CN119410576A 一种用于修复疤痕的成纤细胞外泌体及其制备方法及应用 （北京圣美细胞生命科学工程研究院有限公司）

一种用于修复疤痕的成纤细胞外泌体及其本发明公开了一种用于修复疤痕的成纤细中进行适应培养24_30小时；S2在经过适应培养的完全培养基中进行培养至融合度80再采用上清液进行超速离心提取得到成纤细胞外泌体备的成纤外泌体还能通过调节TGF_β/Smad信号2S2在经过适应培养完成后，更换新培养基，采用含在无菌容器中，将1袋DMEM培养基粉剂添加到1L超纯水中,调节温度至60℃,保温以采用PBS重悬步骤e所得到的沉淀，得到重悬液，再次150000xg超速离心处理重悬液所述S3中对成纤细胞外泌体进行转染处理再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行所述重悬液中成纤细胞外泌体初品浓度为2.5x1010个/mL；所述均匀混合液中CD24siRNA浓度为550_600nm采用PBS重悬上述所得到的沉淀，得到重悬液，再次150000xg超速离心处理重悬液3的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的9.根据权利要求1_8任一所述的方法制备得到4一种用于修复疤痕的成纤细胞外泌体及其制备5[0032]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上[0035]0.02_0.06mol/L海藻糖、0.018mol/L的D_甘露醇、0.021mol/L的琥珀酸钠、[0042]本发明制备的成纤外泌体还能通过调节TGF_β/Smad[0043]在缩短皮肤创面愈合时间上，主要是通过成纤外泌体的促进血管内皮细胞的增速伤口愈合具有较为显著的促进作用。制备的成纤细胞外泌体中的活性成分可以抑制成纤维细胞的异常增殖和胶原纤维的过度67[0070]S3对成纤细胞外泌体初品进行转染处理，得到用于修复疤痕[0073]再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行电转处理；电转参数[0078]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的[0086]再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行电转处理；电转参数[0091]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上8的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的[0099]再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行电转处理；电转参数[0104]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的[0112]再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行电转处理；电转参数[0117]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的9[0125]再采用移液枪将上述得到的均匀混合液移入电转杯中进行电转处理；电转参数[0130]其中，超速离心为以120000×g超速离心步骤d所得到的滤液50min，然后弃去上的氯化钾、0.08mol/L的氯化镁、0.06mol/L的磷酸氢钠、以及质量分数为0.03％的4.214.154.084.174.264.655.085.136.053.323.253.263.585.333.724.115.289.27[0