22年病理学技术(中级)考试试题及答案8

22年病理学技术(中级)考试试题及答案8一、单项选择题（每题1分，共50分。每题只有一个最佳答案）1.在常规石蜡切片制作过程中，组织固定的主要目的是A.使组织变硬B.防止组织自溶和腐败C.便于染色D.增强组织折光性E.去除组织内水分2.10%中性缓冲福尔马林固定液的pH值应为A.4.5～5.0B.6.8～7.2C.7.4～7.6D.8.0～8.2E.5.5～6.03.常规组织固定时，固定液与组织块体积比一般要求为A.1:1B.2:1C.3:1～5:1D.10:1E.20:14.适于观察细胞内微细结构如微管、内质网等的固定液是A.10%福尔马林B.95%乙醇C.戊二醛D.苦味酸E.丙酮5.关于Bouin固定液的特点，下列描述错误的是A.渗透迅速B.对组织固定均匀C.固定后组织不易变脆D.适用于结缔组织染色E.含有苦味酸、甲醛和冰醋酸6.组织脱水过程中，常用的透明剂是A.乙醇B.二甲苯C.丙酮D.甲醛E.冰醋酸7.在组织处理过程中，引起组织过度变硬变脆的主要原因是A.固定时间不足B.脱水不彻底C.透明时间过长D.浸蜡时间过短E.烤片温度过低8.石蜡切片常用的烤片温度和时间是A.40～50℃，30分钟B.60～65℃，30～60分钟C.80℃，15分钟D.100℃，5分钟E.30℃，2小时9.苏木精伊红染色（HE染色）中，细胞核被染成A.蓝紫色B.红色C.粉红色D.橘黄色E.黄色10.HE染色中，分化液的主要成分是A.1%盐酸乙醇B.95%乙醇C.氨水D.冰醋酸E.伊红液11.苏木精染液配制后需熟化，其目的是使其转变为B.苏木精素B.氧化苏木精C.苏木红D.苏木因E.媒染剂12.组织化学PAS染色法主要用于检测组织中的A.蛋白质B.核酸C.糖原和多糖D.脂肪E.钙盐13.在PAS染色中，糖原被染成A.蓝色B.紫红色C.黄色D.黑色E.绿色14.鉴别组织中的淀粉样物质最常用的特殊染色是A.Masson三色染色B.刚果红染色C.网状纤维染色D.银染色E.甲苯胺蓝染色15.刚果红染色后，淀粉样物质在偏振光显微镜下呈现A.苹果绿色双折光B.红色双折光C.黄色单折光D.蓝色双折光E.橙色单折光16.网状纤维染色在常规病理诊断中的主要意义不包括A.鉴别癌与肉瘤B.显示基底膜C.鉴别淋巴结病变D.观察脂肪变性E.显示网状支架17.显示横纹肌的横纹结构最适宜的染色方法是A.HE染色B.Masson三色染色C.PTAH染色D.银染色E.脂肪染色18.抗酸杆菌染色中最经典的方法是A.革兰染色B.墨汁染色C.Ziehl-Neelsen染色D.姬姆萨染色E.瑞氏染色19.Ziehl-Neelsen染色中，抗酸杆菌被染成A.蓝色B.红色C.黄色D.紫色E.黑色20.真菌染色最常用的方法是A.Grocott六胺银染色（GMS）B.抗酸染色C.HE染色D.刚果红染色E.Masson三色染色21.组织内出现含铁血黄素，常采用的染色方法是A.苏丹III染色B.普鲁士蓝染色C.脂褐素染色D.黑色素染色E.钙盐染色22.组织内钙盐沉积物在HE染色中通常呈现A.蓝色B.红色C.紫红色D.黄褐色E.黑色23.证实组织内黑色素的常用方法是A.Masson-Fontana银染法B.普鲁士蓝反应C.茜素红S染色D.刚果红染色E.甲苯胺蓝染色24.免疫组织化学染色中，抗原修复的常用方法不包括A.微波热修复B.高压锅热修复C.水浴锅热修复D.胰酶消化修复E.乙醇修复25.免疫组化染色中最常用的显色剂是A.AECB.DABC.FastRedD.4-CNE.NBT26.DAB显色后，阳性反应产物呈现的颜色是A.