第7章 细胞学检验技术和细胞学诊断

病理检验技术

细胞学检验技术和细胞学诊断高职高专医学检验技术专业系列教材目

录第一节细胞学检验技术01第二节细胞学检查与诊断02第三节细胞形态学变化03第五节细胞学检验的质量控制05第四节液基薄层细胞检查技术04学习目标知识目标能力目标素质目标

1.掌握制作病理细胞标本的采集、制片、固定及染色技术；常用细胞学检查方法、液基薄层细胞制片技术和涂片的识别。2.熟悉常见正常细胞、核异质细胞、肿瘤细胞的形态特点。3.学会独立操作细胞学涂片及染色过程并评价制片效果。1.培养严格遵守操作规程、规范操作的职业精神，

具有认真细致的工作态度。2.热爱生命，树立正确的世界观、价值观和人生观。1.熟悉病理细胞学检验的概念，应用范围及注意事项。2.了解细胞学检查的应用范围、诊断方法及质量控制。案例导入患者，赵某，女性，47岁。临床检查：宫颈呈糜烂样改变，白带异味，考虑宫颈癌或癌前病变，建议做宫颈细胞学检查。宜选用哪种制片方法及染色技术呢？第一节

细胞学检验技术

第一节细胞学检验技术一、细胞学检验技术概述二、细胞学标本的采集三、细胞学制片四、细胞的固定五、细胞的染色第一节细胞学检验技术一、细胞学检验技术概述细胞病理学又称诊断细胞学或临床细胞学，是通过观察细胞的结构和形态来研究和诊断疾病的一门科学，与病理组织学改变关系密切，病理学的分支学科之一。临床上根据细胞标本来源分为脱落细胞学针吸细胞学第一节细胞学检验技术二、细胞学标本的采集（一）脱落细胞标本的采集

正常或病理情况下，自然脱落下来的细胞，随分泌物、排泄物等排出体外，称脱落细胞。（二）细针穿刺细胞标本的采集临床医师应用外径0.6～0.9mm细针头，10ml左右的一次性空针，穿刺近体表组织器官，如浅表淋巴结、甲状腺肿块、乳腺肿块、肝及软组织等，吸取少量细胞制成涂片；影像科医师也可在B超、X射线或CT引导下，施行内脏包块穿刺。（三）细胞学常用标本1.妇科涂片

包括宫颈刮片、阴道残端刮片、阴道穹刮片、阴道侧壁刮片及宫腔吸片等。

2.呼吸道涂片

包括痰涂片、纤维支气管镜刷片及细支气管肺泡灌洗液。

3.尿液及前列腺液、乳头溢液、体表溃疡刮片及体表或深部脏器包块细针穿刺涂片等。4.浆膜腔积液

包括胸腔积液、腹水及心包积液等。第一节细胞学检验技术三、细胞学制片1.涂抹法2.推片法3.拉片法4.印片法5.压片法6.甩片法7.喷射法8.液基薄层细胞制片法第一节细胞学检验技术四、细胞的固定固定目的是保持细胞的自然形态，防止细菌导致标本腐败或细胞自溶及丢失。新鲜标本应及时固定，可使染色效果更佳，利于检测。（一）常用固定液1.95％乙醇

2.乙醚-乙醇固定液

3.三氯甲烷乙醇固定液即Carnoy液4.甲醇

（二）固定方法固定可应用浸入法或滴加法。根据固定时机，又分为湿固定、潮干固定及干燥固定。第一节细胞学检验技术五、细胞的染色（一）巴氏（Papanicolaou）染色法（二）苏木精-伊红（HE）染色法（三）瑞氏（Wright）染色法（四）迈-格-吉（May-Grünwald-Giemsa，MGG）染色第二节

