细胞实验高频试题及标准解答

细胞实验高频试题及标准解答考试时间：______分钟总分：______分姓名：______一、单项选择题1.在细胞培养中，胎牛血清的主要作用不包括A.提供细胞生长所需的激素B.提供结合蛋白C.提供生长因子D.提供无机盐离子2.使用血球计数板进行细胞计数时，为了保证计数池内的细胞悬液体积固定（20μL），正确的操作步骤是A.直接将细胞悬液滴入计数池B.先盖上盖玻片，再将细胞悬液滴入计数池边缘，利用毛细现象充满计数池C.先盖上盖玻片，再将细胞悬液滴入计数池，静置2-3分钟D.先盖上盖玻片，再将细胞悬液滴入计数池，静置2-3分钟，静置后需轻轻吹打混匀3.WesternBlot实验中，使用PVDF膜而非硝酸纤维素膜（NC膜）的主要原因是A.PVDF膜不需要经过甲醇活化即可吸附蛋白B.PVDF膜只适合用于湿法转移C.PVDF膜具有疏水性，需用甲醇活化后才能吸附蛋白，且适合高疏水性蛋白的转移D.PVDF膜比NC膜便宜4.常规PCR扩增反应体系中，用于催化DNA链延伸的酶是A.TaqDNA聚合酶B.PfuDNA聚合酶C.高保真DNA聚合酶D.逆转录酶5.PI（碘化丙啶）染色通常用于检测细胞的A.细胞膜通透性B.细胞核DNA含量C.细胞骨架D.蛋白质表达量6.在细胞培养箱中，CO2的主要作用是A.提供碳源B.调节培养液pH值，维持碳酸氢盐缓冲系统C.抑制细菌生长D.提供氧气二、多项选择题7.细胞培养基中通常包含的成分有A.氨基酸B.维生素C.无机盐D.葡萄糖E.胎牛血清F.抗生素8.WesternBlot实验的主要流程包括A.蛋白质提取与定量B.SDS电泳C.半干法或湿法转膜D.封闭E.一抗/二抗孵育与洗涤F.显色或化学发光检测9.使用血球计数板计数时，关于压线细胞的计数规则，正确的有A.计数室四个角的大方格内的细胞，凡是压在格线上的细胞，只计上方的和左侧的B.计数室四个角的大方格内的细胞，凡是压在格线上的细胞，只计下方的和右侧的C.计数室四个角的大方格内的细胞，凡是压在格线上的细胞，一律不计D.计数室四个角的大方格内的细胞，凡是压在格线上的细胞，上、下、左、右格线上的细胞均需计入10.根据生物安全实验室的分级，涉及高致病性人畜共患病病原体的实验通常属于A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-411.细胞冻存常用的保护剂有A.DMSO（二甲基亚砜）B.甘油C.蔗糖D.氯化钠12.在免疫荧光实验中，洗涤步骤的主要目的是A.去除未结合的特异性抗体B.去除非特异性结合的抗体C.提高背景噪音D.加快反应速度13.下列关于细胞凋亡与细胞坏死的描述，正确的有A.细胞凋亡是细胞主动的、程序性的死亡过程B.细胞坏死是细胞被暴力的、病理性的损伤导致的死亡过程C.细胞凋亡会有核染色质固缩D.细胞坏死会有细胞膜破裂14.细胞培养过程中，需要进行无菌操作的关键环节包括A.实验室环境的清洁与消毒B.使用无菌的培养基和生理盐水C.使用无菌的移液器和枪头D.打开培养瓶盖子时，火焰灼烧瓶口15.PCR反应体系中，包含的组分通常有A.模板DNAB.引物C.dNTPsD.Mg2+E.TaqDNA聚合酶F.电泳缓冲液试卷答案一、单项选择题1.答案：D解析：胎牛血清是细胞培养基的重要添加剂，主要提供激素、生长因子、结合蛋白、贴附因子、抗蛋白酶、催化酶等。而无机盐离子（如Na⁺,K⁺,Ca²⁺,Mg²⁺等）通常由基础培养基（如DMEM,RPMI等）提供，而非直接来源于血清。2.答案：C解析：使用血球计数板计数时，必须先盖上盖玻片，再将细胞悬液滴入计数池边缘，利用毛细现象充满计数池，此时细胞悬液的体积被固定为20μL。滴入后静置2-3分钟，待细胞沉降到计数板上后再进行计数。静置后不需要吹打混匀，否则会重新悬浮细胞，导致计数结果偏低。3.答案：C解析：PVDF膜具有疏水性，使用前必须用甲醇活化以使其变为亲水性并吸附蛋白。相比NC膜，PVDF膜具有更高的结合力（特别是对疏水蛋白）、机械强度高且干湿法均可使用。4.答案：A解析：TaqDNA聚合酶是耐高温DNA聚合酶，常用于常规的PCR扩增反应。PfuDNA聚合酶具有3'→5'外切酶活性，具有高保真性。逆转录酶的作用是将RNA逆转录为cDNA。5.答案：A解析：PI（碘化丙啶）是一种荧光染料，能够插入DNA双螺旋结构中发出荧光。PI通常用于检测细胞膜完整性，只有膜通透性受损的死细胞才能摄取PI并进行染色。6.答案：B解析：培养箱中的CO₂主要用于调节培养液的pH值。培养基中的碳酸氢钠（NaHCO₃）与CO₂反应形成碳酸氢盐缓冲系统，维持pH在7.2-7.4的生理范围内。二、多项选择题7.答案：ABCDEF解析：细胞培养基通常包含以下成分：氨基酸（蛋白质合成原料）、维生素（辅酶成分）、无机盐（维持渗透压和酶活性）、葡萄糖（碳源和能量来源）、胎牛血清（提供生长因子、贴附因子等）以及抗生素（防止细菌污染，可选）。8.答案：ABCDEF解析：WesternBlot实验的标准流程包括：蛋白质提取与定量、SDS凝胶电泳、转膜（半干法或湿法）、封闭（减少非特异性结合）、一抗/二抗孵育与洗涤、以及显色或化学发光检测。9.答案：A解析：国际通用的血球计数板计数规则是：凡是压在格线上的细胞，只计上方和左侧的（即计上不计下，计左不计右），以避免重复计数或遗漏。10.答案：CD解析：BSL-3适用于处理高致病性人畜共患病病原体（如结核分枝杆菌、SARS病毒等）。BSL-4则适用于处理极其危险、目前无疫苗的病原体（如埃博拉病毒），需要最高级别的生物安全防护设施。11.答案：AB解析：细胞冻存常用的保护剂主要是DMSO（二甲基亚砜）和甘油。它们通过降低冰点、减少冰晶形成来保护细胞膜和细胞器。蔗糖、葡萄糖和氯化钠通常用于渗透平衡或脱水保存，而非主要的冷冻保护剂。12.答案：AB解析：免疫荧光实验中的洗涤步骤主要目的是去除未结合的特异性抗体以及减少非特异性结合的抗体，从而降低背景噪音，提高信噪比。增加背景噪音或加快反应速度不是洗涤的目的。13.答案：ABCD解析：细胞凋亡是细胞主动的、程序性的死亡过程，表现为染色质固缩、DNA片段化、细胞膜起泡（形成凋亡小体）。细胞坏死是细胞被暴力的、病理性的损伤导致的死亡过程，表现为细胞肿胀、细胞膜破裂、内容物外泄。两者在形态和机制上有明显区别。14.答案：ABCD解析：细胞培养的无菌操作原则包括：保持实验室环境清洁、使用无菌的培养基和