教学材料《奶牛养殖技术》-第４ 章

４.１母牛的生殖器官母牛的生殖器官包括三个部分:性腺(卵巢),生殖道(输卵管、子宫、阴道),外殖器(泌尿生殖前庭、阴唇、阴蒂)。如图４－１所示。４.１.１卵巢１.形态及位置卵巢(如图４－２所示)是母体重要的生殖腺体,两个卵巢分别位于腹腔两侧,每侧卵巢的前端为输卵管端,后端为子宫端,两缘为游离缘和卵巢系膜缘。卵巢的形状、大小和位置因畜种、个体及不同的生理时期而异。牛的卵巢呈稍扁的椭圆形,平均大小为４ｃｍ×２ｃｍ×１ｃｍ。下一页返回４.１母牛的生殖器官随着性周期的变化,卵泡和黄体突出卵巢表面,而使卵巢外表不平整。未怀孕过的母牛,卵巢多位于骨盆腔内,在耻骨前缘两侧稍后;个别经产母牛卵巢在耻骨联合前或位于腹腔内。２.组织结构卵巢的表层为一单层的生殖上皮,其下面有一薄层致密结缔组织,称白膜。白膜下面为卵巢实质,分为皮质部和髓质部,皮质部在髓质部的外周,两者没有明显的界线,其基质都是结缔组织。皮质部占卵巢的大部分,含有许多发育不同的卵泡、黄体及黄体退化后变成的白体,有较多的血管、淋巴管和神经纤维,由卵巢门进入髓质,再由髓质伸入到皮质中。上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官３.生理机能(１)随着母牛的发育,卵巢的皮质部开始出现卵泡,卵泡主要由初级卵母细胞和单层卵泡细胞构成,这一时期的卵泡称为初级卵泡,初级卵泡逐渐发育成为次级卵泡,再成为生长卵泡,最后成为成熟卵泡,成熟卵泡发育到最后排出卵子,排卵后的卵泡形成黄体。(２)分泌雌性激素和孕激素。雌激素主要由卵泡内膜上皮细胞分泌,孕激素由排卵后所形成的黄体细胞所分泌。４.１.２输卵管１.形态及位置上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官输卵管是多弯曲的细管,它位于每侧卵巢和子宫角之间,由子宫阔韧带外缘形成的输卵管系膜所固定。输卵管的前端接近卵巢,扩大呈漏斗状,称输卵管漏斗;漏斗部边缘呈放射状褶皱,称输卵管伞;漏斗的中心有一小开口,称输卵管腹腔口,与输卵管相通。输卵管的前半部或前三分之一段较粗,称输卵管壶腹部,是卵子受精的地方。壶腹部之后,与子宫角连接的部分较细,称为峡部。２.组织结构上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官输卵管的管壁从外向内由浆膜、肌肉层和黏膜构成,肌肉层主要为环状或螺旋形肌纤维和外层纵行肌束,其中混有斜行肌纤维,使整个管壁能协调地收缩。黏膜是由上皮和固有膜组成,上皮为单层柱状纤毛上皮,能向子宫端摆动,有助于卵母细胞的运送。３.生理机能(１)运送卵子和精子。(２)精子获能、卵子受精的场所。(３)分泌机能。４.１.３子宫１.形态及位置上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官奶牛的子宫包括子宫角、子宫体和子宫颈三个部分,牛、羊的子宫角基部有一纵隔,将二角分开,称为对分子宫。(１)子宫角、子宫体牛子宫角长２０~４０ｃｍ,角的基部直径１.５~３ｃｍ,子宫体长３~４ｃｍ。青年及经产胎次少的母牛,子宫角弯曲如绵羊角状,位于骨盆腔内。经产胎多次的,子宫并不完全恢复原来的形状和大小,较为伸展,垂入腹腔。二角基部之间纵隔之上有一纵沟,称为角间沟。子宫黏膜上有７０~１２０个特殊的半圆形隆起,称为子宫阜,阜上没有子宫腺,其深部含有丰富的血管,妊娠时子宫阜即发育为母体胎盘。上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官(２)子宫颈牛的子宫颈长５~１０ｃｍ,直径３~４ｃｍ,壁厚而硬。在不发情阶段封闭很紧,发情时也只是稍微开放,子宫颈阴道部粗壮,伸入阴道约２~３ｃｍ;黏膜上有放射状褶皱,经产牛的褶皱有时肥大如菜花状;子宫颈肌的环状层很厚,分为黏膜层和固有层,如图４－３所示。２.组织结构子宫壁从内向外由黏膜、肌层和浆膜三层构成。黏膜又称子宫内膜,内有子宫腺,其分泌物经腺管排至子宫内膜表面,在妊娠期可为早期胚胎提供营养。上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官肌层主要由内外两层平滑肌构成,外层薄,为纵形纤维;内层厚,为螺旋形的环状肌纤维。两层平滑肌之间含有丰富的血管和神经。子宫壁最外层是浆膜层,与子宫阔韧带的浆膜相连。３.生理机能(１)贮存、筛选和运送精子。(２)孕体的附植、妊娠和分娩。(３)调控母牛发情周期。４.１.４阴道阴道是母牛的交配器官,也是胎儿排出的通道。位于骨盆腔内,在直肠和膀胱之间。上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官阴道腔为一扁平的缝隙,前端有子宫颈阴道部突入其中,子宫颈阴道部周围的阴道腔称为阴道穹隆,后端与尿生殖前庭相连。阴道壁由肌层和黏膜层构成,黏膜呈粉红色,有许多纵褶。４.１.５外生殖器１.尿生殖前庭尿生殖前庭为阴道至阴门之间的短管,前高后低,稍微倾斜。其前端腹侧有一横行的黏膜褶,称阴瓣,以此与阴道分界,后端以阴门与外界相通。紧靠阴瓣的后方有一尿道外口,尿道外口的后方两侧有前庭小腺的开口,背侧有前庭大腺的开口。上一页下一页返回４.１母牛的生殖器官２.阴唇构成阴门的两侧壁,其上下端为阴唇的上下角,两阴唇的开口为阴门裂。阴唇的外面是皮肤,内为黏膜,两者之间有阴门括约肌及大量的结缔组织。３.阴蒂由两个富含神经的勃起组织构成,位于阴唇下角的阴蒂窝内。上一页返回４.２生殖激素基础知识４.２.１生殖激素的概念激素是体内特异活细胞分泌的特殊化学物质。通过血液循环,经传递、运送、弥散到特异的靶器官,引起一系列生理生化反应。与奶牛繁殖活动关系密切的激素称为生殖激素。奶牛繁殖是一个复杂的生理过程,生殖激素的作用贯穿生殖过程的始终。生殖激素作用的紊乱,常常是造成奶牛不孕的重要原因。利用外源激素来控制奶牛繁殖过程的技术,越来越受到人们的重视和深入研究,并且在奶牛繁殖生产上得到了广泛的应用。下一页返回４.２生殖激素基础知识４.２.２生殖激素的分类及特点１.生殖激素的分类生殖激素的分类方法很多,通常按照其来源进行分类。(１)丘脑下部的释放激素。(２)垂体前叶的促性腺激素。(３)胎盘分泌的促性腺激素。(４)性腺激素。(５)其他激素。包括前列腺素和外激素等。２.生殖激素的作用特点上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识(１)生殖激素在血液消失很快。(２)量少作用大。(３)明显的选择性。(４)协同和抗衡作用。４.２.３生殖激素的功能和应用１.下丘脑释放激素(１)促性腺激素释放激素①来源。是由下丘脑某些神经核产生的,为十肽的蛋白质激素。可人工合成,其活性比天然的高许多倍。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识②作用。能刺激垂体前叶合成及释放促卵泡素和促黄体素。③应用。作用于垂体产生促卵泡素和促黄体素,对卵巢机能、刺激排卵、维持黄体发育和功能等方面具有应用价值。可提高受胎率和胚胎存活率,克服某些卵巢机能障碍。(２)促甲状腺素释放激素①来源。来自于下丘脑分泌细胞,由３个氨基酸和１个酰胺组成,能人工合成。②作用。促进垂体前叶分泌和释放促甲状腺素。③应用。