2026年间充质干细胞管理师中试题(附答案)

2026年间充质干细胞管理师中试题(附答案)一、单项选择题（共15题，每题1分，共15分）1.间充质干细胞（MSC）最典型的生物学特性是？A.强免疫原性B.贴壁生长且具有多向分化潜能C.表达CD34和CD45表面标志物D.仅能从骨髓中分离获取2.以下哪项是MSC质量控制中必检的微生物指标？A.金黄色葡萄球菌B.支原体C.流感病毒D.白色念珠菌3.MSC冻存时常用的保护剂是？A.二甲基亚砜（DMSO）B.甘油C.生理盐水D.胎牛血清4.原代MSC分离时，组织块贴壁法与酶消化法的主要区别在于？A.前者需使用胶原酶，后者不需要B.前者更易保持细胞活性，后者分离效率更高C.前者适用于脂肪组织，后者仅适用于脐带D.前者需严格控制酶解时间，后者无此要求5.根据《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》，MSC活率检测应不低于？A.80%B.85%C.90%D.95%6.以下哪项不是MSC免疫表型的阳性标志物？A.CD73B.CD90C.CD105D.CD457.MSC培养过程中，无血清培养基的主要优势是？A.降低异源蛋白污染风险B.提高细胞增殖速度C.减少培养基成本D.简化培养操作流程8.支原体污染对MSC的主要影响是？A.导致细胞快速死亡B.干扰细胞代谢和功能检测结果C.增强细胞分化能力D.提高细胞冻存存活率9.MSC制剂运输时，若采用冷藏运输，温度应控制在？A.-20℃～-80℃B.2℃～8℃C.15℃～25℃D.35℃～37℃10.以下哪项是MSC伦理审查的核心要求？A.确保细胞来源的合法性B.最大化研究机构的经济收益C.简化受试者知情同意流程D.允许未经验证的临床应用11.MSC传代培养时，通常建议不超过的代数是？A.3代B.5代C.8代D.10代12.检测MSC增殖能力常用的方法是？A.台盼蓝染色法B.CCK-8法C.流式细胞术D.吉姆萨染色法13.以下哪项操作会导致MSC分化潜能下降？A.控制传代次数在5代以内B.使用无血清培养基C.长时间消化（超过10分钟）D.定期检测支原体污染14.MSC制剂内毒素检测的常用方法是？A.革兰氏染色B.鲎试剂法C.免疫荧光法D.实时荧光PCR15.关于MSC的多向分化潜能，以下描述正确的是？A.仅能分化为成骨细胞B.可分化为成骨、成脂、成软骨细胞C.分化能力不受培养条件影响D.分化后细胞表型与原代细胞无差异二、多项选择题（共10题，每题2分，共20分。多选、少选、错选均不得分）1.间充质干细胞的主要来源包括？A.骨髓B.脐带C.脂肪组织D.外周血2.MSC质量控制的关键检测项目包括？A.活率B.免疫表型C.核型分析D.支原体检测3.原代MSC分离过程中，需注意的操作要点有？A.组织清洗需彻底去除血迹和杂质B.酶解时间过长会导致细胞损伤C.离心转速越高，细胞收集越完全D.接种密度需适中以避免接触抑制4.MSC冻存操作的正确步骤包括？A.细胞悬液与冻存液按1:1混合B.程序降温（-1℃/min）至-80℃C.直接转移至液氮长期保存D.冻存管标记需包含细胞来源、代数、日期5.以下哪些法规或指南涉及MSC的管理？A.《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则（试行）》B.《干细胞临床研究管理办法（试行）》C.《药品生产质量管理规范（GMP）》D.《医疗器械监督管理条例》6.MSC培养过程中，可能导致污染的原因有？A.超净台未定期消毒B.培养基开封后超过48小时使用C.操作时戴无菌手套D.细胞冻存管未密封7.MSC的免疫调节功能主要表现为？A.抑制T淋巴细胞增殖B.促进B淋巴细胞活化C.分泌抗炎细胞因子（如IL-10）D.增强NK细胞杀伤活性8.无血清培养基的组成通常包括？A.重组生长因子B.动物血清C.微量元素D.激素9.MSC制剂运输记录应包含的信息有？A.运输起始和到达时间B.全程温度监测数据C.运输人员签名D.接收方验收签字10.影响MSC增殖能力的因素包括？A.培养基pH值B.细胞接种密度C.传代次数D.二氧化碳浓度三、判断题（共10题，每题1分，共10分。正确填“√”，错误填“×”）1.间充质干细胞必须表达CD34和CD45表面标志物。（）2.MSC冻存时可直接放入-80℃冰箱，无需程序降温。（）3.支原体污染仅需在终产品检测，过程中无需监测。（）4.无血清培养基完全不含动物源性成分。（）5.MSC传代次数越多，分化潜能越强。（）6.病毒灭活处理会显著降低MSC活性。（）7.伦理审查只需在研究启动前进行一次。