CN116583594B 用于骨髓的提取和低温保藏的系统和方法 （奥瑟姆健康公司）

US2019083530A1,2019.03.212023.08.112023.06.12PCT/US2021/0550812021.10.14WO2022/081909EN2022.04.21提供了用于从获自死亡供体的骨中提取骨2(a)产生所述包含细胞的生物样品的可移植单元，其中所述可移植单元包含第一浓度(b)产生所述包含细胞的生物样品的代用单元，其中所述代用单元包含第二浓度的第浓度相差不超过30以及(c)以共同的优化速率冷却第一容器中的所述可移植单元的所述细胞和第二容器中的(d)将所述可移植单元和所述代用单元储存在同一长期贮藏容器中，所述长期贮藏容器将所述可移植单元的所述细胞和所述代用单元的所述细胞在长期贮藏持续时间期间暴从而为来自所述可移植单元的细胞和来自所述代用单元的细胞提供等同的存活和存的解冻后细胞增殖速率相差不超过30使得所述2.根据权利要求1所述的方法，其中所述可移植单元和所述代用单元在第一冷却速率4.根据权利要求1所述的方法，其中所述可移植单元中的所述细胞的解冻后存活率与所述代用单元中的所述细胞的解冻后存活率相5.根据权利要求1所述的方法，其中所述可移植单元的所述细胞的解冻后细胞增殖速率与所述代用单元的所述细胞的解冻后增殖速6.根据权利要求1所述的方法，其中所述可移植单元的所述细胞和所述代用单元的所7.根据权利要求1所述的方法，其中所述可9.根据权利要求8所述的方法，其中所述第一冷却速率和所述第二冷却速率为一1℃/10.根据权利要求8所述的方法，其中所述第一冷却速率和所述第二冷却速12.根据权利要求11所述的方法，其中所述可移植单元和所述代用单元设置在所述冷3用单元布置在所述静态冷冻机内，使得所述可移植单元和/或所述代用单元不接触所述冷述代用单元的所述包含细胞的生物样品经历相20.根据权利要求1所述的方法，还包括将所述可移植单元和所述代用单元转移至低于86℃的长期贮藏容器的步骤，使得所述代用单元经历与所述可移植单元相同的温度波4[0002]本申请要求2020年10月14日提交的美国临时申请号63/提交的美国临时申请号63/110,571；2020年12月23日提交的美国临时申请号63/130,255；以及2021年3月30日提交的美国临时申请号63/168,178的权益。所述四件优先权申请各自[0004]本发明是依照美国国立卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)的合同号[0005]出于临床目的骨髓目前是从HLA匹配的兄弟姐妹或者最佳匹配的非亲属供体采问题涉及可从低温保藏的供体骨中获得的存活的细胞诸如H述第一浓度相差不超过30以及以第一冷却速率冷却所述第一体积并且以第二冷却速率体积中细胞的解冻后细胞增殖速率与所述第二体积中细胞的解冻后增殖速率相差不超过5胞的解冻后存活率与第二体积中细胞的解冻后存活率相差不超过25％。在一些实施方案中，第一体积中细胞的解冻后存活率与第二体积中细胞的解冻后存活率相差不超过20％。体积中细胞的解冻后细胞增殖速率与第二体积中细胞的解冻后细胞增殖速率相差不超过一体积中细胞的解冻后细胞增殖速率与第二体积中细胞的解冻后细胞增殖速率相差不超方案中，第一冷却速率和第二冷却速率包括约一1℃/min至约一2℃/min的亚冷冻(sub一6方法还包括将第一体积布置在静态冷冻机内，使得第一体积不接触一个或多个冷冻机的[0009]本公开内容的另一方面包括一种用于加工骨髓或其衍生物的方法，所述方法包产生骨髓或其衍生物的第二体积，其中所述第二体积小于所述第一体积并且包含第二浓度，其中所述第二浓度与所述第一浓度相差不超过30以及以第一冷却速率冷却所述第积中骨髓源性细胞群的解冻后存活率与第二体积中骨髓源性细胞群的解冻后存活率相差髓源性细胞群的解冻后存活率与第二体积中骨髓源性细胞群的解冻后存活率相差不超过源性细胞群的解冻后细胞增殖速率与第二体积中骨髓源性细胞群的解冻后增殖速率相差积中骨髓源性细胞群的解冻后细胞增殖速率与第二体积中骨髓源性细胞群的解冻后增殖7速率包括约2.5℃/min至约4℃/min的超冷冻速率，直至至少冰已经在冷冻介质中成核。方法还包括将第一体积布置在静态冷冻机内，使得第一体积不接触一个或多个冷冻机的差不超过30以及以第一冷却速率冷却所述第一体积并且以第二冷却速率冷却所述第二冻后细胞增殖速率与所述第二体积中MSC的解冻后增殖速率相差不超过30％。在一些实施8方案中，第二体积小于第一体积的30％。在一些实施方案中，第二体积小于第一体积的MSC的解冻后存活率与第二体积中MSC的解冻后存活率相差不超过20％。在一些实施方案差不超过15％。在一些实施方案中，第一体积中MSC的解冻后细胞增殖速率与第二体积中体积中MSC的解冻后细胞增殖速率与第二体积中MSC的解冻后增殖速率相差不超过5％。在9[0011]本公开内容的另一方面包括一种用于加工包含细胞或其衍生物的生物样品的方的所述第一浓度相差不超过30产生细胞特定的冷冻曲线；以第一冷却速率冷却所述第方案中，第一体积中细胞的解冻后存活率与第二体积中细胞的解冻后存活率相差不超过细胞或其衍生物的生物样品和第二体积中的包含细胞或其衍生物的生物样品经历相同的贮藏容器低于86℃。中所述低温保藏包括在静态温度冷冻机中以大于约一1℃/min的冷冻速率降低骨髓或其衍约3.5℃/min的超冷冻速率下冷却骨髓或其衍生物，冻机内，骨髓或其衍生物的等分试样没有直接贮藏在骨髓或其衍生物的另一等分试样上髓或其衍生物解冻之后CD34+细胞群包含至少80％的存活的CD34+细胞。在一些实施方案白的骨产物相关的泡沫或泡沫状物；以及重复i和/或ii直至未检测到泡沫或泡沫状物为以增强与经漂白的骨产物相关的任何泡沫或泡沫状物的可细胞/ml骨髓或其衍生物包含至少90％的存活的[0016]本公开内容的另一方面包括一种用于加工从骨髓或其衍生物中获得的CD34+细胞行CD34+细胞分离测定法以产生包含CD34+细胞群的细胞组合物，其中包含CD34+细胞群的组合物包含至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其衍生物。