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文档简介
第2章细胞工程
第2节动物细胞工程
二动物细胞融合技术与单克隆抗体
A级基础达标练
一、选择题
1.下列关于细胞融合的说法,错误的是()
A.动植物组织中的细胞在融合之前都需经酶处理
B.灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合
C.融合后,动植物细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息
D.可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞
答案:B
解析:动植物组织中的细胞在融合之前都需经酶处理,植物细胞在融合之前需要用纤维素酶和
果胶酶处理,而动物细胞融合同样需要获得单个细胞,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,A正确;
灭活的病毒可以诱导动物细胞融合,但不会溶解磷脂双分子层,B错误;由于细胞融合可能出现两
个或多个细胞融合的情况,故动植物细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息,C正确;细胞融合
过程可出现同种细胞融合的细胞和异种细胞融合的细胞,因此,可根据细胞中染色体数目和形态的
差异来鉴定杂种细胞,D正确。
2.植物原生质体融合和动物细胞融合相比较,正确的是()
A.两者诱导融合的方法完全不同
B.用于获得植物原生质体和使动物组织分散成单个细胞的酶相同
C.两者所依据的基本原理不同
D.两者都能形成杂种细胞
答案:D
解析:诱导植物原生质体融合的方法有物理法和化学法,动物细胞融合的诱导方法有物理法、
化学法和生物法,A错误;获得植物原生质体需要用到纤维素酶和果胶酶,将动物组织分数成单个
细胞需要用到胰蛋白酶等,B错误;两者所依据的基本原理相同,均为细胞膜的流动性,C错误;
两者都能形成杂种细胞,D正确。
3.下面对动物细胞融合技术及意义的叙述,不合理的是()
第1页共8页
A.细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究
B.可以打破生殖隔离,实现远缘杂交、获得新物种
C.杂交痛技术是在细胞融合技术的基础上发展起来的
D.灭活的病毒可以诱导细胞融合,与病毒表面的糖蛋白有关
答案:B
解析:动物细胞融合技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种的重要手段,
A正确;动物细胞融合技术不能获得新物种,B错误;杂交瘤技术是在动物细胞融合技术的基础上
发展起来的,如将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞,C正确;灭活的病毒诱导动物细
胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,进而使细胞发
生融合,D正确。
4.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后要用特定培养基筛选出杂交
瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是(A)
①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合
细胞⑤杂交瘤细胞
A.①@③④B.①③⑤
C.②④D.①③
答案:A
解析:特定培并基培养细胞的目的是筛选出既能大量增殖,又能产生抗体的杂交瘤细抱,因此
其他的细胞都不能在此培养基上生存。在这种培养基上不能存活和繁殖的细胞有①B淋巴细胞、②
小鼠骨髓瘤细胞、③B淋巴细胞自身融合细胞、④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞。
5.(不定项)制备抗A抗原单克隆抗体的过程如下图,下列有关叙述错误的是()
A抗原免疫小取
I
:::•。静
B淋巴细胞\/件<»胸细胞
I细胞融含
[细胞箫选
。1
I克.而培养
抗A抗原单抗枪测品大培养
A.提取的B淋巴细胞有多种,是因为操作存在失误
第2页共8页
B.题述过程诱导细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法完全相同
C.通过特定的选择培养基可以将能产生抗A抗原抗体的杂交瘤细胞筛选出来
D.检测抗A抗原单抗时可选用荧光标记的A抗原作为检测试剂
答案:ABC
解析:一种抗原可以诱导小鼠产生多种特异性的抗体,且实验中小鼠可能接触了除A抗原之外
的其他抗原,故提取的B淋巴细胞有多种,A错误;诱导动物细胞融合可以用灭活病毒诱导法,但
诱导植物原生质体的融合不能用灭活病毒诱导法,B错误;通过特定的培养基可以将能产生抗体的
杂交瘤细胞筛选出来,若筛选能产生抗A抗原抗体的杂交瘤细胞还需要做专一性抗体检验,C错误;
抗原抗体会发生特异性结合,所以通过荧光标记的A抗原可以检测抗A抗原单抗,D正确。
