《动物实验期末考试试题及答案解析》

《动物实验期末考试试题及答案解析》一、单项选择题（本大题共20小题，每小题1分，共20分。在每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，请将其代码填在题后的括号内。）1.实验动物学中，著名的“3R”原则是由（）提出的。A.DarwinB.MendelC.Russell和BurchD.Pasteur【答案】C【解析】“3R”原则即替代、减少和优化，由WilliamRussell和RexBurch于1959年在《人道主义实验技术原则》一书中正式提出，已成为全球实验动物伦理的核心准则。2.下列哪种动物属于啮齿目，且没有胆囊？（）A.小鼠B.大鼠C.豚鼠D.家兔【答案】B【解析】大鼠是啮齿目动物，其解剖学特点之一就是缺乏胆囊，胆管直接开口于十二指肠。这一特点在胆汁代谢相关研究中需特别注意。3.实验动物环境指标中，普通级动物（CV）的空气洁净度要求为（）。A.100级B.1000级C.10000级D.无特定洁净度要求，但需保持清洁通风【答案】D【解析】普通级动物（CV）主要要求不携带主要人兽共患病和动物烈性传染病病原，对空气洁净度没有像SPF或无菌动物那样严格的层流级别要求，但需保持良好的通风和卫生状况。4.小鼠的合笼繁殖中，通常采用的最佳雌雄比例是（）。A.1:1B.1:2C.2:1D.1:3【答案】C【解析】小鼠繁殖常采用一雄二雌（2:1）的比例同笼饲养，这样可以提高雌鼠的受孕率和繁殖效率，同时减少雄鼠之间的争斗。5.下列近交系小鼠中，常用于免疫学研究且属于H-2单倍型为H-2d的是（）。A.C57BL/6B.BALB/cC.DBA/2D.C3H【答案】B【解析】BALB/c小鼠的H-2单倍型为H-2d，因其具有良好的免疫应答特性，常用于杂交瘤制备单克隆抗体、免疫学机制研究。C57BL/6为H-2b。6.在动物实验中，抓取固定小鼠时，常用的正确手法是（）。A.提起尾巴B.抓住双耳C.右手抓取鼠尾向后拉，左手拇指和食指捏住其后颈部皮肤D.双手直接环抱身体【答案】C【解析】正确的抓取方法是右手抓住鼠尾将其提起，放在粗糙面上，左手拇指和食指迅速捏住其后颈部皮肤，其余手指握住躯干。仅提尾巴易导致椎骨脱臼或皮肤撕脱。7.下列哪种给药途径吸收速度最快？（）A.口服给药B.肌肉注射C.静脉注射D.皮下注射【答案】C【解析】静脉注射药物直接进入血液循环，生物利用度为100%，起效最快。腹腔注射次之，然后是肌肉注射、皮下注射和吸入给药，口服给药受首过消除影响，通常较慢。8.裸小鼠的主要免疫缺陷特征是（）。A.缺乏T淋巴细胞B.缺乏B淋巴细胞C.缺乏巨噬细胞D.缺乏NK细胞【答案】A【解析】裸小鼠基因突变导致先天性无胸腺，因此缺乏成熟的T淋巴细胞，细胞免疫功能完全缺陷，常用于肿瘤移植和人类免疫系统疾病研究。9.实验动物饮用水的水质标准应符合（）。A.生活饮用水标准B.纯净水标准C.矿泉水标准D.灭菌注射用水标准【答案】A【解析】普通级实验动物饮用水通常需符合国家生活饮用水标准（GB5749）。对于SPF级及以上动物，通常需经过高压灭菌或过滤处理以达到无菌或极低微生物负荷要求。10.大鼠的体温调节中枢发育较完善，但其体温与环境温度的关系是（）。A.恒温，不受影响B.变温，随环境变化C.高温环境下体温易升高D.低温环境下体温易降低【答案】C【解析】虽然大鼠是恒温动物，但其汗腺极不发达，主要依靠尾巴散热，在高温高湿环境下极易发生中暑死亡，体温调节能力在高温侧较弱。11.进行动物全身体积描记法（Plethysmography）检测肺功能时，最常用的实验动物是（）。A.犬B.猕猴C.小鼠D.