在一些实施方案中，至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其实施方案中，至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其衍生物施方案中，核酸酶是Benzonase@或Denarase@.在一些实施方案中，稳定化缓冲剂还酶是Benzonase@或DenaraseE.在一些实施方案中，稳定化缓冲剂还包含大于约[0018]本文所述的任何方面或实施方案可以与本文公开的任何其他方面或实施方案组公开内容能够具有其他不同的实施方案，并且其若干细节能够在各种明显的方面进行修[0027]图7A和图7B是根据本公开内容的一个方面的自动化骨加工系统的侧视图和透视[0031]图11A图11C是在有和无身体冷却的情况下随着热缺血和冷缺血时间而变化的[0032]图12A图12C是在有和无身体冷却的情况下随着热缺血和冷缺血时间而变化的[0033]图13A图13C是在有和无身体冷却的情况下随着热缺血和冷缺血时间而变化的[0034]图14显示了86℃EppendorfCryocube型号F740hi的一个搁架中的HPC骨髓[0035]图15显示了86℃EppendorfCryocube型号F740hi的一个搁架中的盒位置的示[0037]图17A图17E显示了当用稳定化缓冲剂从冷冻样品中加工骨髓细胞时防止了聚集剂加工的骨髓细胞样品中在过滤之后缺乏截留的聚集体。图17C和图17D显示了用[0042]图22显示了在活供体对比于死亡供体BM中CD45+白细胞、CD34+HSPC和CD3+T细胞[0044]图24显示了从器官供体(OD)和活供体(LD)BM中分离的CD34+HSC的相似存活率和[0045]图25显示了在注射CD34+细胞之后16周受辐射的NSG小鼠的骨髓中人CD45+细胞的[0046]图26显示了在对NSG小鼠辐射和用CD34+细胞移植之后16周在骨髓(BM)、外周血[0047]图27描绘了次级移植。在注射来自植入来自所示供体的CD34+细胞的小鼠的总骨[0052]本文公开的组合物、系统和方法提供了从本领域中已知的骨髓和HSC的分离和加工技术(尤其用于从活供体中加工骨髓和HSC的产生本文所述的骨髓和HSC组合物的加工技术的多种实械地加工，其中骨髓和/或骨髓源性细胞(例如HSC)被过滤而产生存活的骨髓(以及骨髓中或附近包含的HSC)组合物。骨和细胞组合物被进一步机械地/酶法地加工而产生最佳产量[0055]本文所述的这些优化的组合物、系统和方法为医学执业者(例如免疫学、再生医文所述的组合物、系统和方法产生的骨髓储库还将具需要对代用品进行解冻和测定例如细胞存活率以便该细胞类型或细胞产品存活于低温保藏。此最佳冷却速率使细胞内冰形成(IIF)所致二体积以至少确定对低温保藏袋的贮藏是否适当地维持并且不必操纵和测试第一体积的的存活率和效用。第二，因为对象可能在移植之前经受清髓性预处理(myeloablativeconditioning)，所以患者可能预先阻止清髓性预处理直至细胞产品已经被测定和确定为积或第二体积的不同类型的容器和/或使容器就位在相同冷冻机(例如，静态温度冷冻机)第二体积/代用小瓶)中的细胞与较大体积(即，第一体积/低温IIF所致的损伤。在另一方面，较大的第一体积(低温液氮贮藏罐)中并且在长期贮藏装置内就位在案中，本文公开的过程的完成导致在标准血袋中以1_1.5亿个总成核细胞/ml的目标贮藏中有技术的组织加工技术人员可以在6小时窗口内加工一系列供体骨而产生有意义数量的训练有素的器官获取组织(OPO)的人员使用骨凿和木槌从同意的器官和组织供体中回收。更详细地描述的，经过预定时期的热缺血和/或冷缺血的骨适合于获得有意义数量的存活图1A至图1D中所示的手工工具去除椎弓根。特别注意要避免破坏皮质骨而可能暴露骨松葡萄糖酸氯己定溶液在冲洗盆中或上方剧烈地擦洗尸体骨的所有表面约3分钟。第一名技没在包含过氧化氢的溶液中包括：将经漂白的骨产物浸没在包含过氧化氢溶液的容器中；[0072]经预加工的或未经预加工的VB被置于无菌袋中并且浸没在约10％漂白剂溶液[0073]从在漂白剂处理的不同持续时间下加工的每组VB而来的骨髓可以通过流式细胞段允许漂白剂填充VB的孔或裂缝而进一步将VB去污率与从在10分钟漂白剂处理下处理的VB中分离的骨髓细胞的存活率相比未降低或者降低分钟漂白剂处理下处理的VB中分离的骨髓细胞的存活率相比降低小于2％。在一些实施方骨中提取的骨髓或其衍生物中包含的存活的CD34+细胞的百分比为至少约80％至约85％、约80％至约90％、约80％至约95％、约85％至约90％、约85％至约95或者约90％至约在漂白剂中的骨中提取的骨髓或其衍生物中包含的存活的CD34+细胞的百分比为至少约一些情况中，H2O2溶液包含PLASMA_LYTETM和人血清白蛋白(HSA)，其是稳定化剂和贮藏剂(它可以在H2O2溶液中被稀释而达到2.5％HSA)。将所述袋封闭并且短暂震摇以确保骨的整并且短暂震摇以确保整个骨与PLASMA_L产物浸没在包含过氧化氢溶液的容器中；检测与经漂白的骨产物相关的泡沫或泡沫状物；惰性造影染料添加至包含过氧化氢的溶液以增强与经漂白的骨产物相关的任何泡沫或泡[0083]可以在足以使低温防护剂溶液能够渗入尸体骨中的时间长度期间和条件下使尸况中，足以允许低温防护剂溶液渗入的条件包括使用真空辅助的低温防护剂渗入尸体骨中存在的水的至少一部分；(c)升高封闭容器中的压力并且使封闭容器保持在升高的压力足以去除尸体骨中存在的水的至少一部分。封闭容器中的减压可以具有以下值：约_99％或约100％DMSO。低温防护剂溶液可以包含约10％DMSO。低温防护剂溶液可以包含约如，HSA)或人血小板裂解物的成分。商业上可获得的人血小板裂解物产品的实例是[0098]在一个实例中，低温防护剂溶液包含约20％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0099]在另一实例中，低温防护剂溶液包含约40％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0100]在又一实例中，低温防护剂溶液包含约60％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0101]在另一实例中，低温防护剂溶液包含约80％DMSO和约10％人血小板裂解物在22S或氦气22S或氦气如，HSA)或人血小板裂解物的成分。