单克隆抗体制备工程师考试试卷及答案

单克隆抗体制备工程师考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.杂交瘤技术中常用的细胞融合剂是______。2.单克隆抗体的特点包括特异性强、______和可大量制备。3.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞称为______。4.筛选杂交瘤细胞的常用培养基是______。5.单克隆抗体制备中，免疫动物最常用的是______。6.杂交瘤细胞需经过______筛选和抗体检测才能获得阳性克隆。7.单克隆抗体的应用领域包括诊断试剂、治疗药物和______。8.HAT培养基中的“H”代表______。9.骨髓瘤细胞通常缺乏______酶，因此在HAT培养基中无法存活。10.单克隆抗体是由______细胞分泌的。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.下列哪种试剂是常用的细胞融合剂？（）A.乙醇B.PEGC.甲醛D.生理盐水2.HAT培养基中的“A”代表什么？（）A.腺嘌呤B.氨甲蝶呤C.丙氨酸D.精氨酸3.免疫动物的目的是？（）A.获得骨髓瘤细胞B.刺激B细胞产生特异性抗体C.提供融合细胞D.筛选杂交瘤4.杂交瘤细胞的核心特点是？（）A.仅分泌抗体B.仅无限增殖C.既能无限增殖又能分泌特异性抗体D.无法增殖5.克隆化培养杂交瘤细胞的常用方法是？（）A.有限稀释法B.密度梯度离心C.流式分选D.磁珠分选6.下列哪项不是单克隆抗体的优点？（）A.特异性强B.纯度高C.批次间差异大D.可大量制备7.骨髓瘤细胞的选择需满足？（）A.能分泌抗体B.不分泌抗体C.HGPRT缺陷D.B和C8.免疫小鼠时，注射的抗原类型不包括？（）A.蛋白质B.核酸C.糖类D.以上都包括9.HAT培养基筛选的第一步是选出？（）A.未融合的B细胞B.未融合的骨髓瘤细胞C.融合的杂交瘤细胞D.以上都不是10.单克隆抗体治疗肿瘤的原理不包括？（）A.直接杀伤肿瘤细胞B.靶向递送药物C.激活免疫系统D.以上都包括三、多项选择题（共10题，每题2分）1.单克隆抗体制备的基本步骤有？（）A.免疫动物B.细胞融合C.杂交瘤筛选D.抗体纯化2.HAT培养基的成分包括？（）A.次黄嘌呤B.氨甲蝶呤C.胸腺嘧啶核苷D.葡萄糖3.杂交瘤细胞筛选的方法包括？（）A.有限稀释法B.软琼脂克隆法C.流式细胞术D.ELISA4.单克隆抗体的应用领域有？（）A.疾病诊断B.肿瘤治疗C.生物科研D.食品检测5.细胞融合的方法有？（）A.化学法（PEG）B.物理法（电融合）C.生物法（灭活病毒）D.以上都不是6.骨髓瘤细胞的选择要求包括？（）A.无限增殖能力B.不分泌自身抗体C.HGPRT缺陷D.对HAT敏感7.免疫动物时需考虑的因素有？（）A.抗原剂量B.免疫途径C.免疫次数D.佐剂使用8.单克隆抗体纯化的方法有？（）A.蛋白A/G亲和层析B.离子交换层析C.凝胶过滤D.盐析9.影响杂交瘤融合效率的因素有？（）A.PEG浓度B.融合温度C.细胞比例D.融合时间10.单克隆抗体的局限性有？（）A.制备周期长B.成本高C.可能产生免疫原性D.特异性差四、判断题（共10题，每题2分）1.单克隆抗体由多个B细胞克隆分泌。（）2.HAT培养基可筛选出融合的杂交瘤细胞。（）3.骨髓瘤细胞自身能分泌抗体。（）4.有限稀释法是克隆化培养的常用方法。（）5.单克隆抗体的特异性比多克隆抗体低。（）6.细胞融合时PEG浓度一般为30%-50%。（）7.佐剂可增强免疫动物的免疫反应。（）8.杂交瘤细胞只能体外培养，不能体内培养。（）9.单克隆抗体可用于治疗自身免疫性疾病。（）10.氨甲蝶呤通过抑制DNA合成的从头途径发挥作用。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述单克隆抗体制备的基本流程。2.为什么杂交瘤细胞能无限增殖并分泌特异性抗体？3.简述HAT培养基的筛选原理。4.单克隆抗体与多克隆抗体的主要区别是什么？六、讨论题（共2题，每题5分）1.单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用及优势。2.如何提高杂交瘤细胞的融合效率？答案：一、填空题1.PEG2.均一性高3.杂交瘤细胞4.HAT培养基5.小鼠6.克隆化7.生物制药8.次黄嘌呤9.HGPRT10.单一B细胞克隆二、单项选择题1.B2.B3.B4.C5.A6.C7.D8.D9.C10.D三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABC四、判断题1.×2.√3.×4.√5.×6.√7.√8.×9.√10.√五、简答题1.流程包括：①免疫动物：用目标抗原免疫小鼠，刺激B细胞产生特异性抗体；②细胞融合：将免疫后的B细胞与骨髓瘤细胞用PEG融合，形成杂交瘤细胞；③筛选：HAT培养基筛选融合细胞，克隆化培养并ELISA检测阳性克隆；④抗体生产：体外培养或小鼠腹腔接种杂交瘤细胞，收集上清/腹水并纯化抗体。步骤需保证细胞活性和抗体特异性。2.杂交瘤细胞融合B细胞和骨髓瘤细胞的优势：B细胞能分泌特异性抗体但体外存活短，骨髓瘤细胞无限增殖但不分泌抗体且HGPRT缺陷。融合后继承骨髓瘤的无限增殖能力和B细胞的抗体分泌功能；HAT培养基中未融合的骨髓瘤因HGPRT缺陷死亡，B细胞凋亡，仅杂交瘤存活增殖，持续分泌抗体。3.HAT含H（次黄嘌呤）、A（氨甲蝶呤）、T（胸腺嘧啶核苷）。氨甲蝶呤抑制二氢叶酸还原酶，阻断DNA从头合成；细胞需通过补救途径：H经HGPRT转化为嘌呤核苷酸，T经TK转化为嘧啶核苷酸。骨髓瘤细胞缺乏HGPRT/TK死亡，B细胞凋亡，杂交瘤有HGPRT/TK存活，实现筛选。4.区别：①来源：单克隆来自单一B克隆，多克隆来自多个B克隆；②特异性：单克隆针对单一表位，多克隆针对多表位；③均一性：单克隆纯度高、批次差异小，多克隆成分杂；④制备：单克隆需杂交瘤技术，多克隆直接取血清；⑤应用：单克隆用于精准诊断/治疗，多克隆用于初步检测。六、讨论题1.应用如曲妥珠单抗（HER2靶向）、利妥昔单抗（CD20靶向）。优势：①特异性强，精准识别肿瘤抗原，减少正常细胞损伤；②靶向递送毒素/化疗药，直接杀伤肿瘤；③PD-1/PD-L1抑制剂激活免疫；④副作用小，耐受性好。虽有耐药性，但结合其他疗法可提升疗效。2.方法：①选