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文档简介
课时作业62基因工程的基本操作程序及应用(二)1.[2022·朝阳一模]运用PCR技术从DNA中扩增目的基因的过程中,引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基,5'端无严格限制,可用于添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是()A.该图表示PCR循环中的变性环节B.dNTP作为扩增的原料会依次连接到3'端C.TaqDNA聚合酶催化配对的dNTP间形成磷酸二酯键D.用图中引物扩增两个循环后可获得目的基因2.[2019·海淀二模]为提高大豆对磷元素的吸收能力,研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中。下图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图,下列相关叙述不正确的是()A.以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获取大量OsPTF基因B.RNA聚合酶与启动子1识别并结合后,启动抗除草剂基因的转录C.可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织D.用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后,经电泳分离至少得到两个条带3.[2025·石景山期末]5-羟色氨酸是具有药用价值的色氨酸衍生物,主要从植物中提取。利用大肠杆菌实现5-羟色氨酸的规模化生产的主要代谢过程如下图。然而构建的工程菌产生的色氨酸羟化酶催化效率很低,将其肽链中197位和219位氨基酸替换后,催化效率大大提高。下列相关步骤不正确的是()A.可通过改变DNA序列改变色氨酸羟化酶的氨基酸序列B.用相同的限制酶处理目的基因与大肠杆菌质粒,再用DNA连接酶处理C.将大肠杆菌用Ca2+处理后,导入构建的基因表达载体D.通过PCR技术不能检测转入的色氨酸羟化酶基因是否转录4.[2022·海淀期末]乳酸乙酯是白酒中重要的呈香物质,由乳酸脱氢酶催化产生,影响白酒品质和风味。科研人员将酿酒酵母质粒上的丙酮酸脱氢酶基因(PD)替换为植物乳杆菌中的乳酸脱氢酶基因(L-PG),可获得乳酸乙酯高产菌株,该过程如下图所示。下列关于该过程的分析不合理的是()A.转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性B.可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞C.通过基因重组实现酵母菌的PD基因替换为L-PG基因D.标记基因Ampr可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株5.[2023·昌平二模]转座子是基因组中可移动的DNA片段,玉米Ac转座子能编码转座酶而自主转座,Ds转座元件只有与Ac转座子同时存在时,才能从原位点切离并插入新位点中。研究者利用玉米转座子系统构建烟草突变体,下列叙述错误的是()A.推测Ds转座元件不具有编码转座酶功能B.可构建同时含有Ac/Ds的基因表达载体C.利用农杆菌转化法将基因表达载体导入烟草细胞D.Ds与其插入的基因间发生基因重组6.[2023·昌平期末]科研人员在常规PCR基础上发展出同时检测多种病原体的多重PCR技术,检测原理(甲、乙)及结果(丙)如图。下列叙述错误的是()A.需要针对不同病原体设计特异性引物和荧光探针B.图乙是PCR反应的复性过程C.多重PCR同时完成对4种病原体的检测D.由结果推测该检测样品中有A病原体的核酸7.[2021·朝阳期末]戊型肝炎病毒是一种RNA病毒,ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位于病毒表面,构成病毒的衣売。我国科研人员利用基因工程技术,在大肠杆菌中表达pORF2,制备戊型肝炎疫苗,过程如图。下列关于该疫苗的叙述正确的是()A.过程①需要的酶是RNA聚合酶,原料是A、U、G、CB.重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒C.过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于感受态D.过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定8.[2020·朝阳期末]为增加玉米抗旱性,科研人员构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒,采用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中,用E蛋白的抗体进行抗原—抗体杂交检测后,经进一步鉴定,筛选出抗旱的转基因玉米。下列叙述错误的是()A.提取该微生物mRNA逆转录为cDNA,通过PCR可获得大量目的基因B.将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中,可获得转化的农杆菌C.用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格无菌操作D.用E蛋白的抗体进行抗原—抗体杂交,可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状9.[2024·西城二模]裸鼹鼠几乎不得癌症,其寿命可超过30年,同样大小的家鼠最长寿命为4年。为探究其原因,科研人员做了以下研究。(1)将裸鼹鼠皮肤成纤维细胞置于 培养箱进行体外培养,经检测发现其分泌大量黏稠的高分子量透明质酸(HA),可抑制细胞过度增殖。(2)研究者检测不同来源成纤维细胞中HA合成酶(HAS)的含量,结果如图甲。另外,发现裸鼹鼠组织的HA降解酶(HAase)的活性远低于人和小鼠。结合图文信息,分析裸鼹鼠皮肤成纤维细胞分泌大量高分子量HA的原因是 。图甲结果显示,裸鼹鼠胚胎期HA合成酶低表达,推测其意义是 。(3)为进一步研究高分子量HA能否提高小鼠的寿命,研究人员进行了下列实验(图乙)。①通过转基因技术获得转基因小鼠A:为了将目的基因插入小鼠6号染色体的特定位点,需在其两端设计与6号染色体同源的序列,实现同源序列之间的重组。由此获得的转基因小鼠A暂时无法表达HA合成酶2,原因是 。②B鼠为导入表达CE的纯合子,CE也插入6号染色体的相同位点。外源雌激素可诱导cre重组酶活化,活化的cre重组酶能识别并切除LoxP位点间的序列。A、B鼠交配获得C、D鼠,请画出C鼠的基因组成情况。③利用C、D鼠进行实验,测得实验组小鼠HA含量升高,癌症概率降低、炎症反应减少,寿命也得到了延长。请写出对照组的选材: (填“C”或“D”)鼠及实验处理: 。(4)请简述本研究的应用前景: 。10.[2024·丰台期末]无核葡萄品质优良,但抗寒性差。我国科学家以中国野生葡萄资源中抗寒性最强的山葡萄为材料,对抗寒相关基因Va的功能展开相关研究。(1)通过前期研究结果,科研人员推测Va基因可能为转录因子。转录因子是一类特定的蛋白,可以调控 与启动子的结合。(2)为进一步验证Va基因的转录激活功能,科研人员利用pG载体首先构建了重组质粒,导入敲除GAL4基因的酵母菌株AH109中,如下图所示。GAL4基因可编码酵母中具有转录激活功能的蛋白,AH109菌株为色氨酸、组氨酸缺陷型菌株,只有在添加相应氨基酸的培养基中才能生长。①为了能够筛选得到重组酵母,培养基的配方为下列选项中的 组,此外还需额外添加 ,通过显色反应做进一步验证。A组:加色氨酸和组氨酸B组:不加色氨酸和组氨酸C组:加组氨酸,不加色氨酸D组:加色氨酸,不加组氨酸②完善实验过程及对应结果(3)利用本地不抗寒葡萄品种“红地球”进一步探究Va基因的功能,科研
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