商业上可获得的人血小板裂解物产品的实例是[0113]在一个实例中，低温防护剂溶液包含约20％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0114]在另一实例中，低温防护剂溶液包含约40％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0115]在又一实例中，低温防护剂溶液包含约60％DMSO和约10％人血小板裂解物在[0116]在另一实例中，低温防护剂溶液包含约80％DMSO和约10％人血小板裂解物在的动态的数据示于PCT/US2021/04206[0124]尸体骨可以暂时地获得约_5℃至约_15℃的温度，但是这发生在尸体骨的温度连到约_5℃至约_15℃的温度(随着骨继续冷却至期望的温度。液氮或液氮蒸气中，例如，在约_200℃的温度。显示后续冷却期的动态的数据示于PCT/US2021/042064在图6B中。在一些实施方案中，后续冷却期可以发生在合适的静态冷冻机[0127]低温保藏的尸体骨可以无限期地保存在液氮、液氮蒸气或合适的静态冷冻机法提供多约101％的存活的细胞到多约200％的存活的细胞，例如，多约101％、102％、有约35℃至约45℃的温度的研磨介质中持续足够的时间以使尸体骨碎片变暖至约20℃的℃的温度。引用而以其整体并入本文中)中所述的定制骨切割工具用来将低温保藏的尸体骨分割成较小块。另一种骨切割工具可以与如US2019/0343112中所述的定制骨切割工具组合或代替[0142]当施加小于50lbf时，用于分割低温保藏的尸体骨的手动骨切割装置能够产生高的中央部分向外伸展。当一个或多个切割刀片将低温保藏的尸体骨分割成大致扇形的碎的碎片转移至具有约35℃至45℃的温度的研磨介质中持续足够的时间以使尸体骨碎片变暖至约20℃的表面温度。或者，尚未被分割的整体低温保藏的骨转移至具37℃至约40℃的温度。[0145]使尸体骨碎片在约100℃/min至约500℃/min的速率下变暖至约20℃的表面温度。480℃/min、490℃/min和约500℃/min。在一些实施方案中，变暖速率为约400℃/min至约据示于PCT/US21/42064的图15骨研磨机碎裂。为了简化该过程并且为了增加对加工人员的安全性，提供了如US2019/0343112(其通过引用而以其整体并入本文中)中所述的定制骨切割工具来将VB切割成较小块。另一种定制骨切割工具可以与如US2019/0343112中所述的定制骨切割工具组合使用[0159]将由骨切割工具产生的块立即置于无菌罐中并且浸没在300_500ml的研磨介质以各种量使用其他抗凝剂。HSA提供蛋白质来源以防止细胞粘附和吸附至表面以及反应性氧清除。注意到，常规研磨介质使用DNA酶，但是对于本公开内容，Benzonase@或是因为IMDM适合用于快速增殖高密度细胞培养物并且理想地用于支持T淋巴细胞和B淋巴[0164]在一些实施方案中，在研磨介质中BenzonaseE或Denarase@的量为约11U/45U/ml至约55U/ml，或者约50U/ml至约55U/ml。在一些实施方案中，在研磨介质中[0165]注意到，Denarase@试剂(C_LectaGmbH)与本过程中相同量的Benzonase®[0167]在一些实施方案中，HSA以约0.5％[0168]在研磨之后保留另一罐300_500ml的研磨介质以收集骨碎片，并且保留另外供给约100ml的研磨介质以供在研磨过程期间冲洗研磨机以防止骨碎片粘附于研磨部件的罐表[0169]可以在ISO_7洁净室内在ISO_5环境中使用电动骨研磨机例如BiorepTechnologiesInc,(Miami,FL)的研磨机。如果加工来自相同供体的VB和髂执行的过程中可能为大约1000ml)转移至无菌包装中以供后续加工和分析。对每袋的内容物进行目视检查以证实该内容物不包含任何可见滤器是200μm或500μm过滤器。这两个在线过滤器初始都是500μm以便首次通过过滤器系统的输出管线177可以与转移包装容器180的容器夹具181接合。转移包装容器可以是600_[0175]来自经过滤的骨髓产品的总成核计数(TNC)可以如下进行计算：TNC(×103个细包括在加工骨髓的研磨和过滤部分期间机械地搅动骨研磨屑和/或骨研磨滤液。在一些情可以通过离心(例如旋转)进行机械地搅动。在一些实施方案中，骨研磨屑可以以至少[0182]在一些实施方案中，对骨研磨屑的机械搅动增加获得的表达CD34的骨髓细胞数。研磨屑的机械搅动而获得的表达CD34的骨髓细胞数增加至少约10％、20％、30％、40％、细胞数相比，通过对骨研磨屑的机械搅动而获得的表达CD45的骨髓细胞数增加至少约[0185]在某些实施方案中，获得的骨髓或其衍生物的CD34+细胞/ml的量为至少约100,在一些实施方案中，获得的骨髓或其衍生物的CD34+细胞/ml的量为至少约1,500,000个的CD34+细胞/ml的量为至少约1,500,000个CD34+细胞/ml至约1,750,000个CD34+细胞/ml、95或者约90％至约95％。在一些实施方案中，CD34+细胞的存活率为至少约70％、约[0187]为了质量控制，在注射部位157使用注射器从无菌包装152中提取少量(例如胞计数来进行质量控制。还可以评估测试样品的人白细胞抗原、CCR5δ32突变和载脂蛋白钟、约35分钟或约40分钟。在一些情况中，包含提取的骨髓的袋可以通过以600xg(约25％至约75％、约25％至约100％、约50％至约75％、约50％至约100或者约75％至约体可以被标示为潜在地未通过整体质量控制。设想到在每袋中预定体积的骨髓，例如在250ml袋中包含70ml。此预定体积用于计算对骨髓沉淀的有效低温保藏所需的冷冻介质组从供体中获得的低温保藏袋的8％至约9％或者约9％至约10％DMSO。在一些实施方案中，所述冷冻介质包含约1％至约[0206]冷冻介质可以基于下式以预定速率(10％的冷冻介质体积/分钟)添加至骨髓散装分钟的时间期间以10％的介质/分钟的速率添加冷冻介质。一旦该介质已经与浓缩的骨髓个低温保藏袋密封而产生四个隔室，然后将其分隔以贮藏在待贮藏在低温冷冻机中的盒以便该细胞类型或细胞产品存活于低温保藏。