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文档简介

实训三高效液相色谱法测定甲硝唑片的含量实训三高效液相色谱法测定甲硝唑片的含量实训的目的1.掌握高效液相色谱法的规范操作;流动相配制;

对照品、供试品的配制;

外标定量法。2.熟悉高效液相色谱法系统适应性试验。3.了解高效液相色谱法的测定原理及高效液相色谱仪的维护常识。基本原理

甲硝唑属于一种广谱抗生素,具有紫外吸收特性,采用高效液相色谱法测定甲硝唑片的含量,根据含量与峰面积成正比的关系,用外标法以峰面积计算甲硝唑的含量。实训器材1.仪器

高效液相色谱仪、C18柱、溶剂抽滤器、超声仪器、0.45um滤膜等2.试剂甲硝唑片、甲硝唑对照品、甲醇(色谱纯)、超纯水药典标准

本品含甲硝唑(C6H9N3O3)应为标示量的93.0%~107.0%。【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液

取本品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量(约相当于甲硝唑0.25g),置50ml量瓶中,加50%甲醇适量,振摇使甲硝唑溶解,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过。精密量取5ml,置100ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。对照品溶液

取甲硝唑对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.25mg的溶液。分别用0.45μm滤头过滤到样品瓶中。药典标准色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(20:80)为流动相;检测波长为320nm;进样体积10μl。系统适用性要求

理论板数按甲硝唑峰计算不低于2000。测定法

精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算。【规格】甲硝唑片0.2g

【贮藏】遮光,密闭保存。操作规程同甲硝唑氯化钠注射液含量测定

LC

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