由于促甲状腺素能刺激乳腺细胞的活性,生产中用来提高母牛的泌乳量。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识２.垂体促性腺激素(１)促卵泡素①来源。由垂体前叶嗜碱性细胞所分泌的一种糖蛋白激素。②作用。对母牛主要是刺激卵泡的生长和发育,促进卵泡内膜细胞的分化;在促黄体素的协同作用下,刺激卵泡的最后成熟。对雄性奶牛,能促进生精细管的发育和精子的生成。③应用。在生产上促卵泡素用于超数排卵、母牛不发情、安静发情、卵巢发育不全、卵巢萎缩和卵巢硬化等症。(２)促黄体素上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识①来源。由垂体前叶嗜碱性细胞所分泌的一种糖蛋白激素。②作用。促黄体素对母牛可促进卵巢血流加速,在促卵泡素协调作用下,促进发育成熟的卵泡排卵,并能刺激黄体的产生和分泌孕酮;对雄性奶牛可刺激睾丸间质细胞分泌睾酮,对精子的最后成熟起决定性作用。③应用。用于治疗卵泡囊肿、排卵弛缓、黄体发育不全等。与促卵泡素合用可治疗卵巢静止或卵泡中途闭锁,也可促使母牛同期发情和超数排卵。(３)促乳素①来源。由垂体前叶嗜酸性细胞所分泌的一种蛋白激素。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识②作用。与雌激素协同作用于乳腺管系统;与孕酮协同作用于乳腺泡系统;与固醇激素协同可激发和维持泌乳活动;刺激和维持黄体分泌孕酮。３.胎盘促性腺激素(１)孕马血清促性腺激素①来源。由妊娠马属动物子宫内膜杯状细胞分泌的,是一种糖蛋白激素。②作用。与促卵泡素作用相近。③应用。是一种经济实用的促性腺激素,可代替昂贵的促卵泡素,用于母牛卵巢发育不全、卵巢机能衰退、公牛性欲不强、生精能力衰退,并广泛用于奶牛的诱发发情、超数排卵等。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识(２)人绒毛膜促性腺激素①来源。来自于人和灵长类动物胎盘绒毛膜,是一种糖蛋白激素。存在于胎盘和尿液中,在妊娠８~９周达到高峰,２１~２２周消失。②作用。其功能与促黄体素很相近。③应用。用于促进母牛卵泡成熟和排卵,增强超排效果。治疗排卵迟缓、卵泡囊肿有一定疗效。４.性腺激素性腺激素主要来自于母牛的卵巢、公牛的睾丸。由卵巢分泌的有雌二醇、松弛素、孕酮;

由睾丸分泌的雄激素、睾酮。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识此外,这些激素还可以来自于胎盘,肾上腺皮质也可产生少量的孕酮及睾酮。除松弛素为多肽外,其他都是类固醇激素。(１)雄激素①来源。主要由睾丸间质细胞分泌,肾上腺皮质、卵巢也能少量分泌。最主要的形式为睾酮。②作用。促进雄性生殖道、副性腺的发育和机能;刺激精子的发生;维持附睾的发育,延长附睾精子的寿命;刺激并维持公牛的性行为;促进公牛第二性征的表现。③应用。临床上用于治疗种公牛性欲不强、性机能减退和精液品质下降等。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识(２)雌激素①来源。主要产生于卵巢的卵泡内膜,睾丸的间质细胞、胎盘、肾上腺皮质等也能分泌少量的雌激素。卵巢分泌的雌激素主要为雌二醇。②作用。促使母牛发情表现和生殖道变化,促进母牛生殖器官的发育;促进母牛第二性征的表现,抑制长骨生长;促进乳腺管道系统的发育;分娩时雌激素水平升高,是参与分娩过程的发动激素之一。③应用。雌激素应用广泛,主要用于治疗母牛安静发情;分娩时加强子宫收缩,促进排出子宫内容物;雄性畜禽“化学去势”等。(３)孕激素①来源。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识孕激素主要代表激素是孕酮。主要为卵巢中黄体细胞及胎盘分泌,奶牛妊娠后期的胎盘为孕酮最主要来源。此外,卵泡颗粒层细胞、肾上腺皮质及睾丸也能少量分泌。②作用。促进生殖道发育;调节发情;促进子宫黏膜层增厚,促进子宫颈口收缩,抑制子宫的自发性活动,有利于早期胚胎发育和保胎;促进乳腺泡系统的发育。③应用。主要用于母牛的同期发情,防止功能性流产,治疗卵泡囊肿、持久黄体,根据血中或乳汁的孕酮浓度进行早期妊娠诊断或诊断卵巢机能紊乱。５.松弛素上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识(１)来源。哺乳奶牛妊娠期间的黄体产生,子宫和胎盘也可产生。(２)作用。促使骨盆韧带及耻骨联合松弛,使子宫颈口开张,以有利于分娩时期胎儿产出。(３)应用。用于奶牛分娩。６.前列腺素(１)来源。前列腺素不是由专一的内分泌腺所产生,前列腺细胞广泛存在于奶牛的各种组织中,生殖器官是其主要来源。(２)作用。①溶解黄体。使卵巢上的黄体溶解,促进母牛发情。②促进排卵。前列腺素能促进卵泡壁降解酶的合成,刺激卵泡外膜收缩,导致排卵。上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识③刺激公牛输精管道收缩,有利于精子的运行和受精。④提高精子通过子宫颈黏液和穿透卵子的能力。(３)应用。①溶解黄体、诱导发情。②治疗奶牛繁殖疾病。③诱发分娩,用来人工引产。④促进子宫收缩,提高精子的运动能力,提高受胎率。７.外激素外激素是动物个体向周围环境释放的一种或多种化学物质,作为信息引起同类动物行为和(或)生理上的特定反应。(１)来源上一页下一页返回４.２生殖激素基础知识它是由分布在身体各部、靠近体表的一些腺体分泌,

有些奶牛的尿液中也有外激素。(２)作用。①提早性成熟时间。②终止乏情期,促进发情。③对发情持续期和排卵时间产生重要作用。④促进雄性性行为。(３)应用。主要用于母畜的催情、公畜的采精训练。４.２.４应用生殖激素应注意事项(１)生殖激素应避光、低温保存。(２)对奶牛用激素时要慎重,严控用量,不可经常使用,严禁滥用生殖激素。(３)根据用途和适应症状把握好应用的时机和正确选择激素的类型及使用量。上一页返回４.３奶牛生殖生理４.３.１公牛精子与精液１.精子的发生精子是雄性奶牛到一定年龄后由睾丸分化出来的特殊细胞。在精细管内由精原细胞经精母细胞到精子细胞的分化过程称为精子的发生(精子在睾丸内形成的全过程)。精子发生以精原细胞为起点。精细胞分裂不同于体细胞,即自精原细胞起到最后变成精子,需经过复杂的分裂和分化过程,在此过程中染色体数目减半,细胞质和细胞核也发生明显变化。公牛精子发生的全过程需约６０天。下一页返回４.３奶牛生殖生理２.精子的形态和结构精子的结构分头、颈、尾三部分,如图４－４。(１)头。奶牛精子的头部呈椭圆形。细胞核:染色体和ＤＮＡ的含量为体细胞的一半。顶体:顶体内含有多种水解酶。核后帽:包在核后部分细胞膜上,对伊红和溴酚蓝易着色的属于死精子,不易着色的为活精子,因此可以鉴别死活精子。细胞质膜:主要含脂蛋白,耐酸不耐碱。(２)颈。连接头部和尾部,由近端中心小体、基粒、厚纤维组成,是精子最脆弱的部分,易脱落形成无尾精子。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理(３)尾。是精子的运动器官。精子的运动主要靠尾的鞭索状波动,而使精子推向前进。尾部中段因富含为精子提供能量的线粒体,是精子能量代谢的中心所在。３.