细胞学检查与诊断

第二节

细胞学检查与诊断一、细胞学检查与诊断概述二、细胞学检查与诊断的应用范围三、细胞学检查与诊断的优缺点四、细胞学检查与诊断的注意事项第二节

细胞学检查与诊断一、细胞学检查与诊断概述细胞学检查与诊断通过采集细胞标本，经过涂片、固定、染色等技术制片，在显微镜下观察细胞形态，包括细胞的大小和形状，核的大小和形状，核染色质颗粒和分布，核膜、核仁与核分裂，核质比等特征来诊断疾病，又称为细胞病理学、诊断细胞学或临床细胞学。根据标本来源不同分为妇科细胞学和非妇科细胞学，根据采样方式不同分为脱落细胞学和细针穿刺吸取细胞学。第二节

细胞学检查与诊断二、细胞学检查与诊断的应用范围1.良性病变的提示或诊断

如胸腔积液、腹水涂片，查见大量淋巴细胞提示结核；宫颈涂片发现大量线索细胞，提示细菌性阴道病；发现滴虫，可诊断为滴虫性阴道炎。2.癌前病变的发现

如宫颈上皮内瘤，及时治疗防止发生癌变。3.肿瘤的筛查与诊断

如宫颈涂片、痰涂片、食管拉网检查，为癌症早期治疗和进一步检查提供依据。4.癌瘤治疗后观察

如肿瘤切除或放疗后，观察疗效，判断复发与转移。5.阴道脱落细胞学检查

判断女性雌激素水平，了解卵巢功能，指导内分泌治疗。三、细胞学检查与诊断的优缺点第二节

细胞学检查与诊断（一）优点1.设备简单、技术简便、容易掌握、易于普及。2.取材安全方便，无创或微创，可反复取材，无任何不良反应。某些器官局部（如子宫颈）进行多位点的脱落细胞学检查。3.费用低，报告快，检出率较高，病人容易接受，受临床医生认可。4．癌细胞检出率较高，如技术条件好，采集细胞方法正确，某些肿瘤阳性率可达80％～90％。对某些无明显临床表现的恶性肿瘤，如隐性肺癌，能够得到早期诊断。（二）缺点1.取材部位不准，涂片过厚过薄，脱落细胞常有退变,影响诊断结果。2.对黏膜表面的脱落细胞和体腔抽出液中的脱落细胞，不能全面观察病变组织的结构层次，因此不利于对肿瘤做组织学分型。3.在某些情况下，不能确定肿瘤发生的具体部位，如腹水中检出癌细胞，不能判断肿瘤细胞的来源，浸润的程度和病灶范围。4.受病理技术和阅片经验影响，易出现假阴性或假阳性。第二节

