真菌感染基础医学知识

抗感染基础知识培训

科赛斯日程真菌细胞形态及分类常用抗真菌药物比较侵袭性真菌病的诊断常见侵袭性真菌病Q&A真菌的细胞结构细胞壁：葡聚糖

棘白菌素类:

科赛斯米卡芬净细胞质：P450酶

唑类:

氟康唑

伊曲康唑

伏立康唑细胞膜：麦角固醇

多烯类:

两性霉素B

两性霉素B脂型DNA

抗代谢药:

氟胞嘧啶真菌的分类—形态特性酵母菌单细胞，呈圆形或椭圆形，孢子形式存在如隐球菌念珠菌霉菌（丝状菌）多细胞，呈丝状，由菌丝和孢子组成

如曲霉菌毛霉菌等二形型真菌不同条件下可以两种形式存在，常为地方性分布的致病菌。如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌、孢子丝菌酵母菌：单个细胞（A），芽孢细胞（B）和假孢子（C）

1.细胞核2.局部酶溶解3.母细胞4.芽孢酵母菌的结构隐球菌念珠菌医学重要的酵母菌分类SegalB,BowEJ,MenichettiF:InfectDis

ClinNAm2002;16:935-64

条件致病的酵母菌

念珠菌属

非念珠菌属白念珠菌非白念珠菌热带念珠菌近平滑念珠菌

隐球菌属新型隐球菌

毛孢子菌属白吉利毛孢子菌头形毛孢子菌

酵母属酿酒酵母

红酵母属

光滑念珠菌克柔念珠菌季也蒙念珠菌葡萄牙念珠菌霉菌的结构-菌丝和孢子菌丝和孢子的形态是显微镜下鉴别丝状菌的重要依据(单列)分生孢子头、分生孢子梗、顶囊、瓶梗、分生孢子烟曲霉菌医学重要的霉菌分类SegalB,BowEJ,MenichettiF:InfectDis

ClinNAm2002;16:935-64

霉菌

曲霉菌属

非曲霉菌属烟曲霉非烟曲霉黄曲霉黑曲霉土曲霉

镰刀霉

茄病镰刀霉 尖孢镰刀霉

赛多孢属

尖端赛多孢 多育赛多孢

接合菌

根霉属 毛霉属 根毛霉属 梨头霉属 小克银汉霉属暗色孢霉

链格孢霉属

万氏霉属

双极菌属

弯孢属日程真菌细胞形态及分类常用抗真菌药物比较侵袭性真菌病的诊断常见侵袭性真菌病Q&A抗真菌药物研制过程024681012141618195019551960196519701975198019851990199520002005#ofdrugsNystatinB两性霉素BGriseofulvin5-FCMiconazoleKetoconazoleYearFluconazole氟康唑Itraconazole

伊曲康唑Caspofungin科赛斯Voriconazole

伏立康唑米卡芬净AnidulafunginPosaconazole泊沙康唑MoAbs?两性霉素B脂质体Terbinafine系统性抗真菌药物的商品名药物商品名氟康唑大扶康伊曲康唑斯皮仁诺伏立康唑威凡两性霉素B脂型两性霉素B安浮特克棘白菌素科赛斯

米开民真菌细胞壁双层磷脂膜抗真菌作用靶点麦角固醇

-(1,6)-葡聚糖甘露糖蛋白

-(1,3)-葡聚糖

-(1,3)-葡聚糖合成GS棘白菌素类

–抑制酶类:卡泊芬净,米卡芬净多烯类–与固醇结合:两性霉素B,两性霉素B脂质体,制霉菌素唑类–抑制负责合成的

CYP-450酶:

氟康唑,伏立康唑,伊曲康唑,泊沙康唑棘白菌素类药物

—作用机制非竞争性抑制真菌的1,3-β-D葡聚糖合成酶

(GS)β-葡聚糖对维持真菌细胞壁的完整性很重要念珠菌和曲霉菌细胞壁富含1,3-β-D葡聚糖曲霉等丝状真菌葡聚糖合成的主要部位在菌丝的顶端棘白菌素类药物作用于真菌后酵母细胞的溶解导致细胞死亡

