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文档简介
克氏双糖铁（KIA）培养基试验COMPOUNDBIOCHEMICALTEST-KIRSCHBERGDISACCHARIDEIRON(KIA)MEDIUMTEST一、原理KIA琼脂中含有牛肉膏、酵母浸膏、蛋白胨、乳糖、葡萄糖、枸橼酸铵铁、酚磺酞指示剂等。乳糖的浓度为葡萄糖的10倍，若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖，培养基中的葡萄糖被分解后只能产生少量的酸，在最初培养的8~11小时内，这些酸也足以使培养基的底层和斜面变黄色。但连续培养数小时后，在细菌和氧的作用下，培养基的斜面所含氨基酸发生降解，释放氨类，立即中和斜面部分的酸，培养18~24小时后，整个斜面转变成碱性，斜面又变成红色。在培养基深层中，氨基酸的降解作用不足以中和所形成的酸，故仍呈黄色。因此，KIA斜面呈碱性，深层呈酸性反应，说明该菌只分解葡萄糖而不分解乳糖。若细菌分解乳糖则产生大量的酸，这些酸能中和斜面产生的碱，使整个培养基呈黄色。若细菌能分解培养基中含硫氨基酸，则可产生H2S，H2S与培养基中枸橼酸铵铁起反应，产生不溶性的黑色硫化亚铁沉淀。二、试验方法用接种针挑取待检细菌，先穿刺接种到KIA深层，距管底3~5mm为宜，再从深层向上提起，在斜面上从中间由下至上划一条直线，再自斜面底部Z字形划线。35℃培养18~24小时，观察结果。三、试验结果未接种细菌。分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（AA--）。分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性（AA+-）。不分解乳糖、葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（KA--）。不分解乳糖、葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性（KA-+）。四、应用KIA主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2
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