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文档简介

选修1

1、在果酒、果醋的制作过程中,所用的重要菌种分别是:酵母菌、醋酸菌。

2、在果酒、果醋、的制作过程中,它们所需的温度分别是1作25℃、30~35℃

3、酵母菌是高中阶段的明星生物,必修一:有关真核生物原核生物的问题,酵

母菌是单细胞真核生物;有关酶本质的探索中,酶的本质是蛋白质或RNA;在探

究酵母菌的呼吸方式中,酵母菌异化作用的方式是兼性厌氧菌。

必修三:培养液中酵母菌的计数可以采用抽拄检测的措施,用固体培养基培养

的酵母菌可用活菌计数法(菌落)计数。

选修一:运用酵母菌制作果酒的反应式是:

C6Hlf2czHsOH(酒精)+2C02,固定酵母细胞的方式是

包埋法。

4、微生物培养基由于加琼域而分为固体培养基和液体培养基等。

5、培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。

6、无菌技术包括:(1)对试验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;

(2)将培养器皿、接种用品和培养基等器具进行灭菌;

(3)为防止周围微生物污染,试验操作应在酒遁灯火焰附近旁进行;

7、制备牛肉膏蛋白陈培养基的环节:计算f称量f溶化(调PH)灭菌f倒

平板)

8、常见的4种消毒措施:煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、酒精进行

消毒)

9、常见的3种灭菌措施:(灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法)

10、高压蒸汽灭菌法规定气压升至(100)kPa,温度为(121)℃,并维持(15〜

30)min才能到达灭菌的规定。

11、微生物接种的最常用措施是平板划线法和稀释涂布平板法。

12、在微生物培养中,培养基有“三倒”,详细是倒放、倒拿、倒培养。

13、平板划线法接种微生物过程中最终的灼烧接种环的目的是防止细菌污染环

境和操作者;稀释涂布平板接种微生物过程中移液管吹吸三次的目的是:使菌

种均匀混合。

14、试验室中微生物的筛选原理:当培养基中唯一氮源为尿素时,就可以分离

出分解尿素的细菌。培养基中唯一碳源为纤维素时,可以分离出分解纤维素的

微生物;

15、微生物计数常有两种措施:活菌计数法和显微镜直接计数。活菌计数法一

般选择菌落数在鸣幽的平板进行计数,在同一稀释度下,至少对3个平板进

行反复计数,然后求出平均值。

16、写出每克样品中菌株数公式?

17、纤维素酶由微生物分泌的一种复合酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶,

刚果红能与纤维素形成红色复合物,当纤维素水解后培养基中出现以菌落为中

心的透明圈。

18、写出植物组织培养的基本流程:离体器官、组织或细胞-愈伤组织f根芽

一植物体

19、生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。

20、植物组织培养最常用的培养基是韭置壁。

21、菊花的组织培养的材料一般选择未开花植物茎上部新萌生的侧枝;

22、果胶酶是分解果胶的一类酶的总称,包括多半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、

果胶酯酶等三种。

23、举例阐明酶的活性测定措施有两种措施?

(1)相对直接测定的措施如单位时间内、单位体积中反应物的减少许或增长量;

