TZJSYJ 0002-2025 香菇液体菌种工厂化制棒技术规程

香菇液体菌种工厂化制棒技术规程2025-12-22发布本标准按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利的责任。本标准由浙江省食用菌协会提出并组织实施。本标准起草单位：浙农科(武义)农业产业发展研究院有限公司、浙江省农业科学院、浙江省农业技术推广中心、武义县经济特产技术推广站、龙泉市菇源自动化设备有限公司。本标准主要起草人：潘祖华、金群力、周海涌、陈礼威、何思逸、傅军卫、陈青、陆中华、周树东、蔡为明、王晓、施礼、吕秋实、吴杭波、范丽军、杨振华、王青青、乔涛涛、杨文杰。本标准为首次发布。工2仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3术语和定义3.3摇瓶菌种(一级种)原种罐菌种(二级种)栽培种罐菌种(三级种)接种量3设室外堆料场、仓库、搅拌区、装袋区、灭菌区、冷却区、接种区(栽培种罐菌种培养室)、菌棒培养区等，各功能区彼此独立又相互衔接，并做罐及空气过滤系统、水处理设备、自动/半自动装袋机、环保蒸汽锅炉、高压吸附式干燥机、空气过滤器、恒温机等。供电不稳地区，应配备备用电源(发电机)。抑菌物质的阔叶硬质树种加工。生产用水应符合GB5749的规定，石膏应符4增氧接种菌液培养母种配方及生产操作流程应符合NY/T528按液体培养基配方配制，装入摇瓶中，混合均匀，装液量为摇瓶容量的30%~40%。灭菌结束后，摇瓶冷却至28℃以下待用。在无菌条件下，用接种针挑取20～25块绿豆大小(1～2)mm×(1～3)mm的母种块迅速转接于摇接种后，搅拌或振荡培养，培养室温度控制23℃~25℃,搅拌培养转速300r/min～700r/min,振5培养液澄清透明、无异味；镜检无杂菌、菌丝形态正常；菌丝体密集，不低于整个培养液80%。用水将配方原料搅拌均匀加入罐体，装液量为罐体容量的70%～80%,同时加入0.03%～0.05%消泡剂，通入空气搅拌1min～2min,混合均匀，拧紧上料口盖，气密性检查通过后开始灭菌。20min～30min,期间需进行间隙性排水，管路要求同步灭菌。7.4.5冷却排管或夹层内通入冷水降温，待培养液温度降至25℃以下时，停止降温。0.03MPa～0.05MPa。建议接种量：摇瓶菌种接原种罐0.5%～1.5%,原种罐菌种接栽培种罐5%～10%。培养温度控制在23℃~25℃,根据菌丝生长情况，适时调节进气阀和排气阀，维持罐压0.03MPa~0.05MPa,培养6d～8d。观测菌丝形态、色泽、气味、菌丝量等，通过显微镜观察菌丝体锁状联按照无菌操作从取样阀取少量培养液，接种于GB/T4789.28中规定的PDA培养基中，置于28℃~30℃恒温培养48h,采用显微镜和感官观察菌丝生长状况及有无杂菌污染。若出现白色以外的杂色者，液中，置于28℃~30℃恒温培养24h～48h,观察培养液是否浑浊。培养液浑浊，为有细菌污染；培6菌液状态菌丝片段均匀悬浮于液体中，不分层，菌液体积比达80%以上，菌球大小适菌液色泽澄清透明呈浅黄色，菌丝球或菌丝片段呈白色或灰白色。罐体排气口有香菇培养液特有的香气，无酸、臭等异味。显微形态菌丝健壮，无空泡，有明显锁状联合，无杂菌。菌液pH值3.5～4.5;菌丝湿重0.1g/mL～0.2g/mL。后使含水量达到52%～57%,pH值6.0～6.5。7建议采用微压、高压灭菌，微压蒸汽灭菌料温宜4h内升至105℃~110℃,保持8h～10h;高压蒸汽灭菌料温宜4h内升至118℃~121℃,保持3h～4h,灭菌器内温度降到70℃以下出料。料棒制作完成后应及时灭菌，在灭菌器(柜)排尽冷空气并达到相应温度时开始计时。料棒在预冷室降温至60℃~65℃后，移入事先已清洁的强冷室，6h～8h后，表面温度降到20℃(料温22℃~26℃)为宜。接种前对接种室进行彻底清洁、消毒，室内温度调至18℃~22℃,湿度70%以下。接种人员应更换工作服及鞋帽进入接种室，用75%酒精擦拭双手消毒。培养室温度控制24℃~26℃,菌棒中心温度不超过26℃;空气相对湿度60%～65%、CO₂浓度低8.2.3增氧管理菌棒培养10d～15d,菌圈直径达6cm～8cm时脱去套袋；菌丝满棒时间25d～30d,满棒后10d左8.2.4转色后熟菌棒刺孔后排放至培养架上，间距2cm～3cm,控制温度22℃~24℃、空气相对湿度70%～80%、不同品种(菌株)应达到其说明书中要求的菌龄。外观菌棒瘤状体分布均匀，转色占菌棒85%左右，呈茶褐色虎斑状且带有白点。表2菌棒质量要求(续)8具有香菇菌丝特有的香味，无异味。8.2.6菌棒检测方法菌棒检测方法见表3。表3菌棒检测方法以每一培养罐液体菌种生产的菌棒为1批次。随机抽取每批次生产菌棒5～10棒进行镜菌棒抽样在适宜的环境条件下进行催蕾处理，5d～7d后正常现随机抽取1/1000菌棒，肉眼观察无杂菌及病虫害。9生产档案母种、摇瓶菌种、原种罐菌种、栽培种罐菌种及菌棒生产的每个环节都要有详实的记录，记录内容见附录B。生产记录归档保存2年以上。9(资料性)A.1液体菌种培养基配方配方2:豆粕粉10.0g(磨浆)玉米粉10.0g(磨浆)、麦麸10.0g(磨浆)、葡萄糖20.0g、酵母膏杂木屑78%、麦麸20%、白糖1%、石膏(或碳酸钙1%。根据不同品种可适当优化调整。(资料性)生产档案记录事项表B.1给出了液体菌种生产记录表。表B.1液体菌种生产记录品种名称接种日期培养温度(℃)操作人员菌种来源发满日期使用日期生产编号生产日期操作人员料液灭菌冷却起止时间摇床振荡转速(r/min)时间开始接种起止时间磁拌器转速(r/min)培养起止时间结束培养温度(℃)保温压力(MPa)生产编号培养液是否澄清透明();有无异味();菌丝形态是否正常();菌丝生产日期操作人员料液灭菌冷却起止时间维持罐压(MPa)时间开始接种起止时间培养起止时间温接种量(%)结束培养温度(℃)保温压力(MPa)灭菌前：灭菌生产编号①菌液状态(),菌液比(%);②菌液色泽()③菌液气味();④显微形态();⑤pH()生产日期操作人员料液灭菌冷却起止时间维持罐压(MPa)时间开始接种起止时间培养起止时间接种量(%)结束培养温度(℃)保温压力(MPa)生产编号①菌液状态(),菌液比(%);②菌液色泽()③菌液气味();④显微形态();⑤pH()表B.2给出了菌棒工厂化生产记录表。表B.2菌棒工厂化生产记录表生产编号负责人生产日期装袋起止时间单袋湿料重(kg)筒袋规格(cm)