CN119403827A 用于治疗乙型肝炎病毒(hbv)感染和hbv相关疾病的组合物和方法 （维尔生物科技公司）

2024.12.18PCT/US2023/0671742023.05.18WO2023/225598EN2023.11.23用于治疗乙型肝炎病毒(HBV)感染和HBV相本公开提供了使用组合疗法来治疗HBV感染疗法的各组分可包括以下中的一项或多项：抗2其中：所述受试者为HBeAg阴性，所述受试者在治疗前具有≤2000IU/mL的HBVDNA水2.一种在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法中使受试者是非肝硬化的，所述受试者具有≤所述正常值上限(ULN)的丙氨酸转氨酶(ALT)水试者先前尚未被施用抗HIV抗体，并且/或者所述受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的所述受试者还被施用了靶向HBVmRNA的siRNA和核苷(酸3.一种抗HBV抗体；一种靶向HBVmRNA的siRNA；和一种核苷(酸)逆转录酶抑制剂(NRTI)，在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法中使用；4.一种在制造用于治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的所述受试者还被施用了靶向HBVmRNA的siRNA和核苷(酸5.一种在制造第一药物时使用的抗HBV抗体、一种靶向HBVmRNA的在制造第二药物时第一药物、所述第二药物和所述第三药物用于治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)37.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有≤2000IU/mL的HBVDNA8.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有<209.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是非肝14.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的15.一种治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法，所述其中：所述受试者为HBeAg阴性或HBeAg阳性，所述受试者在治疗前具施用靶向HBVmRNA的siRNA，所述受试者先前未被施用干扰素一α,所述受试者在治16.一种在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法中使2000IU/mL的HBVDNA水平，所述受试者是非肝硬化的，所述受试者具有>所述正常值上限418.一种在制造用于治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的所述受试者为HBeAg阴性或HBeAg阳性，所述受试者在治疗前具有>2000IU/mL的HBV所述受试者在治疗前具有>10IU/mL的HBsAg水平。22.根据权利要求15所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有>223.根据权利要求15所述的方法，其中所述受试者具有26.根据权利要求15所述的方法，其中所述受试者先前未被施用靶向HBVmRNA的29.根据权利要求15所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有>10IU/mL的HBsAg水5可变结构域(VL)；和(b)与根据SEQIDNO:53的氨基酸序列具有至少90％、至少95％或(a)根据SEQIDNO:59的轻链氨基酸序列，和(b)根据SEQIDNO:57的重链氨基酸序轻链可变结构域(VL)；和(b)与根据SEQIDNO:53的所述氨基酸序列具有至少90％、至少6(a)根据SEQIDNO:59的轻链氨基酸序列，和(b)根据SEQIDNO:57的重链氨基酸序中所述正义链包括与SEQIDNO:1的核苷酸1579_1597相差不超过3个核苷酸的至少15个连UGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNO:4)的核苷酸序列或由所述核苷酸GUGUGCACUUCGCUUCACA_3'(SEQIDNO:3)的核苷酸序列或由所述核苷51.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRNA的至少一个链包括至少1个核苷酸的52.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRNA的所54.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRN57.根据权利要求56所述的方法，其中所述siRNA与如以下结构中所示的所述配体缀759.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRNA的至少一个核苷酸是经修饰的核苷5'磷酸酯模拟物的核苷酸。61.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRNA62.根据权利要求50所述的方法，其中所述siRN括5'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL963'(SEQIDNO:5)，所述反义链包括5'usGfsuga基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；63.根据权利要求62所述的方法，其中所述L96与如以下结构中所示的所述正义链缀864根据权利要求15所述的方法，其中所述siRNA包括形成双链区的正义链和反义链，其中所述正义链包括与SEQIDNO:1的核苷酸1579_UGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNO:4)的核苷酸序列或由所述核苷酸GUGUGCACUUCGCUUCACA_3'(SEQIDNO:3)的核苷酸序列或由所述核苷67.根据权利要求66所述的方法，其中所述siRNA的至少一个链包括至少1个核苷酸的68.根据权利要求66所述的方法，其中所述siRNA的所述双70.根据权利要求66所述的方法，其中所述siRN73.根据权利要求72所述的方法，其中所述siRNA与如以下结构中所示的所述配体缀975.