CN119451990A 与抗pd-1抗体组合的抗ilt4抗体或其抗原结合片段的稳定制剂及其使用方法 （默沙东有限责任公司）

2024.12.26PCT/US2023/0197052023.04.25WO2023/211868EN2023.11.02与抗PD-1抗体组合的抗ILT4抗体或其抗原本发明涉及与人免疫球蛋白样转录物4(ILT4)和PD_1结合的抗体或其抗原结合片段的2轻链可变结构域，其包含：CDR_L1：TGSSSNIGAGYDVH(SEQIDNO:19)，CDR_L2：6.根据权利要求1_5中任一项所述的制剂，其中所述非离子型表面活性剂是聚山梨醇3轻链可变结构域，其包含：CDR_L1：TGSSSNIGAGYDVH(SEQIDNO:19)，CDR_L2：12.根据权利要求1或4_11中任一项所述的制剂，其包含约10mg/mL至约150mg/mL的抗13.根据权利要求1或4_11中任一项所述的制剂，其包含约10mg/mL至约150mg/mL的抗14.根据权利要求12所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段的浓度为约15.根据权利要求12所述的制剂，其中所述抗PD_1抗体或其抗原结合片段的浓度为约19.根据权利要求1_13中任一项所述的制剂，其包含约100mg/mL的抗ILT4抗体或其抗420.根据权利要求1_13中任一项所述的制剂，其包含约125mg/mL的抗ILT4抗体或其抗24.一种抗人免疫球蛋白样转录物4(“抗ILT4轻链可变结构域，其包含：CDR_L1：TGSSSNIGAGYDVH(SEQIDNO:19)，CDR_L2：25.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段轻链可变结构域，其包含：CDR_L1：TGSSSNIGAGYDVH(SEQIDNO:19)，CDR_L2：26.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段27.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段528.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段29.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列的重链和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸30.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段31.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段32.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包含：由SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸33.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗人PD_1抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQIDNO:98中所示的氨基酸序列的可变轻区和包含SEQIDNO:103中所示34.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗人PD_1抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQIDNO:99中所示的氨基酸序列的可变轻区和包含SEQIDNO:104中所示35.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中所述抗人PD_1抗体或其抗原结合片37.根据权利要求1_36中任一项所述的制剂，其中所述抗ILT4抗体与抗PD_1抗体的比39.根据权利要求1_38中任一项所述的制剂，其中所述制剂是贮存于约3℃至约5℃的40.根据权利要求1_24中任一项所述的制剂，其中在约3℃至约5℃下贮存长达9个月6(i)如通过超高效尺寸排阻层析确定的，所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％单体为至少约99%;(iii)如通过高效离子交换层析确定的，所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约63所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约23和/或所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段的碱性变体为至多约14%;41.根据权利要求1_34或37_41中任一项所述的制剂，其42.一种治疗有此需要的人患者中的癌症的方法，所述方法包括施用有效量的根据权44.根据权利要求1_41中任一项所述的制剂用于制备用于治45.根据权利要求1_42中任一项所述的制剂用于治疗人7[0002]本申请要求于2022年4月29日提交的美国临时申请号63/336,839的优先权利益，[0005]本发明一般涉及与人白细胞介素样转录物4(ILT4)结合的抗体或其抗原结合片段[0007]肿瘤细胞用来逃避先天和获得性免疫应答的常见策略与人白细胞抗原(HLA)_G的作用(trogocytosis)和趋化性的削弱而直接抑制免疫细胞功能(Morandi等人Cytokine体介导的HLA_G功能的阻断已显示抑制肿瘤进展并阻断髓源性抑制细胞(MDSC)的扩增细胞之间由于ILT4的相互作用抑制了人单核细胞衍生的抗原呈递细胞(APC)的成熟，导致通过Stat3激活的MHCII类抗原和共刺激分子的表达减少(Colonna等人JImmunol.1998，过HLA_G的诱导是通过破坏MHCII类呈递途径(Ristich等人EurJImmunol.2005，35：8润淋巴细胞上的PD_1表达标记乳腺癌和黑色素瘤中的功能失调T细胞，并且与肾癌的不良[0009]抑制PD_1与其配体PD_L1和PD_L2之一或两者之间的相互作用的几种单克隆抗体mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段；(ii)约10mg/mL至约200mg/mL的抗PD_1抗体或其抗原其