猪【答案】C【解析】虽然多种动物均可进行肺功能检测，但在哮喘等呼吸系统疾病机制研究中，由于遗传背景清晰、模型构建成熟，小鼠是使用最广泛的动物，常配合无约束体描记箱使用。12.下列关于豚鼠的描述，错误的是（）。A.草食动物，对粗纤维需求量高B.自身不能合成维生素C，需外源补充C.性情温顺，不易受惊D.抗生素使用需极其谨慎，易引起肠道菌群失调【答案】C【解析】豚鼠性情温顺是正确的，但“不易受惊”是错误的。豚鼠实际上非常胆小，对声音和惊吓敏感，受惊后常表现为奔跑、跳动或出现“炸群”现象，甚至导致流产。13.实验动物福利伦理审查中，IACUC的全称是（）。A.国际实验动物委员会B.实验动物管理与使用委员会C.实验动物质量控制中心D.动物实验标准化委员会【答案】B【解析】IACUC是InstitutionalAnimalCareandUseCommittee的缩写，即实验动物管理与使用委员会，负责机构内的动物实验伦理审查和监督。14.家兔的静脉注射最常用的部位是（）。A.耳缘静脉B.耳中央动脉C.后肢小隐静脉D.尾静脉【答案】A【解析】家兔耳缘静脉表浅、固定，易于进针，是静脉注射、采血的首选部位。耳中央动脉主要用于采血，但因易痉挛导致注射困难，一般不用于注射。15.确定药物LD50（半数致死量）的实验设计中，统计学上最常用的方法是（）。A.卡方检验B.t检验C.Bliss法（概率单位法）D.方差分析【答案】C【解析】Bliss法是计算LD50及其95%可信区间的经典统计学方法，利用剂量对数与死亡率的概率单位呈直线关系的原理进行计算。16.Beagle犬作为实验动物的主要优点不包括（）。A.性情温顺，易于抓取B.体型适中，便于操作C.血液循环系统与人类相似D.体型巨大，采血量极大【答案】D【解析】Beagle犬属于小型犬，体型适中，并非“体型巨大”。其优势在于温顺、均一性好、背景数据丰富，是毒理学和安全评价研究的首选犬种。17.SPF级动物指的是（）。A.无特定病原体动物B.无菌动物C.悉生动物D.普通级动物【答案】A【解析】SPF是SpecificPathogenFree的缩写，指无特定病原体动物。它们除清洁级动物标准外，还不携带主要潜在感染或条件致病病原体，是目前高质量实验研究的标准动物。18.小鼠的唾液腺中，哪种腺体主要用于构建干燥综合征模型？（）A.腮腺B.颌下腺C.舌下腺D.泪腺【答案】B【解析】虽然唾液腺包括多种，但在诱导干燥综合征（Sjögren'ssyndrome）动物模型时，颌下腺是主要的免疫攻击靶点之一，常用于研究腺体破坏机制。19.下列哪种麻醉剂属于分离麻醉剂，具有镇痛作用强但对呼吸抑制较轻的特点？（）A.戊巴比妥钠B.氯胺酮C.乌拉坦D.水合氯醛【答案】B【解析】氯胺酮是NMDA受体拮抗剂，属于分离麻醉剂，主要产生镇痛和镇静作用，且对呼吸功能抑制较轻微，常与其他镇静药物（如赛拉嗪）复合使用。20.实验动物设施中，关于压力梯度的描述，正确的是（）。A.屏障环境必须保持负压B.屏障环境通常保持正压C.感染动物室必须保持正压D.普通环境必须保持正压【答案】B【解析】屏障环境用于保护SPF动物免受外界污染，因此静压差应高于非洁净区，即保持正压。感染动物室为了防止病原微生物外泄，必须保持负压。二、多项选择题（本大题共10小题，每小题2分，共20分。在每小题列出的五个备选项中至少有两个是符合题目要求的，请将其代码填在题后的括号内。多选、少选、错选均不得分。）1.实验动物遗传质量控制中，常用的近交系动物特征包括（）。A.基因高度纯合B.遗传背景一致C.对实验处理反应均一D.具有杂交优势E.个体间差异大【答案】ABC【解析】近交系是通过连续20代以上兄妹交配培育而成，具有基因纯合、遗传一致、反应均一的特点。