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高中生物必修2DNA的知识清单一、DNA方式的探索与证明(一)【基础】对DNA方式的早期推测1、半保留模型:在DNA过程中,每条母链作为模板,按照碱基互补配对原则合成新的子链。结束后,一个DNA分子解体,形成两个完全相同的DNA分子,每个子代DNA分子都包含一条母链和一条新合成的子链。这种方式称为半保留。2、全保留模型:另一种可能的方式是,DNA时,母链DNA作为模板,合成一个全新的子代DNA分子,而母本DNA分子则完整保存下来。结束后,一个DNA分子产生了一个全新的DNA分子和一个亲本DNA分子。(二)【非常重要】【高频考点】DNA半保留的实验证据——梅塞尔森斯塔尔实验1、实验目的:证明DNA的方式是半保留,而非全保留。2、实验原理:(1)利用同位素示踪技术。氮元素是DNA的组成元素(存在于碱基中),使用重氮(15N)和轻氮(14N)标记DNA分子,使其密度不同。(2)密度梯度离心技术。将不同密度的DNA分子放在氯化铯(CsCl)溶液中进行高速离心。DNA分子会聚集在与自身密度相等的CsCl密度层中,形成一条狭窄的条带。通过观察条带的位置(更高或更低),可以判断DNA分子的密度大小。含15N的DNA分子密度大,位于离心管更靠下的位置(重带);含14N的DNA分子密度小,位于离心管更靠上的位置(轻带);一条链含15N、一条链含14N的杂交DNA分子密度介于两者之间,位于中间位置(中带)。3、实验方法:同位素标记法(15N/14N标记)、密度梯度离心法。4、实验过程:(1)第一代(0代):将大肠杆菌放入以15NH4Cl为唯一氮源的培养液中培养多代,获得DNA双链均为15N标记的细菌(亲代DNA,记为15N/15NDNA)。(2)第二代(1代):将上述细菌转移到以14NH4Cl为唯一氮源的培养液中培养。待细菌完成一次分裂后,收集细菌并提取DNA,进行CsCl密度梯度离心。(3)第三代(2代):在14N培养液中让细菌完成第二次分裂后,收集细菌并提取DNA,进行CsCl密度梯度离心。5、实验结果与预期分析:(1)亲代(0代):全部DNA分子为15N/15N,离心后全部位于重带位置。(2)第一代(1代):A、若为半保留:亲代DNA双链解开,每条15N链作为模板,利用14N原料合成新链。一次后,每个子代DNA分子均由一条15N链和一条14N链组成(15N/14NDNA)。离心后应全部位于中带位置。B、若为全保留一次后,亲代DNA分子(15N/15N)保持完整,留在重带;新合成的DNA分子全部由14N组成(14N/14NDNA),位于轻带。离心后应出现重带和轻带两个条带。C、实际结果:离心后只出现一个中带条带,有力地支持了半保留模型。(3)第二代(2代):A、若为半保留:第一代的15N/14NDNA分子再次,每条链作为模板。以15N链为模板合成的子代DNA为15N/14N(中带);以14N链为模板合成的子代DNA为14N/14N(轻带)。因此,两次后,应出现一半中带、一半轻带。B、若为全保留两次后,亲代DNA(15N/15N)始终存在(重带),其余新合成的DNA均为14N/14N(轻带)。离心后仍应出现重带和轻带两个条带。C、实际结果:离心后出现中带和轻带两个条带,且比例为1:1。6、实验结论:DNA的是以半保留的方式进行的。(三)【重要】实验的关键点与易错分析1、实验成功的关键:同位素标记(15N和14N)的使用,以及密度梯度离心技术能够灵敏地区分不同密度的DNA分子。2、区分“标记”与“原料”:实验开始时用15N标记的是亲代DNA的所有链(作为模板)。培养液中的14N是新合成子链的原料。3、对“次数”的理解:一次指从亲代DNA分子开始,到第一次分裂完成产生两个子代DNA分子。两次指产生四个DNA分子。4、易错点:混淆DNA分子数、链数以及标记情况。计算时需明确问题指向。二、DNA半保留的过程(一)【基础】DNA的概念与时间1、概念:以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程,遗传信息从亲代DNA传递给了子代DNA。