无菌技术操作作业指导书

无菌技术操作作业指导书1范围本指导书规定了各级各类医疗机构临床科室、医学实验室、消毒供应中心、门诊操作室等场所开展无菌技术操作的基本要求、操作流程、质量控制标准与风险防范要求，适用于医务人员、医学生、护理实习生开展无菌技术操作训练、临床实践及教学考核，也适用于医疗机构感控部门开展无菌技术操作质量督查与持续改进。2规范性引用文件本指导书内容依据下列文件最新有效版本编制：《医院消毒供应中心第1部分：管理规范》（WS310.1-2016）、《医院消毒供应中心第2部分：清洗消毒及灭菌技术操作规范》（WS310.2-2016）、《医疗机构消毒技术规范》（WS/T367-2012）、《医院消毒卫生标准》（GB15982-2012）、《医务人员手卫生规范》（WS/T313-2019）、国家卫生健康委员会《基础护理学》（第6版）。3术语和定义3.1无菌技术指在执行医疗护理、侵入性操作过程中，防止一切病原微生物侵入人体，同时防止无菌物品、无菌区域被外源性微生物污染的一系列操作技术规范。3.2无菌物品指经过物理或化学方法灭菌处理后，未被污染、保持无菌状态的物品。3.3无菌区域指经过灭菌处理后未被污染的区域，操作过程中需持续保持无菌状态。3.4非无菌区域指未经灭菌处理，或虽经灭菌处理但已被病原微生物污染的区域。4职责4.1操作者必须接受无菌技术操作专项培训，考核合格后方可独立开展操作；操作前按要求完成人员、环境、用物准备与核对，严格执行本操作规范；操作后按要求整理用物，落实医疗废物分类处置，做好相关记录。4.2带教与质控人员负责操作过程的质量监督，及时纠正不规范操作；定期组织无菌技术操作培训与考核，每季度开展无菌技术操作质量评估，针对存在问题落实持续质量改进。5操作前准备5.1人员准备操作者修剪指甲，指甲长度不得超过指尖1mm，锉平甲缘，去除甲缝污垢，摘除手部所有饰物（戒指、手链、手表、美甲等），按照《医务人员手卫生规范》（WS/T313-2019）要求执行七步洗手法，每步揉搓不少于15秒，总洗手时长不低于1分钟，确认手部无肉眼可见污染物；戴圆帽将全部头发遮盖，鬓角、发梢不得外露；戴医用外科口罩，将口鼻、下颌完全遮盖，系带固定牢固；开展侵入性无菌操作（如手术、穿刺等）需更换清洁洗手衣、换专用拖鞋进入洁净区域，按要求执行外科手消毒。操作者存在呼吸道感染、手部皮肤破损、渗出性炎症时，不得开展侵入性无菌技术操作。5.2环境准备操作前30分钟停止环境清扫、整理、更换被服等产生扬尘的活动，减少人员走动，操作区域10㎡范围内人员流动控制在≤5人；操作区域距离垃圾桶、水池等污染源不少于3m；操作区域符合对应等级消毒卫生要求：II类环境（手术室、产房、新生儿室、ICU、器官移植病房等）空气菌落总数≤4cfu/(15min·直径9cm平皿)，物体表面菌落总数≤5cfu/cm²；III类环境（普通病房、注射室、门诊换药室、普通检验科等）空气菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)，物体表面菌落总数≤10cfu/cm²；操作前采用1000mg/L有效氯含氯消毒剂擦拭操作台面，作用30分钟后用净水擦干，或采用符合消毒要求的一次性消毒湿巾擦拭；采用紫外线消毒环境时，照射时间不少于30分钟，消毒后提前30分钟通风；操作区域照度≥200lx，温度控制在22℃~24℃，相对湿度控制在40%~60%。5.3用物准备所有无菌物品必须符合灭菌要求，包装完好，标注清晰的物品名称、灭菌日期、失效日期、锅号、锅次，包外化学指示胶带变色均匀合格，包内放置化学指示卡，变色达到灭菌合格标准；一次性无菌物品包装无破损、无漏气、无潮湿、无胀袋，不在有效期内的物品严禁使用。根据操作项目准备对应用物，基础无菌操作常规准备：无菌持物钳（镊）及盛放容器、无菌容器、无菌包、无菌溶液、无菌治疗巾、无菌手套、手消毒剂、启瓶器、碘伏、棉签、标签、笔、医疗废物分类容器；所有用物按清洁区、无菌区分区放置，两类区域物品间距≥10cm，放置有序，便于操作。干罐储存的无菌持物钳标注开启时间，每4小时更换1次；湿罐储存的无菌持物钳，消毒液液面高度浸没持物钳轴节以上2cm~3cm，或镊子长度的1/2，盛放容器每12小时更换1次，消毒液每周更换2次，门诊高流量使用场所每日更换1次，消毒液浓度不合格、液体浑浊时立即更换。