浙江省台州市2026届高三生物下学期4月第二次教学质量评估试题 (一)-附答案

台州市届高三第二次教学质量评估试题生物本卷满分分，测试时间分钟。考生注意：．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用黑色字迹的签字笔或钢笔分别填写在试题卷和答题纸规定的位置上。．答题时，请按照答题纸上“注意事项”的要求，在答题纸相应位置上规范作答，在本试题卷上的作答一律无效。．非选择题的答案必须使用黑色字迹的签字笔或钢笔写在答题纸上相应区域内，作图时可先使用铅笔，确定后必须使用黑色字迹的签字笔或钢笔描黑。一、选择题（本大题共小题，每小题2分，共分每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分）1.生物技术在造福人类的同时也带来了诸多伦理问题。下列各项技术中违背生命伦理的是（）A.生殖性克隆人B.试管婴儿C.治疗性克隆D.基因治疗【答案】A【解析】A性关系等传统的伦理道德观念，A正确；B、试管婴儿技术是体外受精和胚胎移植技术，它是为了解决不孕不育问题，符合伦理道德，B错误；C道德，C错误；D病的目的，符合伦理道德，D错误。2.某同学长时间运动大量出汗，出现头晕、乏力等症状。医生诊断为出汗导致体内某种无机盐离子大量流失，影响细胞外液渗透压和神经功能，建议该同学优先补充（）A.碘离子B.钠离子C.镁离子D.铁离子【答案】B【解析】【详解】钠离子是维持细胞外液渗透压的主要离子，同时可维持神经肌肉的正常兴奋性，大量出汗会流失第1页/共20页

大量钠离子，补充后可缓解头晕、乏力等症状，B正确，ACD错误。3.小麦在感染某些锈病真菌后，叶片上受侵染部位会主动形成一个微小的枯死斑，从而有效限制真菌向周围健康组织的扩散。枯死斑的形成是受感染细胞发生了（）A.细胞癌变B.细胞衰老C.细胞分化D.细胞凋亡【答案】D【解析】A形成枯死斑，A错误；B亡，B错误；C亡，C错误；D限制真菌扩散，属于细胞凋亡，是植物的抗病机制，D正确。4.垃圾焚烧产热发电是实现垃圾“减量化、无害化、资源化”的重要途径。下列叙述错误的是（）A.垃圾焚烧前需进行分类处理B.焚烧过程中产生的废气需脱硫处理C.焚烧发电可减少垃圾填埋量D.焚烧产生的废渣可直接回收利用【答案】D【解析】A分类处理，A正确；B、焚烧过程会产生含硫的酸性废气，直接排放会引发酸雨等大气污染，因此需进行脱硫处理后再排放，B正确；CC正确；D用，不能直接回收利用，D错误。5.溶酶体是真核细胞内的“消化车间”。下列关于溶酶体的叙述，正确的是（）A.其中的水解酶只能分解蛋白质B.其中的水解酶由高尔基体合成并加工C.其结构的稳定性依赖双层膜结构D.其功能障碍会导致细胞内积累异常细胞器第2页/共20页

【答案】D【解析】【详解】A、溶酶体内含有多种水解酶，可分解蛋白质、核酸、脂质、多糖等多种细胞组分或外来物质，A错误；B类和包装，不参与合成，B错误；C、溶酶体是具有单层膜结构的细胞器，C错误；D就会导致细胞内积累异常细胞器，D正确。6.某同学观察洋葱根尖有丝分裂装片时，在显微镜下观察到如图细胞。下列叙述正确的是（）A.图中细胞内正发生同源染色体的分离B.图中细胞的分裂方向由中心体位置决定C.染色体和染色体组数的加倍均发生在图示时期D.用秋水仙素处理根尖可使细胞停留在图示分裂时期【答案】C【解析】【详解】A、有丝分裂过程不发生同源染色体的分离，A错误；B、洋葱是高等植物，没有中心体，B错误；C、该图是有丝分裂后期，染色体和染色体组数都加倍，C正确；D极，D错误。7.某公园近年试行落叶留存土壤自然腐解的就地还林措施，该措施会（）A.提高生态系统的能量传递效率B.提高部分落叶层昆虫的越冬存活率C.降低公园土壤中小动物类群的丰富度D.显著改变公园演替的速度和方向【答案】B【解析】第3页/共20页