根据权利要求66所述的方法，其中所述siRNA的至少一个核苷酸是经修饰的核苷5'磷酸酯模拟物的核苷酸。77.根据权利要求66所述的方法，其中所述si78.根据权利要求66所述的方法，其中所述s括5'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL963'(SEQIDNO:5)，所述反义链包括5'usGfsuga基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；79.根据权利要求78所述的方法，其中所述L96与如以下结构中所示的所述正义链缀80380)或替诺福韦exaliades(T80380)或替诺福韦exaliades(T(ii)所述siRNA包括正义链和反义链或由所述正义链和所述反义链组成，所述正义链包括5'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL963'(SEQIDNO:5)，所述反义链包括5'usGfsuga基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；(ii)所述siRNA包括正义链和反义链或由所述正义链和所述反义链组成，所述正义链包括5'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL963'(SEQIDNO:5)，所述反义链包括5'usGfsuga基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；94.根据权利要求93所述的方法，其中在44周、48周或更长时间的治疗期内施用所述102.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有丁型肝炎病毒包含靶向HBVmRNA的siRNA和药学上可接受[0003]乙型肝炎病毒(HBV)为在人肝细胞中感染、复制和保持的DNA病毒(ProtzerU等ofviralreplicationandgeneticvariability,JournalofHepatology,2016,64DNA(cccDNA)，其作为游离型染色质化结构保持在宿主细胞核中(AllweissL等人，TheRoleofcccDNAinHBVMaintenance,Viruses2017,9:156)。cccDNA充当所有病毒转录物的转录模板(LuciforaJ等人，AttackinghepatitisBviruscccDNA—TheholyRNA(pgRNA)转录物被逆转录为新病毒粒子的新rcDNA，这些病毒粒子经分泌而不引起细胞组亚病毒粒子的数量可能超过分泌的病毒粒子数量的10,000倍(Seeger等人，2015，见上人，MechanismsofHBV_inducedhepatocellularcarcinoma,JournalofHepatology的先天性和适应性免疫应答清除病毒，这些免疫应答包括细胞毒性T细胞导致受感染肝细胞死亡，并且B细胞的诱导产生防止病毒传播的中和抗体(BertolettiA,Adaptive人，TheroleofinnateimmunityintheimmunopathologyandtreatmentofHBVinfection,JournalofHepatology2016,64(1):S60_S70；LiY等人，Genome_wideassociationstudyidentifies8p21.3associatedwithpersistenthepatitisB[0006]慢性HBV感染因显著的发病率和死亡率仍然是重要的全球公共卫生问题(Trepo慢性HBV感染是特征在于病毒复制和宿主免疫应答的将患者分为不同的疾病阶段(EuropeanAssociationfortheStudyoftheLiver,EASL2017ClinicalPracticeGuidelinesonthemanagementofhepatitisBvirusinfection,JHepatol.2017年8月，67(2):370_398；SarinSK等人，Asian_PacificclinicalpracticeguidelinesonthemanagementofhepatitisB:a2015update,HepatolInt.2016年1月，10(1):1_98；TerraultNA等人，Updateonprevention,diagnosis,andtreatmentof细胞癌(HCC)。非活动性携带者为HBeAg阴性和抗HBe阳性，持续低水平的HBVDNA(<2,率，很低的肝硬化或HCC风险和很高的长期乙型肝炎表面抗原(HBsAg)清除率(EASL,2017，见上文；InvernizziF等人，TheprognosisandmanagementofinactiveHBV人，Incidence,Factors,andPatient_LevelDataforSpontaneousHBsAgSeroclearance:ACohortStudyof11,264Patients,ClinTranslGastroenterol2020[0009]在患有慢性HBV感染的非肝硬化患者中，目前建议对具有高水平病毒血症(HBV人，PresentandfuturetherapiesofhepatitisB:Fromdiscoverytocure,患者(<10％)中和在48周的疗法后(KonermanMA等人，InterferonTreatmentfor[0010]当前可用的治疗都不能恢复大部分患者对HBV的免疫控制。因此，仍然需要针对NRTI，该受试者先前尚未被施用抗HIV抗体，该受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的试者在治疗前具有>10IU/mL的HBsAg水平。[0027]图5A至图5I描绘了用于实施例1中的临床研究中的所有队列的随访期的活动的时[0034]图12A至图12I描绘了用于实施例2中的临床研究中的所有队列的随访期的活动的[0035]本公开提供了在治疗乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病时使用的方法和组[0037]以下部分提供了用于治疗HBV感染或HBV相关疾病的组合疗法以及与组合疗法相料或步骤以及那些不会实质上影响所要求保护的本发明的基本特性和新型特性的材料或化或泛素化的氨基酸添加。这些修饰在文献(ProteinsStructureandMolecularProperties，第2版.,T.E.Creighton,NewYork(1993)proteinmodificationsandnonproteincofactors,Meth.Enzymol.1990,182:626_46；百分比可例如使用BLAST，使用由NCBI指定的默认参数(theNationalCenterfor至少99％同一性的氨基酸序列的核苷酸序列变体。