此最佳冷却速率使细胞内冰形成(IIF)所致二体积以至少确定对低温保藏袋的贮藏是否适当地维持并且不必操纵和测试第一体积的阻止清髓性预处理直至细胞产品已经被测定和确定为适合于使用为止，这通常耗时约两积或第二体积的不同类型的容器和/或使容器就位在相同冷冻机(例如，静态温度冷冻机)第二体积/代用小瓶)中的细胞与较大体积(即，第一IIF所致的损伤。在另一方面，较大的第一液氮贮藏罐)中并且在长期贮藏装置内就位在于一86℃静态冷冻机中。袋被置于盒中，该盒可以缺少隔热，而代用小瓶分别地置于约15℃。髓或其衍生物解冻之后CD34+细胞群包含至少70％的存活的CD34+细胞。在一些实施方案至低于130℃的温度以进行贮藏。一旦冷冻的第一步骤(例如，在相同86℃静态冷冻机[0218]在一些实施方案中，用于冷冻骨髓或骨髓细胞的温度包括实施例5中所示的温度℃/min、约2℃/min至约3℃/min、约2℃/min至约3.5℃/min、约2℃/min至约4℃/冻速率为约2.54℃/min至约4.09℃/min。冷冻速率包括1.13℃/min至1.62℃/min的范围。约17.52℃的范围。或骨髓细胞的低温保藏袋可以被置于如图1或<150℃。[0228]本公开内容的另一方面包括一种用于加工包含细胞或其衍生物的生物样品的方的所述第一浓度相差不超过30以及以第一冷却速率冷却所述第一体积并且以第二冷却体积中细胞的解冻后细胞增殖速率与第二体积中细胞的解冻后细胞增殖速率相差不超过therapeutics:Factorstoconsiderduringcryopreservationandstorageofhuman[0230]具有至少两体积的生物样品允许测试生物样品的子集(第二体积)而不必操纵要的约1％、第一体积的约50％至第一体积的约0.5％、第一体积的约40％至第一体积的约体积中细胞的解冻后存活率相差不超过约0.5％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差体积中细胞的解冻后存活率相差约30％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约15％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约30％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差率相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约30％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约30％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约25％至与第二体第二体积中细胞的解冻后存活率相差约15％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约相差约25％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约25％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约25％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5％、与第二体积二体积中细胞的解冻后存活率相差约20％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约20％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约20％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约15％至与第二体积二体积中细胞的解冻后存活率相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约15%至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约15％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约10％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约10％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约10％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5％、与第二第二体积中细胞的解冻后存活率相差约5％至与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约0.5或者与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1％至与第二体积中细胞的解冻后存二体积中细胞的解冻后存活率相差约20％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1或者与第二体积中细胞的解冻细胞的解冻后存活率相差不超过至少约30％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约第一体积中细胞的解冻后存活率与第二体积中细胞的解冻后存活率相差不超过至多约存活率相差约5％、与第二体积中细胞的解冻后存活率相差约1或者与第二体积中细胞方案中，第一体积中细胞的解冻后存活率与第二体积中细胞的解冻后存活率相差不超过存活率为至少50％。存活率可以涉及功能存活率(其衡量细胞增殖的能力)和常规存活率[0233]在一些实施方案中，细胞的解冻后增殖速率(其代表细胞的功能存活率)为至少胞至约200CFU_GM/105个细胞。