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：GYYWSLPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：含：(i)约10mg/mL至约200mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段；(ii)约10mg/mL至约H3：LPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：9合片段包括包含以下的可变轻链区：SEQIDNO:95的CDRL1、SEQID[0017]在又其它实施方案中，制剂包含约10mg/mL至约150mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原个实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的浓度为约12.5mg/mL。在又一个实施方案段的浓度为约50mg/mL。在另一个实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的浓度为约含：(i)约50mg/mL至约100mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段；(ii)约10mg/mL至约抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)，CDR_H2：EINHXGSTNYNPSLKS，其中X为S或A(SEQIDNO:17)，和CDR_H3：LPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：合片段包括包含以下的可变轻链区：SEQIDNO:95的CDRL1、SEQID[0027]在本文提供的各种制剂的其它实施方案中，抗ILT4包含SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:58中所示的[0028]在本文提供的各种制剂的又其它实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列的重链和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸序[0030]在本文提供的各种制剂的某些实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列组成的重链可变结构域和由SEQIDNO:58中所示的[0031]在本文提供的各种制剂的一些实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:2中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组[0034]在本文提供的各种制剂的其它实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组少约99(ii)如通过超高效尺寸排阻层析确定的效离子交换层析确定的，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约52抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约15和/或抗ILT4抗体或其抗原结合片段的段的％主峰为至少约10抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约5和/小为至少2μm的颗粒的亚可见颗粒计数为至多约3500；和/或(vii)如通过还原肽图分析确交换层析确定的，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约63抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约23并且抗ILT4抗体或其抗原结合片段的碱性变体NO:2或80中所示的抗ILT4抗体的重链中的W7。在另一个实施方案中，氨基酸残基是如SEQ氨基酸残基是如SEQIDNO:2或80中所示的抗ILT4抗体的重链中的M42[0049]图3显示了如实施例6中所述的，如通过还原肽图分析对在40℃下4周具有不同L_甲硫氨酸浓度(7–15mM)的抗ILT4/抗PD_1共制剂样品确定的，以及根据金属浓度和光暴露[0050]图4显示了如实施例6中所述的，如通过还原肽图分析对在40℃下4周具有不同L_[0053]图7显示了如实施例7中所述的，在40℃下在不同因子水平下的HMW共制剂的预测[0055]图9显示了如实施例7中所述的，在40℃下对于派姆单抗SE在不同因子水平下的角形)和40℃(向下的三角形)下贮存6个月时，CF1和CF2中如通过IEX确定的抗ILT4和派[0072]图30显示了如实施例8中所述的，当在5℃(浅灰色)下贮存12个月、在25℃(深灰角形)和40℃(向下的三角形)下贮存6个月时，如通过还原肽图分析CF1和CF2确定的，角形)和40℃(向下的三角形)下贮存6个月时，如通过还原肽图分析CF1和CF2确定的，W102(抗ILT4单克隆抗体)和W7(抗ILT4单克隆抗体)的亲和力通常可以由解离常数(KD)表示。亲和力可以通过本领域已知的常见方法包括22分子。们以基本干扰如本文所述的结合化合物的实验或治疗用途可以是例如来自哺乳动物细胞的抗体制剂及其翻译后修饰、上游和下游加工或贮存的结规(多克隆)抗体制备物通常包括大量在其可变结构域(其通常对不同的表位具有特异性)在例如Clackson等人(1991)Nature352：624_628和Marks等人(1991)J.Mol.Biol.222：581_597中描述的技术，从噬菌体抗体文库中分离。