【详解】A、生态系统的能量传递效率是相邻两个营养级之间同化量的比值，通常稳定在10%~20%，该措施仅促进落叶中有机物的分解，无法改变营养级间的能量传递效率，A错误；B的越冬存活率，B正确；C、落叶腐解过程会为土壤小动物提供更多的食物和栖息环境，会提高土壤小动物类群的丰富度，C错误；D生显著影响，D错误。8.野生豌豆具有发达的藤蔓和卷须，便于攀附其他植株向上生长；经人工驯化的栽培豌豆，藤蔓和卷须退化、茎秆直立，植株上仍能观察到卷须的残余结构。下列叙述正确的是（）A.人工驯化能诱导控制卷须的基因定向突变，使栽培豌豆出现卷须退化的性状B.栽培豌豆保留的卷须残余结构，可证明其与野生豌豆有共同的进化起源C.栽培豌豆的卷须退化性状更适应栽培环境，在自然环境中也有更强的适应性D.栽培豌豆与野生豌豆的基因库存在明显差异，说明二者是不同的物种【答案】B【解析】A卷须的基因发生定向突变，A错误；B化起源，B正确；C无法攀附其他植株争夺光照等资源，适应性弱于野生豌豆，C错误；D、物种的判定依据是两种群间存在生殖隔离，仅基因库存在明显差异无法证明二者是不同物种，D错误。9.科研人员将胡萝卜愈伤组织离散获得的小细胞团用海藻酸钠凝胶包裹，通过控制小细胞团在三维空间中的位置和密度，打印出具有精细网格的“胡萝卜形”活体结构。下列叙述正确的是（）A.凝胶中需添加MS培养基来调节小细胞团的生长发育B.精细网格结构有利于提高小细胞团的光合作用效率C.需置于黑暗环境中培养以诱导小细胞团完成脱分化过程D.可利用添加抗生素的培养基进行后续培养以防止杂菌污染【答案】D【解析】第4页/共20页

AMSMS培养基本身不直接“调节”细胞的生长发育，调节细胞脱分化、再分化的是植物激素（生长素、细胞分裂素等）A错误；BB错误；C要诱导其再分化，通常还需要给予适宜光照，C错误；D、抗生素可抑制细菌等杂菌的生长繁殖，在培养基中添加抗生素能有效减少后续培养过程中的杂菌污染，D正确。10.卡西霉素是一种脂溶性小分子抗生素，它与细胞膜融合后能特异性结合Ca2+，使Ca2+顺浓度梯度转运，从而破坏细胞内Ca2+浓度的稳态。下列叙述正确的是（）A.上述Ca2+的运输方式属于主动运输B.卡西霉素能介导离子跨膜运输与它的脂溶性无关C.增强细胞膜流动性不会影响Ca2+的运输速率D.细胞外Ca2+浓度变化会影响Ca2+的运输速率和方向【答案】D【解析】A明Ca²为顺浓度梯度转运，因此不属于主动运输，A错误；B其介导离子跨膜运输与脂溶性有关，B错误；C程的速率也会受细胞膜流动性影响，因此增强细胞膜流动性会影响Ca²的运输速率，C错误；DCa²Ca²Ca²浓度变化会改变浓度差大小，影响运输速率，若膜两侧浓度梯度方向改变，Ca²的运输方向也会改变，D正确。是（）第5页/共20页