精液与精液组成(１)精液的组成精液由精子和精清两部分组成。精清是由睾丸液、附睾液、副性腺分泌物组成的混合液体。不同种动物精液含量差异很大,通常牛和羊的精液量小,而精子的密度很大,猪和马则相反。(２)精液的成分上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理无机成分:阳离子以Ｋ＋和Ｎａ＋为主,精子内的Ｋ＋的浓度比精液中的高。糖类:精液中含有的糖主要是果糖,而且大多数来源于精囊腺,精液中无葡萄糖。蛋白质和氨基酸:精子中的蛋白质主要是组蛋白,约占精子干重的一半以上,主要在头部与ＤＮＡ结合构成碱性的核蛋白,并在尾部形成脂蛋白和角质蛋白。脂类:精液中脂类物质主要是磷脂。在精子中大量存在,主要存在于精子表膜和线粒体内,而且尾部多于头部。精清中的磷脂主要是卵磷脂和缩醛磷脂。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理酶:精清中的酶主要来源于副性腺。其他有机物:来源于精囊腺。包括有机酸盐、胆固醇、尿素、柠檬酸等。维生素:精液中含有几种维生素,这和奶牛本身的营养有关。主要有维生素Ｂ１、维生素Ｂ２和维生素Ｃ等,这些维生素的存在有利于提高精子的活力或密度。(３)精清的功能精清具有稀释和运送精子、供给精子营养的功能,对精子适应外界环境起一定的缓冲作用。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理４.精子的运动精子是可独自活动的非常活跃的细胞,它能依靠尾部的摆动而运动,这种运动的能力称为精子的活动力或活力。精子活动力表现出三个不同的运动方式:直线前进运动:精子按直线方向前进运动,表示活力最强。旋转运动:精子作转圈运动,表示活力较低。摆动:精子在原地呈微弱的左右摆动,表示活力最低。旋转运动和原地摆动的精子均没有受精能力。５.外界因素对体外精子的影响(１)温度上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理最适合精子运动和代谢的温度是奶牛的体温。高温:高温使精子的代谢和活力增强,加快能量消耗,缩短精子存活时间。除冷冻保存精液外,体外保存精子的最合适的温度是０℃~１０℃,检查精子活力的温度是２０℃~４０℃,精子死亡温度是５４.５℃~５６℃;若温度长期超过２５℃以上,精子活力会随着时间的推移呈明显下降。低温:将精液的温度缓慢下降至０℃,对精子的存活力无不良的影响。但如急剧降至１０℃以下,会使精子很快失去活力,而且不能复苏,这种情况称为冷休克。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理超低温:－１９６℃液氮超低温保存精子,可使精子的代谢和活动力基本停止,因而可以长期保存。(２)光照和辐射光照能显著缩短精子的存活时间,对精子有害。紫外线不仅降低精子受精能力,而且可杀死精子。Ｘ射线也有破坏、杀死精子的作用。(３)酸碱度精子在生存过程中,要有一定的酸碱度范围,过高过低对精子的活动都有影响而造成精子死亡。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理ｐＨ偏低即弱酸性环境,精子活动受到抑制,呼吸作用减弱,此时精子呈休眠状态,暂时不活动;ｐＨ偏高即碱性环境中精子的代谢活动都增强,以至容易耗费能量,存活时间不能持久。在精液保存时,常加入一些缓冲剂,如柠檬酸盐、磷酸盐以调整ｐＨ值,防止ｐＨ值改变。奶牛精液适宜的ｐＨ值范围为６.４~７.８。(４)渗透压精子与其周围的液体基本上是等渗透压,液体渗透压高,容易引起精子本身水分的脱出,致使尾部呈锯齿状,头部缩小。反之,低渗透压则使精子头部膨大,尾部圆形弯曲,一般来说,低渗比高渗危害更大。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理(５)离子浓度一般来说,阴离子对精子的损害力较强于阳离子,而且离子之间也有差异。(６)气体氧对精子的呼吸是必不可少的,但二氧化碳可抑制精子的呼吸和分解糖的能力。(７)稀释和浓度在精液加入糖类或缓冲剂使渗透压与精子相等时,对精液保存有利,适当的稀释对精子保存有利,但高倍稀释时精子活力容易受到损害,高倍稀释还能破坏精子细胞膜的磷脂物质。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理由于高倍稀释造成的渗透压改变对精子也有损伤作用。(８)化学物质抗生素能延长精子的存活时间,但消毒剂、防腐剂等对精子有破坏作用或能直接杀死精子。(９)振动与离心轻微而少量的振动对精子没有严重影响,但振动对精子存活是不利的;离心力对精子影响并不严重,通过分离减少精清的危害。马、猪精液保存时,将精子和精清分离后,再行稀释。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理４.３.２母牛生殖机能的发育母牛生长发育到一定年龄时,便开始表现有发情现象,发情是在未妊娠状态下母牛所表现出的有规律性、周期性的生理变化。１.性机能发育母牛的性机能发育过程一般分为初情期、性成熟期、生殖机能旺盛期及生殖机能停止期(指停止繁殖的年龄),

如表４－１所示。此外,为了指导生产实践,根据不同奶牛性成熟和体成熟时期,人为地规定了适配年龄。(１)初情期与性成熟。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理初情期是指母牛生长发育至一定年龄时,出现初次发情和排卵的时期,此时配种便有受精的可能性。初情期母牛虽有发情表现,但不完全,发情周期也往往不正常,其生殖器官和机体仍在继续生长发育中。初情期后,随着年龄的增长,生殖器官发育完全,发情周期和排卵已趋正常,具备了正常繁殖后代的能力,此时称之为性成熟。到达性成熟期的母牛,由于此时身体的生长发育尚未完成,故一般不宜配种,过早怀孕,一方面会妨碍母牛本身的发育,另一方面也会影响胎儿的生长发育,导致后代体重减轻、体质衰弱或发育不良。(２)体成熟与适配年龄。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理性成熟后,母牛再经过一定时期发育,当机体器官组织发育完成并具有成年奶牛固有的外貌特征,此时称为体成熟。在生产实践中,考虑母牛机体的发育成熟情况和经济价值,一般选择在性成熟之后体成熟之前用于繁殖,这个适于开始繁殖的年龄称为适配年龄(或称繁殖年龄)。母牛开始配种时的体重一般应达到成年体重的７０％左右。(３)繁殖机能停止期。母牛的繁殖能力有一定的年限,年限的长短因品种、饲养管理以及健康情况之不同而异。母牛到达老龄时,卵巢生理机能逐渐停止,不再出现发情和排卵。母牛一般在此年龄之前,因已失去饲养价值而多被淘汰。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理２.卵泡发育和排卵(１)卵泡发育①卵子的发生雌性生殖细胞分化和成熟的过程称为卵子发生。卵子的发生过程包括卵原细胞的增殖、卵母细胞的生长和卵母细胞的成熟三个阶段。卵原细胞的增殖。奶牛在胚胎期性别分化后,雌性胎儿的原始生殖细胞便分化为卵原细胞。卵原细胞通过有丝分裂,一分为二,二分为四,形成许多卵原细胞,这个时期称为增殖期,或称有丝分裂期。