杂交优势是F1代动物（杂交群）的特征，近交系一般不表现杂交优势，且个体间差异极小。2.下列哪些情况属于需要应用实验动物“替代”原则的场景？（）A.使用低等动物（如果蝇）替代哺乳动物B.使用组织细胞培养替代整体动物C.使用计算机模拟预测药物毒性D.使用数学模型替代动物实验E.使用同一只动物进行连续多次实验以减少使用数量【答案】ABCD【解析】“替代”原则包括相对替代（使用低等动物）和绝对替代（非动物方法，如细胞培养、计算机模拟）。选项E属于“减少”原则，不属于替代。3.常用的实验动物给药途径中，属于非胃肠道给药的有（）。A.灌胃B.静脉注射C.腹腔注射D.肌肉注射E.经皮给药【答案】BCDE【解析】灌胃属于经口给药，属于胃肠道给药（虽然操作是强制的）。静脉、腹腔、肌肉、皮下、经皮等均属于非胃肠道给药途径。4.关于小鼠的生物净化技术，正确的是有（）。A.主要用于消除动物携带的病原微生物B.常用方法包括剖腹产术和胚胎移植C.净化后动物可直接转为普通级动物D.需要在隔离器或屏障环境中进行E.只能消除病毒，无法消除寄生虫【答案】ABD【解析】生物净化旨在将普通级或清洁级动物净化为SPF级或无菌动物，主要利用剖腹产或胚胎移植切断垂直和水平传播途径，必须在无菌环境（隔离器）进行。净化后通常升级为SPF级，且能消除绝大多数病原体（包括细菌、病毒、寄生虫）。5.下列哪些基因工程小鼠常用于肿瘤研究？（）A.SCID小鼠B.nude小鼠C.TG小鼠（转基因小鼠）D.KO小鼠（基因敲除小鼠）E.所有上述小鼠【答案】ABCDE【解析】SCID和nude是免疫缺陷小鼠，用于异种移植瘤；TG小鼠可用于构建致癌模型；KO小鼠可用于敲除抑癌基因构建自发性肿瘤模型。因此所有选项均正确。6.实验动物麻醉监测中，需要重点关注的生理指标有（）。A.呼吸频率与深度B.心率与心律C.体温D.角膜反射E.痛觉反射【答案】ABCDE【解析】麻醉深度监测需综合评估呼吸、循环（心率）、体温（麻醉常致体温下降）以及反射情况（角膜反射、痛觉反射）以判断麻醉深度，防止麻醉过深致死或过浅导致疼痛。7.下列关于实验动物垫料的描述，正确的有（）。A.应具有良好的吸湿性B.应无异味，不含对动物有害物质C.杨木屑中常含有芳香烃，对肝脏有毒性，需慎用D.玉米芯垫料吸水性好，常用于大鼠E.垫料使用前必须经高压灭菌处理【答案】ABCD【解析】垫料要求吸湿、无毒、无刺激。杨木屑含酚类物质有毒，软木屑（如杨木、松木）需避免或特殊处理，阔叶木（如杨木中的某些品种需区分，通常指软木屑有问题，硬木如白杨较好，但题目特指杨木屑毒性，故C正确）。玉米芯是大鼠常用垫料。对于SPF级动物，垫料需灭菌，但对于普通级动物，未必必须高压灭菌，干燥清洁即可，故E不完全绝对，但在严格意义上，优质实验应尽量使用灭菌垫料。本题侧重选ABC，D也是正确描述。但在严格考试中，E视情况而定，通常屏障环境必须。综合选ABCD。8.导致实验动物异常死亡或结果偏差的非生物学因素包括（）。A.温度剧烈波动B.噪音干扰C.光照周期紊乱D.饲料营养成分不均衡E.操作人员手法粗暴【答案】ABCE【解析】饲料营养属于生物学因素（营养学），虽然影响结果，但题目问非生物学因素（环境、心理等）。A、B、C属于环境因素，E属于心理/操作因素。9.犬的常用解剖生理特点包括（）。A.汗腺发达，主要靠出汗散热B.嗅觉灵敏，听觉极其发达C.网膜无视锥细胞，是色盲D.胃呈单室，消化能力强E.血液循环系统与人类极为相似【答案】BDE【解析】犬汗腺不发达，主要靠呼吸散热（A错）；犬视网膜具有视锥细胞，并非全色盲，有一定辨色能力（C错）；B、D、E均为犬的典型特征，使其广泛应用于生理学和毒理学研究。