ISO 13629-12025 纺织及印刷业纺织品抗真菌活性的测定第1部分发光法标准立项发展报告

纺织品抗真菌活性的测定第1部分：发光法标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:Textiles—DeterminationofAntifungalActivityofTextileProducts—Part1:LuminescenceMethod摘要随着功能性纺织品市场的快速扩张，具有抗真菌功能的纺织品在医疗、保健、户外运动及日常穿着等领域的应用日益广泛，其抗菌性能的准确评价已成为行业关注的焦点。真菌作为引发纺织品劣化及人体皮肤感染的重要微生物类型，对其防护效果的定量检测方法亟需规范化、国际化。在此背景下，国际标准化组织（ISO）于2025年5月正式发布ISO13629-1:2025《纺织品抗真菌活性的测定第1部分：发光法》。本报告系统梳理了该标准的立项背景、编制过程、核心技术内容及其行业意义。该标准确立了基于发光法检测纺织品抗真菌活性的技术框架，规定了试验原理、仪器设备、试剂材料、试验步骤及结果计算等关键技术要素，填补了纺织品抗真菌活性定量检测领域的国际标准空白，为全球纺织行业提供了统一、高效、可比的抗真菌性能评价依据。本报告还对该标准的发布机构、主要起草单位及标准实施推广前景进行了分析和展望，旨在为纺织检测机构、生产企业及科研单位理解和应用该标准提供系统参考。关键词：纺织品；抗真菌活性；发光法；国际标准；ISO13629；抗菌功能性纺织品；检测方法标准化Keywords:Textiles;AntifungalActivity;LuminescenceMethod;InternationalStandard;ISO13629;AntimicrobialFunctionalTextiles;TestingMethodStandardization一、引言1.1立项背景纺织品在日常生活和工业应用中不可避免地接触人体与环境中的各类微生物，其中真菌类微生物（如须癣毛癣菌、白色念珠菌等）不仅可导致纺织品自身霉变、褪色和力学性能劣化，更可能引发脚癣、体癣等人体皮肤感染疾病，对免疫力低下人群构成健康威胁。随着消费者健康意识的提升，具有抗真菌功能的功能性纺织品——包括抗菌袜、医用敷料、运动服装、军用纺织品等——已形成规模可观的全球市场。然而，长期以来，纺织品抗真菌活性的检测方法存在明显短板：不同国家和地区采用不同的试验菌种、培养条件和评价指标，导致检测结果缺乏可比性；部分传统方法（如琼脂平皿法）操作周期长、结果判定主观性强、定量能力不足，难以适应现代纺织品研发和质量控制的需求。尽管ISO20743等标准已对纺织品抗菌活性的测定作出规定，但其主要针对细菌类微生物，抗真菌活性的定量检测方法在此前一直缺乏统一的国际标准。1.2标准立项必要性面对上述行业痛点，制定一项科学、高效、可定量检测纺织品抗真菌活性的国际标准，具有以下重要意义：第一，填补标准空白。现有国际标准体系中，纺织品抗菌性能检测多聚焦于细菌，针对真菌的定量检测方法标准尚属空白，无法全面覆盖功能性纺织品的微生物防护评价需求。第二，统一评价基准。不同国家间检测方法不统一带来的技术壁垒，制约了功能性纺织品的国际贸易流通。制定国际标准有助于消除贸易障碍，促进全球市场的公平竞争。第三，推动技术创新。发光法作为一种快速、灵敏的生物检测技术，在微生物活性评价领域具有独特优势。将其引入纺织品检测标准化，将引导行业向更加高效、精准的检测技术方向演进。第四，保障消费者健康。规范化检测标准有助于筛选真正具有抗真菌功能的产品，防止夸大宣传和劣质产品流入市场，从而更好地保护消费者权益。二、标准基本信息|项目|内容||------|------||标准编号|ISO13629-1:2025||标准名称|纺织品抗真菌活性的测定第1部分：发光法||英文名称|Textiles—Determinationofantifungalactivityoftextileproducts—Part1:Luminescencemethod||标准状态|现行（Published）||发布机构|国际标准化组织（ISO）||技术委员会|ISO/TC38（纺织品技术委员会）||分类号|纺织产品综合（ICS59.080.01）||发布日期|2025年5月23日||发布年份|2025年||国别|国际组织||语言|英语||标准定价|1092.0元|该标准的发布标志着纺织品抗真菌活性检测正式迈入定量化、标准化的国际新阶段。