还参见Presta(2005)J.Allergy分配至各个结构域：SequencesofProteinsofImmunologi如Kabat编号和IMGT独特编号系统在内的编号系统之间的关系是本领域技术人员众所周知HHHLLL在多肽的非关键区域的单一氨基酸取代不会实质性地改等人(1987)MolecularBiology[0146]如整个说明书和权利要求中使用的，短语“基本上由……组成(consists[0153]“稳定”制剂是其中的蛋白质在贮存时或在应力条件下基本上保持其物理稳定性域中可获得的，并且在PeptideandProteinDrugDelivery，247_301，V[0154]如果在颜色和/或透明度的目视检查时，或者如通过UV光散射、尺寸排阻层析降解过程包括水解或剪切(通过诸如尺寸排阻层析和S[0156]如果抗体在给定时间的生物学活性在制备药物制剂时表现出的生物学活性的预[0163]●在结构域1处结合人ILT4(参见Wilcox等人BMCStructuralBiology2:6;;染料标记的HLA_F四聚体)与ILT4(例如，用ILT4转染并表达ILT4的小鼠3A9T细胞上的ILT4的小鼠3A9T细胞上的ILT4)与ANGPTL1、ANGPTL4和/或ANGPTL7(例如，生物素化的[0175]●例如以0.43微克/ml(+0.14微克/ml)的EC50逆转ILT4转染的3A9细[0178]●增强抗CD3诱导的来自外周血单核细胞(PBMC)的促炎性髓系细胞因子例如GM_[0179]●抑制人或例如其它哺乳动物例如小鼠(例如免疫缺陷型NSG小鼠)中的肿瘤生肿瘤是例如来自细胞系SKMEL5的人皮肤黑色素[0187]VSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKS[0190]EVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARLPTRWV[0197]EVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHAGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARLPTRWV[0203]QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARLPTRWV[0206]CDR_H2：EINHXGSTNYNPSLKS，其中X为S或A(SEQIDNO:17)(例如，EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)或EINHAGSTNYNPSL[0212]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGG[0218]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNANRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGG[0224]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGQSNRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGG[0231]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGESNRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGG[0238]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGDSNRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGG[0246]QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSVSKSGASASLAITGLQAEDEADYYCQSFDNSLSAYVFGGX2为S或A(SEQIDNO:20)(例如，[0257]EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYFDS[0263]EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYFDA[0269]EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYFSS[0280]QSVLTQPSSLSASPGASASLTCTLRSGINVDTYRIHWYQQKPGSPPQYLLRYKSDSDKHQGSGVPSRFSGSKDPSANAGILLISGLQSEDEADYYCAIWYSSTWVFGG[0282]本文公开的制剂可以与包含SEQIDNO:11或74的抗体及其抗原结合片段一起使[0293]EVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYAMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVG[0295]本文公开的制剂可以与包含SEQIDNO:12或67的抗体及其抗原结合片段一起使[0305]DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKFLIYAASSLQSGVPSKFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPPTF[0316]EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKVSGYTLTELSMHWVRQAPGKGLEWMGGFDPEDGETIYAQKFQGRVTMTEDTSTDTAYMELSSLRSEDTAVYYCARAGPLYTIFGVVIIPDNWFDPWGQGTLVTV[0318]本文公开的制剂可以与包含SEQIDNO:14或68的抗体及其抗原结合片段一起使[0328]ESVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGSGVVFGG[0330]本文公开的制剂可以与包含SEQIDNO:15或76的抗体及其抗原结合片段一起使[0336]在抗体或其抗原结合片段的各个实施方案中，重链免疫球蛋白的C末端赖氨酸不氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:3中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:4中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:5中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋的氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:6中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋示的氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列的轻链免疫球氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:3中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:11中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:11中所示的氨基酸序列的轻链免疫球蛋示的氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:11中所示的氨基酸序列的轻链免疫球所示的氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:13中所示的氨基酸序列的轻链免所示的氨基酸序列的重链免疫球蛋白和包含SEQIDNO:15中所示的氨基酸序列的轻链免氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:73中所示的氨基酸序列的轻链可变结构的氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:58中所示的氨基酸序列的轻链可变结氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:74中所示的氨基酸序列的轻链可变结构的氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:75中所示的氨基酸序列的轻链可变结所示的氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:76中所示的氨基酸序列的轻链可[0361]在一个进一步的实施方案中，结合ILT4的抗体或其抗原结合片段包括包含1E1的及包含1E1的CDR_H1、CDR_H2和CDR_H3(例如，SEQIDNO:16_18)的免疫球蛋白重链可变[0362]在一个进一步的实施方案中，结合ILT4的抗体或其抗原结合片段包括包含2A6的及包含2A6的CDR_H1、CDR_H2和CDR_H3(例如，SEQIDNO:22_24)的免疫球蛋白重链可变[0363]在一个进一步的实施方案中，结合ILT4的抗体或其抗原结合片段包括包含3G7的及包含3G7的CDR_H1、CDR_H2和CDR_H3(例如，SEQIDNO:28_30)的免疫球蛋白重链可变[0364]在一个进一步的实施方案中，结合ILT4的抗体或其抗原结合片段包括包含2C1的及包含2C1的CDR_H1、CDR_H2和CDR_H3(例如，SEQIDNO:34_36)的免疫球蛋白重链可变[0365]在一个实施方案中，抗体或抗原结合片段包括包含以下的VH结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：[0366]在另一个实施方案中，抗体或抗原结合片段包括包含以下的VH结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：[0368]在另外一个实施方案中，抗体或其抗原结合H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：[0369]在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括包含以下的VH结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHSGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:47)和CDR_H3：[0373]在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括包含以下的VH结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：[0377]在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段包括包含以下的VH结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：H1：GYYWS(SEQIDNO:16)、CDR_H2：EINHAGSTNYNPSLKS(SEQIDNO:48)和CDR_H3：其抗原结合片段包含抗体2A6的VL结构域(例如，SEQIDNO:74)和/或抗体2A6的VH结构域其抗原结合片段包含抗体3G7的VL结构域(例如，SEQIDNO:75)和/或抗体3G7的VH结构域其抗原结合片段包含抗体2C1的VL结构域(例如，SEQIDNO:76)和/或抗体2C1的VH结构域[0391]在另一个实施方案中，抗体由两条重链和两条轻链组成，其中每条轻链包含SEQ[0392]在又一个实施方案中，抗体由两条重链和两条轻链组成，其中每条轻链包含SEQ中所述轻链进一步包含SEQIDNO:90中所示的氨基酸序列，并且所述重链进一步包含SEQ个或更多个保守或非保守氨基酸取个或更多个保守或非保守氨基酸取代的此类氨基酸序列的多肽一起使氨基酸序列具有至少90％氨基酸序列同一性的重链可变本发明的抗ILT4抗体或抗原结合片段的免疫球蛋白轻链可操作地连接到例如包含氨基酸序列MSVPTQVLGLLLLWLTDARC(SEQIDNO:42)的信号序列。氨酰胺(Q)被焦谷氨酸替换。在一个实施方案中，重链免疫球蛋白的N末端Q被焦谷氨酸替包含以下中所示的重链可变结构域和轻链可变结构域氨基酸序列的抗体或其抗原结合片其中抗ILT4抗体或抗原结合片段与ILT4的结合改变了从与ILT4结合的探针层和内部参考ILT4涂布的尖端浸入例如在96或384孔板的孔中含有抗体或抗原结合片段的分析物溶液别包含以下中所示的重链可变结构域和轻链可变结构域氨基酸序列的抗体或片段竞争与[0405]本文公开的制剂可以与包含N联聚糖的抗ILT4抗体及其抗原结合片段一起使用，所述N联聚糖通常加入中国仓鼠卵巢细胞(CHON联聚糖)或改造的酵母细胞(改造的酵母N联个实施方案中，抗ILT4抗体及其抗原结合片段包含一种或多种“改造的酵母N联聚糖”或约85％、约90％或约95％)是改造的酵母N联聚糖或CHON联聚糖。