检测案44动物细胞工程

检测案44动物细胞工程(分值：45分)授课提示：对应课后定时检测案139页基础巩固练1～5题，每题2分。1．某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是()A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封C．血清经过高温处理后加入培养基D．所使用的培养基呈弱酸性解析：小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A符合题意；培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B不符合题意；高温会使血清含有的促进细胞生长和增殖所需要的营养物质失活，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓慢，C不符合题意；小鼠细胞内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，使细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D不符合题意。答案：A2．(2024·北京卷，11)我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构(类囊胚)，为研究灵长类胚胎发育机制提供了实验体系(如图)。相关叙述错误的是()A．实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能B．实验过程中使用的培养基含有糖类C．类囊胚的获得利用了核移植技术D．可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育解析：体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构(类囊胚)，证实了食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能，A正确；实验过程中使用的培养基需含有糖类，糖类可为细胞培养提供能源物质，B正确；类囊胚的获得利用了动物细胞培养技术，并没有进行核移植，C错误；可借助胚胎移植技术将类囊胚移植到相应的雌性受体中继续胚胎发育，从而用来研究类囊胚的后续发育，D正确。答案：C3．(2024·重庆卷，8)科研小组以某种硬骨鱼为材料在鱼鳍(由不同组织构成)“开窗”研究组织再生的方向性和机制(如下图所示)，下列叙述不合理的是()A．“窗口”愈合过程中，细胞之间的接触会影响细胞增殖B．对照组“窗口”远端，细胞不具有增殖和分化的潜能C．“窗口”再生的方向与两端H酶的活性高低有关，F可抑制远端H酶活性D．若要比较尾鳍近、远端的再生能力，则需沿鳍近、远端各开“窗口”观察解析：“窗口”愈合过程中存在细胞增殖以增加细胞的数量，正常细胞增殖过程中存在接触抑制，即细胞之间的接触会影响细胞增殖，A正确；处理组与对照组比较发现，添加F后，“窗口”远端的细胞继续增殖和分化，说明对照组“窗口”远端的细胞具有增殖和分化的潜能，B错误；由题图可知，“窗口”再生的方向与两端H酶的活性高低有关，由活性低的向活性高的方向再生，添加F后可抑制远端H酶活性，使组织再生的方向往中间延伸，C正确；题图中的近端和远端为同一个“窗口”，只能判断出再生的方向，若要判断出再生的能力，则需沿鳍近、远端各开“窗口”分别观察，D正确。答案：B4．单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用，如图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程，下列有关叙述正确的是()A．提取脾B淋巴细胞有多种，是因为一种抗原可诱导产生多种B细胞B．诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法完全相同C．在具有杂交瘤细胞的培养板上滴加相应抗体，出现阳性反应的即为目标细胞D．筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养解析：一种抗原只能诱导B细胞产生一种抗体，提取脾B淋巴细胞有多种，是因为小鼠曾经接触过其他多种抗原，A错误；诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法不完全相同，如诱导动物细胞融合的特有方法是灭活的病毒，B错误；单抗检测时不能在培养板上直接检测，需进行单细胞克隆化培养和抗体检测，出现阳性反应为目标细胞，C错误；筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养，D正确。答案：D5．(2024·重庆卷，10)自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述正确的是()注：PGCs是原始生殖细胞，iPGCs是诱导型原始生殖细胞，均有成为卵原细胞或精原细胞的潜能。A．诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性B．移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息C.该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲D．通过该实验可以获得甲的克隆解析：胚胎干细胞具有发育的全能性，iPGCs是诱导型原始生殖细胞，具有成为卵原细胞或精原细胞的潜能，故诱导后的iPGCs不具有胚胎干细胞的特性，A错误；移植的iPGCs分化形成卵原细胞或精原细胞后，通过减数分裂形成配子，在减数分裂过程中基因可能会发生重组，导致最终产生的配子的遗传信息不一定相同，B错误；由题图可知，将物种甲处于囊胚期的iPGCs移植到阻止PGCs形成的乙鱼的胚胎中，培育出的乙鱼的生殖腺中的细胞由甲鱼的iPGCs增殖分化而来，该乙鱼再与物种甲杂交，配子均是由物种甲的生殖细胞产生，故子一代的遗传物质来源于物种甲，C正确；克隆属于无性繁殖，该实验过程中涉及有性生殖，D错误。答案：C提能强化练6～8题，每题3分。6．科研人员在制备杂交瘤细胞的过程中，获得了能够产生双特异性抗体(简称双抗)的双杂交瘤细胞，双抗可以同时结合两种抗原。如图是抗EGFR/CD3双特异性抗体作用结果的示意图，该双抗既能与肿瘤细胞表面的受体EGFR结合，也能与T细胞表面的抗原CD3结合。已知颗粒酶、穿孔素是T细胞分泌的细胞因子，能促进肿瘤细胞的凋亡。下列说法正确的是()A．将两种抗原分别注射到小鼠体内产生细胞免疫以制备双抗B．T细胞分泌颗粒酶和穿孔素促进肿瘤细胞的凋亡，体现了免疫监视功能C．分离出两种T细胞并与瘤细胞结合，能获得可产生双抗的双杂交瘤细胞D．抗EGFR/CD3双特异性抗体能同时与两种细胞结合，说明抗体不具有专一性解析：为了制备抗EGFR/CD3双特异性抗体，科研人员需要将抗原CD3注射到小鼠体内产生B淋巴细胞，制备产生抗CD3抗体的杂交瘤细胞，将抗原EGFR注射到小鼠体内产生B淋巴细胞，制备产生抗EGFR抗体的杂交瘤细胞，然后通过一定的方法诱导两种杂交瘤细胞融合，从而得到可产生双抗的双杂交瘤细胞，该过程涉及体液免疫，A、C错误；免疫监视是指机体识别和清除突变的细胞，防止肿瘤发生的功能，所以T细胞分泌颗粒酶和穿孔素促进肿瘤细胞的凋亡，体现了免疫监视功能，B正确；抗EGFR/CD3双特异性抗体能与肿瘤细胞表面的受体EGFR结合，同时又能与T细胞表面的抗原CD3结合，但不能与其他受体或抗原结合，故该抗体仍然具有专一性，D错误。