(2)间接测定的措施如产生果汁的量、果汁的澄清度、果汁的透光率

24、高中生物试验多次用到红细胞,人的红细胞来源于造血干细胞:蛙的红细

胞进行的分裂方式是无丝分裂;动物细胞膜的制备所用的细胞材料是哺乳动物

成熟的红细胞;DNA的粗提取所用血液是鸡血红细胞;血红蛋白的提取材料是

哺乳动物的红细胞。

25、在凝胶柱中分离蛋白质的有效措施叫凝胶色谱法,分子量大的在凝胶柱中

运动速度快,运动途径较短,先从凝胶柱洗脱出来。

26、许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等还可以用电泳的措施分开,根据

待分离样品中分子常电性质的差异以及分子自身的大小,形状的不一样,使带

电分子产生不一样的迁移速度,从而实现样品中多种分子的分离。在SDS•聚丙

烯酰胺凝胶电泳中,只根据分子的带电荷的大小就可待分离物质分开。

27、蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理一粗分离一纯化一纯度鉴定,

透析除去分子较小的杂质。

专题一老式发酵技术的应用

课题一果酒和果醋的制作

1、发酵:通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。

2、有氧发酵:醋酸发酵谷氨酸发酵•无氧发酵:酒精发酵乳酸发酵

3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌•醉母菌的生殖方式:出芽生殖(重要)分

裂生殖袍子生殖

4、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。C6Hl2O6+6O2+

6H2OT6CO2+12H2O+能量

5、在无氧条件下,醉母菌能进行酒精发酵。C6H12O6—2C2H5OH+2c02+

能量

6、20c左右最合适酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃

7、在葡萄酒自然发醉的过程中,起重要作用的是附着在前萄皮表面的野生型酵母

菌.在发酵过程中,伴随酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒

展现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,而绝大多数其他

微生物都因无法适应这•环境而受到制约。

8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂

9、当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺乏糖源时,

醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。C6Hl2。6+

202-2cH3coOH+2CO2+2H2O

C2H5OH+O2->CHjCOOH+H2O

10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量尤其敏感,当进行深层发酵时,

虽然只是短时间中断通入氧气,也会引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最适生长温度为

32'C,控制好发酵温度,使发酵时间缩短,乂减少杂菌污染的机会。③有两条途

径生成醋酸:直接氧化和以酒精为底物的氧化。

11、试验流程:挑选葡萄一冲洗一榨汁-酒精发酵一果酒(一醋酸发酵一果醋)

・培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培

养基中加入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固

剂)后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可

见的菌落。根据菌落的特性可以判断是哪一种菌。液体活养基应用于工业或生活

生产,固体培养基应用于微生物的分离和鉴定,半固体培养基则常用于观测微生

物的运动及菌种保藏等。

•按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基,合成培养基是用成分已

知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成,常用于实际工业生产。

・按照培养基的用途,可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是

指在培养基中加入某种化学物质,以克制不需要的微生物生长,增进所需要的微

生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化

学药物配制而成的,用以鉴别不一样类别的微生物。

•培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源(生长因子)等。

•碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如C02、NaHCCh等无机碳源;糖

类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能运用有机碳源。单质碳不能作

为碳源。

•氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3NH4+(无机

氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陈(有机氮源)等。只有固氮微生

物才能运用NO

2

・培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的规定。例如,培养

乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,

培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧

的条件

・无菌技术・获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,要注意如下几种方面:

①对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用品和培养基等器具进行灭菌。

③为防止周围环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用品与周围的物品相接触。

无菌技术除了用来防止试验室的培养物被其他外来微生物污染外,尚有什么目

的?

答:无菌技术还能有效防止操作者自身被微生物感染。

•消毒与灭菌的区别

消毒指使用较为温和的物理或化学措施仅杀死物体表面或内部一部分对人体有

害的微生物(不包括芽抱和胞子)。消毒措施常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对

于某些不耐高温的液体)尚有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外

线消毒。

灭菌则是指使用强烈的理化原因杀死物体内外所有的微生物,包括芽泡和胞子。

灭菌措施有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

灭菌措施:

①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;

②玻璃器皿、金属用品等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;

③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。

④表面灭菌和空气灭窗等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。

比较项理化原因的作用强消灭微生物的数量芽抱和抱子能否被消

度灭

消毒较为温和部分生活状态的微生不能

灭菌强烈所有微生物能

制作牛肉膏蛋白陈固体培养基

(1)措施环节:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

(2)倒平板操作的环节:

①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔

出棉塞。

②右手拿锥形瓶,将瓶口迅速通过火焰。

③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍不小于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中

的培养基(约10〜20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固,大概需5〜lOmin。然后,将平板倒过来放置,使培养皿

盖在下、皿底在上。

・倒平板操作的讨论

1.培养基灭菌后,需要冷却到50c左右时,才能用来倒平板。你用什么措施来估

计培养基的温度?

提醒:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手

时,就可以进行倒平板了,

2.为何需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?

