尿糖对尿肌酐相关肾损伤标志物的干扰分析

摘要本研究采用横断面研究。选取2023年10月1日至2024年3月31日于北京大学第一医院就诊的CKD患者，年龄为(50±18)岁，男性患者90例，女性患者70例。收集患者的新鲜晨尿，纳入160份尿液样本。将尿液样本分成5份，每份225μ1,其中1份加入75μl去离子水作为对照样本，其余各加入120、480、960、1200mmol/L葡萄糖溶液75μ1,最终得到葡萄糖浓度分别为30、120、240、300尿转铁蛋白-肌酐比值(uTRF/uCr)、尿a1-微球蛋白-肌酐比值 葡萄糖苷酶-肌酐比值(uNAG/uCr)。伤标志物时存在显著差异(P0.05)。明显高于酶法且平均偏差的绝对值随葡萄糖浓度升高而增大。对于酶法肌酐及相关肾损伤标志物测定受葡萄糖浓度的影响较小，苦味酸法肌酐及相关肾损伤标志物测定结果受葡萄糖浓度影响较大。对于CKD的筛查、诊断、分期和监测具有重要的意义[6,除了uACR蛋白-尿肌酐比值(urinarytransferrincreatinineratio,uTRF/uCr)⁸、尿a1-微球蛋白-尿肌酐比值(urinarya白G-尿肌酐比值(urinaryuIgG/uCr)10、尿N-乙酰葡萄糖苷酶-尿肌酐比值(urinaryN-acetyl-β-D-glucosidasecreatinineratio,uNAG/uCr)「,这些比值的目前临床上测定肌酐的常用方法有酶法和苦味酸法。对于血肌酐的检测，苦味酸法会受到葡萄糖的影响12,且随着葡萄糖浓度的增加其偏倚也会增加，酶法则不受葡萄糖浓度的干扰12,183。对于尿肌酐是不是也存在同样的干扰?本研究通过外源葡萄糖添加实验，模拟CKD患者的尿糖状态，评估葡萄糖对酶法和苦味酸法检测尿肌酐及多种尿液肾损伤标志物的干扰。选取2023年10月1日至2024年3月31日于北京大学第一医院就诊的CKD患者，排除带有内源性尿糖的标本(尿糖浓度<5.6mmol/L)。收集患者的新鲜晨尿，尿液量≥2ml。本研究共纳入160份尿液样本。患者年龄为(50±18)岁，男90例，女70例。试者，且研究项目不涉及个人隐私和商业利益。经伦理委员会审查 (2024研667-001)批准后，免除签署知情同意。二、方法(一)实验方案将尿液样本分成5份，每份225μ1,第一份加入75μ1去离子水作为对照样本，其余各加入120、480、960、1200mmol/L葡萄糖溶液75μ1,最终得到葡萄糖浓度分别为30、120、240、300mmol/L(二)主要仪器与试剂三、统计学分析本研究使用SPSS26.0进行统计分析，使用GraphPadPrism9.5.0绘制相关图形。对实验组与对照组的结果采用Bland-Altman分析。正态分布数据采用c士s表示，同一份标本加糖后酶法和苦味酸法检测结果的差异采用配对t检验。双侧检验，R0.05为差异有统计学酶法测定肌酐时，以加糖前后肌酐测定结果的百分偏差为纵坐标，以加糖前肌酐测定结果为横坐标做Bland-Altman图1;以加糖前后定结果的百分偏差为纵坐标，以加糖前肌酐测定结果为横坐标做Bland-Altman图，见图3;以加糖前后肌酐测定结果的绝对偏差为纵坐标，以加糖前肌酐测定结果横坐标做Bland-Altman图，见图4。法与苦味酸法肌酐在加糖后的百分偏差具有显著差异(表1,R0.001)。