A.核仁是合成rRNA和核糖体蛋白的场所B.核糖体大小亚基通过核孔自由进出细胞核C.rRNA的合成过程需要RNA聚合酶识别rDNA上的启动子D.图中rDNA的转录和翻译可同时进行，以提高基因表达的效率【答案】C【解析】【详解】A、核糖体蛋白的合成场所是核糖体，rRNA的合成场所在核仁，A错误；B、核糖体大小亚基不能自由进出细胞核，只能通过核孔进出细胞核，不能进入细胞核，B错误；C、rRNA的合成属于转录过程，转录需要RNA聚合酶识别并结合到rDNA的启动子区域，启动转录过程，C正确；D、rRNA的转录发生在细胞核，翻译发生在细胞质中的核糖体上，需要先转录再翻译，不能同时进行，D错误。12.能精准识别肿瘤细胞并有效释放药物，还能招募免疫细胞来共同对抗肿瘤细胞。下列叙述错误的是（）A.特异性识别肿瘤的抗体可通过单克隆抗体技术制备B.被招募的细胞毒性T细胞活化后可特异性识别并裂解肿瘤细胞C.若该肿瘤细胞上的抗原发生变异，可通过更换载药类型恢复精准治疗D.该方案通过抗体介导的靶向识别，可降低抗肿瘤药物对正常细胞的损伤【答案】C【解析】A定肿瘤的抗体可通过该技术制备，A正确；BT死亡，B正确；C第6页/共20页

异后的肿瘤细胞，此时需要更换对应识别功能的抗体，仅更换载药类型无法恢复精准识别，也就无法恢复精准治疗，C错误；D正常细胞的损伤，D正确。13.存在于木霉菌中的双功能酶CCBEpH对CCBE酶催化两种不同底物时酶活性的影响，结果如图所示。下列叙述正确的是（）A.CCBE酶能催化两种不同底物的分解，因此不具有专一性B.利用木霉菌分解秸秆中的纤维素时，pH应设置在5.2左右C.pH通过影响CCBE酶的空间结构，从而影响其与不同底物的结合能力D.若改变本实验的反应温度，两条曲线不会发生变化【答案】C【解析】【详解】A、酶的专一性是指一种酶只能催化一种底物或者少数几种相似底物的反应，A错误；B、利用木霉菌分解秸秆中的纤维素时，pH应设置在其最适pH4.2左右，B错误；CpH的结合能力，从而改变酶活性。该规律对CCBE酶催化两种底物的过程均适用，C正确；D、酶活性同时也会受到温度的影响，若改变本实验的反应温度，两条曲线会发生变化，D错误。14.为探究乙烯对果实成熟的调控作用，科研人员以绿熟期香蕉为材料进行实验，结果如下表所示。第2天乙烯释放峰值第5天果实硬度第5天可溶性糖含量处理组（μL·kg‒1·h‒1）（kg·cm‒2）（mg·g‒1）①自然成熟18.54.2120.5②喷洒乙烯合成抑制2.19.825.3剂（AOA）第7页/共20页

③喷洒外源乙烯52.42.5185.6④喷洒乙烯作用抑制17.88.930.1剂（1-MCP）下列叙述正确的是（）A.实验结果说明香蕉果实成熟过程中乙烯是唯一发挥作用的激素B.外源乙烯可能通过促进果实内乙烯的合成来加速果实成熟C.AOA和1-MCP作用机制都是通过显著降低乙烯浓度来抑制果实成熟D.若对组④补充外源乙烯，预期其果实硬度和色素含量与组③相似【答案】B【解析】A挥作用的激素，A错误；B且③组果实硬度更低、可溶性糖含量更高，成熟速度更快，可推测外源乙烯能加速果实成熟，B正确；C、AOA是乙烯合成抑制剂，可降低乙烯浓度；1-MCP是乙烯作用抑制剂，④组乙烯释放峰值与①组接近，并未显著降低乙烯浓度，仅抑制乙烯发挥作用，二者作用机制不同，C错误；D1-MCP其果实硬度和色素含量不会与组③相似，D错误。15.北方白犀牛现已野外灭绝，目前世界上仅存两头雌性北方白犀牛，且只有一头雌性具有正常排卵功能。科研团队利用多头北方白犀牛冻存的体细胞和精子，通过以下三条技术路径开展拯救计划。下列叙述错误的是（）A.路径①中需要对现存雌性北方白犀牛进行同期发情处理B.路径②在增加后代遗传多样性方面最具潜力C.路径③依据的原理是动物细胞核具有全能性D.及早建立基因资源库可更好的保护濒危物种【答案】A第8页/共20页