(杀真菌活性)丝状真菌菌丝体顶端溶解

使生长受到抑制并导致形态学异常、使其失去侵袭性念珠菌

vs.曲霉菌-科赛斯不同的作用形式0hour3hours24hours白色念珠菌烟曲霉菌Control,24hCAS1µg/mL,24h科赛斯葡聚糖合成抑制剂通过抑制细胞膜中的β－（1，3）－葡聚糖合成酶阻断葡聚糖的合成由于其作用机制与麦角固醇无关，葡聚糖合成抑制剂因而能与两性霉素B及唑类联用以治疗感染。对念珠菌属、曲霉菌属和金罗维氏肺孢子虫有抗菌活性。对夹膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌和粗球孢子菌活性差。而对新型隐球菌和接合菌则无活性。对人体细胞无毒，副作用少念珠菌耐药发生少，药物间相互作用少科赛斯和米开民的适应症*科赛斯米开民适应症剂量适应症剂量中性粒细胞缺乏伴发热患者的经验性治疗

70mgLD50mgQD挽救性治疗侵袭性曲霉菌病

70mgLD50mgQD侵袭性念珠菌病

70mgLD50mgQD食道念珠菌病

50mgQD

150mgQD造血干细胞移植患者预防念珠菌感染

50mgQD*美国适应症真菌细胞膜真菌细胞膜最主要固醇是麦角固醇，人类细胞含有胆固醇多烯类：与真菌细胞固醇类形成复合体如两性霉素B，与人细胞胆固醇有一定的交叉作用，可作用于人体的细胞膜，产生毒性。肝肾毒性及输液反应。唑类：抑制在细胞质中负责麦角固醇合成的CYP-450酶，破坏细胞膜，如氟康唑、伊曲、伏立康唑。药物间相互相互作用多，肝功能影响明显。两性霉素B作用机制A、多烯类1穿过真菌细胞壁2，并与真菌细胞膜4中的麦角固醇3结合。B、多烯类1与麦角固醇2的相互作用导致细胞膜中孔道3的形成。增加了细胞膜的通透性，导致细胞内许多小分子物质外漏。两性霉素B的剂型两性霉素B脱氧胆酸盐（DOC）脂质体两性霉素B（L-AMB）两性霉素B脂质复合体（ABLC)两性霉素B胶体悬液（ABCD）多烯类

–两性霉素B多烯类穿透真菌细胞壁，并与真菌细胞膜中麦角固醇结合也可与人类细胞膜中的胆固醇结合活性谱广泛，对大多数真菌有抗菌活性毒性大，尤其是肾毒性及输注相关的反应脂型肾毒性有所改善三唑类药物作用机制羊毛甾醇14－α－去甲基酶为细胞色素P450依赖酶。三唑类对人CYP－450酶也有低程度的交叉抑制作用氟康唑有口服和静脉剂型能很好渗入脑脊液，可用于中枢真菌感染主要经肾脏排泄，肾功能不全的患者应降低药物剂量。抗菌谱：新生隐球菌、白色、热带和近平滑念珠菌等有抗菌活性。但是，克柔、平滑念珠菌耐药率高。相对较少，常作为真菌药物安全性评价的参照药物伊曲康唑口服剂型，胶囊和口服液；静脉剂型广谱抗菌活性，包括曲霉菌属、念珠菌属、新生隐球菌、皮炎芽生菌、球孢子菌、组织胞浆菌、巴西副球霉菌和孢子丝菌

对毛霉菌无效伊曲康唑在肝脏代谢

念珠菌株中已发现唑类交叉耐药伊曲康唑：副作用多胃肠道不适皮疹、搔痒头痛眩晕肝脏酶短暂性升高重度肝脏毒性（罕见）可能发生盐皮质潴积综合征伊曲康唑的副作用-严重心血管事件

由于有引起严重心血管事件的危险，禁止与西沙必利、哌咪嗪、奎尼丁、多非利特和左美沙朵同时使用伊曲康唑：药物间相互作用多药物相互作用多。包括免疫抑制剂环孢霉素与他克莫司、某些抗肿瘤药物（如长春新碱）、苯妥英、苯二氮、甲基强的松龙、地高辛、奎尼丁等。伊曲康唑如与利福平、利福布丁、异烟肼等联用，其血清水平降低。伏立康唑伏立康唑是一广谱抗真菌药有口服和胃肠外剂型对念珠菌属（包括氟康唑耐药性菌株克柔或光滑念珠菌等）和新生隐球菌属、曲霉菌属等有活性。作用于P450酶，药物间相互作用多伏立康唑：副作用100%患者会出现异常的视网膜电流图谱；33%以上的患者有暂时的视力障碍（闪光幻觉，常描述为象LSD游伴颜色分辨能力改变，视力模糊，眼冒金星和畏光）；停药后副作用消失。皮疹和光敏性：罕见于Stevens-Johnson综合征病例。肝酶水平升高(13%)。伏立康唑：药物间相互作用