答案：B7．(不定项)近年来，单倍体胚胎干细胞的研究发展迅速，如图为建立孤雄单倍体胚胎干细胞(AG-haESCs)的流程。获得小鼠的AG-haESCs后，科研团队又将其细胞核移植到正常未受精的卵母细胞中，获得半克隆小鼠，发现这些半克隆小鼠都是雌性。以下叙述错误的是()A．与二倍体胚胎干细胞相比，对AG-haESCs进行基因改造，更容易获得理想表型B．若囊胚细胞中某些基因表达错误影响滋养层的功能，则会影响AG-haESCs的获取C．根据结果推测仅携带X染色体的AG-haESCs很可能发育异常，难以稳定培养和扩增D．哺乳动物的单倍体胚胎干细胞技术成熟后，在半克隆人的研究中有广阔的前景解析：与二倍体胚胎干细胞相比，对AG-haESCs进行基因改造，更容易获得理想表型，因为AG-haESCs只具有一套染色体，有利于研究一些未知的隐性表型基因突变，A正确；滋养层将来发育成胎膜和胎盘的一部分，若囊胚细胞中某些基因表达错误影响滋养层的功能，不会影响AG-haESCs的获取，B错误；根据结果推测仅携带X染色体的AG-haESCs很可能发育正常，可以稳定培养和扩增，C错误；哺乳动物的单倍体胚胎干细胞技术成熟后，在疾病的治疗等方面有广阔的前景，但法律规定禁止克隆人或半克隆人的研究，D错误。答案：BCD8．(2026·吉林长春检测卷)(不定项)有部分人体内缺乏乳糖酶，饮用鲜牛奶后会出现肠胃不适、消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生，有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，相关叙述正确的是()A．犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致B．去核的卵母细胞可用去核的乳腺细胞代替C．犊牛的出生体现了动物细胞核的全能性D．体细胞核移植技术可用于提供人类器官移植所需的供体和保护濒危动物解析：犊牛的细胞质基因来自卵母细胞，且其细胞核基因经过重组，因此其性状与黑白花奶牛的性状不完全一致，A错误；卵母细胞细胞质中有促进细胞核全能性表达的物质，而乳腺细胞没有，因此去核的卵母细胞不可用去核的乳腺细胞代替，B错误。答案：CD大题冲关练9.(14分)在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是指被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类，其中过继性细胞治疗相关过程如图所示。回答下列问题：(1)在单克隆抗体治疗中，为了获取能产生抗肿瘤细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。筛选所用的培养基属于____________(按功能)。筛选出来的杂交瘤细胞进行____________和____________，才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(2)科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合，制成了抗体—药物偶联物(ADC)，ADC通常由____________________________三部分组成。(3)过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞置于适宜环境下培养，培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有____________________________________________________________________________________(答出2点)，培养过程中出现接触抑制现象时，可以用________________________酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。(4)过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，其原因是________________________________________________________________。解析：(1)单克隆抗体制备过程中对杂交细胞有两次筛选，第一次用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞都死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；第二次筛选出能合成所需抗体的杂交瘤细胞，对经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(2)ADC为抗体—药物偶联物，由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成，抗体具有特异性，可以实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，减少了用药量，也降低了副作用。(3)在细胞培养的过程中，由于细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏和接触抑制，细胞分裂受阻；培养过程中出现接触抑制现象时，可以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。(4)过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，原因是自体免疫细胞进行诱导培养得到的肿瘤特异杀伤细胞与人体正常细胞的组织相容性抗原相同。答案：(1)选择培养基克隆化培养抗体检测(2)抗体、接头、药物(3)细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏(合理即可)胰蛋白酶或胶原蛋白(4)以自体免疫细胞进行诱导培养得到的肿瘤特异杀伤细胞与人体正常细胞的组织相容性抗原相同10．(12分)M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题。(1)在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是__________________________，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的__________________断开。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是________________________________________________________________________。(3)鉴定转基因动物：以免疫小鼠的________淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)基因工程中切割DNA的工具酶是限制性内切核酸酶(限制酶)，故在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是限制性内切核酸酶(限制酶)。(2)在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够的营养。(3)先给小鼠注射特定抗原使之