畜牧兽医检测题库及答案

畜牧兽医检测题库及答案一、单项选择题（每题1分，共25题）1.采集动物血液分离血清时，最常使用的采血管是A.EDTA抗凝管B.肝素抗凝管C.枸橼酸钠抗凝管D.无抗凝剂真空采血管【答案】D2.口蹄疫疑似病例采集病料时，首选样品是A.粪便B.水疱皮和水疱液C.尿液D.毛发【答案】B3.荧光定量PCR中Ct值是指A.荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数B.扩增产物熔解温度C.反应循环总数D.模板初始浓度对数值【答案】A4.ELISA检测中最常用的标记酶是A.葡萄糖氧化酶B.辣根过氧化物酶C.脲酶D.过氧化氢酶【答案】B5.虎红平板凝集试验用于检测布鲁氏菌病，其反应类型属于A.间接凝集反应B.直接凝集反应C.沉淀反应D.补体结合反应【答案】B6.饱和盐水漂浮法检查线虫卵的主要原理是利用A.虫卵与饱和盐水比重差异B.虫卵染色C.虫卵运动D.抗原抗体反应【答案】A7.非洲猪瘟病毒核酸检测时，不适合作为首选的样品是A.EDTA抗凝血B.脾脏C.淋巴结D.尿液【答案】D8.琼脂扩散试验形成沉淀线的本质是A.抗原抗体在琼脂凝胶中特异性结合后形成的可见复合物B.细菌菌落堆积C.脂质条带D.核酸条带【答案】A9.高压蒸汽灭菌常用温度为A.100℃维持10minB.121℃维持20minC.160℃维持2hD.75℃维持30min【答案】B10.革兰染色步骤正确的是A.结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、复红复染B.碘液初染、结晶紫媒染、乙醇脱色、复红复染C.复红初染、碘液媒染、乙醇脱色、结晶紫复染D.乙醇初染、结晶紫媒染、复红脱色、碘液复染【答案】A11.某禽流感病毒抗原血凝效价为1:256，配制4个血凝单位抗原时，应将抗原稀释至A.1:32B.1:64C.1:128D.1:16【答案】B12.病毒分离培养常用的载体不包括A.鸡胚B.细胞系C.实验动物D.普通营养琼脂平板【答案】D13.牛结核病检疫常用方法是A.虎红平板凝集试验B.结核菌素皮内变态反应C.荧光抗体试验D.血凝抑制试验【答案】B14.PCR扩增中变性温度通常为A.72℃B.55℃C.94℃D.37℃【答案】C15.操作高致病性禽流感病毒至少应在哪级生物安全实验室进行A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4【答案】C16.鉴别猪瘟野毒与猪瘟兔化弱毒疫苗株常采用A.普通PCRB.特异性RT-PCR或荧光定量RT-PCRC.革兰染色D.生化试验【答案】B17.溶液稀释计算的基本依据是A.稀释前后溶质质量不变B.稀释前后溶剂体积不变C.稀释前后溶液密度不变D.稀释前后温度不变【答案】A18.平板菌落计数时，适宜计数的平板菌落数范围一般为A.1～10CFUB.30～300CFUC.500～1000CFUD.大于1000CFU【答案】B19.外周血白细胞计数常用的稀释液为A.生理盐水B.1%冰醋酸溶液或白细胞稀释液C.蒸馏水D.瑞氏染液【答案】B20.犬细小病毒抗原快速检测试纸条常用的原理是A.胶体金免疫层析B.琼脂扩散C.补体结合D.病毒中和试验【答案】A21.口蹄疫病毒属于A.小RNA病毒科口蹄疫病毒属B.正黏病毒科C.疱疹病毒科D.副黏病毒科【答案】A22.新城疫血凝抑制试验中使用的鸡红细胞浓度通常为A.10%B.5%C.1%D.0.1%【答案】C23.油镜观察细菌时，在载玻片与镜头之间常滴加A.水B.香柏油C.甘油D.乙醇【答案】B24.副结核病慢性腹泻牛只粪便中可检查到抗酸染色阳性的A.副结核分枝杆菌B.大肠杆菌C.沙门氏菌D.球虫【答案】A25.酶标仪测定ELISA结果时，TMB底物显色常用的测定波长为A.260nmB.450nmC.600nmD.700nm【答案】B二、多项选择题（每题2分，共15题，多选、少选、错选均不得分）1.