环孢霉素、他克莫司、长效巴比妥类、利福平、利福布丁苯妥英、磺脲类、他汀类、生物碱类、钙通道阻滞剂、地西泮、卡马西平、麦角生物碱类奥美拉唑、奎尼丁、西罗莫司、华法林 日程真菌细胞形态及分类常用抗真菌药物比较侵袭性真菌病的诊断常见侵袭性真菌病Q&A侵袭性真菌感染的部位真菌血症深部真菌病表浅、皮肤和皮下真菌感染脑肺心肝脾肾侵袭性真菌通常累及内脏器官或真菌血症侵袭性真菌感染的途径1.外源性2.内源性副鼻窦血管内导管肺食道皮肤肠生殖道消化道胃侵袭性真菌感染常见的致病菌机会性致病菌：念珠菌曲霉菌隐球菌毛霉菌镰刀菌，金罗氏肺孢子虫等，通常发生于免疫力低下的病人二形性真菌：组织胞浆菌，皮炎芽生菌，粗球孢子菌，西副球孢子菌等，呈地方性分布，如旅行后发病侵袭性真菌感染的高危因素免疫抑制基础疾病：肿瘤、糖尿病……药物：化疗、激素、免疫抑制剂侵入性操作：深静脉插管广谱抗生素致菌群失调其他常见真菌感染的科室血液科：化疗致粒细胞减少患者造血干细胞移植患者，移植前清髓性化疗实体移植科：肝、肾移植等

ICU各种重症患者真菌感染诊断的基本思路流行病学史：有真菌感染的危险因素临床特征：症状及体征实验室检查：组织病理学，微生物学检查，血清学，PCR等诊断的级别：确诊，临床诊断，拟诊2008EORTC/MSG

真菌感染的诊断标准与治疗原则宿主因素临床特征微生物学组织病理学确诊proven+/-+/-+*+临床诊断probable+++-拟诊possible++--*正常无菌部位取得的标本培养阳性，如血液、组织、胸腔积液等EORTC/MSGEuropeanOrganizationforResearchandTreatmentofCancer/MycosesStudyGroup2008EORTC/MSG

曲霉/毛霉菌确诊病例标本霉菌镜检-无菌标本细针穿刺或组织切片标本，用组织化学或细胞化学方法或直接镜检发现相应的霉菌菌丝，并发现伴有相应的组织损害。培养-无菌标本临床或放射学符合感染表现的正常无菌部位，通过无菌操作获得标本，培养发现霉菌。标本不包括支气管肺泡灌洗、鼻咽腔、尿路等标本培养-血液血培养阳性，曲霉通常为污染2008EORTC/MSG

念珠菌/隐球菌确诊病例标本霉菌镜检-无菌标本细针穿刺或组织切片标本，用组织化学或细胞化学方法或直接镜检发现相应的酵母菌细胞和/或假/真菌丝培养-无菌标本临床或放射学符合感染表现的正常无菌部位，通过无菌操作获得标本，培养发现酵母菌。标本可包括24小时内置管引流标本培养-血液血培养发现酵母菌血清学检测-脑脊液隐球菌抗原

2008EORTC/MSG

宿主因素中性粒细胞减少:中性粒细胞计数<0.5*109/L,且持续10d以上异体干细胞移植使用等效于0.3mg/kg/d强的松的皮质激素治疗>3周前90天内接受T细胞抑制剂治疗

先天性严重免疫缺陷2008EORTC/MSG

临床标准下呼吸道感染:1项CT表现致密的边界清晰的病灶，伴或不伴光晕征新月形空气征实变区域内出现空腔支气管炎支气管溃疡、结节、伪膜、斑块、焦痂等鼻及鼻窦感染:

影像学检查提示鼻窦部位侵袭性感染，加一项以下表现局部疼痛、鼻溃疡伴结痂,病灶扩展到骨性屏障以外如眼眶4.中枢神经系统感染:1项表现影像学检查提示局灶表现CT或磁共振脑膜增厚