三、标准编制原则与依据3.1编制原则ISO13629-1:2025的编制遵循了国际标准化活动的通用原则：一致性原则：在术语定义、试验条件、结果表述等方面与已发布的ISO13629系列标准框架保持一致，确保标准体系的协调统一。科学性原则：所有技术内容和试验参数的确定均以充分的实验室验证数据为基础，确保方法的科学性、准确性和可重复性。适用性原则：充分考虑不同实验室的设备条件和操作水平，在保证精度的前提下力求方法简便可行，利于在全球范围内推广应用。安全性原则：对试验涉及的真菌菌株操作、废弃物的处理等作出明确规定，确保试验过程满足生物安全要求。3.2编制依据本标准的制定主要依据以下文件和技术资料：-ISO13629系列标准的总体框架和编写规则-ISO20743《纺织品抗菌成品抗菌活性的测定》中确立的抗菌检测基本原则-ISO105-C06等纺织品前处理及试验条件控制相关标准-国际实验室间比对试验（RoundRobinTest）的验证数据-发光检测技术在微生物学领域的最新研究成果四、标准主要内容4.1范围界定ISO13629-1:2025适用于各类纺织产品（包括纤维、纱线、织物及成品）抗真菌活性的定量检测。标准规定的试验方法通过发光信号的变化量来反映纺织样品表面真菌的代谢活性，从而评价其抗真菌效果。该部分标准作为ISO13629系列的第1部分，与后续其他检测方法部分共同构成完整的纺织品抗真菌活性检测标准体系。4.2规范性引用文件标准中引用的规范性文件主要包括微生物学实验通用规范、纺织品试验环境调湿和试验条件标准，以及发光检测相关的仪器校准规范等，确保试验操作有据可依。4.3术语和定义标准对以下关键术语进行了明确定义：抗真菌活性（Antifungalactivity）：纺织产品抑制测试真菌菌株生长或繁殖的能力。该定义涵盖杀菌和抑菌两种作用机制。发光法（Luminescencemethod）：基于真菌细胞活性与发光信号的相关性，通过检测发光强度变化来定量评价纺织品抗真菌效果的方法。阴性对照（Negativecontrol）：不含抗真菌成分的对照织物，用于验证试验体系和真菌活力的有效性。阳性对照（Positivecontrol）：已知具有明确抗真菌活性的标准织物或经标准抗菌剂处理的试样，用于方法质控。4.4试验原理发光法的核心原理基于细胞内ATP（三磷酸腺苷）与荧光素酶-荧光素反应体系的生物发光效应。活细胞内的ATP水平与细胞活性密切相关，当纺织样品具有抗真菌活性时，样品表面真菌的生长受到抑制，活菌数量减少或代谢活性降低，导致细胞内ATP含量下降。通过添加细胞裂解液释放ATP，在荧光素酶和荧光素存在的条件下，ATP驱动荧光素氧化并发出波长为约560nm的光信号。发光强度与ATP浓度成正比，从而间接反映真菌的活性状态。测量并比较样品与对照的发光强度值，即可定量计算纺织品的抗真菌活性率。该方法的优势在于：检测灵敏度高（可检测10⁻¹⁵mol水平的ATP）；操作快速（全程可在数小时内完成）；结果客观量化（以发光强度数值直接表征）；重复性好（避免了传统目测法的主观误差）。4.5试剂与材料标准详细规定了试验所需的各种试剂和材料，主要包括：-测试菌株：标准中规定了适用于纺织品抗真菌检测的标准菌株，包括须癣毛癣菌（*Trichophytonmentagrophytes*，ATCC9533）、白色念珠菌（*Candidaalbicans*，ATCC10231）等。标准同时规定，经双方约定也可使用其他菌株。-发光检测试剂盒：含荧光素酶、荧光素、细胞裂解液、ATP标准品等组分-培养基：按菌株要求配制的液体和固体培养基-试剂级水：符合ISO3696三级水要求-中和剂及洗涤液：用于终止抗真菌作用并回收真菌细胞4.6仪器设备标准规定的主要仪器设备包括：-发光检测仪（Luminometer）：能够检测并记录相对发光单位（RLU）的专用设备，配备温控功能-恒温培养箱：控温精度±1℃，用于真菌培养-无菌操作台：生物安全柜（二级）-离心机：可用于50mL离心管-涡旋混合器、精密天平、pH计等常规实验设备-高压灭菌器：用于培养基和实验废弃物的灭菌处理4.7试验步骤标准规定的试验流程分为如下几个主要阶段：（1）试样准备：将纺织样品裁剪为规定尺寸（通常为直径约30mm的圆片或等面积方块），每种样品设置三个平行样。对照样品和不含抗菌成分的标准空白织物同步准备。（2）菌液制备：将标准菌株在适宜培养基上活化培养，制备浓度约为1×10⁵～1×10⁶CFU/mL的孢子（或细胞）悬浮液，精确测定接种浓度。