10.在动物实验设计遵循的随机原则中，常用的随机化方法有（）。A.完全随机化B.配对随机化C.区组随机化D.按体重分层随机E.按毛色分组【答案】ABCD【解析】随机化目的是避免偏倚。完全随机、配对设计、区组设计（随机区组）、分层随机（如按体重或性别分层）都是科学的方法。按毛色分组通常不是科学的随机化依据，除非毛色是研究变量。三、填空题（本大题共20空，每空1分，共20分。请将正确答案填在题中横线上。）1.实验动物按微生物控制等级分类，从低到高依次为：普通动物、清洁动物、__________、无菌动物。【答案】无特定病原体动物（SPF动物）2.小鼠的基因组大小约为人类基因组的__________倍，但其基因数量与人类相当。【答案】0.8（或1/1.2，填“接近”也可，通常数值为1/1.2，此处填0.8或接近即可）3.实验动物抓取固定时，对于犬，通常使用__________器来固定头部。【答案】犬嘴套（或口笼）4.动物实验中，最大给药量通常受__________体积的限制，小鼠灌胃一般不超过__________ml/10g体重。【答案】胃；0.2-0.4（或0.2，0.3，0.4，通常标准为0.2-0.4ml/10g）5.豚鼠对__________生素缺乏敏感，必须通过饲料补充，否则会出现坏血病。【答案】C6.常用的实验动物编号标记方法中，__________染色法适用于短期（白色）标记，__________植入法适用于长期标记。【答案】苦味酸（或化学染料）；电子芯片（或皮牌）7.在毒理学实验中，观察药物急性毒性的主要指标是__________，常用__________法来计算其数值。【答案】半数致死量（LD50）；Bliss（概率单位）8.大鼠长期饲养的适宜温度范围为__________℃，相对湿度范围为__________%。【答案】18-29（或20-26）；40-709.动物实验设施内的气流速度，一般要求在__________m/s之间，以避免冷风直吹动物。【答案】0.1-0.210.免疫缺陷动物中，__________小鼠同时缺乏T和B淋巴细胞，而__________小鼠主要缺乏T淋巴细胞。【答案】SCID；裸（或Nude）11.动物实验伦理审查的核心原则是3R，即Replacement（替代）、Reduction（减少）、__________。【答案】Refinement（优化）12.家兔颅骨的__________部位较薄，此处注射可用于刺激大脑皮层定位，或在此处取脑组织样本。【答案】囟门（或矢状缝/冠状缝交汇处）13.进行动物手术时，无菌操作是关键，对于啮齿类动物，通常皮肤消毒采用__________%碘伏或________%酒精。【答案】2-5（或2）；7514.实验动物的营养需求中，__________是啮齿类动物维持正常生长发育所必需的脂肪酸，大鼠缺乏时会出现生殖机能障碍。【答案】亚油酸15.在进行动物实验数据统计分析时，若数据呈正态分布且方差齐，两组间比较常用__________检验；多组间比较常用__________分析。【答案】t；方差（或ANOVA）四、判断题（本大题共10小题，每小题1分，共10分。请判断下列说法的正误，正确的打“√”，错误的打“×”。）1.昆虫由于缺乏痛觉神经中枢，因此在某些国家的动物保护法规中不属于受保护的实验动物范畴。（）【答案】√【解析】多数国家法规主要针对脊椎动物，昆虫、线虫等无脊椎动物通常不在严格监管范围内，但仍需合理使用。2.昆夜长光照（如16L:8D）可以持续刺激啮齿类动物的生殖系统，使其处于性活跃状态。（）【答案】√【解析】长光照通常模拟春夏季节，促进啮齿类动物性腺发育和繁殖。