卵原细胞经过最后一次有丝分裂之后,即发育为初级卵母细胞并进入成熟分裂前期,经短时间后,便被卵泡细胞所包围而形成原始卵泡。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理卵母细胞的生长。卵原细胞经最后一次分裂而发育成为初级卵母细胞并形成卵泡。这个时期的主要特点是:卵黄颗粒增多,使卵母细胞的体积增大;透明带出现;卵泡细胞通过有丝分裂而增殖,由单层变为多层。卵泡细胞作为营养细胞为卵母细胞提供营养物质,为以后的发育提供能量来源。卵母细胞的成熟。卵母细胞的成熟是经过两次成熟分裂。卵泡中的卵母细胞是一个初级卵母细胞,在排卵前不久完成第一次成熟分裂称为次级卵母细胞。受精时才完成第二次成熟分裂。②卵子的形态和结构卵子的形态。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理哺乳动物的卵子为圆球形,凡是椭圆、扁圆、有大型极体或卵黄内有大空泡的,特别是特大或特小的卵子都属于畸形卵子。卵子的结构。卵子的主要结构包括放射冠、透明带、卵膜及卵黄等部分。放射冠:紧贴卵母细胞透明带的一层卵丘细胞呈放射状排列,称为放射冠。卵膜:卵子有两层明显的被膜,即卵黄膜和透明带。卵黄膜是卵母细胞的皮质分化物。透明带:是一均质而明显的半透膜,一般认为它是由卵泡细胞和卵母细胞形成的细胞间质。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理透明带和卵黄膜具有保护卵子完成正常的受精过程,使卵子有选择性地吸收无机离子和代谢产物,对精子具有选择作用。卵黄:卵黄占据透明带内大部分容积,内含有核,是重要的遗传物质。③卵泡的发育母牛初情期前,卵泡虽能发育但不能成熟排卵,当发育到一定程度时便闭锁和退化。初情期后,卵巢上的原始卵泡才通过一系列发育阶段而达到成熟排卵。卵泡发育从形态上可分为几个阶段,依次为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡。有的把初级卵泡开始生长至三级卵泡阶段,统称为生长卵泡。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理④卵泡的闭锁和退化奶牛出生前,卵巢上就有很多原始卵泡,但只有少数卵泡能够发育成熟和排卵,绝大多数卵泡发生闭锁和退化。退化的卵泡数出生前较出生后多,出生后,又是初情期前较初情期后多,因此,卵泡的绝对数随着年龄的增长而减少。(２)排卵和黄体形成成熟的卵泡突出卵巢表面,突出的部分卵泡破裂,卵母细胞和卵泡液及部分卵丘细胞一起排出,称为排卵。①排卵的过程。随着卵泡发育和成熟,卵泡液不断增加,卵泡容积增大并凸出于卵巢表面,但卵泡内压并没有提高。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理突出的卵泡壁扩张,细胞质分解,卵泡膜血管分布增加、充血,毛细血管通透性增强,血液成分向卵泡腔渗出。随着卵泡液的增加,卵泡外膜的胶原纤维分解,卵泡壁变柔软,富有弹性。突出卵巢表面的卵泡壁中心呈透明的无血管区,排卵前卵泡外膜分离,内膜通过裂口而突出,形成一个乳头状的小突起,称为排卵点。排卵点膨胀并破裂,卵泡把卵母细胞及其周围的放射冠细胞随卵泡液一同排出,卵子被输卵管所接纳。由于输卵管的纤毛上皮的摆动,将卵母细胞送入输卵管壶腹部。②排卵时间和排卵数。排卵是成熟卵泡在促黄体素作用下产生的,奶牛的排卵时间大约在发情结束后的１０~１８小时,每个生殖周期排卵１~２枚。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理③黄体形成与退化。成熟卵泡排卵后形成黄体,黄体分泌孕酮作用于生殖道,使之向妊娠的方向变化,如未受精,一段时间后黄体退化,开始下一次的卵泡发育与排卵。４.３.３母牛的发情１.发情母牛生长发育到一定年龄后,在垂体促性腺激素的作用下,卵巢上的卵泡发育并分泌雌激素,引起生殖器官和性行为的一系列变化,并产生性欲,母牛所表现出的这种生理状态称为发情。正常的发情主要有三方面的征状:即卵巢、生殖道和行为发生变化。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理求偶表现:母牛主动接近公畜,举尾、叉开后肢、接受爬跨;有的母牛阴门表现开闭动作。外生殖道变化:外阴部、阴蒂潮红肿胀;流出阴门的黏液增多,随着发情时间的推移,黏液由多变少,由稀薄变黏稠,牵缕性增强。行为变化:母牛在发情时往往表现出兴奋不安,对外界的变化十分敏感,频繁走动,食欲下降,哞叫。２.发情周期母牛初情期以后,卵巢出现周期性的卵泡发育和排卵,并伴随着生殖器官及整个有机体发生一系列周期性生理变化,这种变化周而复始(非发情季节和怀孕期间除外),一直到性机能停止活动的年龄为止,这种周期性的性活动称为发情周期。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理发情周期的计算,一般是指从一次发情的开始到下一次发情开始的间隔时间。奶牛的发情周期平均为２１天。３.发情周期的划分根据卵巢和阴道上皮细胞的变化将发情周期划分为四个阶段。(１)发情前期。这是卵泡发育的准备时期。此期的特征是:上一个发情周期所形成的黄体进一步退化萎缩,卵巢上开始有新的卵泡生长发育。但尚无性欲表现。(２)发情期。指母牛性欲达到高潮时期。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理此期特征是:愿意接收雄性交配,卵巢上的卵泡迅速发育,雌激素分泌增多,强烈刺激生殖道,使阴道及阴门黏膜充血肿胀明显,子宫黏膜显著增生,子宫颈充血,子宫颈口开张,子宫肌层蠕动加强,腺体分泌增多,有大量透明稀薄黏液排出。多数是在发情期的末期排卵。(３)发情后期。指排卵后黄体开始形成的时期。此期特征是:母牛由性欲激动逐渐转入安静状态,卵泡破裂排卵后雌激素分泌显著减少,黄体开始形成并分泌孕酮作用于生殖道,使充血肿胀逐渐消退,子宫肌层蠕动逐渐减弱,腺体活动减少,黏液量少而稠,子宫颈管逐渐封闭,子宫内膜逐渐增厚,阴道黏膜增生的上皮细胞脱落。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理(４)间情期(又称休情期)。指黄体活动时期。此期特征是:母牛性欲已完全停止,行为恢复正常。４.异常发情、乏情和产后发情(１)异常发情。母牛异常发情多见于发情初期后、性成熟前性机能尚未发育完全的一段时间内;性成熟以后由于环境、生理等异常也会导致异常发情,如劳役过重,营养不良,内分泌失调,泌乳过多,饲养管理不当和温度等气候条件的突变以及繁殖季节的开始阶段。常见的异常发情主要有以下几种。①短促发情。指母牛发情持续时间短,如不注意观察,往往错过配种时机。短促发情多发生于青年母牛。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理其原因可能是神经内分泌系统的功能失调,发育的卵泡很快成熟破裂排卵,缩短了发情期,也可能是由于卵泡突然停止发育或发育受阻而引起。②断续发情。指母牛发情延续很长,且发情时断时续。其原因是卵泡交替发育,先发育的卵泡中途发生退化,新的卵泡又再发育,因此产生断续发情的现象,当其转入正常发情时,就有可能发生排卵,配种也可能受胎。③持续发情。持续发情表现为慕雄狂的症状,表现为持续强烈的发情行为。