【解析】【详解】A、路径①需要对现存雌性南方白犀牛进行同期发情，A错误；B、路径②进行了重编程，在增加后代遗传多样性方面最具潜力，B正确；C、路径③为核移植，依据的原理是动物细胞核具有全能性，C正确；D、及早建立基因资源库，可更好的保护濒危物种，D正确。16.的最小取样面积称为最小样方面积。下列叙述正确的是（）A.调查群落的物种丰富度时，设置的样方面积应不小于最小样方面积B.当取样面积达到最小样方面积后，群落的物种组成不再发生变化C.若两个群落的最小样方面积相同，则两个群落中的物种数相等D.调查群落中植物种群密度时，针对每种植物设置的样方面积应不小于最小样方面积【答案】A【解析】A面积，会遗漏大量物种导致统计结果偏小，因此设置的样方面积应不小于最小样方面积，A正确；B种数量仍可能缓慢增加，且群落的物种组成本身会发生动态变化，并非恒定不变，B错误；C出二者物种数相等，C错误；D（草本、灌木、乔木）设置适配的样方面积即可，无需达到群落的最小样方面积，D错误。阅读以下材料，回答下面小题。SRS综合征是一种罕见遗传病，患者表现为生长受限、出生低体重、身体不对称等症状，其发病机制主要有以下两种。A体表达；C基因促进生长并与A基因形成生长调控平衡对，仅父源染色体表达；B区在父源和母源染色体中均发挥作用，且只调控自身所在染色体相关基因的表达。第9页/共20页

机制②：人类7号染色体上也存在调控生长的相关基因，当体内2条7号染色体均为母源染色体时，也会表现为SRS综合征。17.机制①的患者体内号父源染色体上的A基因及C基因的表达情况为（）A.表达、表达下降B.不表达、表达C.表达、表达D.不表达、表达下降18.结合材料分析，下列叙述正确的是（）A.机制①患者基因A、C的遗传遵循自由组合定律B.机制②患者染色体组型一定不正常C.机制②患者的母亲卵原细胞减数分裂过程中同源染色体未分离D.两种发病机制的患者均无法通过DNA测序技术直接确诊【答案】17.A18.D【解析】【17题详解】正常人：在B区调控作用下，母源A基因表达，母源C基因不表达，父源B区甲基化不表达，父源A基因不表达，C基因正常表达，促进生长并与母源A基因形成生长调控平衡对。机制①患者：父源B区甲基化减弱，父源A基因表达，父源基因C的表达下降，A正确，BCD错误。【18题详解】A、A和C基因连锁，不遵循自由组合定律，A错误；B、机制②患者染色体数量仍为正常46条，染色体组型正常，B错误；CII复制的染色体未正常分离，C错误；D、两种发病机制DNA序列均正常，无法通过DNA测序技术直接确诊，D正确。19.双酚A是一种环境中常见的有机污染物，进入人体可导致甲状腺功能紊乱，作用机理如图所示。下列叙述正确的是（）A.长期接触双酚A会提高甲状腺对促甲状腺激素的敏感性B.长期接触双酚A会导致人体内促甲状腺激素释放激素分泌量过低第10页/共20页

C.在双酚A影响下人体可能出现怕冷、精神萎靡、食欲下降等症状D.体内双酚A含量过高可通过注射促甲状腺激素来维持甲状腺激素水平的稳定【答案】C【解析】【详解】A、长期接触双酚A会使促甲状腺激素受体减少，降低甲状腺对促甲状腺激素的敏感性，A错误；BA高，B错误；CAC正确；D、体内双酚A含量过高时，由于促甲状腺激素受体减少，注射的促甲状腺激素无法发挥作用，无法用来维持甲状腺激素水平的稳定，D错误。20.5-羟色胺是一种能使人产生愉悦情绪的信号分子。下图为其在突触处的传递过程。下列叙述正确的是（）A.5-羟色胺能被突触前膜的载体回收，使神经冲动在该突触处能双向传递B.5-羟色胺受体能运输钠离子，也能运输5-羟色胺C.若神经细胞内囊泡蛋白簇数量减少，可能会引起情绪低落D.若特异性抑制5-羟色胺载体的功能，可能会引起情绪低落【答案】C【解析】【详解】A、5-羟色胺能被突触前膜的载体回收，不会向前膜传递信号，神经冲动在该突触处是单向传递，A错误；B、5-羟色胺受体能运输钠离子，不能运输5-羟色胺，B错误；第11页/共20页