结果的百分偏差(5)与售程丽进圳津荒们结果的百分偏差(5)与售程丽进圳津荒们结果的百分偏差(结果的百分偏差(结果的百分偏差(X(结果的百分偏差(X(加糖前酶法测定肌酐结果(nnol/L)加糖前酶法测定肌酐结果(nnol/L)加糖前后酶法测定肌酐加糖前后廉法测定肌酐结果的百分偏差(%)图1加糖前后酶法肌酐百分偏差Band-Altman图(1A为葡萄糖浓度为30mmol/L时的Bland-Altman图；1B为葡萄糖浓度为120mmol/L时的Bland-Altman图；1C为葡萄糖浓度Bland-Altman图；1D为葡萄糖浓度为300mmol/L时的Bland-Altman加糖前后酶法测定肌酐加糖前后廉法测定肌酐结果的百分偏差(%)…平均绝对偏差及95%一致性界限…平均绝对偏差及95%一致性界限…平均绝对偏差及95%一致性界限一拟合直线加塘前酸法测定肌酐结果(meo)/L)1.5…平均绝对偏差及95%一致性界限一拟合直线浓度为30mmol/L时的Bland-Altman图；2B为葡萄糖浓度为120mmol/L时的Bland-Altman图；2C为葡萄糖浓度为240mmol/L时的Bland-Altman图；2D为葡萄糖浓度为300mmol/L时的Bland-Altman后后苦味酸法肌酐其世其料置性种生机生结果的百分偏差(X(法取味苦后前着吴法取味苦后前着吴萄糖浓度为30mmol/L时的Bland-Altmanmmol/L时的Bland-Altman图；3C为葡萄糖浓度为240mmol/L时的Bland-Altman图；3D为葡萄糖浓度为300mmol/L时的Bland-Altman…平均绝对偏差及95%一致性界限…平均绝对偏差及95%一致性界限…平均绝对偏差及95%一致性界限一拟合直线1.5r…平均绝对偏差及95%一致性界限一拟合直线…平均绝对偏差及95%一致性界限一拟合直线图4加糖前后苦味酸法肌酐绝对偏差Band-Altman图(4A为葡萄糖浓度为30mmol/L时的Bland-Altman图；4B为葡萄糖浓度为120mmol/L时的Bland-Altman图；4C为葡萄糖浓度为240mmol/L时的Bland-Altman图；4D为葡萄糖浓度为300mmol/L时的Bland-Altman裹1不同葡萄辨浓度下，nCr加糖前后测定结果的百分偏差及绝对偏差(x±s)值值百分偏差(%)绝对偏差(mmL/L)酶法测定肌酐时，葡萄糖浓度为30、120、240、300mmol/L斜率均为-0.0001;平均绝对偏差为-0.01、1.27、0.95、1.10mg/g,斜率为-0.0018、0.0014、-0.0003、0.0012。苦味酸法测定肌酐-0.0007、-0.0008、-0.0008;平均绝对偏差为-11.69、-14.98、-16.91、-18.51mg/g,斜率为-0.0262、-0.0260、-0.0354、-0.0406。酶法与苦味酸法uACR在加糖后的百分偏差和绝对偏差差异均有统计学意义(表2,P<0.001)。表2不同葡萄糖浓度下，nACR加糖前后测定结果的百分偏差及绝对偏差(±s)值其中酶法测定偏差≥10%样本数为0;苦味酸法中，葡萄糖浓度为39(5.6%)、11(6.8%)、12(7.5%);偏差≥20%的样本数和百分比分别为0、0、1(0.6%)、2(1.3%),随浓度的升高，葡萄糖对苦葡甜糖浓度(mmo/L)差i例)D0)000U000三、肌酐相关其他尿液肾损伤指标测定结果r★◆rrulgG/uCrr0-2图5不同葡萄糖浓度下多项肾损伤标志本研究结果显示，在高葡萄糖浓度条件下，酶法与苦味酸法在检测尿肌酐相关肾损伤标志物时表现出显著差异。对于尿肌酐，随着葡萄糖浓度的增加，不论是百分偏差还是绝对偏差，苦味酸法的斜率较酶法都有明显变化。随着葡萄糖浓度的增加，苦味酸法加糖前后测定结果的偏差逐渐增大，说明苦味酸法受到葡萄糖浓度影响较大，酶法测定受葡萄糖浓度的影响较小。在尿肌酐较低时，差值为正值；而在尿肌酐较高时，差值为负值，说明葡萄糖会导致苦味酸法测定尿肌酐在低值时高估，而在高值时低估。与检测尿肌酐一样，血肌酐的检测如葡萄糖[12],且随着葡萄糖浓度的增加其偏倚也会增加，酶法测定血肌酐则不受血糖浓度的干扰12.183。与检测尿肌酐结果一样，对于uACR,葡萄糖浓