GB 4789.28-2024 食品安全国家标准　食品微生物学检验　培养基和试剂的质量要求标准立项发展报告

食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:NationalFoodSafetyStandard—FoodMicrobiologicalExamination—QualityRequirementsforCultureMediaandReagents摘要关键词：食品安全；微生物学检验；培养基；试剂；质量标准；国家标准；GB4789.28Keywords:FoodSafety;MicrobiologicalExamination;CultureMedia;Reagents;QualityStandard;NationalStandard;GB4789.28一、引言1.1研究背景食品微生物学检验是食品安全风险监测、监督抽检和企业自我管控的重要技术手段，其检验结果广泛应用于食品合格判定、进出口贸易、食源性疾病溯源及公共卫生风险评估等领域。在食品微生物学检验的全流程中，培养基和试剂作为最基础、最关键的材料要素，其质量优劣直接决定检验结果的准确性、重现性和可信度。质量不合格的培养基可能导致目标菌生长不良、非目标菌过度繁殖、假阴性或假阳性结果等一系列问题，进而引发严重的食品安全隐患和监管决策失误。GB4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》自2013年发布实施以来，为规范我国食品微生物检验用培养基和试剂的生产、验收和使用提供了重要的技术依据。然而，随着食品微生物检验技术的快速发展、分子生物学方法的广泛普及以及国际标准体系的持续更新，原有标准在覆盖范围、技术指标和测试方法等方面逐渐暴露出一定的局限性，亟需进行系统性修订。1.2修订必要性分析近年来，我国食品微生物学检验领域呈现出以下显著趋势，对培养基和试剂质量标准提出了新的更高要求：第一，检验方法体系的快速扩充。GB4789系列标准持续修订和新增，涵盖的致病菌种类不断增加，传统培养方法与分子生物学方法并行的双轨格局已基本形成。2013版标准主要侧重于传统培养法所用培养基的质量控制，对分子生物学检验中涉及的增菌液、选择性培养基及配套试剂的质量要求覆盖不足。第二，培养基产业规模的扩大与产品质量差异化的挑战。随着我国食品工业的持续发展，商品化培养基的市场规模逐年增长，国内外生产厂商众多，产品质量参差不齐。部分小型企业生产工艺落后、质量控制体系不完善，亟需通过更严格、更细化的国家标准进行规范引导。第三，国际标准对接的需求。ISO11133:2014《食品、动物饲料和水的微生物学——培养基的制备、生产、储存和性能测试》已进行了重大修订，建立了更为完善的培养基性能测试框架和验收标准。我国作为食品贸易大国，有必要在充分考虑国情的基础上，借鉴和吸收国际先进技术内容，提升标准的国际兼容性。第四，新发食品安全事件的应对需求。近年来，由克罗诺杆菌（阪崎肠杆菌）、单核细胞增生李斯特氏菌等引发的食品安全事件时有发生，相关检验所用特殊培养基（如显色培养基、ChromogenicCultureMedia）的质量评价方法亟待完善。在上述背景下，国家卫生健康委员会会同国家市场监督管理总局组织对GB4789.28-2013进行了全面修订，于2024年2月8日发布GB4789.28-2024，并于2024年8月8日正式实施。二、标准主要内容概述2.1标准定位与适用范围GB4789.28-2024《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》是GB4789系列食品安全国家标准框架下的重要组成部分。该标准规定了食品微生物学检验用培养基和试剂的质量要求，包括术语和定义、分类、性能测试方法、质量指标、标签和使用说明等关键技术内容。标准适用于食品微生物学检验中使用的商品化培养基和试剂的质量评价和控制，也适用于实验室自配培养基的质量验证。2.2主要技术内容变化相较于2013版标准，2024版在技术内容上进行了大幅度的调整和升级，主要体现在以下几个方面：（一）术语和定义的完善。2024版对“培养基”“选择性培养基”“鉴别培养基”“增菌培养基”“添加剂”等核心术语进行了更加精确的定义，同时新增了“批”“批间差异”“质控菌株”“目标菌”“非目标菌”等基础性术语，为标准的准确理解和执行奠定了语言学基础。