在氨基酸序列的上下文中的“序列变体”同”。[0050]氨基酸序列插入包括长度范围为一个残基至含有一百个或更多个残基的多肽的包括将氨基酸序列的N末端或C末端与报告分核酸序列和/或氨基酸序列中进行特定和有意改变的分子生物学方法)获得的突变。因此，酸分子。编码序列的边界通常由开放阅读框确定，该开放阅读框通常以ATG起始密码子开科(Hepadnaviridaefamily)的众所周知的非细胞病变肝脏嗜性DNA病毒。HBV基因组是具部分双链环状DNA。核心蛋白通过基因C编码(HBcAg)。乙型肝炎e抗原(HBeAg)通过前核心(preC)蛋白的蛋白水解加工来产生。DNA聚合酶由基因P编码。基因S为编码表面抗原逃避免疫检测。由基因X编码的蛋白质在转录反式激活和复制方面发挥作用并且与肝癌的具有独特的地理分布(VelkovS等人，TheGlobalHepatitisBVirusGenotypeDistributionApproximatedfromAvailableGenotypingData,Genes2018,9(10):例如NCBI登录号YP_009173857.1(C蛋白)；YP_009173867.1和BAA32912.1(X蛋白)；YP_和BAA32914.1(S蛋白)。HBV信使RNA(mRNA)序列的附加示例可使用公开可用的数据库(例如，GenBank、UniProt和OMIM)获得。可在http://www.hpa_.uk/HepSEQ/main.php处访问乙型肝炎病毒株数据国际储存库(InternationalRepository动物细胞中的长双链RNA(dsRNA)通过称为Dicer的III型核酸内切酶分解为siRNA(Sharp等转录HBV基因的第一细胞或细胞组中分离或检测到，并且已经用HBV基因表达的抑制剂处染HBV的细胞或经工程化以表达HBV基因的细胞中，并且通过任何适当的测定来确定HBV基[0062]通过细胞或细胞组表达的HBVRNA的水平或循环HBVRNA的水平可以使用本领域RNA可使用RNA提取技术，包括例如使用酸苯酚/异硫氰酸胍(RNAzolB；Biogenesis)、糖核酸杂交的典型测定形式包括核连缀测定、RT_PCR、RNA酶保护测定(MeltonDA等人，EfficientinvitrosynthesisofbiologicallyactiveRNAandRNAhybridizaprobesfromplasmidscontainingabacteriophageSP6promoter,Nuc.Acids2012/177906A1号和美国专利申请公开第US2014/0275211A1号中描述的方法检测循环HBV序列描述第一核苷酸序列时是指包括第一核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸在某些条件用确定最适合于两个序列的互补性测试的条件[0066]如本文所描述的siRNA内的互补序列包括包含第一核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸与包含第二核苷酸序列的寡核苷酸或多核苷酸在一个或两个核苷酸序列的全长上的寡核苷酸和另一个长度为23个核苷酸的寡核苷酸的siRNA，其中较长的寡核苷酸包括与较短的寡核苷酸完全互补的21个核苷酸的序列，仍可被称为出于本文所述的目的“完全互义链之间或siRNA药剂的反义链与靶序列之间的碱基匹配使用，如根据其使用的上下文所结构的两条链可来自具有至少一个自身互补区的单一RNA分子，或可由两个或更多个单独3'末端与形成双螺旋体结构的相应另一条链的5'末端之间的单链核苷酸链(本文中被称为涵盖包括如本文所描述的或本领域已知的一种或多种核糖核苷酸/核糖核苷类似物或衍生2[0082]人类抗体在现有技术中是众所周知的(vanDijkMA和vandeWinkelJC,该转基因动物在免疫时能够在不存在内源性免疫球蛋白的情况下产生人类抗体的完整库[0083]免疫球蛋白基因阵列转移到这种种系突变小鼠中将导致在抗原激发后产生人类抗体(参见例如JakobovitsA.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA1993,90:2551_55；JakobovitsA.等人，Nature1993,362:255_258；BruggemannM.等人，YearImmunol.1993,7:3340)。人类抗体还可在噬菌体展示文库中产生(HoogenboomHRand等人和Boerner等人的技术还可用于制备人单克隆抗体(Cole等人，MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss，第77页(1985)；BoernerP等人，FcRN_IgG受体进入肝细胞的抗原非依赖性摄取，IgG型HBsAg特异性抗体也可有利地阻断(LC)或重链(HC)的部分(通常大约为成熟抗体重链或轻链的105个至120个氨基末端氨基Kabat、EU、国际免疫遗传学信息系统(InternationalImmunogeneticsInformation受体编号和受体分类(AntigenreceptorNumberingAndReceptorClassification，[0086]在某些实施方案中，根据本公开的组合疗法的抗HBV抗体或其抗原结合片段是经段、特别是保留了抗体的抗原结合活性的片段。这种片段包括但不限于单链抗体、Fab、[0087]可通过包括用诸如胃蛋白酶或木瓜蛋白酶等酶消化和/或通过化学还原切割二硫来获得抗体的片段。本公开还涵盖源自本公开的抗体的重链和轻链的单链Fv片段(scFv)。[0088]本公开的抗体片段可赋予单价或多价相互作用并且包含于如上文所描述的各种子的组分，其中序列靶向如本文所描述的表位并且多特异性分子的其他区与其他靶标结能抗体(Holliger和Hudson,NatureBiotechnology体。双特异性抗体的形式公开于例如，Spiess等人(Mol.Immunol.2015,67(2):95)和Brinkmann和Kontermann(mAbs2017,9(2):182_212)，这些双特异性[0095]SIRNA01靶向并抑制由根据NCBI参考序列NC_003977.2(GenBank登录号GI：SIRNA01导致对大部分或所有HBV转录物的表达的显著抑制。