干细胞培养工程师考试试卷及答案

干细胞培养工程师考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.胚胎干细胞的标志性转录因子是______。2.干细胞培养中常用的血清替代物缩写是______。3.成体干细胞中，造血干细胞主要存在于______和骨髓中。4.诱导多能干细胞（iPSC）的建立依赖于______四种转录因子的过表达。5.干细胞培养的基础培养基常选用______。6.干细胞培养需维持的CO₂浓度通常为______%。7.间充质干细胞（MSC）属于______培养型细胞。8.干细胞冻存的常用冷冻保护剂是______。9.造血干细胞分化的终末细胞包括红细胞、白细胞和______。10.干细胞培养防分化的核心是维持______状态。答案1.Oct42.KSR3.脐带血4.Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc5.DMEM/F126.57.贴壁8.二甲基亚砜（DMSO）9.血小板10.未分化二、单项选择题（共10题，每题2分）1.分化潜能最强的干细胞是？A.胚胎干细胞B.造血干细胞C.MSCD.神经干细胞2.iPSC技术发明人是？A.山中伸弥B.詹姆斯·汤姆森C.马丁·埃文斯D.邵峰3.干细胞传代常用胰酶浓度是？A.0.05%B.0.25%C.0.5%D.1%4.不属于干细胞生长因子的是？A.bFGFB.EGFC.胰岛素D.青霉素5.MSC可分化为以下哪种细胞？A.心肌细胞B.神经细胞C.成骨细胞D.以上都是6.干细胞冻存降温速率通常为？A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/minD.室温降温7.ESC培养常用饲养层细胞是？A.MEFB.HEK293TC.HeLaD.CHO8.造血干细胞移植不用于治疗？A.白血病B.再生障碍性贫血C.糖尿病D.地中海贫血9.判断干细胞未分化的方法不包括？A.表面标志物检测B.形态观察C.细胞计数D.三胚层分化验证10.属于成体干细胞的是？A.iPSCB.ESCC.脂肪干细胞D.桑椹胚细胞答案1.A2.A3.B4.D5.D6.A7.A8.C9.C10.C三、多项选择题（共10题，每题2分）1.干细胞基本特性包括？A.自我更新B.多向分化C.无限增殖D.致瘤性2.ESC表面标志物有？A.SSEA-1B.SSEA-4C.TRA-1-60D.CD343.干细胞无菌操作要求包括？A.超净台紫外线消毒B.戴口罩手套C.培养基现配现用D.耗材密封4.MSC来源包括？A.骨髓B.脂肪C.脐带血D.胎盘5.iPSC应用前景有？A.疾病模型B.细胞治疗C.药物筛选D.器官移植6.干细胞培养常用抗生素是？A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.红霉素7.造血干细胞表面标志物有？A.CD34B.CD45C.CD133D.CD718.干细胞培养温度维持在？A.36℃B.37℃C.38℃D.37±0.5℃9.干细胞分化调控因素包括？A.生长因子B.细胞外基质C.转录因子D.pH10.干细胞冻存注意事项？A.细胞密度足够B.避免反复冻融C.DMSO浓度合适D.快速解冻答案1.AB2.BC3.ABC4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABC8.BD9.ABCD10.ABCD四、判断题（共10题，每题2分）1.ESC可分化为人体所有组织细胞。（）2.iPSC无致瘤风险。（）3.MSC属于多能干细胞。（）4.血清会促进ESC分化。（）5.造血干细胞仅能从骨髓获取。（）6.干细胞冻存DMSO浓度为10%。（）7.饲养层可抑制ESC分化。（）8.所有干细胞都能无限增殖。（）9.干细胞培养基需过滤除菌。（）10.神经干细胞仅分化为神经元。（）答案1.对2.错3.错4.对5.错6.对7.对8.错9.对10.错五、简答题（共4题，每题5分）1.简述ESC的主要特性。答案：ESC核心特性：①自我更新：体外长期增殖且保持未分化；②多向分化：可分化为内、中、外三胚层所有组织细胞；③标志物表达：高表达Oct4、Sox2等转录因子，表面SSEA-4、TRA-1-60阳性；④形态：克隆样生长，核质比高，细胞小而圆。2.干细胞培养无菌操作的关键要点？答案：①环境：超净台提前30分钟紫外线消毒，开启风机；②防护：戴无菌手套、口罩、帽子，穿无菌服；③操作：试剂瓶口酒精灯灭菌，避免交叉污染；④细胞：操作轻柔，防止污染；⑤耗材：用过耗材及时入无菌袋，避免扩散。3.简述iPSC的建立过程。答案：步骤：①获取体细胞（如皮肤成纤维细胞）；②导入重编程因子（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc），常用慢病毒载体；③培养筛选：转染细胞接种饲养层/无饲养层体系，培养1-2周；④鉴定：形态观察、表面标志物检测、三胚层分化验证，确认iPSC建立。4.MSC的临床应用前景？答案：①组织修复：骨/软骨损伤、心肌梗死修复；②免疫调节：自身免疫病（类风湿关节炎）、GVHD治疗；③神经修复：脊髓损伤、帕金森病；④肝病治疗：肝硬化、肝功能衰竭改善。其低免疫原性、易获取使其成为理想种子细胞。六、讨论题（共2题，每题5分）1.讨论饲养层细胞的作用及替代方案。答案：饲养层（如MEF）作用：提供营养（bFGF）、抑制ESC分化、维持未分化。但存在动物源污染风险，限制临床。替代方案：①无饲养层体系：重组蛋白（bFGF、TGF-β）+Matrigel；②人源饲养层：人胚胎成纤维细胞，降低异源污染；③化学定义培养基：无血清、无动物源，更安全。无饲养层需优化条件，确保未分化稳定。2.讨论干细胞冻存与复苏的关键技术及注意事项。答案：冻存关键：①细胞密度1×10⁶-1×10⁷/mL；②10%DMSO+90%血清/培养基，避