3.小鼠和大鼠一样，都有胆囊。（）【答案】×【解析】大鼠没有胆囊，小鼠有胆囊。4.所有的转基因小鼠都需要在屏障环境（SPF级）中饲养。（）【答案】√【解析】转基因动物通常价值昂贵且体质可能较弱，为了防止环境病原体感染导致实验失败或模型丢失，必须在SPF级屏障环境中饲养。5.乌拉坦是一种长效麻醉剂，对呼吸影响小，但具有致癌性，因此在慢性实验中应限制使用。（）【答案】√【解析】乌拉坦虽然麻醉效果好，但证实具有致癌性，一般只允许用于急性终末实验。6.实验动物设施中，洁净区内的压力必须低于非洁净区，以防止交叉污染。（）【答案】×【解析】洁净区（如屏障环境）压力应高于非洁净区，防止未经过滤的空气倒灌入洁净区，保持正压。7.静脉注射苯肾上腺素可以引起血压升高，这是通过激动α受体实现的。（）【答案】√【解析】苯肾上腺素是α受体激动剂，收缩血管，导致外周阻力增加，血压升高。8.在进行小鼠腹腔注射时，进针位置应选择在左下腹部，以避开膀胱和肠道。（）【答案】×【解析】腹腔注射通常选择右下腹部（或下腹部），因为左下腹部解剖上位置靠近脾脏和胃，且操作习惯上多选右侧。避开膀胱主要靠动物排空膀胱或位置选择，但一般标准操作是下腹部偏下，避免刺伤内脏。9.同一品系的近交系小鼠，不同年龄段的动物对药物的敏感性是完全一致的。（）【答案】×【解析】年龄是重要的生物变量，幼年、成年和老年动物在药物代谢酶活性、肝肾功能等方面差异巨大，对药物敏感性截然不同。10.实验动物尸体必须按照医疗废物处理标准进行焚烧或高压灭菌处理，严禁随意丢弃。（）【答案】√【解析】实验动物尸体可能携带病原体或有害化学物质，属于生物危害废物，必须严格无害化处理。五、名词解释（本大题共5小题，每小题4分，共20分。）1.近交系【答案】近交系是指经过连续20代以上全同胞兄妹交配或亲子交配培育而成的动物群体。其基因位点高度纯合，遗传背景一致，个体间差异极小，具有稳定的表型特征和实验反应性，是生物医学研究中最重要的实验动物类型之一。2.3R原则【答案】3R原则是实验动物伦理的核心原则，由Russell和Burch提出。包括：Replacement（替代），指尽可能使用非动物方法（如细胞、计算机模型）或低等动物替代高等动物；Reduction（减少），指在保证数据有效的前提下，通过减少实验动物数量、优化实验设计来减少使用；Refinement（优化），指通过改善饲养管理和实验操作，减少动物痛苦、应激和提高福利。3.悉生动物【答案】悉生动物又称已知菌动物，是指其体内携带的微生物（包括细菌、真菌等）完全已知的动物。它们通常在隔离器中饲养，微生物背景明确，用于研究微生物与宿主之间的关系、免疫学功能及代谢研究。无菌动物接种已知菌株后即成为悉生动物。4.半数致死量（LD50）【答案】半数致死量是指在一群实验动物中，引起50%动物死亡的药物剂量。它是衡量药物或化学物质急性毒性强度的重要参数，单位通常为mg/kg。LD50数值越小，表示该物质的毒性越强。5.清洁级动物【答案】清洁级动物是指除普通级动物应排除的病原体外，还不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。其微生物控制等级高于普通级，低于SPF级。是我国目前主要使用的大众化实验动物等级，适用于大多数教学和一般科研实验。六、简答题（本大题共4小题，每小题10分，共40分。）1.简述实验动物在生物医学研究中的主要作用及意义。【答案】实验动物在生物医学研究中扮演着不可替代的角色，其主要作用及意义如下：（1）作为人类疾病的复制品模型：许多人类疾病（如高血压、糖尿病、肿瘤、遗传病等）可以在实验动物身上诱导自发性或诱发性模型，从而研究疾病的发病机制、病理过程及转归。