二、非选择题
6.下图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:
(1)若A、B细胞为动物细胞,从A和B细胞到C细胞的过程中,常用的不同于植物细胞的诱
导融合手段是oA、B细胞融合为C细胞的过程说明了细胞膜具有的特
性。
(2)若A、B细胞为植物细胞,首先用去掉细胞壁。由此生成的结构称
为oA、B细胞融合为C细胞的过程中,融合完成的标志是。
形成的细胞还要应用技术培养成植株。
(3)科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(prC),该基因能激发许
多动物细胞分裂。有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及
文字表示该过程:
@(无限增殖细胞)一匚
0(特定抗原剌激的B淋巴细胞)T2
答案:
(1)灭活的病毒流动性
(2)纤维素酶和果胶酶原生质体生成新的细胞壁植物组织培养
(3)
第3页共8页
公(无限增丁色
O殖细微—L>c)------
f©咨体外培养
g(特定抗原刺激r,」
近组
0MB淋巴细胞)—L^o细胞
解析:
(I)动物细胞融合不同于植物细胞的诱导融合手段,是通过灭活的病毒作为诱导剂进吁诱导融
合,形成杂交细胞,体现了细胞膜的结构特点具有一定的流动性。
(2)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,根据酶的专一性原理,可以用纤维素酶和果胶酶去
除植物细胞壁得到原生质体,再通过物理方法如离心、振动和电刺激诱导原生质体融合,融合完成
的标志是杂合的原生质体形成了新的细胞壁;将杂种细胞培养成杂种植株还需采用植物组织培养技
术。
(3)由于调控细胞无限增殖的pre基因位于细胞质中,因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体
时,只能将浆细胞的细胞核移入到含有prC基因的细胞质中,获得重组细胞,最终获得单克隆抗体。
B级合格达标练
一、选择题
1.下列有关动物细胞融合叙述错误的是()
A.指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象
B.可以在基因型相同或不同的细胞间进行
C.动物的体细胞融合通常伴随一次减数分裂
D.其原理是细胞膜具有一定的流动性
答案:C
解析:动物细胞融合技术是指使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术,融合后形成具
有原来两个或多个细胞遗传信息的杂交细胞,A正确;动物细胞融合可以在基因型相同或不同的细
胞间进行,B正确;动物的体细胞融合不涉及减数分裂,C错误;由于细胞膜具有一定的流动性,
所以通过定的手段进行诱导,可使动物细胞融合,D正确。
2.下列有关单克隆抗体的制备的叙述,正确的是()
A.小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40,其B淋巴细胞的染色体数为40,融合后形成的杂交瘤细胞
DNA分子数为80
B.在单克隆抗体的制备过程中,只有一次筛选
C.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养、动物细胞融合和动物体细胞核移植等技术
D.B淋巴细胞与骨髓痛细胞经细胞融合后的二种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况j
第4页共8页
答案:D
解析:小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40,其B淋巴细胞的染色体数为40,融合后形成的杂交瘤
细胞染色体数目为80,由于线粒体中也有DNA,所以DNA数目大于80,A项错误:在单克隆抗
体的制备过程中,至少涉及两次筛选,B项错误:单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养、动物
细胞融合等技术,不涉及动物体细胞核移植等技术,C项错误;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经细胞融
合后有三种两两融合的细胞类型,即杂交瘤细胞、B淋巴细胞一B淋巴细胞、骨髓瘤细胞一骨髓瘤
细胞,D项正确。
3.对制备单克隆抗体与培育“番茄一马铃薯”杂种植株的共同点表述不正确的是()
A.都利用了细胞膜的流动性
B.都可以用电融合法促融
C.培养环境中都需要有适量的二氧化碳
D.都需要用适宜种类的微素处理
答案:D
解析:制备单克隆抗体与培育“番茄一马铃薯”杂种植株都有细胞膜的融合,都利用了细胞膜的
流动性,A正确;制备单克隆抗体与培育“番茄一马铃薯”杂种植株都可以用电融合法促融,B正确;
动物细胞培养环境需要有适量的二氧化碳,其主要作用是维持培养液的pH,培育“番茄一马铃薯”
杂种植株培养环境中需要有适量的二氧化碳,以便杂种植株进行光合作用,C正确:制备单克隆抗
体不需要激素处理,D错误.