下列属于血清学检测技术的有A.ELISAB.病毒分离C.血凝抑制试验D.琼脂扩散试验【答案】ACD2.影响PCR扩增效率的主要因素包括A.引物设计B.退火温度C.模板纯度D.镁离子浓度【答案】ABCD3.病毒核酸检测样品采集后正确的保存和运输方式是A.短期内4℃冷藏B.长期-70℃保存C.反复冻融D.使用含病毒保存液的采样管【答案】ABD4.下列属于细菌分离培养常用培养基的是A.血琼脂平板B.麦康凯琼脂C.SS琼脂D.三糖铁琼脂【答案】ABCD5.粪便寄生虫检查常用方法有A.直接涂片法B.饱和盐水漂浮法C.沉淀法D.贝尔曼法【答案】ABCD6.口蹄疫病料送检时应附带的信息包括A.动物种类和年龄B.采样日期和地点C.临床症状D.免疫背景【答案】ABCD7.下列关于ELISA间接法检测抗体的描述正确的有A.包被抗原B.加入待检血清C.加入酶标抗抗体D.底物显色【答案】ABCD8.实验室生物安全二级基本要求包括A.配备生物安全柜B.工作人员穿防护服C.实验室可随意进出D.废弃物经无害化处理【答案】ABD9.非洲猪瘟病毒常用的检测靶基因包括A.B646L（p72）基因B.E183L（p54）基因C.EP402R（CD2v）基因D.H5基因【答案】ABC10.结核病检疫中使用的结核菌素包括A.牛型结核菌素PPDB.禽型结核菌素PPDC.猪瘟疫苗D.布鲁氏菌抗原【答案】AB11.荧光定量PCR中常用的荧光化学方法有A.SYBRGreen染料法B.TaqMan探针法C.分子信标D.琼脂糖凝胶电泳【答案】ABC12.猪场采样进行病原检测时，适合采集的样品有A.口腔液B.全血C.淋巴结D.粪便拭子【答案】ABCD13.下列属于直接凝集试验的是A.虎红平板凝集试验B.试管凝集试验C.间接血凝试验D.乳胶凝集试验【答案】AB14.关于高压蒸汽灭菌，正确的有A.排出冷空气B.121℃维持20minC.可灭菌普通培养基D.可用于所有塑料制品灭菌【答案】ABC15.影响饱和盐水漂浮法检出率的因素有A.盐水饱和度B.粪便混匀程度C.静置时间D.虫卵比重【答案】ABCD三、填空题（每空1分，共20空）1.PCR反应中模板变性温度一般为______℃，延伸温度通常为______℃。【答案】94；722.ELISA间接法检测抗体时，包被的是______，加入待检血清后，再加入______。【答案】抗原；酶标抗抗体3.血凝试验中，能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数称为______；血凝抑制试验用于检测______。【答案】血凝效价；特异性抗体4.高压蒸汽灭菌时，在升压前必须排尽锅内______，否则会影响灭菌效果。【答案】冷空气5.布鲁氏菌病虎红平板凝集试验的判定时间为______分钟内，出现可见凝集判为______。【答案】4；阳性6.粪便虫卵计数常用______计数板，结果以每克粪便虫卵数______表示。【答案】McMaster；EPG7.血清学试验中，待检血清倍比稀释后，能与抗原出现阳性反应的最高稀释倍数称为该血清的______。【答案】效价8.荧光定量PCR中，Ct值越大，说明模板初始浓度越______。【答案】低9.油镜放大倍数通常为______倍，需在物镜与标本间加______。【答案】100；香柏油10.病毒分离培养常用的鸡胚接种途径有尿囊腔、______、绒毛尿囊膜和______等。【答案】羊膜腔；卵黄囊11.革兰阳性菌染色后呈______色，革兰阴性菌呈______色。【答案】紫；红12.样品送检时，病毒样品严禁反复______，以免病毒灭活。【答案】冻融13.平板菌落计数时，一般选取菌落数在______至______之间的平板进行计数。【答案】30；300四、简答题（每题6分，共5题）1.简述ELISA间接法检测血清抗体的基本原理。