答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。

3.平板冷凝后,为何要将平板倒置?

答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止培养基表面的

水分过度地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,导致污染“

4.在倒平板的过程中,假如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平

板还能用来培养微生物吗?为何?

答:空气中的微生物也许在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最佳不要用这

个平板培养微生物。

纯化大肠杆菌

(1)微生物接种的措施最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。

(2)平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面持续划线的操作。将汇集

的菌种逐渐稀释分散到培养基的表面。在多次划线后培养,可以分离到由一种细

胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。

(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不一样稀释度的

菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。分为系列稀群操作和涂布平

板操作两步。

(4)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使汇集在一起的微生物分

散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。

(5)平板划线法操作环节:

①将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环,并打开

棉塞。

③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。

⑤将试管通过火焰,并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种

的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。注意不要划破培养皿。

⑦灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。反

复以.上操作,在三、四、五区域内划线。注意小要将最终一区的划线与第一区相

连。⑧将平板倒置放入培养箱中培养。

・平板划线操作的讨论

1.为何在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,

仍然需要灼烧接种环吗?为何?

答:操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上也许存在的微生物污染培养

物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,

使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线

次数的增长,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后

灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作

者。

2.在灼烧接种环之后,为何要等其冷却后再进行划线?

答:以免接种环温度太高,杀死菌种。

3.在作第二次以及其后的划线操作时,为何总是从上一次划线的末端开始划线?

答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末

端开始,能使细菌的数目伴随划线次数的增长而逐渐减少,最终能得到由单个

细菌繁殖而来的菌落。

(6)涂布平板操作的环节:

①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。②取少许菌液,液加到培养基表面。

③将沾有少许酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8〜10s。

④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

涂布平板操作的讨论

涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作

规定,想一想,第2步应怎样进行无菌操作?

提醒:应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、

吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰扈围;等等。

菌种的保留

(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的措施,

①临时保藏措施

将菌种接种到试管的固体斜血培养基匕在合适的温度下培养。当菌落长成后.,

将试管放入4c的冰箱中保藏。后来每3〜6个月,都要重新将菌种从旧的培养

基上转移到新鲜的培养基上。

②缺陷:这种措施保留的时间不长,菌种轻易被污染或产生变异。

(2)对于需要长期保留的菌种,可以采用甘油管藏的措施。

在3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶

中,与甘油充足混匀后,放在一20℃的冷冻箱中保留。

疑难解答

(1)生物的营养

营养是指生物摄取、运用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动,保

证发育、生殖所需的外源物质。

人及动物的营养物质:水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。

植物的营养物质:矿质元素、水、一氧化碳等三类。

微生物的营养物质:水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。

(2)确定培养基制作与否合格的措施

将未接种的培养基在恒温箱中保温1〜2天,无菌落生长,阐明培养基的制备是

成功的,否则需要重新制备。

课题二土壤中分解尿索的细菌的分离与计数

尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸取。只有当土壤中

的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物运用。土壤中的细菌之因此能分解尿素,

是由于他们能合成胭酶

尿素最初是从人的尿液中发现的

筛选菌株

(1)试验室中微生物的筛选应用的原理

人为提供有助于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同步克制或

制止其他微生物生长。

(2)选择性培养基

在微生物学中,将容许特定种类的微生物生长,同步克制或制止其他种类微生物

生长的培养基,称作选择培养基,

(3)配制选择培养基的根据

根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以到达选择的目的。例如,培

养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以

选择培养能固氮的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。

记录菌落数目

(1)测定微生物数量的常用措施有稀释涂布平板法和显微镜直接计数,

(2)稀释涂布平板法记录样品中活菌的数目的原理

当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一种菌落,来源于样品稀释液中的

一种活菌。通过记录平板上的菌落数,就能推测出样品中大概具有多少活细菌。

为了保证成果精确,一般设置3〜5个平板,选择菌落数在30〜300的平板进行

计数,并取平均值。记录的菌落数往往比活菌的实际数目低,因此,记录成果一

般用菌落数而不是活菌数来表达。

采用此措施的注意事项:1.•般选用菌落数在30~300之间的平板进行计数

2.为了防止菌落曼延,影响计数,可在培养基中加入TTC(在计数琼脂中加入适

量的TTC(0.5%TTC1ML加到100ML琼脂中),细菌菌落长成红颜色,对清除食品

本底颗粒物干扰非常故意义).