（二）分类体系的优化。标准对培养基和试剂进行了更加细化的分类，按照功能用途划分为基础培养基、增菌培养基、选择性分离培养基、鉴别培养基、计数培养基、运输保存培养基以及分子生物学检验用培养基和试剂等类别。每一类别均设定了相应的性能测试要求和质量指标。（三）性能测试方法的科学性提升。2024版引入了更加科学、合理的性能测试方法体系，包括生产力（Productivity）、选择性（Selectivity）和特异性（Specificity）等核心评价指标的具体测试步骤和判定标准。针对不同的培养基类型，设计了差异化的测试方案，确保测试结果的代表性和可比性。（四）质控菌株管理要求的强化。标准对性能测试所用质控菌株的来源、传代次数、保存方法和使用规范提出了明确要求，强调应使用具有明确来源（如ATCC、CICC、CMCC等保藏机构）的标准菌株，并对质控菌株的传代次数进行了上限规定，以保证测试结果的稳定性和可追溯性。（五）分子生物学用培养基和试剂质量要求的补充。针对近年来迅速发展的分子生物学检验方法（如实时荧光PCR、等温扩增等），标准新增了对相应增菌液和试剂盒的质量控制要求，填补了该领域标准空白。（六）批间一致性与稳定性评价。标准强化了对商品化培养基不同批次之间质量一致性的控制要求，引入了批次验收测试和稳定性评价的具体方案，有助于推动培养基生产企业持续改进生产工艺，保障产品质量的稳定性。三、标准性能测试的核心指标3.1生产力评价生产力是指培养基支持目标微生物生长的能力，是评价培养基质量的首要指标。2024版标准规定，生产力测试应选择适当的目标菌株，采用定量接种方法，将测试菌株接种至待检培养基和平行对照培养基（参考培养基）上，在规定的培养条件下培养后计数，计算生产力比率（PR值）。具体而言，对于非选择性培养基，生产力比率通常不应低于0.7，且菌落形态应典型、大小正常；对于选择性增菌培养基，目标菌应良好生长，菌数增长量应达到预期水平。对于某些特定培养基，标准中给出了明确的定量验收限值，如某些增菌液在规定培养时间内目标菌浓度应增加不低于一定倍数值。3.2选择性评价选择性反映的是培养基抑制非目标微生物（背景菌群）生长的能力，是选择性培养基的关键质量特征。标准规定，选择性测试应采用适当数量的非目标菌株（通常包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌代表菌株），定量接种至待检培养基上，培养后评价非目标菌的生长抑制程度。选择性比率（SR值）和部分选择性抑制指数为判定依据。一般来说，对于强选择性培养基，目标非目标菌应完全不生长或生长量极低（如低于接种量的1%），部分抑制型培养基则应表现为明显的菌落减少或菌落大小显著缩小。2024版针对不同培养基类型，给出了细化的选择性判定基准，提高了标准的可操作性。3.3特异性评价特异性评价主要针对鉴别培养基和显色培养基，其核心是考核培养基对目标菌典型特征（如特定酶活性、糖发酵产酸、溶血特性、显色反应等）的表现能力。标准要求使用具有典型特征的标准菌株进行测试，验证目标菌在培养基上是否呈现典型的菌落形态和生化反应特征，同时验证非目标菌不具有相应的典型特征。对于显色培养基，还需评价其显色反应的清晰度、稳定性和批次间一致性，以保证不同批次产品在临床和检验应用中具有相同的判读效果。3.4物理和化学指标除微生物学性能外，标准还对培养基的物理性状（如外观、凝胶强度、pH值、透明度等）和化学成分（如各组分的精确配比、水分含量等）提出了规范性要求。其中，pH值是影响微生物生长和代谢活动的重要因素，标准对不同类型培养基的最终pH值范围做了明确规定，并要求在规定的温度下进行测量。四、主要起草单位介绍4.1中国食品药品检定研究院GB4789.28-2024的主要起草单位之一，也是最重要的技术支撑单位——中国食品药品检定研究院（以下简称“中检院”），是国家药品监督管理局直属的食品药品检验检测权威机构，承担着食品、药品、化妆品和医疗器械检验检测、标准制修订、技术仲裁及科学研究等多重职能。中检院成立于1950年，经过七十余年的发展，已成长为我国食品药品安全监管领域最重要的技术支撑机构之一。在食品微生物学检验领域，中检院设有专门的微生物学检验和研究部门，配备有完善的微生物学实验室、分子生物学实验室和培养基质量评价实验室，拥有一支由博士生导师、研究员和高级技术人员组成的专业团队。