细胞学检查与诊断四、细胞学检查与诊断的注意事项1.取材准确

2.操作规范3.认真观察

4.结合临床5.善于总结

6.加强学习第三节

细胞形态学变化

第三节细胞形态学变化一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化二、常见正常非上皮细胞的形态变化三、良性上皮细胞变化四、核异质细胞五、肿瘤细胞学第三节细胞形态学变化一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化（一）复层鳞状上皮细胞复层鳞状上皮细胞主要分布于全身皮肤、口腔、咽喉、食管、肛门、宫颈外口、阴道及阴茎等。鳞状上皮由紧密排列的上皮细胞构成，从底层至表层可分为内底层细胞、外底层细胞、中层细胞、角化前细胞和不完全角化细胞。不全角化细胞在生理或病理情况下，可逐渐衰老死亡，胞核碎裂成小片或逐渐变淡而消失，成为无核的“完全角化细胞”，胞质巴氏染色呈橘黄色。第三节细胞形态学变化一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化细胞种类内底层细胞外底层细胞中层细胞角化前细胞不全角化细胞大小直径12～15μm15～30μm30～40μm40～50μm4～50μm形态圆形圆形或卵圆形卵圆形或菱形扁平多边形扁平多边形胞膜清楚清楚清楚清楚清楚胞质暗绿色稍淡于内底层细胞浅绿色浅绿色鲜红色核位置居中居中居中居中居中核形状圆形圆形圆形圆形固缩核直径8～10μm略小于内底层细胞略小于外底层细胞6～8μm约为4um核染色质均匀细颗粒状细颗粒状细颗粒状细颗粒状匀细核质比1:0.5～1:11:1～1:21:2～1:31:3～1:51：5以上表7-1复层鳞状上皮细胞各层的形态特点（巴氏染色）第三节细胞形态学变化一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化（二）柱状上皮细胞主要分布于呼吸道、消化道、女性生殖道，如鼻腔、支气管、气管、胃、肠、宫颈管、宫内膜和输卵管等。组织学可分为单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上皮和复层柱状上皮。脱落后，根据形态和功能不同可分为纤毛柱状上皮细胞和黏液柱状上皮细胞。一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化第三节细胞形态学变化（三）移行上皮细胞移行上皮细胞分布于肾盂、肾盏、输尿管、膀胱及尿道起始部，为复层上皮细胞，其细胞层次和形态随器官的舒缩或充盈程度而改变。分为基底层，中间层和表层移行上皮。（四）间皮细胞间皮细胞是附着于胸腔、腹腔、心包腔表面的单层上皮细胞。呈圆形或卵圆形，直径10～20μm，甚至更大。核圆形，中央或偏位，常为单个，增生活跃时可为双核。核染色质细颗粒状，偶见小核仁。根据成熟程度及脱落时间长短分为幼稚型(碱性)间皮细胞、成熟型(嗜酸性)间皮细胞以及退化变性型间皮细胞。第三节细胞形态学变化一、正常上皮细胞与脱落后的形态变化（五）内皮细胞内皮细胞分布于血管和淋巴管内层，可见于穿刺细胞涂片中。游离的血管内皮细胞呈圆形或梭形，胞质丰富，其中可见空泡、异物或吞噬的色素颗粒。细胞核圆形或椭圆形，位于细胞中央或稍偏位，染色质细致均匀，可见核仁。淋巴管内皮细胞常为圆形，胞质中通常看不见空泡或吞噬物。（六）腺上皮细胞腺上皮细胞组成内分泌腺和外分泌腺，具有分泌功能。多不形成管腔通道，如甲状腺、肝、胰腺等，只有通过穿刺才能获得。1.柱状腺上皮细胞2.杯状细胞第三节细胞形态学变化二、常见正常非上皮细胞的形态变化（一）红细胞（二）白细胞（三）巨噬细胞或组织细胞（四）脂肪细胞（五）黏液细胞（六）成纤维细胞（七）肌细胞（八）多核巨细胞（九）骨及软骨细胞第三节细胞形态学变化三、良性上皮细胞变化（一）退化变性退化变性主要是细胞自然衰老死亡的过程，表现为肿胀性退化变性和固缩性退化变性两种类型。第三节细胞形态学变化三、良性上皮细胞变化（二）炎症变性炎症变性的上皮细胞形态可发生不同程度的改变，主要表现为细胞核的改变。1.鳞状上皮细胞炎症改变细胞核表现为核肥大、核固缩、核异型和核碎裂等。2.柱状上皮细胞的炎症改变

主要表现为明显的核固缩。3.鳞状上皮细胞化生

鳞状上皮细胞化生是细胞炎症变性的一种特殊类型，即为柱状上皮细胞在炎症等因素刺激下，上皮细胞坏死脱落，储备细胞增生，变为鳞状上皮细胞的一个过程，称为鳞状上皮细胞化生，简称鳞化。鳞化细胞常见于慢性宫颈炎的宫颈涂片中，亦可见于老年性慢性支气管炎的痰涂片中，根据形态可分为成熟型和不成熟型两种。4.修复细胞

修复细胞多见于宫颈涂片中，常在重度宫颈炎、宫颈活检、电热灼伤、放射治疗、子宫全切或锥切后出现。第三节细胞形态学变化四、核异质细胞核异质细胞是指细胞核异常，而胞质分化尚正常的细胞，表现为核增大、大小不一，形态多样，核染色质增多、深染，分布不均匀，核膜增厚，核边界不整齐等，可出现双核与多核。核异质细胞形态介于良性细胞和恶性细胞之间，又称间变细胞，相当于组织病理学的不典型增生。按细胞核异型的程度，核异质细胞分为轻度核异质细胞、中度核异质细胞和重度核异质细胞。第三节细胞形态学变化五、肿瘤细胞学（一）恶性肿瘤细胞的形态学特征1.大小