国际申请公开第WO2020/036862A1号中描述了用于合成SIRNA01的示例性方法和证明HBV基因表达沉默的实验数据，5'UGUGAAGCGAAGUGCACACUU3'(SEQIDNO:4)的反义链，其中这些核苷酸包括2'氟代(2'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL96一3'(SEQIDNO:5)，和包括5'一usGfsuga(Agn)A腺苷3'磷酸酯2'氟腺苷3'磷酸酯[0101]在一些实施方案中，在本文所描述的方法、组合物或试剂盒中使用的siRNA是SIRNA01的序列变体。在特定实施方案中，SIRNA01的序列变体所靶向的HBV转录物部分与续核苷酸的部分序列的siRNA，并且其抑制HBV基因的表达的能力与包括完整序列的siRNA过2个或不超过1个核苷酸的序列。一些实施方案中，如本文所描述的siRNA包含不超过3个错配。在一些实施方案中，如果siRNA的反义链包含与靶序列的错配，则错配区域不位于互补区的中心。在特定实施方案酸上还可作为单一核酸分子的自身互补区被包描述的siRNA的反义链的单链反义RNA分子。反义RNA分子可具有与靶标互补的15个至30个protocolsinnucleic[0111]在一个实施方案中，siRNA的正义链的基本上所有或所有核苷酸和反义链的基本碱基或与扩大的配偶体库进行碱基配对的碱基替换，除去碱基(脱碱基核苷酸)或共轭碱[0114]修饰包括经取代的糖部分。本文所特写的siRNA可包括在2'位置处的以下各项之3332CH32232性质的基团或用于改善siRNA的药效动力学性质的基团以及具有相似性质的其他取代基。2'_DMAOE，以及2'_二甲基氨基乙氧基乙氧基(在本领域中也被称为2*_O_二甲基氨基乙氧2*_O_CH2_O_CH2_N(CH2)2。其他示例性修饰包括2'_甲氧基(2'_[0115]教导这种经修饰的糖结构的制备的代表性美国专利包括但不限于美国专利第4,[0117]教导上文含磷键的制备的代表性美国专利包括但不限于美国专利第3,687,808[0119]教导上述寡核苷的制备的代表性美国专利包括但不限于美国专利第5,034,506[0120]在一些实施方案中，核苷酸单元的糖和核苷间键即主链两者被替换为新颖基维持碱基单元以与适当的核酸靶化合物杂交。一种杂氮原子结合。教导PNA化合物的制备的代表性美国专利包括但不限于美国专利第5,539,相关的教导内容通过引用并入本文。PNA化合物的另外的教导可在例如Nielsen等人(Science1991,254:1497_1500)中[0121]本文所描述的技术所特写的一些实施方案包括具有硫代磷酸酯主链的RNA和具有N(CH3)CH2和N(CH3)CH2CH2[其中天然磷酸二酯主链被表示为OPOCH2]和美国专利中公开的核碱基；在ModifiedNucleosidesinBiochemistry,BiotechnologyandMedicine(HerdewijnP，编辑，Wiley一VCH,2008)中公开的核碱基；在TheConciseEncyclopediaOfPolymerScienceAndEngineering(第858页至第859页，KroschwitzJL，编辑，JohnWiley&Sons,1990)；通过Englisch等人(AngewandteChemie,1993)公开的核碱基。这些核碱基中的某些核碱基尤其可用于增加本文所描述的技术所特取代将通过0.6℃至1.2℃来提高核酸双螺旋体的稳定性(SanghviYS等人，编辑，dsRNAResearchandApplications,CRCPress,BocaRaton,[0125]教导上述某些经修饰的核碱基以及其他经修饰的核碱基的制备的代表性美国专088号；这些文献中的每个文献都针对与制备这种修饰的方法相关的教导内容通过引用并GNA的描述可在例如Zhang等人(JACS2005,127(12):4174_75)中找到，该文献针对与制备[0127]siRNA的RNA还可被修饰为包括一种或多种锁定核酸(LNA)。锁定核酸是具有经修性，并且减少了脱靶效应(ElmenJ等人，NucleicAcidsResearch2005,33(l):439_47；MookOR等人，MolCaneTher2007,6(3):833_43；GrunwellerA等人，NucleicAcidsResearch2003,31(12):3185_93)。Biorg.Med.Chem.Let.1993,3:2765_70)、硫代胆固醇(Oberhauser等人，Nucl.Acids十六烷基_rac_甘油_3_膦酸酯(Manoharan等人，TetrahedronLett.1995,36:3651_54；J.Pharmacol.Exp.Ther.1996胞的微管、微丝和/或中间丝来增加siRNA摄取到细胞中。药物可以是例如分类单元考达唑(nocodazole)、杰斯内酯(japlakinolide)、拉春库林A(latrunculinA)、毒伞素[0136]在一些实施方案中，与如本文所描述的siRNA附接的配体充当药代动力学(PK)调HSA结合的脂质或基于脂质的配体将较不可能被靶向到肾脏，并且因此较不可能从身体清成类似于天然肽的所定义三维结构的分子。肽和肽模拟物与siRNA的附接可能诸如通过增强细胞识别和吸收来影响RNAi的药代动力学分布。肽或肽模拟物部分的长度可以为约5个(GRKKRRQRRRPPQ(SEQIDNO:11)和果蝇触角足突变蛋白(RQIKIWFQNRRMKWK(SEQIDNO:诸如MPG，其源自HIV一1gp41的融合肽结构域和SV40大T抗原的NLS(Simeoni等人，个或多个单糖单元组成的碳水化合物，这些单糖单元具有至少6个碳原子(其可以是直链、胞内体裂解配体(endosomolyticligand)或细个原子之间、介于6个至18个原子之间、介于8个至18个原子之间或介于8个至16个原子之第一参考条件下(其可例如被选择以模拟或代表细胞内条件)的切割是在受试者的血液中或在第二参考条件下(其可例如被选择以模拟或代表在血液或血清中发现的条件)的切割拟细胞内条件的体外条件下)的切割是在血液或血清中(或在被选择以模拟细胞外条件的可切割连接基团的示例是二硫化物连接基团(_S_择以模拟细胞内条件的体外条件下)的降解是在血液中(或在被选择以模拟细胞外条件的使用标准酶动力学测定在被选择以模拟细胞内介质的条件下确定并且与被选择以模拟细通常限于在产生肽和蛋白质的氨基酸之间形成的肽键(即酰胺键)并且不包括整个酰胺官和T5C在每次不22NH或CH2O；和Q5C在每次不出现时独立地为亚烷基或经取代的aNH_,CO,CH＝N_O,或杂环基；[0188]合适的缀合GalNAc衍生物的二价和三价分支接头基团的示例包括但不限于上文以增强siRNA的活性、细胞分布或细胞摄取，并且进行这种缀合的程序可在科学文献中获烷基rac甘油或三乙基铵1,2二O十六烷基rac甘油3膦酸酯(Manoharan等人，或聚乙二醇链(Manoharan等人，Nucleosides&Nucleotides1995,14:969)或金刚烷乙酸(Manoharan等人，TetrahedronLett.1995,36:3651)、棕榈基部分(Mishra等人，[0191]典型的缀合方案涉及合成在序列的一个或多个位置处具有氨基接头的RNA。