2026年病理标本处理技术指南考试试卷试题及答案

2026年病理标本处理技术指南考试试卷试题及答案一、单项选择题（每题仅一个正确答案）1.病理组织标本常规固定首选（）。A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.戊二醛D.冰乙酸答案：B解析：10%中性缓冲福尔马林（含4%甲醛）渗透力强、对组织收缩小，适用于常规HE、免疫组化及多数分子检测。2.固定液体积至少应为组织块体积的（）。A.3倍B.5倍C.10倍D.20倍答案：C解析：为保证固定液充分渗透，组织块与固定液体积比一般不少于1:10。3.下列标本中，应优先选用戊二醛固定的是（）。A.肝穿刺组织（光镜）B.肾穿刺组织（免疫荧光）C.电镜标本D.骨髓活检组织答案：C解析：戊二醛对超微结构保存好，常用于电镜；光镜常规用甲醛。4.骨组织脱钙后为保留抗原性，最佳脱钙液是（）。A.5%硝酸B.10%盐酸C.EDTA脱钙液D.10%醋酸答案：C解析：EDTA脱钙温和，对组织结构、免疫组化及核酸保存优于强酸，但速度较慢。5.组织脱水最后一步通常使用（）。A.70%乙醇B.95%乙醇C.无水乙醇D.二甲苯答案：C解析：梯度乙醇脱水后需经无水乙醇彻底去除水分，随后才能透明。6.透明剂的主要作用是（）。A.使组织固定B.置换脱水剂并利于浸蜡C.使组织软化D.增加组织着色答案：B解析：透明剂既能与乙醇混溶，又能与石蜡混溶，使组织透明并让石蜡进入。7.石蜡包埋时，蜡温通常控制在（）。A.45～50℃B.55～60℃C.65～70℃D.80℃以上答案：B解析：常用石蜡熔点在56～58℃，包埋温度略高于熔点，避免组织损伤。8.常规石蜡切片的标准厚度为（）。A.1～2μmB.3～5μmC.6～8μmD.10～15μm答案：B解析：3～5μm既能保证细胞结构清晰，又适合常规HE及多数特殊染色。9.HE染色中，细胞核被苏木素染成（）。A.红色B.蓝色C.绿色D.棕色答案：B解析：苏木素为碱性染料，与核酸结合呈蓝紫色。10.伊红染色的对象主要是（）。A.细胞核B.细胞质和细胞外胶原纤维C.脂肪滴D.黑色素答案：B解析：伊红为酸性染料，与胞质蛋白和胶原结合呈粉红色。11.组织固定不及时首先导致（）。A.组织硬化B.细胞自溶、结构模糊C.切片染色过深D.组织过度收缩答案：B解析：离体后若未及时固定，自溶酶破坏细胞结构，严重影响诊断。12.术中冰冻切片快速HE染色时，切片后通常使用（）固定数秒。A.10%甲醛B.95%乙醇C.丙酮D.二甲苯答案：B解析：95%乙醇固定快，对冰切HE染色形态保存好，且不产生水结晶。13.包埋时，组织块的切面应（）。A.朝上B.朝下并平贴包埋框底部C.垂直于包埋框底部D.任意放置答案：B解析：欲切面朝下贴在包埋框底部，切片时才能获得完整组织切面。14.HE染色中，苏木素染色后分化通常使用（）。A.1%盐酸乙醇B.饱和碳酸锂C.蒸馏水D.伊红液答案：A解析：分化液移除多余染料，使核染色清晰。15.标本接收核对时，下列哪项不属于必查内容（）。A.患者姓名及住院号B.送检组织部位及数量C.申请单签字医师资质D.固定液类型和体积答案：C解析：核对重点是患者身份、标本标识、申请信息和固定情况；医师资质不在本科室核对范围。16.对于完整大器官标本（如全肺、全胃），最优的固定方法是（）。A.整体直接泡入固定液B.沿病变对侧切开，并灌注固定C.先冷冻保存D.不加固定液送检答案：B解析：大标本必须切开或灌注，使固定液充分渗入内部，防止中心自溶。17.使用微波辅助固定组织的优点是（）。A.完全保留酶活性B.固定速度显著加快C.组织无收缩D.不需要控制温度答案：B解析：微波加热可加速固定剂渗透，但需严格控制温度和时间，避免组织过热损伤。18.组织脱水时，乙醇浓度梯度过大（如从70%直接到无水乙醇）会导致（）。A.组织膨胀B.组织明显收缩、变形C.组织变软D.蜡块不硬答案：B解析：骤然的渗透压改变使组织剧烈变形、收缩，影响切片和诊断。19.染色后封片的目的是（）。A.防止脱片B.使组织透明并长久保存C.增强苏木素着色D.