在GB4789.28-2024的修订过程中，中检院承担了以下关键工作：第一，标准修订的总体技术设计和框架搭建。中检院牵头组织国内相关科研院所、高等院校、检验机构和生产企业代表成立标准修订工作组，系统梳理了2013版标准实施以来的反馈意见和问题清单，结合国际标准发展动态和国内实际需求，完成了标准框架和核心技术内容的初步设计方案。第二，关键技术指标的实验验证。针对标准中涉及的多项新技术指标和测试方法，中检院组织了多中心协同验证实验。例如，对分子生物学用培养基质量评价方案的可行性验证、对多种新型显色培养基性能测试方法的适用性评价等，为最终确定标准技术指标提供了翔实的实验数据支撑。第三，质控菌株的标准化管理。中检院依托其国家菌种保藏中心的资源平台，为标准中涉及的各类质控菌株提供了标准化菌种来源，并建立了相应的菌种制备、验证和分发体系，有力保障了标准实施后各实验室质控用菌株的规范和统一。第四，标准宣贯和技术培训的组织。在标准正式发布后，中检院积极组织全国范围内的标准宣贯和技术培训工作，为各级食品安全检验机构、企业实验室和相关从业人员提供标准解读和实操指导，推动了标准的顺利实施和落地应用。4.2其他参与单位除中检院外，该标准修订还汇聚了国内食品安全检验领域的多家优势单位，包括各省市疾病预防控制中心、海关技术中心、高校科研院所以及具有代表性的培养基生产企业等单位，体现了“政、产、学、研、用”多方协同的标准制修订机制。各方分工合作，分别承担了不同类型培养基测试方法的验证任务、企业生产现状调研以及国际标准比对研究等工作，为标准的科学性、全面性和适用性提供了有力保障。五、标准实施的预期效益5.1提升食品安全检验质量GB4789.28-2024的实施，将显著提升我国食品微生物学检验的整体质量水平和数据公信力。通过建立更加严格和科学的培养基和试剂质量标准，能够有效减少检验过程中因材料质量问题导致的误判和漏判，提高检验结果的准确性和可比性。这对于保障食品安全监管决策的科学性，维护消费者权益，具有重要的现实意义。5.2推动培养基产业规范化发展5.3促进国际标准对接和贸易便利化该标准在修订过程中充分借鉴了ISO11133等国际标准的最新理念和核心内容，在测试方法、评价指标和技术框架上实现了较好的国际兼容性。这对于消除国际食品贸易中的技术壁垒，促进我国食品进出口贸易的健康发展，以及提升我国在国际食品标准化领域的话语权具有积极作用。5.4支撑食品安全标准体系建设GB4789.28-2024作为GB4789系列标准家族中的重要一员，其修订和实施将与GB4789系列中的其他方法标准形成有效衔接和互补，共同构成更加完善、科学和系统的食品安全微生物学检验标准体系，为落实《中华人民共和国食品安全法》和“四个最严”要求提供坚实的技术支撑。六、结论与展望GB4789.28-2024《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》的发布和实施，是我国食品安全标准化进程中的重要里程碑。该标准在继承2013版标准核心框架的基础上，充分吸纳了国际先进技术成果和国内实践经验，在术语体系、分类框架、性能测试方法、质控菌株管理和分子生物学应用等方面实现了系统性升级，标志着我国食品微生物学检验用培养基和试剂的质量控制迈入了更加科学化、规范化和国际化的新阶段。展望未来，随着食品微生物检验技术的持续进步、新型培养基和试剂的不断涌现以及检验自动化、智能化水平的提升，培养基和试剂的质量标准体系还将面临新的挑战和更高要求。建议有关方面持续跟踪国际标准化动态，加强标准实施效果跟踪评价，及时启动下一轮修订的准备和预研工作，确保标准体系的时效性和先进性。同时，应进一步加大标准宣贯和培训力度，提升全行业对标准理解和执行的水平，共同推动我国食品安全保障能力再上新台阶。参考文献[1]国家卫生健康委员会,国家市场监督管理总局.GB4789.28-2024食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求[S].北京:中国标准出版社,2024.[2]国家卫生和计划生育委员会.GB4789.28-2013食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求[S].北京:中国标准出版社,2013.[3]中华人民共和国食品安全法[Z].2021年修正版.[4]ISO11133:2014Microbiologyo