5.4核对检查操作前逐一核对所有无菌物品信息：核对物品名称、规格、灭菌日期、失效日期，检查包装完整性，检查包外化学指示胶带、包内化学指示卡变色是否合格，检查包装是否存在潮湿、破损、污渍，一次性用品检查是否存在胀袋、漏气，所有项目核对合格后方可使用；不合格物品立即移至不合格物品存放区，按规定重新灭菌或废弃处置。6核心操作流程6.1无菌持物钳（镊）使用操作6.1.1取用时打开盛放无菌持物钳的容器盖，手仅可接触容器盖外表面，将盖平移打开后内面朝上放置于清洁区域，不得将盖内面朝下放置，严禁手触碰盖内面；将无菌持物钳钳端闭合，垂直向下取出，严禁钳端向上倾斜，防止消毒液倒流污染钳端，取出过程中钳端不得触及容器口边缘和容器内壁未浸泡于消毒液的区域；取出后在空气中停留时间不得超过10秒，立即使用。6.1.2使用过程中始终保持钳端向下，钳端不得触及非无菌区域，不得跨越无菌区；禁止用无菌持物钳夹取油纱布（油纱可吸附消毒液，降低灭菌效果），禁止用无菌持物钳直接换药、消毒皮肤，禁止夹取非无菌物品。6.1.3使用后立即将持物钳垂直闭合放回原容器，打开的容器盖及时盖上，不得长时间敞开放置；干罐储存的无菌持物钳开启后使用时间不得超过4小时，超过时间立即更换重新灭菌。6.2无菌容器使用操作6.2.1打开无菌容器时，用手握住容器盖外侧面，平移打开，不得触碰容器盖内面和容器口边缘；打开后容器盖内面朝上放置于清洁干燥处，不得内面朝下接触非无菌台面。6.2.2取无菌物品时，仅可使用无菌持物钳夹取，不得将手伸入无菌容器内，不得触碰容器内的无菌物品；取出的无菌物品即使未使用也不得放回原无菌容器内，按污染物品处置。6.2.3取物完毕后立即按原位置盖回容器盖，盖合时避免触碰容器口边缘造成污染；在容器外壁注明开启日期、时间、操作者签名，开启后的无菌容器有效期为24小时，超过24小时重新灭菌。6.3无菌包打开与取用操作6.3.1将无菌包放置在清洁干燥、平坦的操作台上，核对无菌包信息确认合格后，解开无菌包外系带，将系带放置在包布外下角下方。6.3.2打开包布时，先捏住无菌包外角向外打开，再依次打开左右两角，最后打开内角；打开过程中手仅可接触包布外表面，不得触碰包布内面，手指不得跨越包布内面的无菌区域，包布内角打开时不得触碰地面；打开后包布四层内面朝上，呈扇形展开，露出包内无菌物品。6.3.3需要取出全部物品时，用双手捏住无菌包外层包布内面，将整块无菌物品取出，放置到预先准备好的无菌区域内；需要取出部分物品时，用无菌持物钳夹取所需物品，放到无菌区域后立即按原折痕重新包好。6.3.4重新封包时，用系带横向扎好，不得打成死结，在包布外表面注明打开日期、时间、操作者签名，开启后的无菌包有效期为24小时，超过有效期不得使用，重新灭菌；无菌包打开后发现包装潮湿、破损、污染时，立即停止使用，按污染物品处置；掉出包外的无菌物品不得放回包内，不得使用。6.4铺无菌盘操作6.4.1单层底铺盘法：用无菌持物钳夹取两块无菌治疗巾，放置在清洁干燥的治疗盘上；操作者捏住治疗巾外层两角，轻轻抖开，双折平铺在治疗盘上，将治疗巾上层对折成扇形，边缘向外展开，治疗巾内面为无菌区域，严禁触碰；按顺序将所需无菌物品放置到无菌盘内，然后捏住扇形折叠上层的两角，下拉覆盖无菌物品，使上下两层治疗巾边缘对齐，将多余边缘向上反折两次，不得向下反折，保证边缘整齐；在治疗盘外注明铺盘日期、时间，铺好的无菌盘有效期不超过4小时，超过时间立即更换。6.4.2双层底铺盘法：取出一块无菌治疗巾抖开，对折后平铺在治疗盘上，开口朝向操作者，放置无菌物品后，再取一块无菌治疗巾覆盖在物品上方，四边对齐，多余边缘向下反折固定，标注铺盘时间，有效期同样为4小时。6.4.3铺盘过程中手不得接触治疗巾内面，不得跨越无菌区，铺好的无菌盘需保持干燥，一旦潮湿立即更换。6.5取用无菌溶液操作6.5.1取出密封瓶盛装的无菌溶液，核对溶液名称、浓度、剂量、有效期，检查瓶盖是否松动、瓶身是否有裂缝，倒转瓶体对光检查溶液是否存在沉淀、浑浊、变色、絮状物、异物，确认合格后方可使用。6.5.2用启瓶器撬开瓶盖外层铝盖，用碘伏棉签以螺旋方式消毒瓶塞颈部和瓶盖表面，消毒作用时间不少于1分钟；然后用双手拇指将瓶塞向上翻起，从瓶口边缘取出瓶塞，手不得触碰瓶塞内面和瓶口边缘。