3.本法仅限于形成菌落的微生物

设置对照

设置对照的重要目的是排除试验组中非测试原因对试验成果的影响,提高试验成

果的可信度。对照试验是指除了被测试的条件以外,其他条件都相似的试验,其

作用是比照试验组,排除任何其他也许原因的干扰,证明确实是所测试的条件引

起对应的成果。

试验设计

试验设计包括试验方案,所需仪器、材料、用品和药物,详细的实行环节以及时

间安排等的综合考虑和安排。

(1)土壤取样:同其他生物环境相比,土壤中的微生物,数量最大,种类最多。

在富具有机质的土壤表层,有更多的微生物生长。从富具有机物、潮湿、pHM

的土壤中取样。铲去表层土,在距地表约3〜8cm的土壤层取样。

(2)样品的稀释:样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际

操作中,一般选用一定稀粒范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30〜30()

之间、适于计数的平板。

测定土壤中细菌的数量,一般选用104105106

测定放线菌的数量,一般选用1。310』IO'

测定真菌的数量,一般选用IO?103IO。

(3)微生物的培养与观测

不一样种类的微生物,往往需要不一样的培养温度和培养时间。细菌30~37C1~2

放线菌25~28c5〜7天霉菌25〜28℃3〜4天

每隔24小时记录一次菌落数目,选用菌落数目稳定期的记录作为成果,这样可

以防止因培养时间局限性而导致一楼菌落的数目。一般来说,在一定的培养条件

下(相似的培养基、温度及培养时间),同种微生物体现出稳定的菌落特性。形

状、大小、隆起程度、颜色

疑难解答

(1)怎样从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?

记录某一稀释度下平板上的菌落数,最佳能记录3个平板,计算出平板菌落数的

平均值

每克样品中的菌落数=(C/V)*M其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均

菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数

植物细胞工程

具有某种生物全套遗传信息的任何一种活细胞,都具有发育成完整个体的能力,

即每个生物细胞都具有全能性。但在生物体的生长发育过程中并不体现出来,这

是由于在特定的时间和空间条件下,通过基因的选择性体现,构成不一样组织和

器官。

植物组织培养技术的应用有:实现优良品种的迅速繁殖;培育脱毒作物;制作人

工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。

•细胞分化是一种持久性的变化,它有什么生理意义?

使多细胞生物体中细胞构造和功能趋向专门化,有助于提高多种生理功能的效

率。

比较根尖分生组织和愈伤组织的异同

组织类型细胞来源细胞形态细胞构造细胞排列细胞去向

r根尖分化成多种

受精卵正方形无液泡紧密

分生组织细胞组织

愈伤组织高度分化细胞无定形高度液泡化疏松再分化成新个体

相似点都通过有丝分裂进行细胞增殖

影响植物组织培养的条件

材料:不一样的植物组织,培养的难易程度差异很大。植物材料的选择直接关系

到试验的成败。植物的种类、材料的年龄和保留时间的长短等都会影响试验成果。

菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。一般来说,

轻易进行无性繁殖的植物轻易进行组织培养。选用生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩

枝生理状态好,轻易诱导脱分化和再分化。

营养,离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件的规定相对特殊,需要配制

合适的培养基。常用的培养基是MS培养基,其中具有的大量元素是N、P、S、

K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有机物有甘氨酸、

烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。

激素:植物激素中生长素和细胞分裂素是后动细胞分裂、脱分化和冉分化的关键

性激素。在生长素存在的状况下,细胞分裂素的作用展现加强趋势。在培养基中

需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用的先后次序、用量的比

例等都影响成果。

使用次序试验成果

先生长素,

有助于分裂但不分

后细胞分裂素

先细胞分裂素.