发情周期不正常,发情期长短不一,经常从阴户流出透明黏液,阴户浮肿,荐坐韧带松弛,同时尾根举起,配种不受胎。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理④安静发情。母牛发情时缺乏发情外表症状,但卵巢上有卵泡发育、成熟并排卵。常见于产后带犊母牛或产后第一次发情,每天挤奶次数过多或体质衰弱的母牛以及青年母牛或营养不良的母牛。引起安静发情的原因是由于体内相关激素内分泌失调所致,例如雌激素分泌不足,发情外表症状就不明显;促乳素分泌不足或缺乏,促使黄体早期萎缩退化,孕酮分泌不足,降低了下丘脑中枢对雌激素的敏感性,使母牛缺少发情的外部表现和交配欲。⑤慕雄狂。发生的原因与卵泡囊肿有关,但并不是所有的卵泡囊肿都具有慕雄狂的症状,也不是只有卵泡囊肿才引起慕雄狂表现.上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理⑥妊娠发情。又称孕后发情或假发情,是指母牛在妊娠期仍有发情表现。母牛在妊娠最初３个月内,常有１０％的母牛发情。孕后发情发生的主要原因是由于激素分泌失调,即妊娠黄体分泌孕酮不足,而胎盘分泌雌激素过多所致。母牛有时也因在怀孕初期,卵巢上仍有卵泡发育,致使雌激素含量过高而引起发情,并常造成怀孕早期流产,有人称之为“激素性流产”。(２)乏情。乏情是指已达初情期的母牛不发情,卵巢无周期性的功能活动,处于相对静止状态。它一般不是由于疾病引起的,属于一种生理现象,是生理性乏情。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理①泌乳性乏情。有些奶牛在产后泌乳期间,由于卵巢周期性活动机能受到抑制而引起的不发情。挤乳乳牛每天挤乳多次比每天挤乳两次的母牛出现发情时间要延长。高产乳牛或哺乳犊牛数多的,乏情期一般较长。泌乳引起乏情的原因,是由于在泌乳期间过多泌乳刺激,如吮乳或挤乳的刺激而诱发外周血浆中促乳素浓度的升高,而促乳素对下丘脑产生负反馈作用,抑制了促性腺激素释放激素的释放,因而使垂体前叶促卵泡素分泌减少和促黄体素合成量降低,致使母牛不发情。另一方面,泌乳过多会抑制卵巢周期活动的恢复,因而影响发情。②营养性乏情。日粮中营养水平对卵巢机能活动有明显的影响。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理因营养不良可以抑制发情,且青年母牛比成年母牛影响更大。③应激性乏情。不同环境引起的应激,如气候恶劣、牛群密集、使役过度、栏舍卫生不良、长途运输等应激因素都可抑制奶牛发情、排卵及黄体功能,这些应激因素可使下丘脑—垂体—卵巢轴的机能活动转变为抑制状态。④衰老性乏情。奶牛因衰老使下丘脑—垂体—性腺轴的功能减退,导致垂体促性腺激素分泌减少,或卵巢对激素应答能力降低,不能激发卵巢机能活动而表现不发情。⑤病理性乏情。卵巢和子宫异常,卵巢发育不全,生殖道为幼稚型的母牛往往不表现发情。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理牛的卵巢囊肿可造成乏情期延长;由于子宫积脓、黏液蓄积、胎儿干尸化、流产等病理变化,可导致母牛不发情。(３)产后发情。产后发情是指母牛分娩后的第一次发情。母牛一般可在产后４０~５０天发情。４.３.４奶牛的受精精子和卵子结合形成合子的过程就称为受精。合子是新个体发育的起点。１.配子在受精前的准备(１)精子的运行。精子的运行是指精子在母牛生殖道内由射精部位或输精部位到达输卵管壶腹部的过程。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理经人工授精或自然交配后,一部分活精子靠自身的运动穿过黏液移入子宫,另有一部分活精子进入子宫颈腺窝,以后再陆续释放入子宫。进入子宫颈内的精子,一部分随宫颈收缩活动而被拥入子宫内,一部分死精子借纤毛的颤动而被运往阴道,或随黏液排出,另一部分死精子则被白细胞吞噬。子宫和输卵管的收缩作用,同时输卵管上皮纤毛的颤动是精子运行的主动力;同时子宫颈的吸入作用,交配时由于阴茎的抽动使子宫产生负压、精子本身的运动力、子宫和输卵管管腔液体的液流运动等都可促使精子向输卵管壶腹部运动,从而完成和卵子结合前的运行过程。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理母牛输精后精子从输精部位运行到壶腹部的大致时间为２~１３分钟。精子在母牛生殖道内的存活时间与具有受精能力的时间:精子在母牛生殖道内保持存活能力的时间一般为１５~５６小时。(２)精子获能。刚进入母牛生殖道内的精子,或由附睾取出的精子,不能立即与卵子发生融合,必须经过一定时间和形态及生理变化之后,才能获得受精能力,这一现象称为精子获能。精子获能的基本机理是:在精清里含有某些抗受精物质,它能抑制精子的受精能力,

叫去能因子。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理去能因子被覆在精子的细胞膜上,使精子顶体的受精酶活性不强,精子不具备受精能力。当精子通过母牛的子宫和输卵管时,在某些酶作用下,去能因子失去活性,从而使精子具备了受精能力。一般认为获能过程先在子宫内进行,最后在输卵管内完成,子宫和输卵管对精子获能起协同作用。２.卵子受精前的准备(１)卵子的运行。卵子不像精子那样本身就能运动,卵子本身并没有运动能力。卵子在输卵管内的运行,在很大程度上则是依赖于输卵管的收缩、液体的流动及纤毛的摆动。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理卵子在输卵管内运行过程中,首先在壶腹部与精子结合形成受精卵,然后在壶峡连接部及峡部运行中进行早期胚胎发育。奶牛的卵子到达壶腹部的时间约为８~１２小时,通过输卵管的时间约为９０小时。(２)卵子的获能。刚排出的卵子在到达输卵管壶腹部前不具有受精能力。卵子在到达输卵管壶腹部时,再进一步成熟,卵子才能受精。３.受精过程(１)精子穿过放射冠。放射冠是由放射冠细胞彼此以胶样物质粘连起来的。当获能的精子与卵子相遇时,精子就发生顶体反应。顶体反应为精子通过放射冠和透明带不可缺少的过程。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理(２)精子穿过透明带。精子在获能后,顶体即已松动,当接触透明带时,头端质膜与顶体外层膜均已脱落,精子头部前端仅覆盖一层顶体内膜,此膜含有顶体素,它是一种类胰蛋白酶。此酶能溶解透明带,使精子穿过透明带。(３)精子进入卵黄。精子穿过透明带接触到卵黄膜表面,引起卵细胞质发生一种反应,精子方能和卵子表面相附着。当一个精子进入卵黄后,卵黄表面对其他精子的接触不发生反应,拒绝新的精子进入卵黄,卵黄膜的这种变化称为卵黄膜封闭作用或称多精子入卵阻滞。(４)原核形成。精子进入卵黄后引起卵黄收缩并排出液体进入卵黄周隙。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理此时精子头部膨大,尾部脱落,精子核形成核仁,周围形成核膜,形成雄原核。大多数奶牛的卵子在精子进入卵黄后,卵子进入第二次成熟分裂,排出第二极体。(５)合子形成。雌原核和雄原核同时发育增大,彼此靠近、接触、融合在一起,形成双倍染色体。