（2）作为药物筛选与安全性评价的工具：新药研发过程中，必须通过动物实验进行药效学筛选、药代动力学研究以及急慢性毒性测试，以评估药物的有效性和安全性，这是进入临床试验前的法定程序。（3）作为生物医药研究的“活试剂”：动物提供的器官、组织、细胞及血清（如小鼠腹水）是免疫学、细胞生物学等研究的重要材料。（4）作为比较医学研究的桥梁：通过比较不同种属动物与人类的解剖、生理及代谢异同，将基础研究成果推演到人类，解决人类健康问题。（5）航空航天及环境毒理学研究：用于模拟特殊环境（如失重、辐射）对机体的影响，以及环境污染物（如PM2.5）的生物危害评估。2.简述SPF级动物的饲养管理要求。【答案】SPF级动物（无特定病原体动物）的饲养管理极为严格，核心在于维持其无菌或特定病原体阴性的状态：（1）环境设施：必须在屏障环境或隔离器中饲养。空气需经初、中、高效三级过滤，维持正压梯度（洁净区>非洁净区），温度、湿度、光照、噪音需严格控制在标准范围内。（2）人员与物品管理：人员进入需经过淋浴、更衣，穿戴无菌防护服，遵循人流物流分开原则。所有进入屏障的饲料、垫料、水、器具必须经过高压灭菌或有效的灭菌处理（如过氧化氢熏蒸、紫外线照射）。（3）动物引进：引进的SPF动物必须来自具有资质的生产单位，且需经过检疫隔离，确认健康后方可转入饲养区。（4）微生物与寄生虫监测：定期对环境、动物及饲料进行微生物和寄生虫检测，一旦发现SPF标准排除的病原体，必须立即采取淘汰或净化措施。（5）日常操作：喂食、换笼、实验操作均需在超净工作台或层流架中进行，严格遵守无菌操作规程，防止交叉感染。3.请列举至少5种常用实验动物的给药途径，并比较静脉注射与腹腔注射的优缺点。【答案】常用给药途径包括：口服（灌胃）、静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮内注射、吸入给药等。静脉注射（i.v.）与腹腔注射（i.p.）的比较：静脉注射：静脉注射：优点：（1）药物直接进入血液循环，起效最快，生物利用度为100%。（2）准确控制给药剂量，适用于刺激性药物（因血液稀释作用强）。缺点：（1）操作技术要求较高，易误伤血管或导致皮下血肿。（2）对于小动物（如小鼠），血管细小，反复注射困难。（3）药效过快，有时不便于观察缓慢的药理反应。（4）有引起急性药物中毒或过敏性休克的高风险。腹腔注射：腹腔注射：优点：（1）操作相对简便，腹腔面积大，容易掌握。（2）吸收速度较快（仅次于静脉和吸入），生物利用度较好。（3）适用于多种动物，尤其是小动物。缺点：（1）药物吸收需经过腹膜，受腹膜血流影响，速度略慢于静脉。（2）腹腔注射具有一定刺激性，可能导致腹膜炎或肠粘连。（3）若操作不当，易误伤肠道、膀胱等脏器。4.简述在设计动物实验方案时，如何遵循“随机、对照、重复”三大原则。【答案】（1）随机原则：目的：避免主观偏见，使样本具有代表性，确保各组间除处理因素外，其他干扰因素分布均衡。实施：使用随机数字表或统计软件将动物分配到各组。常用方法有完全随机化、分层随机化（如按体重、性别分层后随机）、配对随机化等。（2）对照原则：目的：设立基准，以鉴别和处理因素引起的效应，排除非处理因素（如时间、环境、操作）的影响。实施：应设置空白对照（不给药）、阴性对照（给溶剂）、阳性对照（给已知有效药物）或模型对照。对照组除处理因素外，其他条件应与实验组完全一致。（3）重复原则：目的：降低实验误差，估计变异程度，保证结果的可靠性和可重复性。实施：包括样本数量充足（足够的动物数）和实验结果的重复验证（同一实验在相同条件下可重现）。