细胞既分裂也分化

后生长素

同步使用分化频率提高

生长素/细胞分裂素比值与成果

促根分化,

比值高时

抑芽形成

+

促芽分化,

比值低时

抑根形成

比值适中增进愈伤组织生长

环境条件:PH、温度、光等环境条件。

不一样的植物对多种条件的规定往往不一样。进行菊花的组织培养,一般将pH

控制在5.8左右,温度控制在18~22℃,并且每日用日光灯照射12h.

4、操作流程

配制MS固体培养基:配制多种母液:将多种成分按配方比例配制成的浓缩液(培

养基母液)。

・使用时根据母液的浓缩倍数,计算用量,并加蒸储水稀释。

•配制培养基:应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植

物激素的母液,并用蒸镭水定容到1000亳升。

・在菊花组织培养中,可以不添加植物激素

原因是菊花茎段组织培养比较轻易。•灭菌:采用的灭菌措施是高压蒸汽灭菌。

•MS培养基中多种营养物质的作用是什么?与肉汤培养基相比,MS培养基有哪

些特点?

大量兀素和微量兀素提供植物细胞所必需的尢机盐;蔗糖提供碳源,维持细胞渗

透压;甘氨酸、维生素等物质重要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到

一定影响后所产牛•的特殊营养需求。

微生物培养基以有机营养为主,MS培养基则需提供大量无机营养。

外植体的消毒外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。选用菊花茎段时,

要取生长旺盛的嫩枝。菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,

刷洗后在流水下冲洗20min左右。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体

积分数为70%的酒精中摇动2〜3次,持续6〜7s,立即将外植体取出,在无菌水

中清洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入质量分数为0.1%的

氯化汞溶液中l~2min。取出后,在无菌水中至少清洗3次,漂洗消毒液。

注意:对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂的消毒效果,乂要考虑植物的耐

受能力。

接种:接种过程中插入外植体时形态学上端朝上,每个锥形瓶接种7〜8个外植

体。外植体接种与细菌接种相似,操作环节相似,并且都规定无菌操作。

培养:应当放在无菌箱中进行,井定期进行消毒,保持合适的温度(I8~22C)

和光照(12h)