随后使用适当偶联试剂或激活试剂使氨基与所缀合的分子反应。缀合反应可在RNA仍与固相载[0193]在一些实施方案中，提供了包含如本文所描述的siRNA和药学上可接受的载剂或递送全身施用。剂包括但不限于结合剂(例如，预凝胶化的[0195]适于非肠胃外施用的不与核酸发生有害反应的药学上可接受的有机或无机赋形剂也可用于配制siRNA组合物。用于在非肠胃外递送中使用的合适的药学上可接受的载剂机赋形剂。[0198]在一些实施方案中，药物组合物包含在水中配制以用于皮下注跨膜结构域之间，由此抗原环区包括S结构域的氨基酸101_172(SalisseJ和SureauC,JournalofVirology2009,83:9321_8)。感染性的决定簇在于HBV包膜蛋白的抗原环区最重要的序列(JaoudeGA和SureauC,JournalofVirology200[0208]如本文所使用的，HBsAg的S结构域是指如SEQIDNO:13中所阐述的氨基酸序列[0209]MENITSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGTTVCLGQNSQSPTSNHSPTSCPPTCPGYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLIPGSSTTSTGPCRTCMTTAQGTSMYPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFGKFLWEWASARFSWLSLLVPFVQWFVGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYSILSPFLPLLPIFFNO:13的多肽和其天然或人工突变体。此外，当本文描述了HBsAg的S结构域的序列片段时S结构域的位置101_172的氨基酸残基”涵盖来自SEQIDNO:13的位置101_172的氨基酸残即对序列进行比对以获得最高同一性百分比时，位于序列相同位置的片段。M蛋白(M_实施方案中，组合疗法的抗HBV抗体或其抗原结合片段中和丁型肝炎病毒的感染。换句话说，抗体或其抗原结合片段可降低丁型肝炎病毒的病毒感染性(参见下文对丁型肝炎病毒或乙型肝炎e抗原(HBeAg)的水平并且/或者可评估HBcAg染色。在HBV中和测定的一个实施案中，中和50％的HBV所需的本公开的抗体的浓度为500ng/ml或更低，例如，450ng/ml、000到100,000倍)的仅由HBV包膜蛋白(HBsAg)构成的呈相对较小球体和可变长度丝的形式的空亚病毒粒子(SVP)。已显示亚病毒粒子可强烈增强HBV的细胞内病毒复制和基因表达体或其抗原结合片段与HBsAg基因型A)、GenBank登录号D23678(HBV_B1日本)、GenBank登录号AB117758(HBV_C1柬埔寨)、号AF160501(HBV_G美国)、GenBank登录号AY090454(HBV_H尼加拉瓜)、GenBank登录号AF241409(HBV_I越南)和GenBank登录号AB486012(HBV_J婆罗洲)。不同基因型的HBsAg的S结构域的抗原环区的氨基酸序列如表2所示(SE[0227]MENVTSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGTTVCLGQNSQSPTSNHSPTSCPPTCPGYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLIPGSSTTGTGPCRTCTTPAQGTSMYPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFGKFLWEWASARFSWLSLLVPFVQWFVGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYSTLSPFLPLLPIFF变的HBsAg突变体中的至少12种、至少15中或所有18种结合：HBsAgY100C/P120T、HBsAg[0229]在某些实施方案中，根据本公开的抗体或其抗原结合片段与包括HBsAg的抗原环中该至少两个氨基酸、至少三个氨基酸或至少四个氨基酸选自HBsAg的S结构域的氨基酸[0230]在特定实施方案中，根据本公开的抗体或其抗原结合片段与HBsAg抗原环区中的133或氨基酸位置120_130的一个或多个氨由选自HBsAg的S结构域的氨基酸位置115_133、氨基酸位置120_133或氨基酸位置120_130120_133或位置120_130之外—来形成本公[0232]在某些实施方案中，在HBsAg的抗原环区中本公开的抗体或其抗原结合片段所结中本公开的抗体或其抗原结合片段所结合的表位由位于选自HBsAg的S结构域的氨基酸位在一些实施方案中，在HBsAg的抗原环区中本公开的抗体或其抗原结合片段所结合的表位130的位置的四个或更多个氨基酸形成。因此，根据本公开的抗体或其抗原结合片段可与结合，这些氨基酸选自HBsAg的S结构域的氨基酸115_133、HBsAg的S结构域的氨基酸120_结合片段与包括HBsAg的抗原环区的至少两个氨基酸、至少三个氨基酸或至少四个氨基酸号系统进行编号(参见例如Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，美国卫生与人类服务部(U.S.Dept.HealthandHumanServices),1983和[0238]Fc部分的氨基酸位置也可根据IMGT编号系统(包括C结构域的唯一编号和外显子结合、蛋白G结合和补体结合。本领域中已描述了涉及这种功能的天然存在的Fc部分的部可与至少两个IgG1分子或一个IgM分子结合(WardES和GhetieV,Ther.Immunol.1995,322残基在C1q结合中的作用通过包括这些残基的短合成肽抑制补体介导的裂解的能力进通过免疫复合物的吞噬作用去除抗体包被的病原体以及通过抗体依赖性细胞介导的细胞上和肝脏中的Kupffer细胞中大量表达，并且LSEC是清除小免疫复合物的主要位点描述的。