2、发生时间:在真核生物中,DNA发生在有丝分裂的间期和减数第一次分裂前的间期,随着染色体的而完成。在原核生物中,DNA在整个细胞周期中均可进行。(二)【非常重要】【高频考点】DNA的过程(以真核生物为例)1、解旋(起始阶段):(1)条件:需要能量(ATP)和解旋酶的催化。(2)过程:在ATP供能下,解旋酶作用于DNA分子,破坏两条链之间的氢键,使DNA双链的局部(一个或多个特定区域)解开,形成两条单链。这个解开的一段区域称为叉。(3)结果:双链解开,暴露出碱基序列,作为的模板。2、合成子链(延伸阶段):(1)原料:四种游离的脱氧核糖核苷酸(dATP、dTTP、dGTP、dCTP),它们既是原料,也提供能量。(2)条件:还需要模板(解开的单链)、酶(主要是DNA聚合酶)和能量。(3)过程:A、DNA聚合酶以解开的每一条母链为模板,按照碱基互补配对原则(AT,GC),将游离的脱氧核糖核苷酸逐个地连接到正在合成的新链上。B、子链的合成方向:总是从5’端向3’端延伸。这是因为DNA聚合酶只能催化新的脱氧核糖核苷酸添加到已有核苷酸链(引物)的3’OH末端。C、不连续:由于DNA双链是反向平行的,且叉的移动方向和解链方向固定,导致一条新链(前导链)可以沿着解链方向连续合成;而另一条新链(后随链)的合成方向与解链方向相反,因此只能以不连续的方式合成许多短的DNA片段(冈崎片段),然后再由DNA连接酶将这些片段连接成一条完整的链。(4)引物:在DNA聚合酶开始合成新链前,需要一小段RNA引物提供自由的3’OH末端。引物由引物酶催化合成。后随链的每个冈崎片段都需要一个引物。3、双螺旋化:(1)过程:当新链合成完毕后,在DNA聚合酶(校正)、DNA连接酶(连接冈崎片段)等作用下,形成两条完整的子链。每条子链与对应的母链通过氢键重新盘绕成双螺旋结构。(2)结果:一个亲代DNA分子,形成了两个完全相同的子代DNA分子。每个子代DNA分子都包含一条母链和一条新合成的子链。(三)【重要】参与DNA的关键酶及其作用1、解旋酶:作用于氢键,使DNA双链解开。2、DNA聚合酶:(1)作用:催化形成磷酸二酯键,将游离的脱氧核糖核苷酸连接到子链上。具有模板依赖性。(2)特点:只能将单个核苷酸加到已有核酸链(引物或子链)的3’OH端,因此合成方向为5’→3’。(3)功能:还具有校对功能,能识别并切除错配的碱基,保证的准确性。3、引物酶:催化合成一小段RNA引物,提供3’OH端供DNA聚合酶起始合成。4、DNA连接酶:催化形成磷酸二酯键,将后随链上的冈崎片段连接成完整的DNA链。5、拓扑异构酶:在叉前方,通过切断和重新连接DNA链来释放解旋带来的扭转压力。(四)【难点】DNA的特点1、边解旋边:过程不是等DNA完全解旋后才开始合成新链,而是边解旋边合成,提高了效率。2、半保留:亲代DNA的两条链分别作为模板,进入两个子代DNA分子中。3、双向:在真核生物中,DNA是从多个起点(原点)开始,向两个方向同时进行,形成多个泡,大大加快了速度。原核生物通常只有一个起点,也是双向。4、半不连续:由于DNA聚合酶合成方向(5’→3’)和DNA双链反向平行的结构特点,导致一条链(前导链)连续合成,另一条链(后随链)不连续合成。三、DNA的意义与精确性(一)【基础】DNA的生物学意义1、遗传信息的传递:DNA通过,将亲代的遗传信息准确地传递给子代,保证了遗传信息的连续性。2、为细胞分裂奠定基础:在有丝分裂和减数分裂前完成,确保分裂后的子细胞获得与亲代细胞相同的一套遗传信息。3、是生物体生长、发育、繁殖和遗传变异的物质基础。(二)【重要】DNA精确1、独特的双螺旋结构和碱基互补配对原则:为提供了精确的模板。2、DNA聚合酶的严格选择:DNA聚合酶能够精确选择正确的、与模板链配对的脱氧核糖核苷酸。3、DNA聚合酶的校对功能:DNA聚合酶具有3’→5’外切酶活性,能在过程中随时检查并切除错配的碱基,然后继续合成。4、错配修:完成后,细胞中还存在一套复杂的错配修复系统,能识别并修复新合成链中可能存在的错误。四、DNA相关的核心计算与考查方式(一)【非常重要】【高频考点】关于碱基数量的计算1、基本原理:碱基互补配对原则(A=T,G=C)。2、常用公式:(1)在双链DNA分子中,A+G=T+C=嘌呤总数=嘧啶总数=碱基总数的50%。