C5-C正确；D5-5-5-情绪高涨，D错误。二、非选择题（本大题共5小题，共分）21.甲鱼的养殖也降低了水稻病虫害发生的程度，从而实现“百斤鱼、千斤粮、万元钱”的经济效益。回答下列问题。（1）在养殖过程中可以使用_____法调查甲鱼的种群密度，以防甲鱼过多，造成水稻产量下降。此外，还需要避免水体中N、P含量_____，出现富营养化现象。（2）水稻是生态系统组成成分中的_____。为防止植株之间相互遮挡，需要_____。利用水稻的隔离作用，减少甲鱼之间的_____，提高甲鱼的存活率。甲鱼一般在水稻插秧25天后方可放入，其原因是_____。（3）水稻感染立枯丝核菌会导致叶片纹枯病，该种养模式下能够有效降低该病的发病率。从甲鱼的取食角度分析，可能的原因是：①甲鱼可取食水体中立枯丝核菌等微生物；②_____式属于_____。甲鱼粪便可以重新肥田，实现了资源的_____利用，兼顾了经济、社会、_____效益。【答案】（1）①.标志重捕②.过高（增加、增高）（2）①.生产者②.合理密植③.④.防止过早放入对秧苗造成损伤（3）①.甲鱼取食患病的水稻叶片②.生物防治③.多层次（循环、多级）④.生态【解析】【小问1详解】NP发水体富营养化。【小问2详解】水稻是自养型绿色植物，属于生态系统的生产者；农业生产中通过合理密植避免植株相互遮挡阳光，提高刚插秧的秧苗未扎根稳定，甲鱼活动会搅动底泥，导致秧苗倒伏死亡，因此需要秧苗成活后再投放甲鱼，防止过早放入对秧苗造成损伤。【小问3详解】从取食角度分析，除了直接取食病原菌，还可以取食患病的水稻叶片，延缓疾病传播，降低发病率；利用第12页/共20页

生物（甲鱼）防治病虫害属于生物防治；甲鱼粪便中的有机物被分解后可为水稻提供无机盐，实现了资源的多层次（循环、多级）利用；生态农业兼顾经济效益、社会效益和生态效益。22.CK60定两种植物相关指标，结果如下表。净光合速率HO2酶活性镉浓度植物种类红光蓝光（μmolO·m‒2·s‒1）（U·g‒1）（mg·Kg‒1）CK（白光）0.73383.2545.36东南景天411.50480.5790.86511.28456.3291.05CK（白光）1.86640.0048.25龙葵412.18860.4592.28512.70800.5793.99注：两植株初始干重相同，镉提取量作为植物重金属吸收的指标，镉提取量=镉浓度×干重。回答下列问题：（1）光为植物的生长提供能量，同时又可以作为_____，调控植物体内相关激素的合成，影响植物生理过程。光质比例主要影响光反应阶段，该阶段产生的_____作为还原剂参与碳反应中_____的还原，进而合成有机物。（2）提取与测定过氧化氢酶活性时通常将叶片研磨后的匀浆置于冰水浴条件下，目的是_____。从表中数据来看，两种植株均具有较高的过氧化氢酶活性，推测其生理机制是重金属离子胁迫下激活了抗氧化系统，通过提高过氧化氢酶活性清除_____，减轻其对_____膜过氧化损伤，为光反应提供结构保障。（3_____氧气的释放量来表示。综合表中数据，净光合速率与植物干重呈_____关系。红蓝光比例为_____处理条件下最有利于东南景天对镉的吸收，依据是_____。两种植物较强的重金属富集和逆境生长能力，可能与体内的_____（植物激素）含量较高有关。【答案】（1）①.信号②.NADPH③.三碳酸（2）①.防止酶失活##保持酶活性②.HO2③.类囊体薄##光合（3）①.单位时间单位叶面积②.正相关③.41④.在该条件下镉提取量最大##镉浓度×第13页/共20页