扩散性念珠菌病前两周内念珠菌菌血症的病史加以下一项表现肝或脾牛眼征，眼科检查发现进展性视网膜渗出2008EORTC/MSG

微生物学标准直接检测(细胞学、直接镜检、培养)霉菌痰液/支气管肺泡灌洗液/支气管刷检/鼻窦样本检测霉菌的成分培养发现霉菌间接检测(抗原或细胞壁成分)曲霉：血浆、血清、支气管肺泡灌洗液或脑脊液GM检测除隐球菌和接合菌外：G检验治疗策略治疗诊断0363738394041Temperature培养+组织活检+-7071421283542495663-140.1110Daysofneutropenia------->Granulocytes经验可疑预防危险因素针对确诊抢先临床诊断Galacto-mannan真菌感染-实验室诊断直接镜检及组织病理学真菌培养血清学检测PCR：不能常规用于临床口腔念珠菌氢氧化钾标本新生隐球菌的脑脊液墨汁染色染色直接镜检实验室检查：组织病理学曲霉菌的组织病理学菌丝孢子真菌培养方法：临床标本培养，分离和鉴别真菌霉菌的鉴定通常是以它们无性孢子的显微镜检查为基础的酵母菌的鉴定已标准化，如显色培养基等缺点：阳性率低，很难取到深部感染部位的标本念珠菌显色培养基CHROMagarCandida酵母菌生理学试验—碳源同化API20CAUX试剂盒ID32C酵母鉴定系统酵母菌抗真菌药物的判定折点氟康唑5-氟胞嘧啶伊曲康唑#两性霉素B*伏立康唑卡泊芬净S

8

4

0.125

0.5

1

2SDD16-32-0.25-0.5-2I-8-16

--R

64

32

1

1

4#粘膜中酵母菌；*非NCCLS标准;霉菌的鉴定——

观察形态结构真菌病诊断-血清学检测日程真菌细胞形态及分类常用抗真菌药物比较侵袭性真菌病的诊断常见侵袭性真菌病Q&A真菌感染的流行病学概况念珠菌与曲霉菌是感染中最常见的真菌。它们在各个科室的分布不同念珠菌血症以白色念珠菌为主，但有下降趋势，其他非白念如：占总病例约50%，非白色念珠菌（如光滑念珠菌，克柔念珠菌）对常用抗真菌药耐药（如氟康唑等）念珠菌的分类白色念珠菌最常见热带念珠菌近平滑念珠菌光滑念珠菌氟康唑耐药克柔念珠菌氟康唑耐药葡萄牙念珠菌两性霉素B耐药其他常见有致病意义的念珠菌侵袭性念珠菌病全身性念珠菌病的诊断很难确诊，血培养阳性率低于50%大部分为念珠菌菌血症痰等易污染标本阳性并不能诊断念珠菌病。血清学试验可用于重症患者的念珠菌病快速诊断治疗：氟康唑，科赛斯，两性霉素B或脂型，伏立康唑，伊曲康唑病情重或有粒缺患者，氟康唑不合适曾用过唑类预防患者，需考虑交叉耐药情况已有肝肾功能不全患者，宜选择较安全药物ARTEMIS中国念珠菌病原构成-时间变迁朱德妹等中国抗感染化疗杂志2007占总菌株的%ARTEMIS中国耐氟康唑菌株%（直径<=14mm）

0102030405总计白色2.21.32.01.32.21.7光滑6.115.014.59.917.513.7热带2.31.04.34.85.64.6近平滑016.710.310.36.88.3克柔081.335.0

66.782.7

68.3种属氟康唑的耐药情况朱德妹等中国抗感染化疗杂志2007ARTEMIS中国耐伏立康唑菌株%（直径<=13mm）

0102030405总计白色1.10.71.81.41.71.5光滑6.114.211.07.811.610.2热带01.03.74.45.34.2近平滑016.73.46.92.34.1克柔06.310.5

11.87.5

9.2种属伏立康唑的耐药情况朱德妹等中国抗感染化疗杂志2007ARTEMIS

中国唑类的交叉耐药情况氟康唑耐药菌株对伏立康唑的敏感性菌属菌株数%S%SDD%R白念7716.918.264.9

光滑17416.117.266.7

热带5123.519.656.9

近平滑10203050

克柔9681.38.310.4抑菌圈：S,≥17mm;SDD,14to16mm;R,≤13mm.伏立康唑结合克柔P450酶较Flu强，交叉耐药情况不如光滑明显朱德妹等中国抗感染化疗杂志2007念珠菌对两性霉素B的敏感性菌种菌株数50%90%白色念珠菌41950.51光滑94924克柔23448葡萄牙1030.251都柏林1010.250.5C.Guilliermondii1020.251皱褶1314Pfalleretal.CurrDrugTargets2005.6:929–943Pfalleretal.JClin

Microbiol2004；42:4977–4979Pfalleretal.JClin

Microbiol2004；42:3142–3146.卡泊芬净敏感性研究8197株侵袭性念珠菌菌株(2001-2004)*

所有菌种和菌株中，MICs≤1µg/mL者占99.7%体外抗菌活性未发生显著变化315株氟康唑耐药的念