（）8.台盼蓝染色法中，死细胞会被染成蓝色。（）9.MSC运输时，温度波动应控制在±2℃以内。（）10.干细胞制剂质量控制记录需保存至少10年。（）四、简答题（共5题，每题6分，共30分）1.简述间充质干细胞的主要生物学特性。2.说明原代MSC分离的关键操作步骤及注意事项。3.阐述MSC质量控制中微生物检测的主要项目及方法。4.分析无血清培养基在MSC培养中的优势及潜在挑战。5.简述干细胞制剂运输过程中的质量控制要点。五、案例分析题（共2题，每题15分，共30分）1.某实验室在进行脐带MSC扩增时，发现第3代细胞增殖速度明显减慢，部分细胞形态变圆、贴壁能力下降。请分析可能原因及解决措施。2.某机构拟开展MSC治疗膝骨关节炎的临床研究，需完成哪些伦理与合规性准备工作？答案一、单项选择题1.B2.B3.A4.B5.C6.D7.A8.B9.B10.A11.B12.B13.C14.B15.B二、多项选择题1.ABC2.ABCD3.ABD4.BCD5.ABC6.ABD7.AC8.ACD9.ABCD10.ABCD三、判断题1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.√10.√四、简答题1.主要生物学特性：①贴壁生长：在体外培养时呈成纤维样贴壁生长；②多向分化潜能：可分化为成骨、成脂、成软骨等中胚层细胞；③免疫调节：通过分泌细胞因子（如IL-10、TGF-β）抑制T细胞增殖，降低免疫排斥；④表面标志物：阳性表达CD73、CD90、CD105，阴性表达CD34、CD45、HLA-DR。2.关键步骤：①组织处理：脐带/脂肪等组织需用PBS反复清洗，去除血迹和杂质，剪碎至1-2mm³小块；②酶解（若用酶消化法）：加入0.1%Ⅰ型胶原酶或0.25%胰酶，37℃消化30-60分钟，期间轻柔振荡；③离心收集：1000rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬；④接种培养：以5×10⁴/cm²密度接种，置于37℃、5%CO₂培养箱。注意事项：严格无菌操作，避免污染；酶解时间过长会导致细胞损伤，需及时终止（加入含血清培养基中和）；原代细胞贴壁较慢，前3天避免频繁换液。3.微生物检测项目及方法：①细菌：需氧/厌氧培养法（35℃培养5-7天，观察有无菌落）；②真菌：沙氏培养基培养（25℃培养7-14天）；③支原体：PCR法（检测16SrRNA基因）、荧光染色法（DAPI染色观察细胞核外荧光）、培养法（专用支原体培养基）；④病毒：针对特定病毒（如HIV、HBV、HCV），采用ELISA检测抗体/抗原，或PCR检测核酸。4.优势：①降低异源风险：不含动物血清，减少异种蛋白污染和免疫反应；②批间差异小：成分明确，避免血清批次差异对细胞的影响；③符合临床要求：便于后续制剂申报，满足监管对“无动物源成分”的要求。潜在挑战：①成本较高：重组生长因子和添加剂价格昂贵；②需优化配方：不同来源MSC可能对无血清培养基适应性不同，需调整生长因子组合；③增殖效率可能下降：部分MSC在无血清条件下增殖速度慢于含血清培养基。5.质量控制要点：①温度控制：冷藏运输（2-8℃）需使用温控箱，液氮运输需确保罐内液氮量充足；②包装防护：采用防震、保温材料（如泡沫箱+冰袋/干冰），避免运输过程中震荡；③全程监控：使用温度记录仪实时监测，记录运输起始/到达时间、温度波动数据；④文件记录：填写运输单（含细胞信息、数量、接收方），接收方需签字确认；⑤应急处理：若温度异常（如超过8℃），需立即联系接收方，评估细胞活性后决定是否使用。五、案例分析题1.可能原因：①培养基问题：血清或生长因子耗尽，导致营养不足；②消化过度：传代时胰酶作用时间过长（>5分钟），损伤细胞膜；③污染：支原体或细菌隐性污染，影响细胞代谢；④原代细胞质量差：脐带组织保存不当（如取材后未及时处理，导致细胞老化）。解决措施：①更换新鲜完全培养基，补充生长因子（如bFGF）；②优化消化条件：缩短胰酶作用时间（2-3分钟），或降低胰酶浓度（0.125%）；③进行支原体检测（PCR法），若阳性则使用支原体清除剂处理，同时彻底消毒培养环境；④检查原代分离步骤：确保脐带组织取材后24小时内处理，清洗时去除华通胶残留。2.伦理与合规性准备工作：①伦理审查：向机构伦理委员会提交研究方案（含研究目的、入排标准、治疗方案、风险/受益分析）、知情同意书（需明确说明细胞来源、潜在风险如免疫反应、肿瘤形成等）、受试者保护措施（如隐私保护、随访计划）；②合规备案：根据《干细胞临床研究管理办法（试行）》，将研究方案、伦理审查意见等