由此，可增强对免疫复合物的清除(ChuS等人，AmJRespirCrit,Am[0246]在B细胞上，FcγRIIB似乎起到抑制进一步免疫球蛋白产生和同种型切换为例如残基将IgG1和IgG4与FcγRI的结合减少103倍并消除人单核细胞对抗体致敏红细胞的应答[0250]人IgG1上Fc受体结合位点的作图、上述突变位点以及用于测量与FcγRI和Fcγ[0251]关于与FcγRII的结合，天然IgGFc的两个区似乎参与了FcγRII与IgG之间的相Fc上的相同位点结合，而FcRn和蛋白A与IgGFc上的不同位点结合，该位点似乎位于CH2_S239D/A330L/I332E；G236A/S239D/I332E；G236A/A330L/I332E；和G236A/S239D/A330L/半衰期延长突变包括T307A/E380A/N434[0254]在特定实施方案中，结合蛋白包括Fc部分，其包括取代突变：M428L/N434S和在某些实施方案中，抗体或抗原结合片段包括Fc部分，其包括取代突变：G236A/S239D/[0256]另选地或另外地，本公开的结合蛋白的Fc部分可包括本领域已知的蛋白A结合所[0260]例如，二聚体或单链Fc区的Fc部分中的至少两个可来自不同免疫球蛋白类别和/区或部分的其余部分属于不同亚类。例如，Fc多肽的Fc区或部分可包括源自第一亚类(例的氨基酸位置292_340和源自IgG1部分的CH2的其余部分(另选地，CH2的292_340可以源自如部分地源自IgG1、IgG2或IgG4分子(例如，上部和下部中间铰链序列)并且部分地源自[0263]在一些实施方案中，Fc部分或Fc区包括源自人免疫球蛋白序列的氨基酸序列(例、HC和/或LC序列。国际申请公开第WO[0275]应当理解，本公开的抗体或抗原结合片段可包括根据SEQIDNO:44_50和52的[0278]在某些实施方案中，本公开的抗体或抗原结合片段包括：(a)轻链可变结构域[0279]在特定实施方案中，本公开的抗体或抗原结合片段包括(a)轻链，其包干材料重构的材料的情况下。冻干组合物的pH可在冻干前被调整为介于5与8之间或介于抗HBV抗体的药物组合物(例如，AB01)包含剂量为100mg至300mg的抗体。在一些实施方案过抑制HBV聚合酶的作用来特异性地抑制HBVcccDNA的复制，并且不会显著抑制宿主(例如，人类)DNA的复制。这种抑制剂包括替诺福韦、富马酸替诺福韦酯(TDF)、替诺福韦酯HBVDNA水平；以及/或者是非肝硬化的，和/或丙氨酸转氨酶(ALT)水平≤正常值上限的HBV感染临床模型的动物、HBV_AAV小鼠模型(参见例如，Yang等人，CellandMol房发育症；睾丸萎缩；腹部侧支静脉(水母头)；ALT水平高于AST水平；γ_谷氨酰转肽酶(GGT)升高(正常范围通常被认为是约8U/L至65U/L)和碱性磷酸酶(ALP)水平(正常范围通成肝纤维化或相对于具有相同危险因素并且未接受如本文所描述的治疗的群体发展成严[0299]慢性乙型肝炎由以下标准中的一个标准定义：(1)相隔至少6个月的两次血清抗HBV核心抗原(IgM抗HBc)的免疫球蛋白M(IgM)抗体呈阴性和以下测试中的一个测试的结性HBV的受试者为HBsAg阳性，并且具有高病毒血症(≥104HBV_DNA拷贝数/毫升血液)或低是在复制状态期间)可能具有与急性肝炎相似的症状。患有慢性乙型肝炎疾病的受试者可者为HBeAg阴性。患有慢性HBV的受试者具有小于105的血清HBVDNA水平和转氨酶(例如，炎的受试者具有急性肝炎的症状和意识模糊或昏迷(由于肝脏未能解毒化学物质)和瘀伤疗的合理收益/风险比产生了一些期望的效果。在本公开的方法中使用的治疗剂(例如，[0313]在本文所描述的方法的一些实施方案中，siRNA是皮下施用的。在一些实施方案[0316]在本文所描述的方法的一些实施方案中，在同一天开始向受试者施用siRNA和抗[0317]在本文所描述的方法的一些实施方案中，在同一天开始向受试者施用siRNA和抗治愈，即在治疗持续例如24周、48周或更晚的时间之后具有无法检测的HBsAg(为HBsAg阴试者在治疗持续例如24周、48周或更晚的时间之后具有无法检测的HBsAg和/或实现了抗或更晚的时间之后具有正常的丙氨酸转氨酶(ALT[0329]3.根据实施方案1或2所述的方法，其中所述[0330]4.根据实施方案1或2所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有<2000IU/mL的[0331]5.根据实施方案1至4中任一项所述的方[0332]6.根据实施方案1至4中任一项所述的方[0333]7.根据实施方案1至6中任一项所述的方法，其中所述受试者先前尚未被施用[0335]9.根据实施方案1至8中任一项所述的方法，其中所述受试者先前尚未被施用抗[0336]10.根据实施方案1至9中任一项[0337]11.一种治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)[0344]14.根据实施方案11至13中任一项所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有>[0346]16.根据实施方案11至15中任一项所述的方[0347]17.根据实施方案11至16中任一项所述的[0348]18.根据实施方案11至17中任一项所[0349]19.根据实施方案11至18中任一项所述的[0350]20.根据实施方案1至19中任一项所[0351]21.根据实施方案11至20中任一项所述的方法，其中所述受试者在治疗前具有>[0352]22.根据前述实施方案中任一项所述的方法，[0354]24.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其[0377]33.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述抗HBV抗体是双特异性抗[0380]36.根据前述实施方案中任一项所述的方义链和反义链，其中所述正义链包括与SEQIDNO:1的核苷酸1579_1597相差不超过3个核[0382]38.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA包括正义链和反义[0384]40.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA的所述反义链包括5'_UGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNO:4)的核苷[0385]41.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA的所述反义链包括5'_UGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNO:4)的核苷[0386]42.