红色B.蓝色C.棕黄色D.紫色E.绿色27.免疫组化SP法中，“SP”代表的是A.链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶B.卵白素-生物素-过氧化物酶复合物C.多聚体D.碱性磷酸酶E.葡萄球菌A蛋白28.在免疫组化中，内源性过氧化物酶活性最强、最容易造成非特异性背景染色的细胞是A.上皮细胞B.淋巴细胞C.红细胞和粒细胞D.平滑肌细胞E.纤维细胞29.用过氧化氢消除内源性过氧化物酶时，其常用浓度（以H2O2计）为A.0.1%B.1%C.3%D.10%E.30%30.细胞涂片或冰冻切片固定时，常选用的固定液是A.10%中性缓冲福尔马林B.95%乙醇C.丙酮D.冷丙酮或甲醇E.Bouin液31.下列哪种染色用于显示组织中黏多糖类物质A.苏丹黑B染色B.醛品红染色C.甲苯胺蓝染色D.普鲁士蓝染色E.PTAH染色32.甲苯胺蓝染色中，肥大细胞颗粒呈现A.蓝色B.异染性紫红色C.黄色D.绿色E.红色33.冰冻切片最常用的切片方法是A.石蜡切片法B.恒冷箱切片法C.火棉胶切片法D.振动切片法E.超薄切片法34.神经组织切片常规制作中，为了防止冰晶形成，固定前常需用A.生理盐水浸泡B.蔗糖溶液浸泡C.纯酒精浸泡D.甲醛浸泡E.二甲苯浸泡35.病理大体标本制作时，保存标本原色最常用的方法是A.甲醛固定法B.酒精保存法C.Kaiserling法D.真空干燥法E.塑封法36.尸检病理检查中，成人常规开颅取脑组织需在死后多少小时内进行效果最佳A.1小时内B.12小时内C.24小时内D.48小时内E.72小时内37.电子显微镜超薄切片制作时，常用的包埋剂是A.石蜡B.火棉胶C.环氧树脂D.碳蜡E.明胶38.电镜标本固定液中，最常用的缓冲系统是A.磷酸盐缓冲液B.二甲砷酸盐缓冲液C.Tris缓冲液D.巴比妥缓冲液E.醋酸缓冲液39.测量组织切片厚度常用的仪器是A.显微镜测微尺B.分光光度计C.游标卡尺D.螺旋测微器E.比色计40.实验室常规使用的高压灭菌锅，其灭菌原理是利用A.干热空气B.高压饱和蒸汽C.紫外线照射D.电离辐射E.微波加热41.在组织处理过程中，二甲苯作为透明剂的主要缺点是A.透明速度慢B.使组织收缩变脆C.对人体无毒害D.易吸水E.价格昂贵42.常规切片出现组织脱片、切片在染色过程中脱落在染色缸里，最不可能的原因是A.载玻片不洁净B.烤片时间不足或温度过低C.组织固定不良D.展片水温过高E.切片过薄43.免疫组化抗体稀释液中加入小牛血清或BSA（牛血清白蛋白）的主要目的是A.防腐B.提高pH值C.封闭非特异性结合位点，降低背景D.增强抗原抗体结合力E.防止抗体沉淀44.分子病理学检测中，提取组织RNA时，为了抑制RNase活性，最常加入的试剂是A.SDSB.Tris-HClC.EDTAD.DEPC（焦碳酸二乙酯）E.TritonX-10045.原位杂交技术中，常用的核酸探针标记物不包括A.同位素32PB.生物素C.地高辛D.荧光素E.辣根过氧化物酶46.荧光原位杂交（FISH）技术中，洗涤切片所用的洗涤液常含有甲酰胺，其主要作用是A.增强荧光信号B.固定细胞核C.调节杂交严谨度，控制探针与靶序列结合的特异性D.消化细胞质E.复染细胞核47.测量细胞核DNA含量最经典的组织化学方法是A.HE染色B.Feulgen染色C.PAS染色D.MGG染色E.甲苯胺蓝染色48.Feulgen染色中，水解DNA常用的试剂是A.1mol/L盐酸B.1mol/L硫酸C.5%三氯醋酸D.1mol/L氢氧化钠E.88%甲酸49.