去除多余染料答案：B解析：封片胶与组织折射率相近，使切片清晰并隔绝空气。20.下列哪一种固定液不适合用于后续分子病理DNA检测（）。A.10%中性缓冲福尔马林B.含汞固定液（如B5）C.4%多聚甲醛D.70%乙醇答案：B解析：含汞固定液严重交联并降解核酸，不能用于分子检测。二、多项选择题（每题至少两个正确答案）1.病理组织石蜡制片的基本流程包括（）。A.固定B.脱水C.透明D.浸蜡E.包埋、切片答案：ABCDE2.关于组织固定的叙述，正确的有（）。A.固定能防止组织自溶和腐败B.固定使蛋白质凝固、变性C.固定液浓度越高越好D.固定时间对免疫组化结果有影响E.组织固定后细胞形态保留较好答案：ABDE解析：固定液浓度过高会引起组织过度收缩，并非越高越好。3.骨组织脱钙可采用（）。A.硝酸溶液B.EDTA溶液C.微波辅助脱钙D.离子交换树脂脱钙E.超声波辅助脱钙答案：ABCDE4.切片时组织破碎的可能原因有（）。A.固定过度导致组织变脆B.脱钙不彻底C.蜡块温度过低D.刀片有缺口E.切片厚度过大答案：ABCD解析：切片过厚一般表现为卷曲或皱褶，不会直接导致破碎。5.影响HE染色质量的因素包括（）。A.组织固定的及时性B.切片厚度C.苏木素染液的新鲜程度D.分化及蓝化时间E.封片时树脂有无气泡答案：ABCDE6.病理标本处理过程中，对人体及环境的防护措施有（）。A.操作时戴丁腈手套B.甲醛等试剂在通风橱内使用C.废弃标本和废液按生物安全规范处理D.使用防锈防刺容器收集刀片E.接种乙肝疫苗答案：ABCDE7.全自动组织处理机的优点包括（）。A.处理程序标准化B.减少人为误差C.可同时批量处理大量标本D.自动记录处理步骤和时间E.完全免去人工检查答案：ABCD解析：即使自动化，仍需要人员定期检查和维护，不能完全无人监控。8.关于石蜡包埋操作，正确的说法有（）。A.镊子预热后再夹取组织，防止蜡粘镊子B.组织块应始终漂浮在蜡液表面C.包埋用蜡应无气泡、无杂质D.使用专用包埋模具或包埋框E.包埋后放冷台快速冷却答案：ACDE解析：组织块应浸没在蜡液中并轻压平整，不能漂浮。9.下列属于特殊染色的是（）。A.Masson三色染色B.网状纤维染色C.刚果红染色D.PAS染色E.免疫组化染色答案：ABCD解析：免疫组化属于免疫组织化学技术，不属于“特殊染色”范畴。10.为保证分子病理检测（如NGS）质量，组织处理中应做到（）。A.禁止使用含汞固定液B.使用中性缓冲福尔马林并控制固定时间C.避免强酸脱钙D.防止不同标本间交叉污染E.记录处理全过程答案：ABCDE三、填空题1.常规病理固定液最常用的是________，其有效成分是________，推荐固定时间________小时。答案：10%中性缓冲福尔马林；4%甲醛；6～24（或6～48）2.组织脱水时，乙醇浓度通常从________开始，经梯度递增至________。答案：70%（或低浓度乙醇）；无水乙醇3.常规石蜡切片厚度一般为________μm。答案：3～54.HE染色中，细胞核呈________色，细胞质、胶原纤维呈________色。答案：蓝（紫蓝）；红（粉红）5.骨组织制片前必须先进行________处理。答案：脱钙6.组织透明的目的之一是置换组织内的________，便于石蜡渗透。答案：脱水剂（乙醇）7.包埋后应将蜡块在________上冷却，使蜡充分凝固。答案：冷台（冰台/冷却板）8.苏木素染色后需进行________和________，使细胞核染成清晰蓝色。答案：分化；蓝化9.脱水不彻底时，透明阶段组织会呈现________色，石蜡难以浸入。答案：白（云雾状/浑浊）10.防脱片载玻片常涂布多聚赖氨酸或________。答案：APES（3-氨丙基三乙氧基硅烷）四、判断题（正确填A，错误填B）1.标本离体后应在1小时内开始固定，固定时间越长越有利于保存。（）答案：B解析：固定过久会使组织过度交联，阻碍抗体和核酸提取。2.取材组织块的厚度一般不超过0.5cm，以便固定液充分渗透。（）答案：A3.透明时间越长，组织越透明，越有利于切片。