癌细胞核一般为正常细胞（如背景中的淋巴细胞）的1～5倍，甚至10倍以上。各个癌细胞核增大程度不一致，同一视野的癌细胞核大小相差悬殊。2.形态

恶性肿瘤细胞核可出现明显的畸形，表现为细胞核形态不规则，呈结节状、三角形、蝌蚪形等；有时核膜凹陷呈分叶或折叠状。可见多核、裸核及病理性核分裂象，如不对称分裂等。3.染色

癌细胞核的染色质增多、颗粒变粗，常聚集在核膜下，使核膜增厚，染色加深，可呈墨水滴样；核内染色质分布不均，染色深浅不一。4.核仁

体积增大，形态异常，数目增多，常呈嗜酸性。5.核质比

核质比增大是恶性肿瘤细胞最重要的形态特征。癌细胞分化愈差，核质比失常愈明显。癌细胞与核异质细胞均具有核的异质性第三节细胞形态学变化五、肿瘤细胞学鉴别点核异质细胞癌细胞核增大1倍左右，轻度增大1～5倍，显著增大核大小不一大小相似，差别不大明显核形状轻度至中度不规则畸形明显不规则畸形核仁一般不明显易见，增多、增大并有异型性核质比无明显变化，或轻度增高明显增高病理性核分裂无有表7-3癌细胞与核异质细胞核的鉴别第四节

液基薄层细胞检查技术

第四节液基薄层细胞检查技术液基薄层细胞制片技术可应用于所有的脱落细胞学检查。目前主要用于妇科宫颈涂片制备，筛查宫颈癌，为宫颈癌的早期诊断和治疗提供了明确的诊断依据。也用于胸腔积液、腹水涂片，痰和尿液等检查及筛查癌和癌前病变，还可用于免疫组织化学、分子原位杂交、显微镜测量及流式细胞学检查，是目前应用较广泛的临床检验技术。第四节液基薄层细胞检查技术一、妇科液基薄层细胞学检查二、其他液基薄层细胞学检查一、妇科液基薄层细胞学检查第四节液基薄层细胞检查技术病变分级评价未见上皮内病变或恶性病变（NILM）①与炎症有关的反应性形态变化：细胞对炎症、损伤、放疗和化疗的反应性改变；②宫内节育环引起上皮细胞的反应性改变等情况；③子宫切除后的腺细胞；④萎缩性反应性改变。鳞状上皮细胞异常①非典型鳞状上皮细胞，意义不明确（ASC-US）；②非典型鳞状上皮细胞，不除外鳞状上皮内高度病变（ASC-H）；③低级别鳞状上皮内病变（LSIL）：相当于宫颈鳞状上皮轻度非典型增生（CINI）；④高级别鳞状上皮内病变（HSIL）：包括CINII、CINIII；⑤鳞状细胞癌：如能明确组织类型，则按下述报告：角化型鳞癌；非角化型鳞癌；小细胞型鳞癌。腺上皮细胞病变①非典型腺细胞，非特异性（AGC，NOS）：包括宫颈管非典型腺细胞和宫内膜非典型腺细胞；②非典型子宫颈管细胞，倾向肿瘤；③子宫颈管原位腺癌（AIS）；④腺癌：应判断腺癌的来源，如来自子宫颈管、子宫内膜或子宫外。宫颈其他恶性肿瘤原发或转移的肉瘤等，需具体说明表7-4非肿瘤病变和恶性肿瘤TBS分级及评价第四节液基薄层细胞检查技术二、其他液基薄层细胞学检查（一）支气管、肺脱落细胞学检查（二）脑脊液细胞学检查（三）浆膜腔积液细胞