【答案】将已知抗原包被在固相载体上，加入待检血清，若血清中含有特异性抗体，则抗体与固相抗原结合；洗涤后加入酶标抗抗体，酶标抗抗体与已结合的抗体结合；再次洗涤后加入底物，酶催化底物显色，显色深浅与抗体含量成正比，用酶标仪测定吸光度并判定结果。2.简述荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒核酸的样品采集与结果判定要点。【答案】采集发病猪或死亡猪EDTA抗凝全血、脾脏、淋巴结、扁桃体等样品，组织样品加入含病毒保存液的采样管低温送检。提取核酸后进行荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒B646L基因。反应中设置阳性对照、阴性对照和提取空白对照，阳性对照Ct值符合试剂盒判定标准且扩增曲线典型，阴性对照和空白对照无Ct值。待检样品Ct值小于等于试剂盒判定阈值且扩增曲线典型判为阳性；Ct值较高或曲线不典型时需重复检测或换用其他方法验证。3.简述虎红平板凝集试验检测布鲁氏菌病的操作步骤及结果判定。【答案】取洁净玻璃板划分区域，在每一区域滴加30μL待检血清，再加入等量虎红平板抗原，用牙签或玻璃棒充分混匀，室温下4分钟内观察结果。出现明显凝集颗粒或凝集块判为阳性，无凝集判为阴性；出现微弱凝集时判为可疑，需用试管凝集试验或其他方法复检确认。4.简述饱和盐水漂浮法检查粪便中寄生虫虫卵的原理及注意事项。【答案】饱和盐水比重约为1.18～1.20，大于多数线虫卵和部分绦虫卵的比重，使虫卵在饱和盐水中上浮至液面。将粪便与饱和盐水充分混匀，静置后取表层液膜置于载玻片上镜检。注意事项：盐水需保持饱和；粪便应充分捣碎混匀；静置时间不宜过长以免虫卵变形；对吸虫卵等比重较大虫卵效果差，需结合沉淀法检查。5.简述动物疫病检测样品采集的生物安全要求。【答案】采样人员应穿戴防护服、手套、口罩、护目镜等个人防护装备；对疑似重大动物疫病，应在规定的生物安全防护条件下采样；使用一次性或经灭菌的采样器材，避免样品间交叉污染；样品容器应密封、标识清晰，按要求低温保存和运输；现场废弃物及污染物品须经高温高压或其他方式无害化处理；采样结束后对人员、器械和现场进行彻底清洁消毒。五、应用题（共4题）1.计算题：取某血清样品50μL，用稀释液做1:200稀释，需加稀释液多少微升？如将原血清先做1:10稀释，再取1:10稀释血清100μL，需加稀释液多少微升才能得到1:200稀释？写出计算过程。【答案】根据稀释公式=或直接按稀释倍数计算。第一问：样品50μL做1:200稀释，总体积应为50μL×第二问：1:10稀释血清再稀释至1:200，实际还需稀释20倍。取1:10稀释血清100μL，总体积应为100μL×2.计算题：荧光定量PCR标准曲线方程为Ct【答案】将Ct值代入标准曲线方程：26.5lX=该样品核酸拷贝数浓度约为4.11×3.分析题：某羊场进行粪便虫卵计数，取2g粪便，加入饱和盐水至60mL，充分混匀后取0.15mL充入McMaster计数板一个计数室，两个计数室共计数虫卵24个。已知每个计数室容积为0.15mL。计算该羊每克粪便虫卵数，并说明该方法的局限性。【答案】两个计数室总容积为0.15m60mL稀释液中虫卵总数=24每克粪便虫卵数EP局限性：饱和盐水漂浮法主要检出比重较轻的线虫卵，对吸虫卵、棘头虫卵等比重较大的虫卵检出率低；虫卵在稀释液中分布可能不均匀，需重复取样计数；粪便中脂质、气泡和杂质会干扰虫卵识别；静置时间过长可导致虫卵变形或下沉，影响结果准确性。4.综合题：某猪场突发猪只高热、皮肤发绀、部分死亡，怀疑非洲猪瘟疫情。请制定现场样品采集与实验室确诊方案，并说明结果判定和处置措施。【答案】样品采集：无菌采集发病猪和死亡猪的脾脏、淋巴结、扁桃体，EDTA抗凝全血，组织样品置含病毒保存液的采样管中；同时采集同群健康猪口腔液或血清作为辅助样品。样品采集后密封标识，24小时内低温冷藏送检，不能及时检测时于-70℃保存。实验室检测：