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA的所述反义链包括5'_UGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNUGUGAAGCGAAGUGCACACUU_3'(SEQIDNO:4)的核苷酸[0388]44.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA的所述正义链包括5'_GUGUGCACUUCGCUUCACA_3'(SEQIDNGUGUGCACUUCGCUUCACA_3'(SEQIDNO:3)的核苷[0399]55.根据前述实施方案中任一项所述的方法，上所有核苷酸和所述siRNA的所述反义链的基本上所有核苷酸都是经修饰的核苷酸，并且醇核酸或包括5'磷酸酯模拟物的核苷酸。[0409]62.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA包括磷酸酯主链修[0410]63.根据前述实施方案中任一述正义链包括5'gsusguGfcAfCfUfucgcuucacaL963'(SEQIDNO:5)，所O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；[0419]67.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA包括正义链和反义甲基腺苷3'磷酸酯、2'O甲基胞苷3'磷酸酯、2'O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；受试者施用治疗有效量的siRNA；并且其中所述有效量的所述siRNA为约1mg/kg至约8mg/[0428]71.根据前述实施方案中任一项所述的[0434]77.根据前述实施方案中任一项所述的方法，[0436](a)所述抗HBV抗体包括：根据SEQIDNO:59的轻链氨基酸序列，和根据SEQIDNO:57的重链氨基酸序列；O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；[0445](a)所述抗HBV抗体包括：根据SEQIDNO:59的轻链氨基酸序列，和根据SEQIDNO:57的重链氨基酸序列；O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；O甲基鸟苷3'磷酸酯和2'O甲基尿苷3'磷酸酯；3'磷酸酯和2'氟尿苷3'磷酸酯；[0484]93.根据前述实施方案中任一项所述的方法[0488]97.根据实施方案93至97中任一项所述的[0489]98.根据实施方案93至97中任一项所述的方[0490]99.根据实施方案93至97中任一项所述的方法[0492]101.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述siRNA以200mg的剂量施药物要在根据实施方案1至128中任一项所述的方法的组合[0523]132.一种在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方[0525]所述受试者还被施用了靶向HBVmRNA的siRNA和核苷(酸)逆转录酶抑制剂剂(NRTI)在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法中使用；试者先前尚未被施用抗HIV抗体，并且/或者所述受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的[0527]134.一种在制造用于治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关[0529]所述受试者还被施用了靶向HBVmRNA的siRNA和核苷(酸)逆转录酶抑制剂[0530]135.一种在制造第一药物时使用的有≤所述正常值上限(ULN)的丙氨酸转氨酶(ALT)水平，所述受试者先前尚未被施用NRTI，所述受试者在治疗前的24周内尚未接受NRTI，所述受试者先前尚未被施用抗HIV抗体，并且/或者所述受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的si[0534]139.一种在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方[0535]所述受试者为HBeAg阴性或HBeAg阳性，所述受试者在治疗前具有>2000IU/mL的施用靶向HBVmRNA的siRNA，所述受试者先前未被施用干扰素一α,所述受试者在治疗前为逆转录酶抑制剂(NRTI)在治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关疾病的方法中使用；其中：所述受试者为HBeAg阴性或HBeAg阳性，所述受试者在治疗前具有>2000IU/mL的HBVDNA水平，所述受试者是非肝硬化的，所述受试者具有>所述正常值上限[0538]141.一种在制造用于治疗有需要的受试者的乙型肝炎病毒(HBV)感染或HBV相关[0539]所述受试者为HBeAg阴性或HBeAg阳性，所述受试者在治疗前具有>2000IU/mL的施用靶向HBVmRNA的siRNA，所述受试者先前未被施用干扰素一α,所述受试者在治疗前为接受NRTI，所述受试者先前尚未被施用抗HIV抗体，所述受试者先前尚未被施用靶向HBVmRNA的siRNA，所述受试者先前未被施用干扰素_α,所述受试者在治疗前为且/或者所述受试者在治疗前具有>10IU/mL的HBsA[0552]146.根据实施方案145所述的试剂盒，所述[0555]对用于治疗患有低病毒载量慢性HBV感染的HBeAg阴性参与者的组合疗法的临床[0556]在一项2期、多中心、开放标签研究临床研究中，对患有低载量慢性HBV感染的[0558]慢性HBV感染因显著的发病率和死亡率仍然是重要的全球公共卫生问题(Trepo慢性HBV感染是特征在于病毒复制和宿主免疫应答的脏炎症的水平将患者分为不同的疾病阶段(EuropeanAssociationfortheStudyoftheLiver,EASL2017ClinicalPracticeGuidelinesonthemanagementofAsian_PacificclinicalpracticeguidelinesonthemanagementofhepatitisB:a2015update,HepatolInt.2016年1月，10(1):1_98；TerraultNA等人，Updateonprevention,diagnosis,andtreatmentofchronichepatitisB:AASLD2018hepatitis[0560]慢性HBV感染是动态过程并且取决于病毒复制与宿主免疫应答之间的关系。