4.新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合,
侵入人体,引起肺炎。制备抗S蛋白的单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵,相关叙述正确的是()
A.优先选择灭活的新冠病毒免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞
B.用灭活的仙台病毒诱导已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
C.经过第一次筛选获得能产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞
D.经体外培养得到的单克隆抗体可以与ACE2受体结合阻断病毒的入侵
答案:B
解析:研制抗S蛋白单克隆抗体,需要优先选择S蛋白免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞,A错
误;诱导免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合可用灭活的仙台病毒,B正确;至少经过两次筛选才
能获得产生抗S蛋白的单克降抗体的杂交瘤细胞,C错误;经体外培养得到的单克隆抗体可以与S
蛋白结合阻断病毒的入侵,D错误。
5.(不定项)下图是两种生物细胞融合技术的示意图,关于该图的叙述,完全正确的一组是()
第5页共8页
A.a过程必须除去细胞膜,b过程需要通过细胞识别
B.若X是单克隆抗体,则甲、乙细胞分别是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B淋巴细胞
C.若X是苹果一梨杂种幼苗,则c过程是细胞分裂、分化
D.细胞融合技术的缺点是不能克服远缘杂交不亲和性的障碍
答案:BC
解析:动植物细胞融合不需要去除细胞膜,两个细胞的细胞膜融合可以不需要以别,A错误;
若X是单克隆抗体,则甲、乙细胞分别是肿瘤细胞和经抗原刺激产生的B淋巴细胞,两者融合后的
杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生专一抗体,B正确;若X是苹果一梨杂种幼苗,则甲、乙细胞
分别是苹果细胞和梨细胞,c过程是细胞分裂、分化,C正确;细胞融合技术打破了生殖隔离,克
服了远缘杂交不亲和的障碍,D错误。
6.(不定项)如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体一药物偶联物(ADC)的示意图,
它由抗体、接头和小分子药物三部分组成,能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如,用于治疗乳腺
癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。卜列叙述正确的是()
药物小
接头
ADC
A.单克隆抗体从免疫过的B淋巴细胞释放,体现了生物膜的流动性
B.Kadcyla兼具有靶向投递(浓缩效应)和抗肿瘤的作用
C.ADC设计需综合考虑抗体选择、药物分子大小及其细胞毒性等问题
D.ADC中接头稳定性偏低会导致其在循环过程中药物分子脱落造成“脱靶毒性”
答案:BCD
解析:单克隆抗体由免疫过的B淋巴细胞(浆细胞)与瘤细胞形成的杂交瘤细胞合成并分泌,分
泌过程为胞吐过程,体现了生物膜的流动性,A项错误;Kadcyla中的抗体能实现靶向投递(浓缩效
应),药物能实现抗肿瘤的作用,B项正确:ADC设计需考虑抗体选择,选择能与靶细胞(器官)结合
的抗体,需考虑药物分子大小及其细胞毒性,使药物分子能被顺利带到靶细胞内发挥作用,且对正
常细胞无显著毒性,C项正确;由题图可知,ADC中接头的作用是连接药物分子,其稳定性偏低可
能会导致药物分子脱落,进而与正常细胞接触,造成“脱靶毒性”,D项正确。
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二、非选择题
7.H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。通过基因工程可提高
H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关步骤如下:
①细胞培养。将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养,•段时间后,用胰蛋白酶处理
培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为lxl()7个.mL」。
②免疫小鼠。向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL,以后每隔2周免疫I次,共免疫3次,最
后1次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用。
③细胞融合及筛选。将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEG作用下进行融合,筛选出能
产生抗人肝癌的单克隆抗体HAbl8的H18杂交瘤细胞。
④改造H18杂交瘤细胞。利用PCR技术获得小鼠的bcl—XL基因(抗凋亡基因),构建表达载体,
通过脂质体法将其导入H18杂交瘤细胞中,再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。
请分析回答:
(I)步骤①中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是,培养液中还需加入一
定量抗生素的目的是。
(2)步骤②中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是。
(3)步骤③中,除了用50%PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是,物
理诱导方法是。步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18
杂交瘤细胞的过程依赖的原理是.
(4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAM8与相应抗癌药物结合制成的“生物导
弹”治疗肝癌的主要优点是.
(5)乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员
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