需通过统计学方法估算所需的最小样本量，避免样本过小导致假阴性，或样本过大造成浪费。七、综合应用与分析题（本大题共3小题，每小题30分，共90分。）1.某研究团队旨在开发一种新型抗肿瘤药物A。他们计划使用小鼠建立人源肝癌细胞株（HepG2）的皮下移植瘤模型，以评估药物A的抑瘤效果。请根据这一背景，回答以下问题：(1)应选择何种品系的小鼠进行接种？为什么？（6分）(2)简述建立皮下移植瘤模型的主要步骤。（9分）(3)设立实验分组时应考虑哪些因素？请设计一个合理的分组方案（假设每组n=10）。（9分）(4)实验结束后，除了测量瘤体积和称重，还可以通过哪些指标评估药物疗效？（6分）【答案】(1)品系选择：应选择免疫缺陷小鼠，如裸小鼠或SCID小鼠。原因：人源肿瘤细胞移植给正常小鼠会被小鼠的免疫系统识别并排斥（免疫排斥反应）。裸小鼠（T细胞缺陷）或SCID小鼠（T、B细胞联合缺陷）缺乏正常的免疫功能，能够接受人源肿瘤组织的移植并使其生长，从而构建成功的人源肿瘤异种移植模型（CDX）。(2)建模步骤：①细胞准备：复苏并培养HepG2细胞，收集对数生长期的细胞，计数，离心，用PBS或无血清培养基重悬，调整细胞浓度至约1×10^7/ml。②动物准备：选取4-6周龄的裸小鼠，适应性饲养1周。③接种：消毒小鼠右侧腋下皮肤，用1ml注射器吸取细胞悬液，每只小鼠接种0.1-0.2ml（含1×10^62×10^6个细胞），于皮下注入，拔针后用棉签按压针孔防止漏液。④成瘤观察：每日观察小鼠状态，待肿瘤生长至可触及（约100-200mm³）时，视为建模成功，可开始分组给药。(3)分组因素与方案：考虑因素：需设置阴性对照（溶剂对照）、阳性对照（已知有效药物，如5-FU或顺铂）、实验组（不同剂量的药物A，通常设高、中、低三个剂量）。分组时应保证各组小鼠的平均瘤体积和体重无统计学差异（随机化分组）。分组方案（共5组，每组10只）：第1组：模型对照组（给予等体积溶剂，如生理盐水或含DMSO的溶液）。第2组：阳性对照组（给予标准抗肿瘤药，如环磷酰胺20mg/kg）。第3组：药物A低剂量组（如10mg/kg）。第4组：药物A中剂量组（如30mg/kg）。第5组：药物A高剂量组（如60mg/kg）。(4)其他疗效评估指标：①生存期：记录小鼠的生存时间，绘制生存曲线。②肿瘤重量：实验终点剥离肿瘤称重，计算抑瘤率（%）。③病理形态学：HE染色观察肿瘤组织坏死程度、细胞形态变化。④免疫组化（IHC）：检测肿瘤组织中增殖标志物（如Ki67）或凋亡标志物（如Caspase-3）的表达。⑤转移情况：观察是否有淋巴结或远处器官转移。⑥小鼠一般状态：体重变化（评估药物毒性）、精神状态、进食量等。2.某同学在进行大鼠尾静脉注射练习时，遇到了困难：经常出现注射部位出血、肿胀，甚至尾部发黑坏死。请分析导致这些问题的原因，并阐述正确的尾静脉注射操作要点及注意事项。【答案】问题原因分析：（1）注射部位出血、肿胀：主要是针头未完全刺入血管内，导致药液注入皮下；或者是刺破血管壁，导致血液外渗。（2）尾部发黑坏死：主要原因包括注射操作粗暴导致血管严重破裂形成血肿，压迫组织缺血坏死；或者是注射了刺激性强的药物漏出血管外导致化学性坏死；或者是反复多次在同一位置进针造成严重损伤；或者是未严格消毒导致感染坏死。正确操作要点及注意事项：（1）固定：使用大鼠固定器，将大鼠装入并露出尾部，或由助手协助保定，确保大鼠身体不能扭动，尾巴伸直。（2）血管扩张：大鼠尾静脉位于尾巴两侧，较细。注射前可用温水（40-50℃）浸泡鼠尾1-2分钟，或涂抹酒精/二甲苯（需注意毒性）使血管扩张，呈明显的充血状态。（3）进针角度与位置：选择尾侧静脉，避开尾尖和尾根部。左手拇指和食指捏住鼠尾