（）答案：B解析：透明过久组织变脆，切片易碎。4.脱水、透明、浸蜡均需按时间梯度逐步进行，不应随意跳跃。（）答案：A5.冷冻切片可以完全不进行固定，直接染色。（）答案：B解析：多数冷冻切片HE或特殊染色前需要固定，以保存形态。6.HE染色中，分化时间越长，细胞核染色越深。（）答案：B解析：分化会脱去苏木素，时间越长核色越浅。7.切片前将蜡块置于冷台上冷却，可以增加蜡块硬度，减少切片皱褶。（）答案：A8.包埋时镊子无需加热，直接夹取蜡块不会粘连。（）答案：B解析：镊子需预热，否则温度低使蜡粘在镊子上。9.微波固定组织时，应严格监测温度，防止液体沸腾和组织过热。（）答案：A10.病理标本处理的每一步均应记录操作人员、时间、试剂批号等信息，便于质量追溯。（）答案：A五、简答题1.简述石蜡制片的标准操作流程。答案：①标本离体后立即放入10%中性缓冲福尔马林固定；②取材，组织块厚度≤0.5cm、面积≤2cm×1.5cm；③流水冲洗或缓冲液浸泡；④梯度乙醇脱水（70%、80%、95%、无水乙醇）；⑤透明（二甲苯或环保透明剂）；⑥浸蜡（多缸熔融石蜡，温度56～60℃）；⑦石蜡包埋，修整蜡块；⑧切片（厚3～5μm）；⑨摊片、捞片、贴片，烤片；⑩脱蜡至水，HE染色，封片。2.组织固定不及时或不充分会产生哪些后果？答案：①细胞自溶、核固缩或溶解，组织形态破坏；②酸性产物积累，使核染色不清晰；③组织收缩、变形，取材和切片困难；④蛋白质降解，免疫组织化学及分子检测靶标丢失；⑤酶活性丧失，特殊染色结果不准确；⑥严重时无法明确病理诊断。3.如何判断骨组织脱钙是否达到终点？答案：①针刺法：用细针轻刺组织，能无阻力刺入时表示脱钙充分；②弯曲法：薄片组织可轻易弯曲，边缘不硬；③X线摄片法：X线下已无钙化影；④化学法：检测脱钙液中钙离子浓度，若连续两次无明显增加，提示脱钙完成；⑤实际制片时，若切片可完整切出且不损伤刀刃，也间接证明脱钙足够。4.简述防止切片与染色过程中脱片的方法。答案：①使用干净的载玻片，必要时涂布多聚赖氨酸或APES；②组织块脱水、透明充分，避免切片脆裂；③切片厚度适宜，一般3～5μm；④烤片温度不宜过高、时间不宜过长，通常60℃烤片30～60min；⑤抗原修复时避免高压冲击和过度沸腾；⑥染色各步骤操作轻柔，避免切片与液体剧烈冲击。5.使用全自动脱水机时，应注意哪些关键点？答案：①定期更换脱水剂、透明剂和石蜡，并作记录；②确保乙醇浓度梯度准确，避免交叉污染；③检查并设定正确的处理时间和温度；④定期清洁机器管路，防止堵塞；⑤每天检查蜡缸温度，监控异常报警；⑥标本筐内标本量不宜过满，保证液体充分接触；⑦建立日常维护和质控记录。六、论述题1.试述病理标本处理全程质量控制的重要性及关键环节。答案要点：（1）重要性：标本处理是病理诊断的基础，质量差的制片可直接导致误诊或漏诊；不规范的固定、脱水、包埋等操作影响HE、免疫组化和分子检测结果的可靠性；全程质控可及时发现和纠正误差，提高病理科整体水平。（2）关键环节：①标本采集与运送：离体后尽快固定，核对申请单和标本袋标识；②固定：使用合格固定液，把握固定时间，保证固定液量；③取材：选取代表性病变组织，记录大体所见，清洁工具防污染；④脱水、透明、浸蜡：按标准程序进行，定期更换试剂，记录温度和时间；⑤包埋、切片：组织方向正确，切片完整、无皱褶；⑥染色：严格控制苏木素、伊红浓度和分化、蓝化时间，设置对照；⑦封片：选用合格盖片和树脂，无气泡、透明。（3）保障措施：建立各项操作的SOP文件；对技术人员进行定期培训和考核；仪器设备每日校准、维护；试剂更换记录清楚，避免重复使用；参与室间质评，开展室内质量控制，跟踪不良制片并分析原因。2.结合FISH、NGS等分子病理技术的发展，论述对组织处理技术的新要求。答案要点：（1）固定要求：推荐使用10%中性缓冲福尔马林，固定时间控制在6～24小时，避免过短或过长；禁止使用含汞、含苦味酸、强酸等破坏核酸的固定液；固定后应及时脱水、包埋，减少核酸降解。（2）脱钙要求：避免使用强酸脱钙，推荐使用EDTA脱钙，以保留核酸和蛋白完整性；脱钙时间不宜过长。（3）包埋与切片要求：使用无