脱落细胞学检查中，痰液涂片常用的固定液是A.Carnoy液B.95%乙醇C.10%福尔马林D.戊二醛E.丙酮50.巴氏染色中，角化前细胞被染成A.浅绿色或蓝色B.粉红色或橘黄色C.紫红色D.棕色E.黑色二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，少选、错选均不得分）51.病理技术工作中，常用的组织固定液属于醛类固定剂的有A.甲醛B.戊二醛C.多聚甲醛D.丙酮E.乙醇52.组织固定不良可能导致的后果包括A.组织自溶B.细胞结构不清C.影响后续染色效果D.免疫组化抗原丢失E.组织过度硬化53.在石蜡切片制作过程中，脱水剂常用的有A.乙醇B.丙酮C.正丁醇D.二甲苯E.异丙醇54.影响HE染色质量的因素有A.染液的浓度和pH值B.染色时间和温度C.分化和返蓝的程度D.组织固定是否及时E.切片厚度55.关于网状纤维银染法（如Gomori法）的叙述，正确的有A.网状纤维呈黑色B.胶原纤维呈棕黄色或红色C.染色原理基于网状纤维表面有嗜银性D.染色过程中需要用氯化金调色E.操作中需用还原剂使银离子还原成金属银56.免疫组织化学染色中产生非特异性背景染色的常见原因有A.内源性过氧化物酶或生物素未彻底灭活B.抗体浓度过高C.洗涤不充分D.组织固定时间过长导致抗原交联过度E.封闭血清使用不当57.提高免疫组化染色特异性、减少假阳性结果的措施包括A.严格执行阳性对照和阴性对照B.优化抗原修复条件C.梯度稀释抗体寻找最佳工作浓度D.延长显色时间至最深E.增加洗涤次数和洗涤液体积58.组织化学染色中，证实组织中脂类物质常用的方法有A.苏丹III染色B.苏丹IV染色C.苏丹黑B染色D.油红O染色E.锇酸染色59.分子病理检测中，提取高质量DNA/RNA的注意事项包括A.尽量选取新鲜或妥善保存的组织B.操作中严格无菌并防止核酸酶污染C.使用DEPC水处理所有耗材D.提取过程避免剧烈震荡导致核酸断裂E.提取后立即进行浓度和纯度测定60.病理技术实验室安全管理中，涉及二甲苯的操作，正确的要求有A.必须在通风橱内进行B.室内加强通风换气C.操作人员佩戴防毒面具或防护口罩D.定期进行职业健康体检E.废液直接倒入下水道排放三、填空题（每空1分，共20分）1.常规石蜡切片过程中，组织处理的步骤主要包括固定、______、透明、______和包埋。2.HE染色中，细胞核的染色机制主要是由于细胞核内的核酸含有______，呈酸性，易被______性染料苏木精着色。3.10%中性缓冲福尔马林固定液配方中，主要溶质为______%，溶剂为磷酸盐缓冲液。4.常用透明剂二甲苯除了具有透明作用外，还可与______和______互溶，起桥梁作用。5.免疫组化染色中，最常用的抗原修复液是______缓冲液（pH6.0）和______缓冲液（pH8.0/9.0）。6.普鲁士蓝反应的原理是组织中的三价铁离子与亚铁氰化钾作用，生成______色的沉淀。7.刚果红染色在偏振光显微镜下，淀粉样物质呈现______色双折光。8.细胞凋亡的经典形态学检测方法是末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法，简称______法。9.组织切片中常见的切片刀痕主要由______或切片刀刃口______引起。10.巴氏涂片检查中，主要包含______固定液和EA/OG染色液，主要用于______系统脱落细胞学检查。11.电子显微镜标本制备要求极高，超薄切片的厚度通常在______nm左右。12.