至此受精结束,受精后的卵子称为合子。４.３.５奶牛的妊娠受精卵沿着输卵管下行,经过卵裂、桑椹期、囊胚期、原肠期和附植,形成一个新个体的过程叫妊娠,妊娠期是从受精卵形成(一般由最后一次配种日期开始计算)到分娩为止。包括胚胎期和胎儿期。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理１.胚胎的早期发育从受精卵第一次卵裂到发育成原肠胚的过程称为胚胎的早期发育。根据其特点将胚胎的早期发育分为三个时期:桑椹期、囊胚期、原肠期。２.胚胎又叫胚泡早期胚胎在子宫腔内游离一段时间以后,由于泡腔内液体增多,胚泡变大,在子宫内的活动受到限制,位置逐渐固定下来,同时胚胎的滋养层与子宫内膜产生组织和生理联系,这一过程称为附植或着床。附植是一个渐进的过程,胚胎在子宫附植的位置和时间也因奶牛种类不同而异。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理３.胎膜和胎盘(１)胎膜。胎膜是胎儿的附属膜,是胎儿本体以外包被着胎儿的几层膜的总称。其作用是与母体子宫黏膜交换养分、气体及代谢产物,对胚胎和胎儿的发育极为重要。在胎儿出生后,即被摒弃,所以是一个暂时性器官。通常按其结构部位及功能而分为羊膜、尿膜、绒毛膜和卵黄囊。卵黄囊。卵黄囊由胚胎发育早期的囊胚腔形成。卵黄囊只在胚胎发育的早期阶段起营养交换作用。一旦尿膜出现,其功能即为后者替代。随着胚胎的发育,卵黄囊逐渐萎缩,最后埋藏在脐带里,成为无机能的残留组织,而称为脐囊。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理羊膜。羊膜是包裹在胎儿外的最内一层膜,由胚胎外胚层和无血管的中胚层形成。在胚胎和羊膜之间有一充满液体的腔———羊膜腔,内含羊水。羊膜不仅能保护胚胎免受震荡和压力的损伤,同时,还为胚胎提供了向各方面生长发育的条件。随着尿囊的发育,其逐渐萎缩。尿膜。是构成尿囊的膜。尿膜由胚胎的后肠向外生长形成。其功能相当于胚体外临时膀胱,并对胎儿的发育起缓冲保护作用。尿囊中存有尿水。绒毛膜。绒毛膜是胚胎最外层膜,其发生与羊膜相似。绒毛膜包裹着尿囊、羊膜囊和胎儿。绒毛膜表面有绒毛,富含血管网。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理除马的绒毛膜不和羊膜接触外,其他奶牛的绒毛膜均有部分与羊膜接触。脐带。脐带是联系胎儿和胎盘的束状组织,被覆羊膜和尿膜,其中有两支脐动脉、一支脐静脉(反刍奶牛有两支),有卵黄囊的残迹和脐尿管。其血管系统和肺循环相似,脐动脉含胎儿的静脉血,而脐静脉则来自胎盘,富含氧和其他成分,具动脉血特征。脐带随胚胎发育逐渐变长,使胚体可在羊膜腔中自由移动。(２)胎盘。胎盘通常指由尿膜绒毛膜和子宫黏膜发生联系所形成的构造。上一页下一页返回４.３奶牛生殖生理奶牛的胎盘为子叶型胎盘。绒毛集中在绒毛膜表面某些部位,形成许多绒毛丛,呈盘状或杯状凸起,即胎儿子叶。胎儿子叶与母体子宫内膜的特殊突出物———子宫阜(母体子叶)融合在一起形成胎盘的功能。胎儿子叶上的许多绒毛,嵌入母体子叶的许多凹下的腺窝中。子叶之间一般无绒毛,表面光滑,故称子叶型胎盘。此类胎盘,胎儿胎盘和母体胎盘结合紧密,分娩时不易分离,母体胎盘易损伤。胎盘是连接母体和胎儿的纽带,具有输送、贮存和生物合成等方面的功能。是母体和胎儿气体交换、营养供给、代谢产物交换的接口,同时具有防御、内分泌、调节和维持妊娠的作用。上一页返回４.４奶牛繁殖技术４.４.１母牛的发情鉴定发情鉴定是奶牛繁殖工作中的一项重要技术环节。通过发情鉴定,可以判断奶牛的发情阶段,预测排卵时间,以便确定配种适期,及时进行配种或人工授精,从而达到提高受胎率的目的,通过发情鉴定还可以发现奶牛发情是否正常,以便发现问题,及时解决问题。１.外部观察法此法是奶牛发情鉴定最常用的方法,主要观察奶牛的外部表现和精神状态,从而判断其是否发情或发情的程度。发情奶牛常表现为精神不安,哞叫,食欲减退,外阴部充血肿胀、湿润,有黏液流出。上述特征表现随发情进程由弱到强,再由强到弱,发情结束后消失。下一页返回４.４奶牛繁殖技术２.阴道检查法此法是应用阴道开张器插入并扩张阴道,借用光源,观察阴道黏膜颜色,充血程度,子宫颈松弛状态,子宫颈外口的颜色、充血肿胀程度及开口大小,分泌液的颜色、黏稠度及量的大小,有无黏液流出等来判断发情的程度。检查时,阴道开张器要洗净消毒,以防感染,插入时要小心谨慎,以免损伤阴道黏膜。此法由于不能准确地判断奶牛的排卵时间,因此,目前只作为一种辅助性检查手段。３.直肠检查法主要应用于牛、马等大动物,因结果准确可靠,在生产上应用广泛。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术方法是用臂伸进母牛的直肠内,隔着直肠壁用手指触摸卵巢及卵泡发育情况,如卵巢的大小、形状、质地,卵泡发育的部位、大小、弹性,卵泡壁的厚薄以及卵泡是否破裂,有无黄体等。通过直肠检查并结合发情外部症状,可以准确地判断卵泡发育程度及排卵时间,以便准确地判定配种适期。但在采用此法时,术者须经多次反复实践,积累比较丰富的经验后,才能正确掌握和判断。母牛直肠检查时卵泡发育时期的判断方法如下:第一期(卵泡出现期):表现为卵巢体积稍微增大,卵泡的体积为０.５~０.７５ｃｍ,触之能感觉到卵巢上有一个软化点。这一期持续约１０小时。母牛开始出现发情的外表征候。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术第二期(卵泡发育期):卵泡直径１~１.５ｃｍ,触摸时感觉卵泡光滑而有弹性,内部略有波动的感觉。这一期持续１０~１２小时。第三期(卵泡成熟期):卵泡体积不再增大,卵泡液增多,但卵泡壁变薄,紧张性增强,有一触即破的感觉。这一期持续６~８小时。此期母牛的发情征候明显。第四期(排卵期):母牛性兴奋消失后１０~１５小时卵泡开始破裂,泡液流失,泡壁变为松软,呈一凹陷。排卵后６~８小时黄体形成,触感柔软,凹陷不明显,凹陷直径约为０.５~０.８ｃｍ,母牛开始进入休情期。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术母牛的发情鉴定除了上述方法外,另外还有子宫颈黏液ｐＨ值测定法、牛奶中生殖激素测定法等。在母牛发情鉴定时,既要观察外部表现,又要检查生殖道及卵泡的发育变化,同时还要联系影响发情的其他因素,根据各种奶牛的特点,采取重点与一般相结合、进行综合分析判断的原则。４.４.２精液品质检查精液品质检查的目的是在于鉴定精液品质的优劣,以便决定能否用于输精,并依此作为检验精液稀释、保存和运输效果的依据。精液品质检查的项目很多,一般精液检查项目有以下几项。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术１.外观检查主要是肉眼检查,常规检查项目包括射精量、色泽、气味、云雾状等。(１)采精量。采精后将集精瓶中的精液在等温的环境下,盛装在有刻度的试管或精液瓶中,可量测出公牛的采精量。(２)颜色。牛正常精液呈乳白色或浅黄色,若呈淡绿色表示精液中混有脓汁,呈淡红色表示混有血液,呈黄色表示混有尿液。(３)气味。正常精液无臭味,略带有腥味。检查时用手轻轻扇动精液容器上方的空气,同时用鼻子嗅出精液的气味。(４)云雾状。