GM/105个细胞至约10CFU_GM/105个细胞、约1CFU_GM/105个细胞至约20CFU_GM/105个细胞、约1CFU_GM/105个细胞至约30CFU_GM/105个细胞、约1CFU_GM/105个细胞至约40CFU_GM/105约10CFU_GM/105个细胞至约40CFU_GM/105个细胞、约10CFU_GM/105个细胞至约50CFU_GM/105个细胞、约10CFU_GM/105个细胞至约60细胞至约90CFU_GM/105个细胞、约10CFU_GM/105个细胞至约100CFU_GM/105个细胞、约10CFU_GM/105个细胞至约200CFU_GM/105个细胞、约2个细胞、约20CFU_GM/105个细胞至约40CFU_GM/105个细胞、约20CFU_GM/105个细胞至约GM/105个细胞至约90CFU_GM/105个细胞、约20CFU_GM/105个细胞至约100CFU_GM/105个细个细胞至约80CFU_GM/105个细胞、约30CFU_GM/105个细胞至约90CFU_GM/105个细胞、约30CFU_GM/105个细胞至约100CFU_GM/105个细胞、约30CFU_GM/105个细胞至约200CFU_GM/105个细胞、约40CFU_GM/105个细胞至约50GM/105个细胞至约100CFU_GM/105个细胞、约40CFU_GM/105个细胞至约200CFU_GM/105个细胞、约50CFU_GM/105个细胞至约60CFU_GM/105个细胞、约50CFU_GM/105个细胞至约70CFU_GM/1055个细胞、约50CFU_GM/105个细胞至约80CF60CFU_GM/105个细胞至约80CFU_GM/105个细胞、约60CFU_GM/105个细胞至约90CFU_GM/105个细胞、约60CFUGM/105个细胞至约100CFUGM/105个细胞、约60CFUGM/105个细胞至约70CFUGM/105个细胞至约200CFUGM/105个细胞、约80CFU个细胞、约80CFUGM/105个细胞至约100CFUGM/105个细胞、约80CFUGM/105个细胞至约98％、99％或100％。第一冷却速率和第二冷却速率可以相差约100％至约200例如，亚冷冻速率包括1.13℃/min至1.62℃/min的范围。[0238]在一些实施方案中，细胞的解冻后存活率(例如，细胞的功能存活率)为至少约设定在86℃。在一些情况中，一个或多个冷冻机可以被设定在约或其衍生物的生物样品和第二体积中的包含细胞或其衍生物的生物样品经受相同的冷却温保藏袋和代用小瓶在_1℃至_5℃的速率下冷却。胞的存活率相比，通过本文所述的冷冻速率低温保藏的骨髓细胞的存活率增加至少约的数量相比，本文所述的低温保藏骨髓或骨髓细胞的方法增加解冻后CD34+骨髓细胞的数与未通过本文所述的冷冻速率低温保藏的CD45+骨髓细胞的数量相比，通过本文所述的冷的骨髓产品的示例性方法可以在PCT/US2020/025778和在Woods等人，“Ischemiaconsiderationsforthedevelopmentofanorganandtissuedonorderivedbone[0248]本公开内容设想了一种用于回收骨髓以及甚至从骨髓中选择细胞的自动化过程。内容的自动化清洁站包括被配置为产生在不同距离处产生高集中冲击力的直接流或窄“V”[0251]细磨的VB段和加工介质被收集在收集盘252中，并且板253可以被移动到筛分站漏斗266将过滤的内容物导向收集容器268。将由过滤器保留的研磨屑在筛分站260内用不分或全部经加工的骨髓可以通过使用自动化细胞选择方法来进一步加工用于专门的细胞[0253]收集容器268的内容物(其基本上是骨髓浆料)被手动或自动地传送到相邻的滚筒[0254]关于包装的其他教导公开在Woods,E.J.和SThirumala.“Packagingconsiderationsforbiopreservation.”TransfusionMe[0256]在一些方面中，本文描述了一种加工(例如分离)从骨髓或骨髓衍生物中获得的定化缓冲剂中接触和悬浮的骨髓细胞可以通过附接至抗体例如缀合的抗体而被分离。例其中表达CD34的骨髓细胞随后被磁性分离柱(例如"cliniMACS@")捕集。不表达CD34[0257]本公开内容中描述的方面包括一种用于加工从骨髓或其衍生物中获得的CD34+细进行CD34+细胞分离测定法以产生包含CD34+细胞群的细胞组合物，其中包含CD34+细胞群的组合物包含至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其衍生胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其衍生物包含至少80％的存活的CD34+细胞。在一些实施方案中，至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化缓冲剂接触的骨髓或其衍是BenzonaseE或DenaraseE。在一些实施方案中，稳定化缓冲剂还包含大于约10U/ml[0259]在一些实施方案中，稳定化缓冲剂包含核酸酶。在一些实施方案中，核酸酶是Benzonase®或DenaraseE。在一些实施方案中，稳定化缓冲剂包含约3U/ml、4U/ml、[0263]本公开内容的另一方面包括一种用于加工骨髓或其衍生物中包含的CD34+细胞群CD34+细胞分离测定法以产生包含CD34+细胞群的细胞组合物，其中包含CD34+细胞群的组合物包含至少约80,000个CD34+细胞/750μl的与稳定化[0265]在一些实施方案中，与在不存在稳定化缓冲剂的情况下加工的CD34+骨髓细胞的数量相比，本文所述的用稳定化缓冲剂加工或接触骨髓或骨髓细胞增加CD34+骨髓细胞的与在不存在稳定化缓冲剂的情况下加工而获得的CD45+骨髓的数量相比，用稳定化缓冲剂包含从用稳定化缓冲剂加工的骨髓样品而得的CD34+细胞的细胞组合物具有增加量的CD34细胞量为至少约70,000个CD34+细胞/750μl的与本文所述的稳定化缓冲剂接触的骨髓或其本文所述的稳定化缓冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量为至少约70,000个细胞/000个细胞/750μl至约85,000个细胞/750μl、约70,000个细胞/750μl至约90,000个细胞/90,000个细胞/750μl至约95,000个细胞/750μl、约90,000个细胞/750μl至约100,000个细与本文所述的稳定化缓冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量为至少约70,000个细从与本文所述的稳定化缓冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量为至少约70,000个细冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量为至多约75,000个细胞/750μl、约80,000个细从用稳定化缓冲剂加工的骨髓样品而得的CD34+细胞还表现出更定化缓冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量包含至少约70％至约95％的存活率百分施方案中，从与本文所述的稳定化缓冲剂接触的骨髓样品中分离的CD34+细胞量包含至多发现在CD34选择之前通过使用密度减小的Ficoll进行细胞分离有益于从新鲜制备的死亡清除掉所有软组织，而后切成小块，随即将其浸没在500ml研磨介质中。