（3）接种与培养：将定量菌液均匀接种于试样表面，在温度28℃±2℃（丝状真菌）或37℃±1℃（酵母菌）、相对湿度不低于90%的条件下培养规定时间（通常为24～72小时，根据菌株和产品需求确定）。（4）真菌回收：培养结束后，使用含中和剂的洗涤液将试样上的真菌细胞洗脱回收，充分振荡使细胞分散均匀。（5）ATP提取与发光检测：取回收液加入细胞裂解液释放ATP，随后与荧光素酶-荧光素反应试剂混合，立即置于发光检测仪中测定发光强度（RLU）。（6）结果计算：根据标准公式计算抗真菌活性值。常用计算公式为：\[\text{抗真菌活性率（%）}=\frac{\text{RLU}_{\text{对照}}-\text{RLU}_{\text{试样}}}{\text{RLU}_{\text{对照}}}\times100\%\]其中，RLU对照为阴性对照样品的发光值，RLU试样为待测纺织样品的发光值。同时，应使用ATP标准品建立标准曲线，将RLU值转换为ATP浓度（mol/mL），以更精确地反映真菌活性。4.8结果表示与试验报告标准对抗真菌活性的结果表示作出了规范。根据抗真菌活性率的大小，标准建议采用以下分级评价方式：抗真菌活性率不低于99%为强抗真菌；90%～99%为明显抗真菌；50%～90%为有一定抗真菌效果；小于50%视为无明显抗真菌效果。报告应注明具体的培养时间、接种浓度、菌株信息以及所有试验条件和偏差情况。五、标准特点与技术优势相比传统的纺织品抗真菌检测方法，ISO13629-1:2025确立的发光法具有以下显著技术优势：定量精确：传统琼脂扩散法等只能定性或半定量评价抑菌圈大小，而发光法通过ATP生物发光检测可精确定量真菌活性变化，给出明确的百分比数值。快速高效：传统真菌培养检测周期通常需要5～14天，而发光法可在培养后数小时内完成全部检测流程，大大缩短了检测周期，适应企业研发和质量控制的快速需求。灵敏度高：生物发光法可检测极低浓度的ATP，灵敏度远超浊度法等传统定量方法，尤其适合抗真菌活性较强、表面残存活菌较少的样品检测。客观性强：检测结果以仪器读数的数字化形式呈现，消除了目测法的主观判断差异，不同实验室间结果的重复性和可比性大幅提升。应用范围广：该方法和不同纺织基质（天然纤维、合成纤维、非织造布等）以及不同真菌菌株的兼容性良好，具有较强的通用性。六、主要起草单位介绍本标准的制定工作主要由ISO/TC38（纺织品技术委员会）下设的WG23工作组负责推进。在标准编制过程中，日本纺织检查协会和日本纤维产业技术协会发挥了核心作用。日本纺织检查协会（TextileInspectionAssociationofJapan，简称TIAJ）作为该标准起草工作的主要承担单位之一，在标准制定中发挥了技术引领作用。TIAJ成立于1948年，是日本经济产业省认可的纺织品检验机构，长期致力于纺织品品质评价技术的研究与标准化工作。在抗微生物纺织品检测领域，TIAJ拥有超过二十年的技术积累，建立了完善的抗菌、防霉、防螨等功能性评价体系。该协会设有专业的微生物检测实验室，具备BSL-2级生物安全操作能力，在纺织品抗菌性能检测方法的开发与验证方面积累了丰富的实验数据。TIAJ的研究团队在发光法应用于纺织品抗菌检测领域开展了系统的基础研究工作，其技术方案成为ISO13629-1制定的重要技术基础。此外，来自中国、德国、韩国等国家的标准化机构和纺织科研院所也积极参与了该标准的起草和审议工作。各方通过多轮工作组会议、实验室间比对试验和意见征集，共同推动了该标准从工作草案（WD）到最终国际标准草案（FDIS）的完善过程。七、标准实施意义与展望7.1实施意义ISO13629-1:2025的发布和实施对全球纺织行业具有深远影响。对于检测机构而言，该标准提供了规范、统一的检测依据，有助于提高检测结果的权威性和互认度。对于生产企业而言，标准明确了抗真菌纺织品的评价指标和检测方法，为企业产品研发、质量控制及宣称验证提供了可靠工具，有利于规范市场竞争秩序，打击虚假抗菌宣传。对于国际贸易而言，该标准有望成为各国互认的统一评价基准，降低因方法差异造成的技术性贸易壁垒。对于终端消费者而言，标准保障了市售功能性纺织品质量的可信度，有助于消费者准确识别真正具有抗真菌功能的产品。7.2未来展望随着生物技术和检测科学的持续进步，纺织品抗真菌活性检测技术将进一步向更快速、更便捷、更环保的方向发展。未来，ISO13629系列可能进一步扩展，涵盖更多检测原理的方法，如基于代谢组分分析、分子生物学技术（qPCR）等的检测方法，以适应不同场景和应用需求