(2)一条链中的(A+T)与另一条链中的(T+A)相等,即(A1+T1)%=(A2+T2)%。整个DNA分子中A+T的比例等于任一条链中A+T的比例。(3)同理,一条链中的(A1+G1)/(T1+C1)=k,则另一条链中(A2+G2)/(T2+C2)=1/k。整个DNA分子中(A+G)/(T+C)=1。3、考点示例:(1)已知某DNA分子中A占30%,求G的比例。解答:由A+T+G+C=100%,且A=T,G=C,得A=T=30%,则G+C=40%,所以G=20%。(2)已知DNA一条链中(A+T)/(G+C)=0.8,求互补链及整个DNA分子中的比例。解答:互补链中(T+A)/(C+G)=0.8。整个DNA分子中(A+T)/(G+C)=0.8。(二)【非常重要】【高频考点】关于半保留中“标记”与“原料”的计算1、核心模型:将双链都被15N标记的DNA(15N/15N)放入含14N的原料中。2、n次后,DNA分子总数和链数变化:(1)子代DNA分子总数=2n个。(2)子代DNA链总数=2n+1条。(3)含15N标记的DNA链数(母链)=2条(始终存在于子代DNA中,不会被稀释掉)。(4)含14N标记的DNA链数(新链)=总链数母链数=2n+12条。3、n次后,不同类型DNA分子数:(1)含15N的DNA分子数:指DNA分子中至少有一条链含15N。由于母链只有2条,最多存在于2个DNA分子中。n次后,含15N的DNA分子数恒为2个。(此处的“含15N”指含有15N原子)(2)只含15N的DNA分子数:即双链均为15N的DNA分子。随着进行,母链被打散,只含15N的DNA分子数为0。(3)含14N的DNA分子数:指DNA分子中至少有一条链含14N。n次后,除了第一代的亲本DNA(如果还存留的话,但已被打散),所有新合成的DNA分子都含有14N,因此含14N的DNA分子数=总DNA分子数=2n个。(4)只含14N的DNA分子数:指双链均为14N的DNA分子。n次后,只含14N的DNA分子数=总DNA分子数含15N的DNA分子数=2n2个。(5)15N/14NDNA分子数(杂交DNA):1次后为2个;2次后,这2个杂交DNA分子,各产生1个杂交和1个轻DNA,因此杂交DNA分子数恒为2个。4、第n次所需的某种原料数量:(1)设一个DNA分子中某种碱基(如A)的数量为x个。(2)n次后,总DNA分子数为2n个。共需要碱基A的数量为(2n1)x个。(因为最初有一个亲代DNA,它上面的碱基A不需要从原料中获取)(3)第n次(即从第n1次完成后,再进行第n次),新增加的DNA分子数为2n2n1=2n1个。(4)因此,第n次过程中,需要消耗碱基A的数量为2n1x个。5、【易错点】:(1)区分“DNA分子数”和“DNA链数”。(2)区分“含15N的DNA分子”和“只含15N的DNA分子”。(3)区分“n次后共有多少”和“第n次需要多少”。(4)注意题目中“培养到第n代”通常指了n次,但有时也指培养时间相当于n代,需结合上下文判断。(三)【热点】结合细胞分裂的综合计算1、考查形式:将有丝分裂或减数分裂过程中染色体的行为与DNA半保留特点相结合。2、典型例题分析:(1)将某精原细胞(2n=8)的所有DNA分子双链用15N标记后,置于不含15N的培养液中培养。完成一次有丝分裂后,得到的子细胞中染色体标记情况如何?A、分析:DNA一次(半保留),每个DNA分子变成15N/14N的杂交DNA。有丝分裂后期,着丝粒分裂,姐妹染色单体分开,随机分配到两个子细胞。每个子细胞获得的每条染色体上的DNA都是杂交型(15N/14N)。B、答案:每个子细胞中所有染色体上的DNA都含有15N(即每条染色体都被标记)。(2)若上述精原细胞完成的是减数分裂,则最终得到的四个精细胞中染色体标记情况如何?A、分析:减数分裂间期DNA一次,每条染色体上的DNA变成15N/14N杂交型(每条染色单体含一个杂交DNA)。减数第一次分裂同源染色体分离,但着丝粒不分裂。减数第二次分裂着丝粒分裂,姐妹染色单体分开成为染色体。因此,每个精细胞中的每条染色体上的DNA都是15N/14N杂交型。B、答案:四个精细胞中,所有染色体上的DNA都含有15N。