研磨介质可以是PLASMA_LYTETMA注射液，pH7.4，多种电解质，注射液离心以使细胞浓缩至2_3x108/m常规密度减小。具体地，减小该密度是通过将Ficoll_PaquePLUS(密度1.077g/mL,GECompany)与PlasmaLyte_AInjectionpH7.4(BaxterHealthcare2B2544X)以特定比例[0273]可以使用SysmexXP_300对分离的血沉棕黄层中的成核细胞进行计数。CellometerVision(Nexcellom)或流式细胞仪可以用于确定纯化的CD34细胞的细胞计数。商的方案，使用CliniMACS系统(Miltenyi,BergischGladbach,Germany)或EasySepCD34试剂盒(StemcellTechnologies,Vancouver,BC,Canada)通过阳性免疫分离法来选择CD34+细胞。出人意料地，根据在各种Ficoll密度下测试，已确定本公开内容中设想的较低的死亡供体骨髓中初始地获取CD34+细胞。BM可以被低温冷冻，然后可以利用常规密度Ficoll_Paque而随后获取CD34+细胞。在冷冻之前使用修改的Ficoll密度或者在冷冻和解统和适应性免疫系统二者相关的淋巴细胞之间的相互作用而发挥有效的免疫抑制性和抗的vBA_MSC可以通过流式细胞术、成纤维细胞集落形成单位(CFU_F)潜力、群体倍增时间细胞可以在增补有人血小板裂解物和表皮生长因子和/或成纤维细胞生长因子的Alpha_其由纯化的溶组织梭菌胶原酶和多粘类芽孢杆菌(Paneibacilluspolymyxa)中性蛋白酶酶)以及溶液体积(ml)与骨碎片重量(mg)的最佳比[0283]根据本公开内容的一个方面，确定了中性蛋白酶浓度和胶原酶浓度(C1和C2胶原酶)以及溶液体积(ml)与骨碎片重量(mg)的比术文章中查到，“Identificationandcharacterizationofalargesourceofprimarymesenchymalstemcellstightlyadheredtobonesurfacesofhumanvertebralbodymarrowcavities”bioRxiv2020.05.04.076950；/10.1101/[0288]根据该过程，将VB骨的碎片(新鲜碎片或低温保藏的碎片)置于低温防护剂溶液开内容，总缺血被定义为起始于死亡时间(亡时间并终止于将骨回收并包装在冰上时或终止于将身体置于冷却器中时；(b)身体冷却整的CFU模型中，基于设施可能具有不同学习轨迹的假设，系数β2对应于在特定设施的经[0302]将这些模型应用于观察到的数据可以用于确定缺血时间变量对％CD34+的影响，WIT(热缺血时间)限制在小于八(8)小时并将CIT(冷缺血时间)限制在小于40小时优化了从[0304]本文公开的模型预测了存活率，其中80％CD34+细胞存活率阈值被确定为可接受[0305]本公开内容的预测细胞存活率的方法的进一步细节在Woods等人，“Ischemiaconsiderationsforthedevelopmentofanorganandtissuedonorderivedbone[0308]本文公开的储存BM提供了一种向尚未鉴定活供体匹配的患者提供BM的现成机预后不良的许多患者，通过允许按需移植并使这些患者的等待时间从多个月缩短至仅1_2[0309]本文公开的方法和系统能够实现为国家应急准备工作提供大量的按需骨髓(BM)其他有前景的方法和治疗有可能大大增强尸体BM采购和使用提议的方法进行储存的价值，且在不同的供体之间差异很大。还已经确定，与开的过程的完成导致最终产品配置的低温保藏，其是在标准血袋中以1_1.5亿个总成核细胞(TNC)/ml的目标贮藏60_70ml体积，类似于已经用于自体移植的低温保藏的BM的产品配[0316]本文所述的任何方面或实施方案可以与本文公开的任何其他方面或实施方案组至少约10至少约20或至少约30或至少约40或至少约50或至少约60或至少约70或至少约80或至少约90或者高达并包括100％增加或介于10_100％之史对照相比减少至少10例如，减少至少约20或至少约30或至少约40或至少约50或至少约60或至少约70或至少约80或至少约90或高达并包括100％减选地下降到被接受为对无给定疾病的个体而言的正常范围内的包括以下步骤：从死亡供体中获得骨；加工骨以从骨中提取骨髓细胞；获得具有1.063_实施方案中，获得密度降低的Ficoll包括将1.077g/mL的密度的Ficoll_Paque与PLASMA_惰性造影染料添加至过氧化氢溶液以增强容器中的任何泡沫的可见度。在一些实施方案一些实施方案中，一系列在线过滤器包括具有200μm过滤器或500μm过滤器的两个过滤器。沉淀之前，将夹子置于袋上在脂肪层下方以夹紧袋并且防止脂肪层随着取出沉淀而通过。藏骨髓细胞组合物包括：将预定体积的冷冻介质制备为冲洗介质和低温保藏组合物的溶柄的每个连续枢轴处使多个齿中的每个齿接合至固定柄，其中每个第一枢轴包括细长销，[0335]本公开内容的另一方面包括一种用于从尸体骨或尸体骨碎片中高产量回收干细[0336]本公开内容的另一方面包括一种用于从尸体骨或尸体骨碎片中高产量回收干细核酸酶是BenzonaseE、或DNA酶。在一些实施方案中，电解质介质是法包括：将热缺血时间(WIT)限制在小于八小时并将冷缺血时间(CIT)限制在小于40小时。