银染技术中，促使银离子还原成金属银的溶液通常称为______液，如Gomori法中的甲醛溶液。13.测量显微镜下细胞大小的常用工具是______，使用前必须用______进行校准。14.组织化学PAS染色中，______酸能够氧化糖原中的乙二醇基生成______，后者与无色品红结合呈现紫红色。15.病理档案管理中，常规石蜡切片和蜡块的最适宜保存温度一般为室温，应特别注意防潮、防______和防虫。四、简答题（每题5分，共25分）1.简述组织固定的目的及常用固定液10%中性缓冲福尔马林（NBF）的优点。2.在常规HE染色中，苏木精染液出现沉淀或氧化过度是常见问题。请简述Harris苏木精染液配制的主要成分及促使苏木精氧化的常用方法。3.简述免疫组织化学染色（IHC）中导致假阴性结果的主要原因（列举至少五点）。4.简述特殊染色PAS（过碘酸-雪夫反应）的基本原理及其在病理诊断中的主要应用。5.在冰冻切片制作过程中，组织内出现冰晶会严重破坏细胞形态。请简述减少或防止冰晶形成的主要技术措施。五、应用分析综合题（每题10分，共30分）1.案例分析与计算综合题某医院病理科接收一例肝脏穿刺活检标本，标本长1.5cm，直径0.2cm。由于临床送检单未注明特殊要求，技术员将其直接投入10%中性缓冲福尔马林固定液中。（1）该标本的固定时间一般应控制在多少小时为宜？固定液体积与标本体积比应为多少？（4分）（2）在脱水机处理程序中，针对此微小穿刺标本，与常规大标本处理程序相比，在脱水、透明和浸蜡时间上应做何种调整？并说明理由。（6分）2.免疫组化技术故障排查与改进题在乳腺癌组织的免疫组化ER（雌激素受体）染色中，技术员发现切片背景非特异性着色严重，呈弥漫性棕黄色，且无法区分阳性与阴性细胞。已知该抗体为新批次，未进行最佳浓度测试。切片内源性过氧化物酶未作处理，洗涤步骤每次仅1分钟。请运用病理技术原理分析导致非特异性背景染色的可能原因，并提出相应的改进措施。（要求列出至少四点原因及对应改进措施）3.实验设计与计算题实验室需配制1000ml的10%中性缓冲福尔马林固定液。现有试剂为：40%甲醛溶液（市售甲醛水溶液）、磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）和蒸馏水。经典配方如下：40%甲醛100ml，磷酸二氢钠4.0g，磷酸氢二钠6.5g，加蒸馏水至1000ml。（1）请写出配制该1000ml固定液的详细操作步骤。（5分）（2）在病理技术中，常用甲醛溶液的浓度标识为40%，但实际配制的固定液要求为10%福尔马林。请利用公式计算并说明，在此配制中，最终混合液中纯甲醛的实际质量体积百分比浓度（w/v）是多少？（假设40%甲醛溶液密度为1.0g/ml，结果保留一位小数）（5分）（正文结束，以下是答案部分）一、单项选择题答案1.B2.B3.C4.C5.C6.B7.C8.B9.A10.A11.B12.C13.B14.B15.A16.D17.C18.C19.B20.A21.B22.A23.A24.E25.B26.C27.A28.C29.C30.D31.C32.B33.B34.B35.C36.C37.C38.B39.A40.B41.B42.E43.C44.D45.E46.C47.B48.A49.A50.B二、多项选择题答案51.ABC52.ABCD53.ABCE54.ABCDE55.ABCDE56.ABCDE57.ABCE58.ABCDE59.ABCDE60.ABCD三、填空题答案1.脱水；浸蜡2.磷酸基（或核酸的酸性基团）；碱3.4（或37-40%甲醛溶液中的纯甲醛比例换算后的标识）；磷酸盐4.