移栽:栽前应先打开培养瓶的封口膜,让其在培养间生长几日,然后用流水清洗

根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间,

进行壮苗。最终进行露天栽培。

栽培

外植体在培养过程中也许会被污染,原因有外植体消毒不彻底;培养基灭菌不彻

底;接种中被杂菌污染;锥形瓶密封性差等。

专题4酶的研究与应用知识点

课题1果胶酶在果汁生产中的作用

由水果制作果汁要处理两个重要问题:一是果肉的出汁率低,耗时长;二是榨

取的果汁浑浊、黏度高,轻易发生沉淀。

1、植物细胞壁以及胞间层的重要构成成分有纤维素和灌胶;并且两者不溶

于水,在果汁加工中,既影响出汁率,又使果汁浑浊。

2、果胶是植物细胞壁以及胞间层的重要构成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚

合而成的一种高分子化合物,不溶于水。在果汁加工中,果胶不仅会影响出汁率,

还会使果汁浑浊。果胶酶的作用是可以将果胶_分解成可溶性的一半乳醛酸,瓦解

植物的细胞壁及胞间层,并且使果汁变得澄清。

3、果胶酶是一类酶总称,包括果胶分解酶二多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯

醒一等。

4、酶的活性是指酶催化一定化学反应的的能力。的活性的高下可以用在一

定条件下,酣所催化的某一化学反应的反应速度来表达。在科学研究与工业生

产中,酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减小量或产物的增长量来

表达。

5、影响酶活性的原因包括:温度、PH、酶的克制剂等。

(二).试验设计

(设计一)探究温度对酶活性的影响

当酶处在最适温度或最适pH时,酶的活性最高;若温度过高、过酸或过碱,

则导致酶变性失活。在一定范围内,果肉的出汁率和果汁的澄清度与果胶酶的

活性成正比。

此试验的白变量是温度」根据单一变量原则,你应保证各试验组相似的变量

有PH底物浓度底物量试验器材酶的用量等等。

(设计二)探究PH对酶活性的影响

探究pH对果胶酣活性的影响,只须将温度梯度改成pH梯度,并选定一种合适

的温度进行水浴加热。反应液中的pH可以通过体积分数为().1%的氢氧化钠或盐

酸溶液进行调整。

(设计三)探究果胶酶的用量

探究果胶前的用量是建立在探究最适温度和pH对果胶琳活性影响的基础之上

的。此时,研究的变量是昊胶酶的用量,其他原因都应保持不变。试验时可以配

制不一样浓度的果胶酶溶液,也可以只配制一种浓度的果胶酶溶液,然后使用不

一样的体积即可。需要注意的是,反应液的pH必须相似,否则将影响试验成果

的准

旁栏思索题

1.为何在混合苹果泥和果胶酶之前,要将果泥和果胶酶分装在不一样的试管中

恒温处理?

提醒:将果泥和果胶酶分装在不一样的试管中恒温处理,可以保证底物和酶在混

合时的温度是相似的,防止了果泥和果胶酶混合时影响混合物的温度,从而影响

果胶酶活性的问题。

2.在探究温度或pH的影响时,与否需要设置对照?假如需要,又应当怎样设

置?为何?

提醒:需要设置对照试验,小一样的温度梯度之间或小一样的pH梯度之间就可

以作为对照,这种对照称为互相对照。

3.A同学将哪个原因作为变量,控制哪些原因不变?为何要作这样的处理?B

同学呢?

提醒:A同学将温度或pH作为变量,控制不变的量有苹果泥的用量、果胶酶的

用量、反应的时间和过滤的时间等。只有在试验中保证一种自变量,试验成果才

能阐明问题。B同学对于变量的处理应当与A同学相似,只是观测因变量的角

度不一样。

4.想一想,为何可以通过测定滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高

下?

提醒:果胶酶将果胶分解为小分子物质,小分子物质可以通过滤纸,因此苹果汁

的体积大小反应了果胶酶的催化分解果胶的能力。在不一•样的温度和pH下,果

胶酶的活性越大,苹果汁的体积就越大。

5.当探究温度对果胶酶活性的影响时;哪个原因是变量,哪些原因应当保持不

变?

提醒:温度是变量,应控制果泥量、果胶酣的浓度和用量、水浴时间和混合物的

pH等所有其他条件不变。只有这样才能保证只有温度一种变量对果胶酶的活性

产生影响。

试验变量与反应变量(如表)

试验变量(自变量)反应变量(因变量)

含义试验中试验者所操纵的原因或条件由于试验变量变化而引起的变化和成果

实例温度或pH—|一果汁量

联络试验变量为原因,反应变量是成果,两者是因果关系

课题二胡萝卜素的提取

胡萝卜素性质:橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶

于石油醛等有机溶剂。

根据碳碳双键的数目划分为%|1、丫三类。

其中最重要的构成成分为P-胡萝卜素:

作用:①治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病;②常用于食品色素;

③使癌变细胞恢复成正常细胞。

提取。一胡萝卜索的措施重要有三种:①从植物中提取②从大面积养殖的岩藻中

获得③运用微生物的发酵生产

试验环节①粉碎:使原料与有机溶剂充足接触,增大溶解度。②干燥:脱水温度

太高,干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。③萃取

I、萃取剂的选择水溶性的:乙醇、丙酮

水不溶性的:石油酸、乙酸乙酯、乙醛、苯、四氯化碳等

选择:具有较高的沸点,可以充足溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。

II、影响萃取的原因

重要原因:萃取剂的性质和使用量

次要原因:原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等

一般来说,原料颗粒小,萃取温度高,时间长,需要提取的物质就可以充足溶解,

萃取效果就好。萃取前,要将胡萝卜进行粉碎和干燥

10、胡萝卜素提取

装置的设计:萃取过程应当防止明火加热,采用水浴加热,这是由于有机溶剂都

是易燃物,直接使用明火加热轻易

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