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术是精子运动活跃的表现。云雾状明显可用“＋＋＋”表示;较明显可用“＋＋”表示;不明显用“＋”表示。２.精液的ｐＨ值检查新鲜的精液ｐＨ值一般在７左右,牛的精液呈弱酸性。测定ｐＨ值最简单的方法是用试纸比色,目测即可;更为准确的方法是电动比色测定ｐＨ值。３.精子活力检查精子不同于机体其他细胞的显著特点是具有离体后仍可独立活动的能力,精子的活动能力称为精子活动力,简称精子活力。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术精子活力检查是在显微镜下观察精子所表现活动能力的强弱,是常规检查的项目,也是评价精液品质的一个重要指标。一般在采精后、输精前、稀释保存前后、运输后等都要检查。精子活力检查通常用显微镜检查法。精子活力就是指显微镜下呈直线运动精子占全部精子的百分数。精子活力多采用十级评分法,即呈直线运动的精子占１０％可评为０.１分,呈直线运动的精子占２０％则评为０.２分,以此类推。具体方法是:将显微镜保温箱调至３７℃~３８℃,取１滴精液滴于载玻片上,覆一盖玻片,或制成悬滴标本(将精液滴于盖玻片上,而后反转放在凹玻片之凹部),置于４００倍显微镜下检查精子运动状况,并估计前进运动精子占整个视野内精子的百分数。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术４.精子密度精子密度也称精子浓度,是指每毫升精液中含有的精子数目。目前测定精子密度的方法常采用估测法、血细胞计算法和光电比色测定法等。(１)估测法。在显微镜下根据精子分布的稀稠程度,将精子密度粗略地分为“密”“中”“稀”。此法常用于牛羊精子密度的评定。具体判定标准如下:“密”视野中看不清单个精子的活动,精子间的间隙很小,不能容下另一个精子,可记为“密”。每毫升精液中精子数在１０亿个以上。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术“中”视野中可以看清单个精子的活动,精子之间的间隙可容下另一个精子,可记为“中”。每毫升所含精子数约在２亿~１０亿个之间。“稀”视野中精子分布稀疏,精子之间的间隙可容下两个或两个以上另外的精子,可记为“稀”。每毫升精液中精子数在２亿个以下。(２)血细胞计数法。通过计算每毫升精液中所含精子数多少来衡量精子的密度。一般采用血细胞计算板进行。此法设备简单,能较准确地测定精子的密度。(３)光电比色计测定法。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术是目前评定精子密度的一种准确方法,此法是根据精子越多、精液越浓、其透光率越低的特性而进行测定。５.精子形态的检查精子的形态是否正常与母牛受胎率有密切关系。检查项目有:(１)精子畸形率。精子畸形率是指精液中畸形精子数占总精子数的百分比。在奶牛的正常精液中,精子畸形率一般不超过２０％,否则视为精液品质不良,不能用于输精。一般检查方法是进行染色,在显微镜下观察计数。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术(２)精子顶体异常率。顶体异常有顶体膨胀、缺损、部分脱落、全部脱落等。一般在１０００倍显微镜下观察,随机观察５００个精子,计算精子顶体异常的比率。６.精液检查注意事项(１)采集的精液要迅速置于３０℃左右的恒温水浴中或保温瓶中,以防温度突然下降,对精子造成低温打击。按照采精技术规程要求,注意保持工作室(２０℃~３０℃)和显微镜周围(３７℃~３８℃)适宜温度。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术(２)如果同时进行多头公畜精液检查时,要对精液来源作出标记,以防错乱。(３)检查时要求动作迅速,尽可能缩短检查时间,以便及时对精液作出稀释保存等处理,防止精液品质因操作时间过长而下降。(４)检查操作过程不应使精液品质受到危害,如蘸取精液的玻璃棒等用具,既要消毒灭菌,又不能残留有消毒药品及其气味。(５)取样要注意代表性,应从采得的全部并经轻轻振动或搅拌均匀的精液中取样,以力求评定结果客观准确。(６)评定精液质量等级,应对各项检查结果进行全面综合分析,一般不能由一两项指标就得出结论。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术４.４.３奶牛冷冻精液的贮运和解冻目前,冻精保存的最好和普遍采用的方法是以液氮做冷源,以液氮罐为贮存容器。１.液氮及特性液氮是空气中氮气经分离、压缩形成的一种无色、无味、无臭、无毒的超低温液体,标准温度为－１９５.８℃。在气化时,每升可以从周围吸收２００千焦(４８千卡)热量,汽化后温度上升至１８℃时,体积膨胀６８０倍。此外,液氮为不活泼气体,其渗透性很弱,本身无杀菌能力,故精子、细菌、微生物等仍能在其中生存,只是－１９６℃的超低温可使多数细菌、病毒停止繁殖。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术２.液氮容器液氮的容器,包括冷冻精液贮存容器和液氮贮运器两种。前者为贮存精液用,一般多为容积不等的液氮罐。液氮贮运器为贮存和运输液氮用,有大容器的液氮槽、液氮车,也有小容器的运输液氮罐。目前冷冻精液使用的液氮罐,型号很多,但其基本结构相同。(１)内外壳体。液氮罐由内外两层壳体构成,一般采用铝合金制造。(２)内槽。指液氮罐内胆中的空间。内槽底部有底座,供固定提筒用,液氮、提筒和冻精都置于内槽中。(３)夹层。指罐内外壳体间的空隙是抽成高真空状态。为增进罐体的高绝热性能,夹层中还装有活性碳、硅胶及镀铝涤纶薄膜等。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术(４)颈管。是由高热阻材料制成、将罐内外壳体连接而成的长管。(５)罐塞。由绝热性能良好的塑料制成,具有减少容器蒸发和固定贮精提筒手柄的双重功能。(６)提筒。是贮存冻精的装置。置于罐体内,其底部和侧部有多个小眼,以便液氮可以渗入其中。提筒的手柄是由绝热良好的塑料制成的,既能防止温度向罐内液氮传导,又能避免取冻精时发生冻伤。液氮罐是比较精密的容器,它主要靠保持真空和减少导热而维持其正常超低温冷藏功能,为了发挥正常功能和保证安全,应注意正确使用和保养。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术使用中要防止撞击、倾倒,定期刷洗保养,定期检查液氮的消耗状况,一般液氮不足容量的１/３时就应添加,放置装有冻精液氮罐的地方应通风良好、阴凉、干燥、清洁。３.运输精液的保存和运输是紧密相连的,只有精液得到有效保护,才能进行精液有效的运输,才能为人工授精技术的普及推广提供先决条件。因此,在运输过程中要注意:第一,运送的精液必须经过稀释并适合保存,运送的精液应有详细的说明书。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术第二,包装要妥善严密,要有防潮湿、防震设施。第三,尽量避免高温、剧烈震动和碰撞。４.解冻由于冷冻精液的剂型不同,解冻方法不同。颗粒冷冻精液的解冻:颗粒冷冻精液的解冻需要特定的稀释液。常用稀释液为２.９％的柠檬酸钠溶液、维生素Ｂ１２