6.5.3另一手握住溶液瓶身，使标签朝向掌心，避免倒出溶液浸湿标签，导致标识模糊；瓶口距离下方无菌容器口保持2cm~5cm距离，不得接触容器口边缘，不得将瓶口伸入容器内；先倒出10ml~20ml溶液冲洗瓶口，冲洗后的溶液倒入污物桶，不得使用，然后再按所需剂量倒出溶液到无菌容器内。6.5.4倒取完成后立即将瓶塞按原位置塞紧，再次消毒瓶口和瓶塞接触部位，盖好瓶盖，在瓶身外注明开启日期、时间，开启后的无菌溶液有效期为24小时，超过24小时不得使用，剩余溶液不得用于静脉输液，仅可用于非侵入性操作如清洁创面等；已经倒出的溶液不得倒回原瓶，不得使用。6.5.5禁止将无菌敷料伸入无菌溶液瓶内蘸取溶液，禁止直接将瓶口对准患者伤口倒取溶液。6.6戴脱一次性无菌手套操作6.6.1撕开手套包装前，核对手套号码、灭菌日期、失效日期，确认包装完好无破损。6.6.2沿包装封口撕开外包装，将手套袋平铺在操作台上，手套反折口朝向操作者。6.6.3戴手套时，一手捏住手套反折部位（手套口内面，非无菌面）取出手套，另一手对准五指插入手套内，戴好后，用已经戴好手套的手指插入另一手套的反折部位外侧面（手套无菌面），将另一只手插入手套内，戴好后将手套反折部位拉到工作衣袖口外面，不得露出袖口皮肤；用无菌生理盐水冲洗手套外面的滑石粉，检查手套是否存在破损、漏气，存在破损立即更换。6.6.4脱手套时，操作完成后，先用一只手捏住另一只手套口外侧面（污染面），将手套翻转脱下，再用已经脱下手套的手插入另一只手套内面，将手套翻转脱下，全程脱手套时手部皮肤不得接触手套外污染面；脱下的手套放入感染性医疗废物容器内，脱手套后按要求洗手、手消毒。6.6.5戴手套后双手需保持在腰部以上、胸前以下的操作区域，不得接触非无菌物品、面部、口罩，不得跨越非无菌区；操作过程中发现手套破损立即更换，不得继续使用；未戴手套的手不得接触手套外无菌面，戴手套的手不得接触未戴手套的皮肤和非无菌物品。7无菌技术操作基本原则7.1操作者身体与无菌区域保持10cm~20cm的距离，手臂不得跨越无菌区，不得将身体倚靠在无菌区域上，不得面对无菌区说话、咳嗽、打喷嚏，防止飞沫污染无菌物品。7.2无菌物品必须存放在密闭容器或密闭灭菌包装内，存放环境温度≤25℃，相对湿度≤60%，存放架离地距离≥20cm，离墙距离≥5cm，离顶距离≥50cm；纺织品包装的无菌物品有效期为14天，纸塑袋、纸袋包装的无菌物品有效期为6个月，符合低温低湿储存要求的一次性纸塑包装无菌物品有效期可延长至180天。7.3无菌物品一旦被污染，或超过有效期，必须立即重新灭菌，不得继续使用；任何情况下怀疑无菌物品被污染，必须立即更换或重新灭菌，不得继续使用。7.4一份无菌物品只能供一名患者使用，不得多名患者共用，防止交叉感染；所有侵入性操作必须使用灭菌合格的无菌物品，优先使用一次性无菌物品。8质量控制标准8.1操作前：人员准备符合要求，手卫生合格，防护用品穿戴规范；环境消毒合格，温湿度、人员流动符合要求；所有无菌物品核对合格，无过期、不合格物品，合格率100%。8.2操作过程：未发生无菌区域、无菌物品污染事件，操作符合流程要求，未跨越无菌区，未接触无菌区域内面，所有开启的无菌物品都标注了开启时间，有效期符合规范要求。8.3终末质量：操作完成后无菌区域无污染，剩余无菌物品处置规范，医疗废物分类处置正确，无菌物品存放符合要求；定期监测显示，无菌物品不得检出任何微生物，空气、物体表面菌落数符合对应环境等级要求，监测合格率100%。9常见错误与防范措施9.1取用无菌持物钳时钳端向上，导致消毒液倒流污染钳端：操作时强化要点记忆，取放持物钳全程保持钳端向下，垂直进出容器，不得触碰容器口边缘。9.2打开无菌包后手接触包布内面、跨越无菌区：严格执行操作流程，仅允许手接触包布外表面，按照外角-左右角-内角的顺序打开，手指不得越过包布内面。9.3无菌物品开启后未标记时间，超期使用：要求操作者每次开启无菌物品后立即标注开启时间、操作者签名，科室质控人员每日清理无菌物品存放区，及时清理超期物品。9.4戴手套后触碰非无菌物品，手套破损未及时更换：操作前明确无菌操作范围，戴手套后不得随意触碰非无菌物品，操作前必须检查手套完整性，操作过程中随时感知手套状态，破损立即更换。9.5倒无菌溶液时标签未朝向掌心，瓶口接触容器壁导致污染：倒液前核对标签后确认标签位置，倒液时保持标签朝