乙醇；石蜡5.枸橼酸盐（或柠檬酸盐）；EDTA（或Tris-EDTA）6.蓝（或普鲁士蓝）7.苹果绿8.TUNEL9.组织内有坚硬异物；缺口（或缺损）10.95%乙醇；女性生殖11.50（或50-70）12.还原13.测微尺；镜台测微尺14.过碘；醛基15.霉四、简答题答案1.组织固定的目的：（1）防止组织自溶和腐败，保持细胞和组织的生前形态结构。（2）使细胞内蛋白质、糖、脂肪等成分沉淀和凝固，便于后续染色和观察。（3）使组织硬化，便于切块和切片。（4）固定剂中的某些成分具有媒染作用，可增强组织对染料的亲和力。10%中性缓冲福尔马林（NBF）的优点：（1）渗透力强，固定均匀，组织收缩较小。（2）pH值维持在7.0左右，能较好地保存细胞核的形态和抗原性，尤其适合后续免疫组化和分子病理检测。（3）对脂类和糖类有一定的固定作用。（4）价格低廉，使用方便。2.Harris苏木精染液的主要成分：苏木精、无水乙醇（作为溶剂）、明矾（硫酸铝钾，作为媒染剂）、氧化汞或碘酸钠（作为氧化剂）、冰醋酸（调节pH，促核着色）。促使苏木精氧化的常用方法：（1）自然氧化法：将苏木精染液暴露于阳光或空气中，使其自然氧化成熟。此法耗时数周至数月，但染液稳定性和染色效果较好。（2）化学氧化法：在染液中加入氧化剂（如氧化汞或碘酸钠），使苏木精迅速氧化为苏木红。此法配制后可立即使用，但染液寿命相对较短，易产生沉淀。3.免疫组化假阴性的主要原因：（1）组织固定不及时或固定时间过长，导致抗原交联过度，抗原决定簇被封闭。（2）抗原修复方法不当（如热修复温度不够、时间不足，或酶消化过度破坏抗原）。（3）一抗浓度过低或抗体效价下降，以及抗体孵育时间不足、温度过低。（4）一抗或二抗种属不匹配，或二抗失效。（5）显色剂（如DAB）失效或浓度过低，或过氧化物酶抑制剂（如H2O2）残留影响显色。（6）切片假象：组织边缘干涸导致非特异性着色掩盖，或操作中切片中途干燥导致抗原破坏。4.PAS染色原理：过碘酸是一种强氧化剂，能将组织中的糖原、黏多糖、糖蛋白等含有的乙二醇基氧化成双醛基。生成的醛基与雪夫试剂（无色品红亚硫酸溶液）发生缩合反应，形成紫红色的复合物，从而将含有多糖的组织结构显示出来。主要应用：（1）糖原储积症及糖原沉积性疾病的诊断（需配合淀粉酶消化对照）。（2）黏多糖沉积病的诊断。（3）真菌感染诊断：真菌细胞壁含有多糖，PAS染色呈紫红色，是病理诊断真菌的金标准之一。（4）基底膜的显示：肾穿刺活检中观察肾小球基底膜增厚、双层化等病变。（5）腺泡细胞癌、黏液腺癌等分泌黏液肿瘤的鉴别诊断。5.防止冰冻切片冰晶形成的措施：（1）速冻法：将组织置于液氮或异戊烷-液氮混合物中快速冷冻，使组织瞬间越过冰晶形成带，减少大冰晶产生。（2）应用冷冻保护剂：在切片前将组织浸泡于高渗蔗糖溶液（如20%～30%蔗糖PBS溶液）中进行脱水处理，置换组织水分，降低冰点。（3）干冰乙醇速冻法：将组织放于干冰乙醇浴中冷冻，利用乙醇导热快的特点加速冷冻。（4）切片包埋时使用OCT包埋剂填满组织周边缝隙，避免组织直接暴露于空气中结霜。（5）恒冷箱切片机温度控制：根据不同组织设定适宜的切片温度（一般-15℃至-25℃），避免温度过低引起组织过硬变脆。五、应用分析综合题答案1.（1）固定时间应控制在6～24小时为宜（一般不少于6小时，不超过24-48小时）。对于微小穿刺标本，固定液体积与标本体积比应至少为20:1，以保证固定液充分渗透和维持固定液有效浓度。（2）调整措施及理由：①缩短脱水时间：肝脏穿刺标本微小，若按常规大标本程序脱水时间过长，会