在一些实施方案中，WIT起始于死亡时并且终止于当尸体骨被回收并置于冷却环境或条件[0338]本公开内容的另一方面包括一种用于从尸体骨或尸体骨碎片中回收椎骨粘附的[0339]本公开内容的另一方面包括一种用于优化从尸体骨或尸体骨碎片中回收干细胞度上就如同每件单独的出版物、专利或专利申请被明确地且单独地指明通过援引而并入。[0354]8.对整个VB的数量进行计数并确定回收的水平[0355]9.用70％的IPA喷洒天平(CS_5000型号)，并放[0375]7.验证1L的研磨介质是否已被使[0377]1.打开骨髓收集试剂盒，并使用VWR_3000P天平记录一个空的600mLTRANSFER_[0379]3.记录每个填充的600mLTRANSFER_PACK的质量(g)，并计算所有6个TRANSFER_[0383]7.目视检查每个TRANSFER_PACK中的骨髓(计算TNC(使用相同数量的来自QC1SysmexWBC浓度的有效数字)。处理可以在获得该结果[0385]9.在收集的六个TRANSFER_[0389]2.在室温下将离心机设置为500xg持续15分钟，其中制动器设置为4。离心[0392]5.将空的、新的600mLFenwal袋(脂肪后(post_fat)中间袋)焊接到离心的[0395]8.将下一个离心的TRANSFER_PACK焊接到在E.6中用于收集沉淀物的同一个后脂[0404]5.对每个后脂肪中间袋[0408]9.使用新的50mL注射器将来自三个小袋中的每一个的沉淀物混合到预先称重的[0422]2.将在H.3[T]中计算的DMSO的体积添加到冷冻介质瓶中。轻轻倒置瓶一次以混[0440]11.通知QC袋已准备好用于[0442]13.将低温保藏袋置于盒中和/或直接置于搁架上(参见图14和图15)放入Styrofoam箱中并且将代用小瓶分隔地置于coolcellg冷冻贮藏系统中并在盒的箱子前[0448]此实验的范围涵盖在将椎体在5,000ppm漂白剂溶液中浸泡不同时间长度之后测细胞和嗜碱性粒细胞)上存在的抗原。它在信号转导中发挥作用并且在造血祖细胞上弱表达。CD34是骨髓和血液中在未成熟的造血前体细胞和所有造血集落形成细胞上存在的抗表达在早期祖细胞上最高，并随着细胞的成熟而减少。在完全分化的造血细胞上不存在[0449]根据实施例1的组织加工的B_2对椎体进行清理。制备了10％漂白剂溶液和3％过[0450]从加工的每组VB而来的骨髓通过流式细胞术进行测试以评估存活率。如表4中所[0453]实施例3.使用CliniMACSplus从来自死亡供体的新鲜的或解冻的BM中进行CD34[0454]本文描述了从来自死亡供体的新鲜的或解冻的骨髓(BM)中分离表达CD34的细胞[0466]3)使用注射器和针，将20mlBenzonase(1000U/ml)和20mlHSA(25％)注射至每个[0480]1)在研磨和去除脂肪之后，将骨髓细胞悬浮液在血液收集袋中在300xg下离心15[0485]6)通过从此部分的步骤5中获得的重量减去初始重量来确定细胞制备袋1中细胞[0487]8)使用1.0ml注射器通过采样部位联接器而抽取0.5ml骨髓并转移至1.5ml[0490]10)如表5中所示基于总T细胞和CD34+细胞计数而将细胞制备袋1中的体积减小至[0498]5)通过使用附接至转移端口的100mL注射器抽取而将来自2个解冻的低温保藏袋[0501]8)通过从步骤7中获得的重量(1gram＝1mL)减去初始重量来记录细胞制备袋1中[0502]9)通过在摇床上震摇时添加10％体积/分钟而缓慢地向细胞制备袋1填充等体积[0514]E.在5分钟后，使用20ml注射器，通过采样部位联接器对于标准规模将1小瓶[0523]N.在BSC内，使用1mL注射器将0.5ml骨髓转移至1.5mlEppendorf管以进行前_[0530]根据实施例1的B_2和B_3，并且使用所附的用于研磨和过滤的方案，从尸体椎体在研磨时冲洗研磨机。剩余100mL的研磨介质将被留出用于在研磨所有碎片之后最终冲洗[0542]1)用70％IPA彻底地喷洒无菌的白盖容器或不锈钢瓶和2个骨髓(BM)过滤套件并[0544]3)对于袋编号2(实验)，无菌地将研磨介质和BM研磨屑从罐中倒至白盖容器或不[0547]6)使用大无菌漏斗，小心地将研磨介质和BM研磨屑倒入收集容器中(不要将骨添[0553]12)打开收集容器盖并插入无菌漏斗。小心地将冲洗介质和BM研磨屑倒入收集容[0555]14)小心地将冲洗介质和骨研磨屑倒入收集容器漏斗中，使用钳子来帮助将研磨[0556]15)闭合夹具并且从过滤器组中取出2000mLTRANSFER_PACK。弃去用过的过滤器[0558]17)根据TSCDII无菌管线焊接操作，将公鲁尔延伸部无菌焊接到2000mLCD45+和CD34+的具体数据以及CD45+和CD3[0568]表8显示了利用本文所述的加工技术和附加的震摇或附加的震摇和旋转而分离的摇床的方法中，数据表现出较高细胞浓度计数、absCD45+和CD34+HSPC增加以及CD45+和[0574]实施例5.仅在86℃的浸入[0575]此研究的目的是为了评价模拟的HPC骨髓和HPC骨髓产品的冷却曲线以改进低温LN2蒸气相中以进行细胞内玻璃化和长期贮藏。虽然此方法已被验证并且实现令人满意的上不存在CD34抗原。正常外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞和血小板不表达CD34抗原。冲pH以及维持胶体渗透压等功能。它是人血浆中存在的主要蛋白质。冲洗介质：一种由PlasmaLyteA和2.5％HSA组成的溶液。冷冻介质：一种由冲洗介质和10％[0578]HPC库被开发用于源自已故器官和组织供体的骨髓。HPC骨髓被贮藏在冷冻袋(Cryostore250EVA冷冻袋)中置于盒中。对此材料的低温保藏包括在专用一86℃EppendorfCryoCube型号F740hi中被动冷却HPC骨髓，然后转移至低温贮藏在蒸气氮低温用于此实验的温度板是OmegaOM_USB_计算机型号是安装有MicrosoftWindowsHome10的型号20F13CT01WW联想台式机。CryoCube型号F740hi(资产0144)的顶部搁架中搁架的特定位置。根据用户手册，_86℃冻机门期间不要拉扯热电偶导线以保持它们就位。