微生物单克隆抗体研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

微生物单克隆抗体研发工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.杂交瘤技术由______和______两位科学家发明，获1984年诺贝尔生理学或医学奖。2.单克隆抗体（mAb）是由单一______细胞分泌的、针对单一抗原表位的抗体。3.制备鼠源单抗时，常用免疫动物是______。4.细胞融合常用化学试剂是______（聚乙二醇）。5.HAT培养基中，氨基蝶呤（A）阻断______途径。6.ProteinA/G亲和层析主要结合抗体的______区。7.ELISA封闭非特异性位点常用______（如BSA）。8.噬菌体展示筛选单抗的靶标通常是______。9.人源化单抗的______区保留鼠源序列。10.超净台操作前紫外照射需______分钟（常规）。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.杂交瘤细胞的核心特点是（）A.仅分泌一种抗体B.能无限增殖C.兼具增殖与单一抗体分泌D.短期存活答案：C2.单抗特异性来源于（）A.单一B细胞融合B.单一杂交瘤细胞分泌C.单一抗原免疫D.单一佐剂答案：B3.免疫佐剂的主要作用是（）A.延长抗原存留时间B.直接激活B细胞C.抑制免疫反应D.促进T细胞凋亡答案：A4.HAT第一次筛选得到的细胞是（）A.骨髓瘤细胞B.脾细胞C.杂交瘤细胞D.融合脾细胞答案：C5.ProteinG主要结合的抗体类型是（）A.IgAB.IgGC.IgMD.IgE答案：B6.间接ELISA包被的物质是（）A.抗原B.抗体C.酶标二抗D.底物答案：A7.噬菌体展示单抗库的常用载体是（）A.M13噬菌体B.质粒C.腺病毒D.逆转录病毒答案：A8.嵌合单抗的可变区（V区）来源于（）A.人B.鼠C.兔D.羊答案：B9.细胞培养中CO₂的作用是（）A.提供碳源B.维持pHC.促进增殖D.抑制细菌答案：B10.单抗药物靶点选择核心依据是（）A.肿瘤高表达B.与疾病密切相关C.易结合D.序列保守答案：B三、多项选择题（每题2分，共20分）1.杂交瘤技术关键步骤包括（）A.动物免疫B.细胞融合C.HAT筛选D.克隆化培养答案：ABCD2.单抗应用领域包括（）A.临床诊断B.疾病治疗C.科研试剂D.食品检测答案：ABCD3.基因工程单抗种类有（）A.嵌合单抗B.人源化单抗C.全人源单抗D.双特异性单抗答案：ABCD4.HAT培养基组成是（）A.次黄嘌呤（H）B.氨基蝶呤（A）C.胸腺嘧啶核苷（T）D.葡萄糖答案：ABC5.细胞融合常用方法（）A.PEG融合B.电融合C.仙台病毒融合D.热休克答案：ABC6.ELISA常见类型（）A.间接法B.双抗体夹心法C.竞争法D.直接法答案：ABCD7.单抗表达系统（）A.杂交瘤细胞B.CHO细胞C.大肠杆菌D.酵母答案：ABCD8.免疫动物可选（）A.BALB/c小鼠B.大鼠C.兔D.羊答案：ABCD9.噬菌体展示筛选步骤（）A.靶标吸附B.非特异洗脱C.克隆扩增D.序列测定答案：ABCD10.单抗质量控制指标（）A.纯度B.活性C.特异性D.稳定性答案：ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.杂交瘤细胞仅分泌一种单一表位抗体。（）答案：对2.佐剂增强抗原免疫原性，延长存留时间。（）答案：对3.HAT第一次筛选可直接得到特异性单抗杂交瘤。（）答案：错4.ELISA显色后需立即测OD值。（）答案：对5.人源化单抗免疫原性低于鼠源单抗。（）答案：对6.细胞培养基需高压灭菌。（）答案：对7.噬菌体展示仅筛选蛋白抗原单抗。（）答案：错8.单抗可用于肿瘤、自身免疫病治疗。（）答案：对9.抗原剂量越多，免疫效果越好。（）答案：错10.细胞融合后24小时内需加HAT筛选。（）答案：对五、简答题（每题5分，共20分）1.简述杂交瘤技术基本原理答案：骨髓瘤细胞（无限增殖、缺HGPRT）与免疫脾B细胞（分泌特异性抗体、不增殖）融合，形成杂交瘤细胞（兼具增殖与单一抗体分泌能力）。HAT培养基阻断骨髓瘤细胞DNA从头合成，仅杂交瘤细胞可通过HGPRT补救途径存活，再经克隆化培养获得稳定分泌单抗的细胞株。2.单抗纯化常用方法及原理答案：①ProteinA/G亲和层析：利用ProteinA/G与抗体Fc段特异性结合，吸附后洗脱；②离子交换层析：基于抗体电荷差异分离；③凝胶过滤：利用分子大小差异；④疏水层析：基于疏水区域相互作用。其中ProteinA/G是核心方法，纯度高。3.基因工程单抗的优势答案：①降低免疫原性：人源化/全人源单抗减少鼠源序列，避免HAMA反应；②提高亲和力：通过突变优化CDR区；③拓展功能：构建双特异性单抗、ADC等；④便于大规模生产：CHO细胞表达产量高、稳定。4.ELISA筛选单抗流程答案：①抗原包被酶标板；②BSA封闭非特异位点；③加杂交瘤上清孵育；④洗板去未结合抗体；⑤加酶标二抗孵育；⑥洗板；⑦TMB显色；⑧H₂SO₄终止；⑨测OD值，OD高者为阳性克隆。六、讨论题（每题5分，共10分）1.如何提高单抗亲和力？答案：①噬菌体展示：构建突变库，多轮筛选高亲和力克隆；②定点突变：优化CDR区（抗原结合关键区）；③链置换：组合重/轻链筛选最优配对；④计算机辅助设计：模拟抗原-抗体结合位点指导突变；⑤体内成熟：多次免疫促进B细胞亲和力成熟。其中噬菌体展示和定点突变最常用，可提升亲和力10-1000倍。2.鼠源单抗局限性及改进策略答案：局限性：①免疫原