盐的革兰阳性菌或苛养菌导致。（）4.尿标本接种前需充分混匀后再用定量接种环取标本接种，否则会导致菌落计数结果偏差。（）5.为提高结核分枝杆菌检出率，尿标本需离心后取沉渣进行抗酸染色及分枝杆菌培养。（）四、简答题（每题10分，共20分）1.简述尿液微生物检验的标本拒收标准。2.简述尿培养菌落计数的临床意义及报告原则。五、案例分析题（共10分）患者男性，68岁，因脑梗死长期卧床，留置导尿12天，出现发热、尿常规白细胞升高，临床申请尿培养+药敏。实验室接种培养24h后，分离到铜绿假单胞菌，菌落计数为5×10^4CFU/mL，同时分离到少量表皮葡萄球菌（菌落数10^2CFU/mL）。请回答：该结果如何解读及报告？需要给临床哪些提示？参考答案：一、单项选择题1.B解析：A选项清洁外阴用清水或肥皂水即可，无需用碘伏消毒，避免消毒剂残留杀死病原菌导致假阴性；C选项尿培养标本不能加防腐剂，会抑制细菌生长；D选项月经期留取的尿标本易被经血污染，应避免在经期留取，若必须留取需严格清洁外阴后导尿抽取。2.B解析：依据临床微生物检验标本管理规范，尿标本室温下需2h内接种，4℃冷藏最长不超过24h，避免病原菌繁殖或死亡导致计数偏差。3.C解析：1μL接种环接种的菌落数换算为每毫升菌落数需乘以1000，120×1000=1.2×10^5CFU/mL。4.C解析：从尿液中分离到沙门菌、志贺菌、淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌等特异性致病菌时，无论菌落数多少均判定为致病菌。5.A解析：有典型下尿路感染症状的女性患者，革兰阴性杆菌菌落数≥10^2CFU/mL即有诊断意义，无复杂因素的无症状女性诊断阈值为≥10^5CFU/mL。二、多项选择题1.ABD解析：A选项导尿标本需消毒导尿管近端侧壁后穿刺抽取，不能从集尿袋留取，集尿袋内尿液易被污染；B选项24h尿标本加了防腐剂会抑制细菌生长，不能用于培养；D选项幼儿尿袋收集的标本易被皮肤、粪便菌群污染，尽量采用导尿或耻骨上穿刺留取。C选项耻骨上膀胱穿刺标本为无菌操作采集，污染概率极低，无需评估污染。2.AB解析：3种及以上杂菌生长、分离到皮肤定植菌且菌落数低，均提示标本污染可能。C选项单一大肠埃希菌高菌落数为典型致病菌；D选项导尿标本分离到2种致病菌高菌落数可能为混合感染。3.ABCD解析：所有选项均符合操作规范，血平板覆盖革兰阳性菌、苛养菌，麦康凯分离革兰阴性杆菌，淋病奈瑟菌需要巧克力平板和CO2环境。4.ABCD解析：四个选项均为尿培养假阴性的常见原因，此外还有尿液稀释、大量饮水后留取标本也可能导致假阴性。5.ABD解析：C选项分离到3种细菌且菌落数低，考虑污染，无需报告药敏，建议临床重新留取标本。A选项耻骨上穿刺标本无污染，任何菌落数的致病菌都需要报告；B选项有症状患者腐生葡萄球菌是尿路致病菌，10^4CFU/mL有意义；D选项念珠菌≥10^3CFU/mL需要报告。三、判断题1.×解析：中段尿标本会被尿道的厌氧菌定植污染，厌氧菌培养需采用耻骨上膀胱穿刺抽取的标本，密封排出空气后立即送检。2.×解析：长期留置导尿患者常存在细菌定植，凝固酶阴性葡萄球菌多为皮肤定植菌污染或导管定植，若菌落数极低且患者无明确感染症状，无需报告药敏，需结合菌落数和临床症状判断。3.√解析：亚硝酸盐阳性仅提示存在产硝酸盐还原酶的革兰阴性杆菌，革兰阳性菌、苛养菌、厌氧菌不产该酶，会出现亚硝酸盐阴性但存在感染的情况。4.√解析：尿液静置后病原菌会沉于底部，若不混匀直接取上层尿液接种，会导致菌落计数结果偏低。5.√解析：尿中结核分枝杆菌含量较低，离心浓缩后可提高检出率。四、简答题1.尿液微生物检验标本拒收标准如下：（1）标识问题：标本容器标识与申请单信息不符、标识模糊或缺失无法识别，直接拒收；（2）容器问题：使用非无菌容器留取、容器有渗漏、容器外被污染，直接拒收；（3）标本质量问题：标本明显混入粪便、阴道分泌物、脓液等外源污染物，留取的是24h尿标本、尿常规检测后剩余标本、加了防腐剂的标本，直接拒收；（4）送检时效问题：室温下放置超过2h未接种，且未做4℃冷藏处理；或4℃冷藏超过24h的标本，予以拒收；（5）重复送检：同一患者同一时间重复送检2份及以上尿培养标本，无特殊临床说明的，拒收重复标本。2.尿培养菌落计数临床意义及报告原则：（1）临床意义：菌落计数可区分污染菌、定植菌和致病菌，辅助尿路感染诊断。通常清洁中段尿标本革兰阴性杆菌≥10^5CFU/mL、革兰阳性球菌≥10^4CFU/mL提示感染；有尿路刺激征的女性患者革兰阴性杆菌≥10^2CFU/mL、耻骨上穿刺标本任何菌落数的致病菌均提示感染；3种及以上低菌落数杂菌提示污染。（2）报告原则：①分离到沙门菌、志贺菌、淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌等特异性致病菌，无论菌落数多少，均报告鉴定结果及药敏试验，标注为致病菌；②符合感染阈值的单一或2种致病菌，报告鉴定结果、菌落计数、药敏试验；③有明确尿路感染症状、已使用抗菌药物、留置导尿、肾盂肾炎患者，致病菌菌落数略低于阈值的，也需报告鉴定及药敏，备注提示临床结合症状判断；④分离到3种及以上不同种属细菌，且菌落数均较低，报告“标本分离到3种及以上细菌，考虑污染，请重新留取合格标本送检”，无需做药敏试验；⑤念珠菌菌落数≥10^3CFU/mL报告鉴定及药敏，低于该值且无症状可备注提示定植可能。五、案例分析题结果解读及报告：1.铜绿假单胞菌菌落数5×10^4CFU/mL为致病菌，患者有留置导尿史、发热、尿常规白细胞升高，符合导管相关性尿路感染诊断，需报告铜绿假单胞菌的鉴定结果、菌落计数、药敏试验结果；2.表皮葡萄球菌菌落数仅10^2CFU/mL，为少量生长，考虑为皮肤定植菌污染或导管表面定植，无