在完成时，将数据保存为excelcsv文件，然后将格式设置为xlsx文件。将所有Excel工作表打印并且存档在ProcessImprovementExperimentalReport:HPC,MarrowPassivelyCooledUsingCassettes[0581]使用来自供体ISBT:W437520000044_W437520000046的HPC骨髓进行第二实验。所过实施例1的被动低温保藏进行低温保藏。供体W437520000045_W437520000046从实施例1的被动低温保藏偏离之处在于浸入在_86℃EppendorfCryoCube型号F740hi的底部搁架瓶转移至气相氮冷却罐，在其中它们被贮藏直至解冻后存活率测试为止。供体[0592]为了确定亚冷冻检查/冷却速率，从_10℃至_40℃绘制(℃/min)散点图。使用[0608]对于HPC骨髓的所有三个供体，平均成核温度为_13.7032℃(在_10.9017℃至_[0611]关于造血干细胞/祖细胞产品的成功低温保藏的主要文献表明_1至_5℃的冷却速[0613]为了评价在无SmartCool箱的情况下在Cryostore250EVA冷冻袋中冷冻HPC骨髓冷冻的袋的解冻后存活率应满足50％的解冻后CD34+HSC存活率以及至少1CFU_GM/105。SmartCool箱的免除应消除袋与小瓶之间的系统性差异，以便解冻后小瓶可以用作袋的代及其数据将用于确定在不使用被动冷却箱的情况下在Cryostore250EVA冷冻袋中冷冻HPC[0616]在CoolCells中冷冻的所有小瓶以及在无SmartCool箱的情况下冷冻的袋满足50％的解冻后CD34+HSC存活率并且具有的袋与在CoolCells中冷冻的小瓶之前的变异性是从测试人供体而预期的变异性。[0628]MiltenyiCD34试剂系统最常用于临床干细胞分离，其利用位于磁场中的分离柱来捕集与抗体标记的细胞缀合的磁珠。在使用如CliniMACS用户手册中指导的标准方法加置系统过滤器或分离柱并且导致CliniMACS装置的仪器相关的停止。聚集体还可能导致目于从非冷却的干细胞动员的和单采的(apheresed)外周血单位中选择CD34。MACS缓冲剂包导致细胞聚集但是通过不同的过程)。Benzonase添加至MACS缓冲剂清除游离DNA至MACS缓无法克服EDTA。内部的缓冲剂(列表上的编号4)是的一种方式。这主要是为了制备用于器官耐受性研究的CD34+细胞。目标是每kg患者体重[0634]缓冲剂4：内部的标记稳定化缓冲剂(Plasmalyte+0.5％H[0639]图18显示了当用稳定化缓冲剂从冷却的样品中加工骨髓细胞时防止了聚集体的工的骨髓细胞样品中过滤之后缺乏截留的聚集体。图17C和图17D显示了用CliniMACS缓冲剂加工的骨髓细胞的聚集体形成(图17C)不存在(图17D)。图17E显示用稳定化缓冲剂加工的骨髓细胞表现出骨髓细胞的增加的产[0656]3)对于小瓶：使用微量移液器转移整个1mL样品体积并且转移至5mL或15mL锥形[0658]5)将另外1mL冲洗介质一起添加至相同的上述样品。最终稀释样品体积为3mL(DF[0672]科罗拉多州定制Fab(CCF)骨研磨机：对HPC骨髓的验证的加工利用由Biorep生产计成发动机在BSC外部在推车上并且仅具有切割附件的前部被推进穿过BSC侧部的开口。是基于一个在全球范围内用于工业cGMP环境中骨骼加工的平台。对CCF进行评价并且与Biorep研磨机比较以证明从来自相同供体的VB的每件设备回收相当的细胞数(参见随附的它们与Biorep研磨机相比较小且重量较轻，通过使它们易于移进和移出BSC而促进人类因[0673]冷冻方法：目前在HPC骨髓的验证的加工中，将65±5mL袋的HPC骨髓置于冷冻盒随后浸入LN2蒸气相以进行长期贮藏。将HPC骨髓的小瓶置于预先冷却的Instapak箱中的情况中，相同的生物体存在于OPO拭子上和最终产品中，但是在表面去污染之后不在拭子溶液的无菌袋的两层中，然后转移至不同洁净室中的BSC中之前用70％IPA清洁。图19显示支持技术人员将VB的袋从洁净室C物料入口带到由单独人员在单独室中完成并且降低产品受污染的[0683]1)实施例1中确立的加工知识形成总体加工对照策略的基础。在先前加工设计和验证中设计用于加工对照的策略以减小起始物料(死亡供体椎体)的变异以及加工期间的轨道式摇床将确保在每次冲洗期间研磨屑被充分搅动以最大[0685]2.通过在无Smartcool箱的情况下冷冻盒而减小袋和小瓶之间细胞存活率的变[0686]2)生产人员在除了离心机参数之外的所有改变下进行3轮试运行，然后在此报告中所述的所有改变下进行3轮附加的运行。这些试运行向职员提供关于加工的改变的充分[0688]本文描述了在免疫受损的NOD.C植入HPC骨髓CD34_选择的造血干细胞和祖细胞的示例性实验。该实验及其数据确定HPC骨髓是否具有能够长期植入并产生成熟血液细胞的造[0693]EasySep系统：包被有对CD34蛋白特异性的抗体的免疫磁性微珠。由StemCell[0701]在免疫受损的NOD.Cg_PrkdcscidIL2rγtm1Wjl/Sz(NSG)小鼠模型进行骨髓植入收并且通过免疫磁性珠分离加工以富集CD34+细胞。使用EasySep系统(StemCellTechnologies)对供体AGGU049BM进行新鲜加工。将供体AGEJ150BM从低温保藏进行解冻并且使用CliniMACS系统进行加工。使用EasySep系统从来自供体C141019000564(获自[0702]将总计25只雌性NSG小鼠(6_10周龄)用亚致死剂量(300cGy)辐射。将小鼠分配为组(3只小鼠)未受处理而用作抗体染色对照。将CD34+细胞解冻并且在辐射后大约4小时时胞(阳性对照)，则为43％。在未受辐射的未经处理的对照中观察到人CD45抗体的低水平(10％)的非特异性结合。图20中示出了在用每种CD34+细胞制剂处理的动物的血液中人[0707]本文描述了比较来自选择的活供体和死亡供体的新鲜全骨髓中造血干细胞和祖细胞的数量和活性的示例性实验。该实验及其数据可以用于确定与活供体BM相比HPC骨髓[0719]从六个死亡供体的VB中回收HPC骨髓。全骨髓是从三个活供体髂骨中抽吸的和购[0727]表25.HPC骨髓和活供体BM的平均集落形成潜力(每个供体的祖细胞百分比示为