干重的值最大⑤.脱落酸【解析】【小问1详解】光为植物的生长提供能量，同时又可以作为信号，调控植物体内相关激素的合成，影响植物生理过程。光质比例主要影响光反应阶段，光反应阶段产生的NADPH作为还原剂参与碳反应中三碳酸（C）的还原，进而合成有机物。【小问2详解】低温使酶的活性处于抑制状态，所以提取与测定过氧化氢酶活性时通常将叶片研磨后的匀浆置于冰水浴条件下，是为了防止酶失活或保持酶的活性。光反应的场所是类囊体薄膜，酶具有专一性，过氧化氢酶能够催化HO2离子胁迫下激活了抗氧化系统，通过提高过氧化氢酶活性清除HO，减轻其对类囊体薄膜（光合膜）过氧化损伤，为光反应提供结构保障。【小问3详解】实验室中净光合速率可以用单位时间单位叶面积氧气的释放量来表示。依据表中数据可知，净光合速率的大小与植物干重呈现正相关的关系。在红蓝比例为41的处理条件下，东南景天对镉提取量最大，镉浓度×实衰老和脱落的作用，所以两种植物之所以具有较强的重金属富集和逆境生长能力，可能与体内的脱落酸含量较高有关。23.某雌雄同株植物的花色由两对独立遗传的等位基因（A/aB/b种，A和B同时存在时表现为紫色，仅A存在时表现为红色，其余均为白色。科研人员在育种中发现一株A/aA‒其突变类型及相关基因的传递规律，进行如下实验：对亲本及部分F1植株的A、A‒、a基因进行PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳，结果如图1第14页/共20页

回答下列问题：（1）实验中，两对基因的遗传遵循_____定律，纯合紫花植株基因型为_____。A‒、a基因的出现体现了基因突变的_____性，它们与A基因的本质区别是_____。（2）结合图1，推测白花突变体基因型为_____。写出亲本杂交获得F1代的遗传图解_____。选取F2中的红花植株与白花植株杂交，F3白花植株所占的比例为_____。（3）A‒基因无法编码功能蛋白的原因可能是_____，使RNA聚合酶无法结合到DNA上。结合图2，使用引物F1和R1对相关DNA进行扩增时，下列叙述正确的有哪几项？______A．引物F、R1越长，退火所需的温度就越低，PCR扩增的特异性越高B．若引物F、R1充足，每个DNA经过n轮扩增后，需要消耗引物F1的量为2n-1个C．若引物F1充足R1不足，当R1用完后继续PCR，与F1互补的链的数量仍以指数形式增长D．使用引物F、R2对引物F1和R1的扩增产物进行再次扩增，可提高PCR扩增的准确性【答案】（1）①.自由组合②.AABB③.④.脱氧核苷酸序列不同/核苷酸序列不同/碱基序列不同（2）①.A‒aBB②.1/3③.（3）①.缺失启动子/启动子异常②.BD【解析】【小问1详解】两对等位基因独立遗传，因此遵循基因的自由组合定律。根据紫花占9份，为双显可知，纯合紫花植株的基因型为AABBAA‒a为复等位基因，体现基因突变的不定向性。等位基因的本质区别在于碱基序列不同。【小问2详解】纯合红花的基因型为AAbbF2=9349331F1花突变为B1P1P2P2对应的条带是AP1对应的条带是A‒和a，则亲本白花突变植株基因型是A‒aBB，由此可知，F1的基因型为AA‒Bb和AaBb，遗传图解如下：第15页/共20页