患者到患有慢性活动性肝炎，这些慢性活动性肝炎可能发展为包括肝细胞癌(HCC)的严重的肝的肝硬化或HCC风险和很高的长期HBsAg清除率(EASL,2017，见上文；Invernizzi等人，用机制，包括强中和活性和由于Fc结构域工程化增强的免疫活性GAALIE)包括SEQIDNO:59的轻链氨基酸序列和SEQIDNO:57的重链氨基酸序阻断来恢复HBV特异性CD8+T细胞功能与T细胞分化有关(BengschB等人，RestorationofHBV_specificCD8+TcellfunctionbyPD_1blockadeininactivecarrie群体中恢复HBV特异性T细胞的潜力可能是可行的。AB01通过靶向HBsAg和抑制病毒进入肝降解之间的平衡调节。为了生产对HBV具有持续活性的产品，充分表征的LS修饰(M428L和N434S)(GaudinskiMR等人，SafetyandpharmacokineticsoftheFc_modifiedHIV_1humanmonoclonalantibodyVRC01LS:APhase1open_labelclinicaltrialinhealthyadults,PLoSMed.2018年1月24日，15(1):e1002493；KoSY等人，EnhancedneonatalFcreceptorfunctionimprovesprotectionagainstprimateSHIVinfection,Nature2014年10月30日，514(7524):642_5；ZalevskiJ等人，Enhanced157_9)被包括在AB01的Fc区中。LS修饰仅在内体区室的酸性pH下增加IgG1与FcRn的结合，从而增加IgG再循环回到循环中。包含LS突变的单克隆抗体先前已在人类中进行了研究在健康志愿者中在5mg/kg至40mg/kgIV和5mg/kgSC的剂量下被认为是安全并且耐受良好AB01的Fc区也被工程化为包括这样的修饰，即通过增强与活化受体FcγRIIa和FcγRIIIa型中，抗CD20抗体经由巨噬细胞和单核细胞上FcγRIIIa的参与来促进对肿瘤细胞的直接(GASDALIE突变)具有优异的治疗活性(DiLilloDJ等人，DifferentialFc_ReceptorEngagementDrivesanAnti_tumorVaccinalEffect,Cell2015年5月21日，161(5):1035_1045)。与抑制性FcγRIIb结合的平行减少具有进一步增强该疫苗效应(DiLillo等[0563]关于针对HBsAg的抗体在治疗患有慢性HBV感染的患者中效降低2log10IU/mL至3log10IU/mL，并且在患有慢性HBV感染的患者的1期研究中耐受性label,dose_escalation,single_center,phase1studyforGC1102,arecombinanthumanimmunoglobulinforchronichepatitisBpatients,AmericanAssociation大致20IU/mL至85,000IU/mL的不同HBsAg水平的27名患者施用作为两种人类抗HBsAgmAb利的安全性和耐受性，并且没有报道免疫复合疾病或肝毒性的迹象(GalunE等人，Clinicalevaluation(phaseI)ofacombinationoftwohumanmonoclonal慢性HBV患者的两项研究中没有报道不良事件(ReedWD等人，Infusionofhepatitis_BvaccineonHBsantigenseroclearanceforchronichepatitisBinfection,J[0564]来自肿瘤学环境的临床数据表明，被设计为增强ADCC/ADCP和抗原呈递的Fc工程single_agentmargetuximab,anFc_modifiedanti_HER2monoclonalantibody,inmetastaticHER2+breastcancerpatientswithprioranti_HER2therapy,DOI:10.1158/1538_7445.SABCS1的首次人体(FIH)1期研究中耐受性良好。常见毒性主要≤2级，包括没有心脏毒性的证据(BangYJ等人，First_in_humanphase1studyofmargetuximab(MGAH22),anFc_modifiedchimericmonoclonalantibody,inpatientswithHER2_positiveadvancedFc修饰的亲本mAb(曲妥珠单抗)观察到(PondéNF等人，Twentyyearsofanti_RiccioG等人，Trastuzumabandtarget_therapysideeffects:IsstillvalidtodifferentiateanthracyclineTypeIfromTypeIIcardiomyop[0566]队列1b将评估AB01对组合疗法的贡献及其在不存在任何其他研究药剂的情况下现HBsAg损失和HBVDNA<LLOQ的参与者将继续接受AB01和TDF直到第[0567]SIRNA01是与患有慢性HBV感染的患者的HBsAg大幅度降低相关的siRNA。SIRNA01具有包括SEQIDNO:5的核苷酸序列的正义链和包括SEQIDNO:6的核苷酸序列的反义链。现序列特异性RNA切割和降解的19个至21个碱基对的RNA双螺旋体。一个siRNA可具有多种缀合的SIRNA，其靶向所有HBV病毒RNA，从而抑制病毒粒子和亚病毒粒子的产生和分泌。SIRNA01对含HBsAg的非感染性亚病毒粒子的减少被认为是与目前可用的治疗的重要区HepatitisBInfection,Genes(Basel)2019年4月1日，10(4):260；ZoulimF等人，AntiviraltherapiesandprospectsforacureofchronichepatitisB,Cold入的HBsAg的过量分泌被认为有助于T和B细胞功能障碍，并损害宿主清除或控制病毒的能人，SafetyandAntiviralActiviInParticipantsWithChronicHepatitisBInfection:Week48Follow_UpResults,月23日至26日；YuenMF等人，PreliminaryResultsFromaPhase2StudyEvaluatingVIR_2218AloneandinCombinationWithPegylatedInterferonAlfa_2ain导致HBsAg的大幅持续下降。这得到慢性HBV感染的AAV_HBV小鼠模型支持，其中用AB01和