(3)将上述精原细胞置于不含15N的培养液中,完成两次连续的有丝分裂,得到的子细胞中,含15N的细胞占多少?A、分析:第一次分裂后,每个子细胞中所有染色体上的DNA均为15N/14N。第二次分裂间期,DNA再次前,每条染色体含一个杂交DNA(15N/14N)。后,每条染色体由两条姐妹染色单体组成,每条单体含一个DNA分子:一条染色单体上的DNA为15N/14N(母链15N,新链14N),另一条染色单体上的DNA为14N/14N(母链14N,新链14N)。第二次有丝分裂后期,着丝粒分裂,姐妹染色单体随机分配到两个子细胞。因此,对于一个特定的子细胞来说,有可能同时得到含15N和完全不含15N的染色体,也有可能全部得到含15N的染色体。从整个细胞群体来看,含15N的细胞数占所有子细胞的比例是100%(因为即使某个细胞获得了14N/14N的染色体,但它体内仍有15N/14N的染色体)。B、答案:100%。五、DNA与基因的本质(一)【重要】基因的现代定义1、概念:基因是有遗传效应的DNA片段。对于RNA病毒而言,基因是有遗传效应的RNA片段。2、“遗传效应”的含义:指能够指导蛋白质的合成(通过转录和翻译),从而控制生物的性状;或者能够转录出功能RNA(如rRNA、tRNA等),参与细胞的各种生命活动。(二)【基础】DNA片段中的遗传信息1、遗传信息的内涵:遗传信息是指DNA分子中4种碱基(A、T、C、G)的排列顺序。2、遗传信息的多样性(DNA分子的多样性):构成DNA分子的碱基对数量巨大,而碱基对的排列顺序千变万化。若一个DNA分子有n个碱基对,则其排列顺序可能有4n种。这解释了生物界多样性的根本原因。3、遗传信息的特异性(DNA分子的特异性):每个特定的DNA分子(或基因)都有其特定的碱基排列顺序,这是不同物种、不同个体之间性状差异的分子基础。(三)【难点】染色体、DNA、基因、脱氧核苷酸之间的关系1、从结构层次上看:染色体是DNA的主要载体(此外还有线粒体和叶绿体)。一个染色体上通常有一个DNA分子(在未时)或两个DNA分子(后,含两个染色单体)。一个DNA分子上有许多个基因。基因是具有遗传效应的DNA片段。基因的基本组成单位是脱氧核苷酸。2、从功能与概念上看:脱氧核苷酸的排列顺序代表着遗传信息。基因通过控制蛋白质的合成来控制性状。DNA通过传递遗传信息,通过转录和翻译表达遗传信息。染色体是遗传信息(基因)的主要载体。六、核心素养与思维拓展(一)【★】科学思维:假说演绎法在DNA研究中的应用1、梅塞尔森和斯塔尔的工作是运用假说演绎法的典范。他们首先基于DNA双螺旋结构,提出半保留和全保留两种假说。2、然后,他们根据这两种假说进行演绎推理:如果半保留成立,那么第一次分裂后提取的DNA离心应全部是中带;如果全保留成立,则应出现重带和轻带。3、最后,他们通过巧妙的实验设计(同位素标记+密度梯度离心)对演绎推理的结论进行检验,最终证明了半保留的正确性。(二)【▲】批判性思维:对DNA精确性的再认识1、DNA的精确性是相对的,其错配率约为109~1010。这种极高的精确性保证了物种的稳定性。2、然而,过程中偶尔发生的未被修复的错误(突变)是生物进化的原材料之一。因此,DNA的精确与偶尔的“错误”共同构成了生物稳定与变异的分子基础。(三)【☆】科学技术与社会(STS):PCR技术1、原理:PCR(聚合酶链式反应)技术是DNA的体外应用。它模拟了生物体内的DNA过程,利用DNA聚合酶在体外大量扩增特定的DNA片段。2、条件:需要模板DNA、两种引物、四种脱氧核糖核苷酸(dNTPs)、耐热的DNA聚合酶(如Taq酶)以及合适的缓冲液体系。3、过程:变性(高温解开DNA双链)→退火(引物与模板链结合)→延伸(DNA聚合酶催化新链合成)。这三个步骤构成一个循环,每循环一次,目的DNA片段的数量理论上增加一倍。4、应用:广泛应用于遗传病诊断、病原体检测、法医鉴定、亲子鉴定、古生物学研究等领域。七、本章节考点总结与解题要诀(一)核心考点归纳1、梅塞尔森斯塔尔实验的原理、过程、结果和结论(尤其是实验设计思路和结果预期)。2、半保留的过程,特别是所需的条件(酶
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