参见Nett等人Yeast.28是GFI5.0或YGLY8316或美国专利号7,795,002或Zha等人MethodsMolBiol.988:31_43使用的抗体及其抗原结合片段可以进行化学修饰(例[0410]在本发明的一个实施方案中，CDRL1为SEQIDNO:95或SEQIDNO:95的变体，[0413]在本发明的一个替代实施方案中，CDRIDNO:111或SEQIDNO:111的变体，并且CDRH3为SEQIDNO:11128或SEQIDNO:112的变[0417]在本发明的一个进一步实施方案中，CSEQIDNO:119或SEQIDNO:119的变体，并且CDRH3为SEQIDNO:120或S含SEQIDNO:103或SEQIDNO:103的变体。在进一步的实施并且轻链可变区包含SEQIDNO:122或SEQIDNO:122的变体、SEQIDNO:123或SEQIDSEQIDNO:98或由其组成的轻链可变区和包含SEQIDNO:103或由其组成的重链可变区。其组成的轻链可变区和包含SEQIDNO:113或由其组成的重链可变区。在本发明的制剂的含SEQIDNO:124或由其组成的轻链可变区和包含SEQIDNO:121或由其组成的重链可变80％、75％或50％序列同源性的VL结构域和/或VH结构域，并且表现出与PD_1的特异性结[0423]在上述任何实施方案中，PD_1API可以是特异性结合人PD_1的全长抗PD_1抗体或如SEQIDNO:99中所示的氨基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQIDNO:104重链包含如SEQIDNO:114中所示的氨基酸残基的序列或由其组成。在进一步的实施方案基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQIDNO:31251中所示的氨基酸残基的序包含如SEQIDNO:127中所示的氨基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQID链和重链的抗PD_1抗体，所述轻链包含如SEQIDNO:128中所示的氨基酸残基的序列或由相应参考序列的全长最大的匹配。以下参考文献涉及经常用于序列分析的BLAST算法：SequenceandStructure，(1978)vol.5，suppl.3.M.O.Dayhoff(编)Natl.Biomed.Res.Found.，Washington，DC；Schwartz，R.M.，等人，“Matricesfordetectingdistantrelationships.”inAtlasofProteinSequenceandsignificanceofmultipledistinctlocalalignments.”inTheoreticaland抗原结合片段，其包含SEQIDNO:98的轻链可变区序列和SEQIDNO:103的重链可变区序96的CDRL2序列和SEQIDNO:97的CDRL3序列，以及SEQIDNO:100的所示的氨基酸序列的重链和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列的SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列组成的重链可变结构域和由SEQIDNO:58中所示的氨的轻链可变区序列和SEQIDNO:113的重链可变区序列。本发明还提供了具有抗ILT4抗体包含由SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序中，轻链可变区包含SEQIDNO:98或SEQIDNO:98的变体，并且重链可变区包含SEQID可变区包含SEQIDNO:122或SEQIDNO:1228的变体、SEQIDNO:123或SEQISEQIDNO:99中所示的氨基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQIDNO:104中体是包含轻链和重链的抗PD_1抗体，所述轻链包含如SEQIDNO:126中所示的氨基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQIDNO:125中所示的氨基酸残基的序列或由其组NO:127中所示的氨基酸残基的序列或由其组成，所述重链包含如SEQIDNO:125中所示的含如SEQIDNO:125中所示的氨基酸残基的序列或由其组成。在本发明的一些制剂中，抗L或36个月)和/或在各种应力条件下(例如，搅动、冻融循环或光暴露)保持抗ILT4抗体(例段和抗PD_1抗体或其抗原结合片段的各种共制剂，其包含(i)抗ILT4抗体或其抗原结合片1抗体或其抗原结合片段)的约3_300mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段和约3_300mg/mL的抗PD_1抗体或其抗原结合片段，总赋形剂浓度为约10_1000mM的选自组氨酸、天冬氨片段与抗PD_1抗体或其抗原结合片段具有5:1(抗ILT4抗体与抗PD_1抗体或其抗原结合片222和FeCl2的一种或多种赋形剂处于约25_250mM的总赋形剂浓度下。222和FeCl2的一种或多种赋形剂[0455]在一个实施方案中，制剂包含摩尔比为4:1至5:1(抗ILT4抗体与抗PD_1抗体或其抗原结合片段)的约3_300mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段和3_300mg/mL的抗PD_1抗1(抗ILT4抗体与抗PD_1抗体或其抗原结合片段)的约4_250mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结1抗体或其抗原结合片段具有4:1(抗ILT4抗体与抗PD_1抗体或其抗原结合片段)的摩尔比。5:1(抗ILT4抗体与抗PD_1抗体或其抗原结合片在生产步骤期间和/或在小瓶封闭之前使用氮上覆(覆盖，例如氮上覆后仅5％或10％残留糖醇、PEG400或甘油。在一个进一步的实施方案中，制剂包含约20_50mg/ml的山梨糖醇、PEG400或甘油。实施方案中，表面活性剂选自Tween80@(聚山梨醇酯80)、Tween20&(聚山梨醇酯20)、pluronicF88®、PluoronicF-127®、pluronicF68E、Tritonx-100@。在一个醇酯80或聚山梨醇酯20表面活性剂可以以约0.005至约1mg/ml的量存在于制剂中。