。A‒aA‒当做aF2中的红花植株的基因型为AAbbAabb1:2，与白花植株（aabb）杂交，后代白花植株的概率为2/3×1/2=1/3。【小问3详解】RNADNARNA聚合酶无法结合到DNA上。A、引物越长，退火温度越高，特异性越高，A错误；BDNA经过n轮扩增后，得到2n个DNA分子，产生2n+1条链，其中模板的两条链不需要引物，剩余的链一半是引物F1延伸的，一半是R1延伸的，因此需要消耗引物F1的量2n-1个,B正确；C、若R不足，与F互补的链无法指数增长，C错误；DFR的结合位点在FR“二次筛选”。这种嵌套PCR的方式可以有效减少非特异性产物，提高扩增的准确性，D正确。24.一般情况下，在葡萄糖充足时，酿酒酵母中ADH2基因的表达会受到抑制；当葡萄糖耗尽或不足时，ADH2基因才被激活，产生乙醇脱氢酶参与厌氧呼吸。酿酒酵母的Mig1突变株因缺失Mig1基因，无法合成Mig1Mig1蛋白与ADH2基因上游的调控序列的某一位点结合，从而抑制下游ADH2基因的表达。为验证上述猜想并找出Mig1蛋白的具体结合位点，科学家将获得的Mig1基因与GFP（绿色荧光蛋白）基因连接到同一载体上，开展相关实验。图1为ADH2基因及其调控序列，图2为载体的部分结构。第16页/共20页

回答下列问题：（1DNA_____PCR扩增后的产物定向插入GFPF～F6末端和R末端分别添加的限制酶_____和_____的识别序列。区分上述不同的PCR产物可以用琼脂糖凝胶电泳后，_____，再溶解的方式提取。（2）构建重组质粒。将获得的调控序列与__________的存在可以保证重组质粒能够在受体细胞中自主复制并稳定存在。（3）重组质粒导入受体细胞。将构建的重组质粒导入经过_____（填物质）处理过的农杆菌中，使之成为_____F～F4参与构建的受体细胞均不发绿色荧光；引物F5和F6参与构建的受体细胞均发绿色荧光，说明Mig1蛋白的具体结合位点位于_____。若将培养液中的葡萄糖替换为乳糖，各组均能发出绿色荧光，说明_____。（4Mig1基因的表达或者改造_____ADH2基因抑制作用的能力，在葡萄糖充足时也可进行酒精发酵。将菌种进行多次_____，达到一定数量后再进行发酵。为进一步提高产品酒精浓度，可采用_____发酵进行提取。【答案】（1）①.5′端②.SpeI③.BamHI④.切胶（2）①.表达载体②.复制原点/复制起点（3）①.CaCl2②.Mig1突变株③.F4与F5之间④.乳糖无法诱导Mig1GFP基因不受抑制，可正常表达（4）①.ADH2基因的调控序列（Mig1蛋白的结合位点）②.扩大培养③.真空【解析】【小问1详解】PCR引物的5'端不会被DNAADH2基因的转录方向与GFP基因的转录方向相反，因此为保证PCR扩增后的产物定向插入GFP基因上游，调控序列需要翻转180度，则需在F₁~F末端添加SpeI识别序列，在R末端添加BamHI识别序列，不能使用EcoRI，因为EcoRI会破坏GFP基因。琼脂糖凝胶电泳后，可通过切下对应条带，即切胶，再溶解的方式提取不同的PCR产物。【小问2详解】将获得的调控序列与表达载体连接，构建重组质粒。重组质粒中的复制原点可以保证其在受体细胞中自主复制并稳定存在。【小问3详解】将重组质粒导入用Ca²处理过的农杆菌，使之成为感受态细胞。再用农杆菌转化Mig1突变株。引物F₁第17页/共20页

~FF和FMig1蛋白的结合位点位于F与F之间的调控序列上。将培养液中的葡萄糖替换为乳糖，各组均能发出绿色荧光，说明乳糖无法诱导Mig1基因的表达，因此GFP基因不受抑制，可正常表达。【小问4详解】可以通过抑制Mig1基因的表达或改造ADH基因上游的Mig1蛋白结合位点，解除葡萄糖对ADH基因的抑制。将菌种进行多次扩大培养，达到一定数量后再进行发