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文档简介
河北省地方标准甘薯脱毒种苗培育及生产规程2000-04-29发布2000-05-01实施3.4网室隔离以40目以上尼龙网建成的带有1.5m进深缓冲间的网棚。河北省质量技术监督局2000-04-29批准2000-05-01实施用75%酒精浸搅90s,取出后,再用0.1%升汞(HgCl₂)灭菌7min,随即离茎尖当试管苗长到4-5片展开叶时,将其移至38℃±1℃的条件下热处理附录A(标准的附录)。线,以避免出现愈伤组织及由其形成的不定芽,即每次继代均切取带1-2温度不低于15℃,白天不高于28℃,空气相对湿度不低于75%。同时注意5.7品种及其生产性能鉴定8.1.1种苗画地的选择按GB7413-87中的4.1执行。申报单位(农户)繁殖地点种薯级别隔离条件主管机构审批意见8.2.2原原种生产单位所用的种苗必须由省级指定的甘薯脱毒种苗繁育8.2.3原种生产单位所用种苗必须是原原种种苗,其生产程序由所在地送检时间标本编号种薯级别种薯面积注:核心原种按系号,原原种按网棚号,原种按田块地号。申报表1式2份,1份交送检测部门、1份留申报单位(农户)备查。9.6“不同级次种苗的检测标准”,见表3。级次重复次数判断依据标准核心原种指示植物各脱毒试管单系并编号5株/单系2嫁接后2周物叶片有明状0原原种硝酸纤维膜一酶联免疫吸附以网室为单位均匀取样5株为1组2以经指示植物检测确认为阴性对照指示植物按该组单株5段茎段(1芽/段)2同核心原种0如有显症应允许带毒株率的原种依隔离区自10株为1组100组1000株/100亩2同原原种经前步检测该组单株分别取样阳性组:10株/组2(含5%)送检日期检测报告单编号检测结果血清学检测指示植物检测符合种苗级别(盖章)(签字)Na₂SO₃0.2gA1.1.3抗体缓冲液(以100ml计):A1.3.4将膜转到1张干燥的滤纸上,干燥15min-30min。A1.4.1加30ml封闭液(TBS+2%脱脂奶粉+2%TritonX-100或A1.4.3弃去第一抗体溶液,在30mlT-TBS中,通过恒速振荡洗去未被同时用30ml抗体缓冲液(TBS+2%脱脂奶粉)稀释0.1ml微量离心管A1.4.6弃去最后1次的洗涤液,加入显色反应溶液。室温反应5min-30min。阳性反应表现出不同程度的紫色。如果在这段时间内没有可观察A1.4.7弃去显色反应溶液终止反应,将膜在A1.4.8将膜置于滤纸上干燥,保存时用2张A2.1材料准备中,每1株系外移7株-8株,成活株数保证达6株以上。A2.1.2外移的试管苗生长1个月左右,具5片-6片叶时盆播指示植物对照各需生长健壮的巴西牵牛5株。
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