聚山梨[0461]在上述制剂的其它方面，在50℃下，如通过尺寸排阻层析测量的高分子量施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段具有约15_250mg/ml的浓度。在另一个实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段具有约20_100mg/ml的浓度。在一个进一步的实施方案ILT4抗体或其抗原结合片段具有约40_70mg/mL的浓度。在一个进一步的实施方案中，抗或其抗原结合片段为约40_60mg/mL或45_55mg/mL的浓度。在又一个进一步的实施方案中，ILT4抗体或其抗原结合片段为约48_52mg/mL的浓度。在又一个进一步的实施方案中，抗[0465]在本发明的另一个方面，液体制剂中的抗PD_1抗体或其抗原结合片段具有约3_毒性和治疗效果可以通过细胞培养或实验动物中例如用于确定LD50(对于50％的群体致死的剂量)和ED50(在50％的群体中治疗有效的剂量)的标准药学程序进行确定。毒性和疗效指导是可用的。参见，例如，Wawrzynczak(1996)AntibodyTherapy，BiosScientificPeptideTherapyinAutoimmuneDiseases，MarcelDekker，NewYork，(2003)NewEngl.J.Med.348:601_608；Milgrom等人(11973；Slamon等人(2001)NewEngl.J.Med.344:783_792；Beniaminovitz等人(2000)NewEngl.J.Med.342:613_619；Ghosh等人(2003)NewEngl.J.Med.348:24_32；Lipsky等人行。静脉内注射可以在用合适的商业稀释剂例如盐水溶液或5％右旋糖水溶液稀释制剂后[0480]本发明提供了抗ILT4抗体或其抗原结合片段和抗PD_1抗体或抗原结合片段的冻在5.06.8的pH范围内的L组氨酸和乙酸盐缓冲液的适合性。当叙述pH值的范围时，例如[0486]可以用于本发明的制剂中的非离子型表面活性剂包括但不限于聚氧乙烯脱水山[0499]在又其它实施方案中，制剂包含约10mg/mL至约150mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原个实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的浓度为约12.5mg/mL。在又一个实施方案段的浓度为约50mg/mL。在另一个实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的浓度为约[0510]在本文提供的各种制剂的其它实施方案中，抗ILT4包含SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列的重链可变结构域和包含SEQIDNO:58中所示的[0511]在本文提供的各种制剂的又其它实施方案中，抗ILT4抗体或其抗原结合片段包含：包含SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列的重链和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸序[0513]在本文提供的各种制剂的某些实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列组成的重链可变结构域和由SEQIDNO:58中所示的[0514]在本文提供的各种制剂的一些实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:2中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组[0515]在本文提供的各种制剂的其它实施方案中，抗ILT4由SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组氨酸；其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：H3：LPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：[0517]在某些实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：GYYWS[0518]在其它实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结链可变结构域和包含SEQIDNO:58中所示的氨基酸序列的轻链可变结[0519]在又其它实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结合片段的药物制重链和包含SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列的[0521]在一些实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结重链可变结构域和由SEQIDNO:58中所示的氨基酸序列组成的轻链可变结[0522]在一些实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包含：由SEQIDNO:2中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组成的[0523]在一些实施方案中，本文提供了关于抗ILT4抗体或其抗原结重链和由SEQIDNO:7中所示的氨基酸序列组成的寸排阻层析确定的，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％单体为至少约99(ii)如通过ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约63抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约23和/或抗ILT4抗体或其抗原结合片段的碱性变体为至多约14(iv)如通过还原肽图分析确定的，如SEQIDNO:2或80中所示的抗ILT4抗体的重链中选自W7、交换层析确定的，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约63抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约23并且抗ILT4抗体或其抗原结合片段的碱性变体方案中，在制剂贮存于约3℃至约5℃下6个月后，如通过还原肽图分析确定的，如SEQID末可以在标准低体积的水中进行重构，然后用等渗稀释剂例如0.9％氯化钠进行进一步稀[0551]在一些实施方案中，癌症是具有高水平微卫星不稳定性(MSI_H)的转移性结肠直[0554]本文所述的方法和治疗中涵盖证实了与活组织检查或手术材料中存在肿瘤浸润[0555]可以获益于用本文所述的制剂的治疗的另外癌症包括与由病毒持续感染相关的的免疫应答。