无细胞蛋白表达服务：从DNA到蛋白快至5天交付

无细胞蛋白表达服务：从DNA到蛋白，快至5天交付！无细胞蛋白合成（cell-freeproteinsynthesis,CFPS）是一种不依赖活细胞的体外表达技术，能够绕过细胞生长限制，在开放体系中实现蛋白快速合成。相比传统的体内表达体系，CFPS反应周期短、体系可调控且易于微型化和自动化，使其在高通量筛选及蛋白功能研究中展现出独特优势，逐渐发展为一种重要的技术平台。义翘神州自主研发的无细胞蛋白合成系统，可提供高效、快速的蛋白与抗体表达服务，显著缩短研发周期。针对AI驱动的蛋白设计与药物发现需求，我们打造了一站式无细胞表达平台，支持AI生成序列的快速表达、纯化及多维功能验证，助力客户极速锁定优质候选分子。从DNA到蛋白，快至5天交付！01高通量抗体生产能力1高通量合成CFPS平台最显著的优势在于其卓越的并行处理能力。单次项目可完成2,000+个scFv-His/VHH-His抗体片段的合成、纯化及亲和力检测（BLI），从基因合成、抗体表达纯化到活性检测全流程仅需3-4周，较传统方法效率提升数个量级。这种超高通量特性使其成为抗体药物早期发现的理想工具。无细胞表达系统非常适合高通量表达，其产量最高可到mg/mL级别，抗体和抗体功能性片段是100μg/mL级别。对于少量蛋白的检测需要建立相应的检测方法，我们可以协助进行方法学设计。2真实体现抗体活性纯度和活性对于蛋白或抗体样品在研究中发挥作用是极其重要的，无细胞蛋白合成系统制备的样品，纯化后可以具有较好的纯度和活性。纯度

义翘神州利用自建的无细胞蛋白合成系统表达的VHH可以达到SDS和SEC-HPLC纯度均>95%（图1）。图1义翘神州利用无细胞蛋白合成系统表达VHH的SDS和SEC-HPLC结果活性

义翘神州制备的抗体片段显示出与哺乳动物细胞表达纯化的样品一致的体外抗原结合活性（图2）。图2义翘神州利用无细胞蛋白合成系统表达的VHH的活性情况3突破传统表达系统限制通常抗体片段由于恒定区的缺失导致了抗体对于细胞适应性的减弱，从而出现较多抗体片段在细胞或细菌中表达不理想的情况。无细胞蛋白合成系统在表达细胞不耐受性或有难度的样品方面具有突出的优势。义翘神州利用无细胞蛋白合成系统，成功制备出在真核细胞中不表达的抗体片段（图3）。图3义翘神州无细胞蛋白合成系统成功合成2个在HEK293细胞中表达困难的VHH片段常见问题CFPS有哪些优势？·快速蛋白表达：CFPS可以直接使用PCR扩增的DNA模板，无需耗时的分子克隆或载体构建步骤，大幅缩短蛋白表达周期；·并行化处理：随着高产量、低成本批量反应体系的发展，CFPS能在96孔或384孔等多孔板中同时合成蛋白，并结合荧光报告或亲和层析方法快速评估功能，大幅提升筛选通量；·微型化与自动化：CFPS体系易于微型化，可以整合微流控芯片及自动化液体处理平台，实现大规模平行化实验操作，显著节约时间与试剂成本；·开放式调控：CFPS体系无细胞膜限制，反应条件可自由调控，包括添加分子伴侣、膜模拟结构、同位素标记或非天然氨基酸定点插入，以生成具有特殊功能或化学修饰的蛋白分子。同时，结合AI辅助设计，可快速优化蛋白序列或筛选策略，实现高精度、定向的功能筛选；·表达难表达蛋白：CFPS可有效表达毒性蛋白或不易溶解的蛋白，减少因宿主细胞代谢和活性限制导致的产量问题。体系反应体积小、处理周期短，并省略基因克隆步骤，使其在高通量应用中更加高效和灵活。真核来源的蛋白是否必须用真核表达系统？并非如此，真核来源的蛋白除了传统的哺乳动物表达系统，还可以利用无细胞蛋白合成。无细胞系统是一套酶促级联反应，可以添加很多其他组分甚至是真核来源的提取物来实现真核蛋白的表达。如果某些目标蛋白（比如抗体功能性片段scFv和VHH）的功能不依赖翻译后修饰，在这种情况下，不管是无细胞系统还是HEK293系统，两者表达的活性无明显差异。对于原核体系难以表达的真核来源蛋白，无细胞表达体系有什么优势吗？因为其开放式系统可以添加很多其他组分甚至是真核来源的提取物来实现真核蛋白的正确合成。例如我们聚焦的VHH、VHH-Fc等都可以实现无细胞系统中上清表达，但是这些蛋白在原核表达中往往以错误的形式存在。✦义翘神州无细胞蛋白表达平台义翘神州专注于为全球生命科学研究及医药研发提供高质量的蛋白及抗体试剂产品和高水平的CRO技术服务。目前公司已建成一支优秀的高水平研发队伍，经过多年的深入研究，成功建立了自主、高效的无细胞蛋白表达平台，3小时即可完成合成过程，快至1天即可拿到纯化样品。平台已累积数百个成功项目经验，成功率>99%，真正做到快速、高通量支持药物研发。免责声明：义翘神州内容团队仅是分享和解读公开的研究论文及其发现，专注于介绍全球生物医药研究