(０.５ｍｇ/ｍｌ)溶液或葡萄糖—柠檬酸液(３％葡萄糖＋１.４％柠檬酸)。解冻时先取１.５~２ｍｌ稀释液于试管中,在水浴锅(或热水)内加热至４０℃,将１~２粒冻精颗粒投入试管中,当融化一半时,取出试管轻轻摇动至全部溶解,检查评定精液品质,然后进行输精。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术细管冷冻精液的解冻:细管冷冻精液的解冻不需要特定的稀释液。细管从液氮罐内取出后,立即投入３８℃~４０℃的温水中,待冻精基本融化(由不透明转化为基本透明)时取出,用消过毒的剪刀剪去细管的封口端,装入输精枪即可输精。细管精液的品质评定可按批次抽样检查,不需要每支检查,以避免影响每头份的输精量和有效精子数。冷冻精液解冻后应尽快输精,如不能立即输精,颗粒精液可在７℃~１５℃条件下保存,细管精液可在０℃~５℃条件下保存。４.４.４输精技术上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术输精是利用器械将精液注入母牛生殖道内,正确的输精技术和适宜的输精时间是提高母牛受胎率的重要条件,这是人工授精的最后环节。主要方法有直肠把握子宫颈输精法、阴道开膣器输精法等。１.输精方法牛的输精方法常用的由直肠把握法和阴道开张法。(１)直肠把握法该法已有较长历史,在２０世纪５０年代,欧美国家多已采用,我国有一些单位也早已应用此法进行输精。随着冷冻精液的推广,我国大部分奶牛场已改用直肠把握输精法,在黄牛改良工作中也逐步推广直肠把握输精法,要求慢插、适深、轻注、缓出。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术进行直肠把握法输精时,应先把母牛保定在配种架内(已习惯直肠检查的母牛可在槽上进行),尾巴用细绳拴好拉向一侧。术者手臂涂上润滑剂,按直肠检查方法将一手伸入母牛直肠内掏出宿粪,然后清洗消毒外阴部、擦干。用一手在直肠内摸到子宫颈,并将它握住(这时要把子宫颈外口握在手中,握得太靠前会使颈口游离下垂,造成输精器不易对上颈口),另一手持装好精液的输精器,从阴门先斜向插入５~１０ｃｍ,再稍向前向下插入到子宫颈口处。这时两手互相配合,使输精器插入到子宫颈,并达到子宫颈深部或子宫体,进行输精。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术在操作过程中个别牛努责剧烈,应握住子宫颈向前方推,以便输精器插入。操作时动作要谨慎,防止损伤子宫颈和子宫体。在输精操作前,要确定是空怀发情牛,否则会导致母牛流产。直肠把握法的优点是受胎率比阴道开张法高,使用器械简单,操作方便。直肠把握法比阴道开张法受胎率高９.７％~１２.３％。(２)阴道开张法该法是用开膣器插入母牛阴道,以反光镜或手电筒光线找到子宫颈外口,用输精器装好精液插入子宫颈外口内１~２ｃｍ,注入精液,取出输精器和开膣器。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术阴道开张法的优点是操作比较简单,容易掌握;缺点是所用器械较多,受胎率比直肠把握法低,目前已很少使用。人工授精所用器械在工作完毕后要立即进行清洗消毒。玻璃和金属器械清洗消毒的程序为:清水清洗→热碱水或洗衣粉水洗涤→清水清洗干净→蒸馏水冲洗→高压灭菌器或恒温干燥箱中消毒后备用。橡胶用品清洗消毒的程序为:热碱水或洗衣粉水充分洗涤→清水冲洗干净→挂在干燥处阴干。纱布、毛巾等先用清水浸泡,然后用洗衣粉水洗涤,再用清水洗几次,晾干,放在高压灭菌器中消毒或蒸煮消毒。２.输精时间上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术奶牛的发情周期平均为２１天,发情持续期较短,大约１８小时,排卵一般发生在发情结束后１０~１６小时。因此,准确的发情鉴定,适时输精是提高受胎率的有力保证。输精时间安排在排卵前６~１８小时内,其受胎率最高。牛的排卵时间不易准确掌握,而根据发情时间来掌握输精时间比较容易,以发情后期输精为好。实践表明,在母牛接受爬跨时(即站立发情阶段的末期或发情后期的开始阶段)、卵泡发育期的后期或卵泡成熟期,输精均可获得最佳的受胎效果。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术３.输精量输精量一般为１ｍｌ。新鲜精液一次输精量含有效精子数１亿个以上。冷冻精液输精量和颗粒标准为１ｍｌ;塑料细管为０.５ｍｌ或０.２５ｍｌ。输精标准以含直线前进运动精子数１５００万~３０００万个为宜。４.输精部位关于输精的深度,试验结果表明,子宫颈深部、子宫体、子宫角等不同部位输精的受胎率没有显著差别。子宫颈深部输精的受胎率是６２.４％~６６.２％,子宫体是６４.６％~６５.７％,子宫角是６２.６％~６７％。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术输精部位过深容易引起子宫感染或损伤,所以,采取子宫颈深部或子宫体输精是比较安全的。当前普遍采用子宫颈深部(子宫颈内口)输精。５.输精次数冷冻精液输精,除母牛本身的原因外,母牛的受胎率主要受精液质量和发情鉴定准确性的影响。若精液质量优良,发情鉴定准确,一次输精可获得满意受胎率。在一个发情期内输精两次,受胎率有所提高。由于发情排卵的时间个体差异较大,一般掌握在１~２次为宜。盲目地增加输精次数,不但不能提高受胎率,有时还可能造成某些感染,发生子宫或生殖道疾病。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术进行两次输精时,可在发现发情时输精１次,间隔１０~１２小时再输精１次。４.４.５奶牛的妊娠诊断技术奶牛配种或输精后,如能尽早地进行妊娠诊断,对于奶牛的保胎、减少空怀、提高母牛繁殖率等具有重要意义。经过妊娠检查,确定怀孕的母牛,按孕畜对待,加强饲养管理,确保母牛和胎儿健康,避免流产;对空怀的母牛,要及时找出原因,采取相应的措施加以改进,提高母牛的繁殖率。奶牛妊娠临床诊断方法有:上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术１.外部观察法通过观察母牛的外部症状进行妊娠诊断的方法。此法适用于各种母牛,缺点是不易做出妊娠早期诊断,常作为妊娠诊断辅助方法。妊娠母牛的外部变化具有如下特点:行为表现:动作谨慎、躲避咬架、嗜睡;食欲表现:食欲旺盛、消化增强、增重明显;新陈代谢:皮肤舒展、毛色光润;水体循环:胎儿压迫,循环受阻、局部水肿;体形变化:后期腹部增大。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术２.直肠检查法主要是触摸子宫的变化,其次是检查卵巢黄体的存在和子宫动脉搏动情况,此法的优点是诊断的准确性高,但需要检查人员具有丰富的实践经验和熟练的技巧。妊娠母牛的直肠检查方法如下:手伸入直肠,先在骨盆腔底找到子宫颈,再由子宫颈向前找到子宫角,检查子宫角的形状、大小、有无收缩反应、有无波动,由子宫角再摸到卵巢检查其体积、质地、形状和有无黄体等。然后检查子宫中动脉。上一页下一页返回４.４奶牛繁殖技术怀孕１个月时两个子宫角逐渐开始不对称,孕角变大变粗,质地松软,收缩不明显,