抗体或其抗原结合片段可以用于刺激针对对于人感染性的病毒的免疫应答，病毒和HIV的病毒感染在被视为慢性病毒感染的那疗剂或化学治疗剂)的剂量和给药频率将部分取决于特定治疗试剂、待治疗癌症的严重程NewYork，NY；Bach(编)(1993)MonoclonalAntibodiesandPeptideTherapyinAutoimmuneDiseases，MarcelDekker，NewYork，NY；Baert等人(2003)New613_619；Ghosh等人(2003)NewEngl.J.Med.348:24_32；Lipsky等人(2000)NewEngl.J.Med.343:1594_1602；Physicians'DeskReference2003(Physicians'Desk[0562]各种文献参考可用于促进关于另外的治疗试剂的药学上可接受的载体或赋形剂GoodmanandGilman’sThePharmaNewYork，NY；Gennaro(2000)Remington：TheScienceandPracticeofPharmacy，PharmaceuticalDosageForms：DisperseSystems，MarcelDekker，NY；Weiner和学品的所需剂量在摩尔/kg的基础上与抗体或多肽[0564]本发明的实施方案还包括本文所述的一种或多种生物制剂，其(i)用于在以下中[0566]分子生物学中的标准方法在以下中进行描述：Sambrook，Fritsch和Maniatis(1982&1989第2版，2001第3版)MolecularCloning，ALaboratoryManual，ColdSpringHarborLaboratoryPress，ColdSpringHarbor，NY；Sambrook和Russell(2001)MolecularCloning，第3版，ColdSpringHarborLaboratoryPress，ColdSpring法也出现在Ausbel等人(2001)CurrentProtocolsinMolecularBiology，Vols.1_4，等人(2000)CurrentProtocolsinProteinScience，Vol.1，JohnWileyandSons，了多克隆抗体和单克隆抗体的生产、纯化和片段化(Coligan等人(2001)Current(1999)UsingAntibodies，ColdSpringHarborLaboratoryPress，ColdSpringAntibodiesALaboratoryManual，ColdSpringHarborLaboratoryPress，Cold[0569]人源化的替代方法是使用噬菌体上展示的人抗体文库或转基因小鼠中的人抗体文库(Vaughan等人(1996)NatureBiotechnol.14:309_314；Barbas(1995)NatureMedicine1:837_839；Mendez等人(1997)NatureGenetics15:146_156；Hoogenboom和Chames(2000)Immunol.Today21:371_377；Barbas等人(2001)PhageDisplay：A的抗体(参见，例如，LeDoussal等人(1991)J.Immunol.146:169_175；Gibellini等人(1998)J.Immunol.160:3891_3898；Hsing和Bishop(1999)J.Immunol.162:2804_2811；Owens等人(1994)FlowCytometryPrinciplesforClinicalLaboratoryPractice，可用的(MolecularProbesy(2003)Catalogue，MolecularProbes，Inc.，Eugene，OR；Inc，Bethesda，MD)；GCGWisconsinPackage(Accelrys，Inc.，SanDiego，CA)；(TimeLogicCorp.，CrystalBay，Nevada)；Menne等人(2000)741_742；Wren等人(2002)Comput.MethodsProgramsBiomed.68:177_181；vonHeijne(1983)Eur.J.Biochem.133:17_21；vonHeijne(1986)NucleicAcidsRes.14:4683_[0576]适合于评估产物稳定性的分析方法包括尺寸排阻层析(SEC)、动态光散射测试SEC(J.Pharm.Scien.，83:1645_1650，(1994)；Pharm.Res.，11:485(1994)；[0577]使用IsoquantIsoaspartateDetectionSystem(Promega)测量样品中的异天冬冬氨酸残基的存在。PIMT催化甲基基团从S_腺苷_L_甲硫氨酸转移到α_羧基位置处的异天可以使用试剂盒中提供的SAHHPLC标准通过反相HPLC进[0578]抗体的效力或生物特性(bioidentity)可以通过其与其抗原结合的能力进行测的抗氧化剂，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：和CDR_H3：LPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：段包括包含以下的可变轻链区：SEQIDNO:95的CDRL1、SEQIDNO:96的CDRL2和SEQIDNO:97的CDRL3，以及包含以下的可变重链区：SEQIDNO:100[0588]实施方案8提供了一种制剂，其包含：(i)约10mg/mL至约200mg/mL的抗ILT4抗体QSFDNSLSAYV(SEQIDNO:21)；并且其中所述抗PD_1抗体或其抗原结合片段包括包含以下[0592]实施方案12提供了实施方案1或4_11中任何一个的制剂，其包含约10mg/mL至约[0593]实施方案13提供了实施方案1或4_11中任何一个的制剂，其包含约10mg/mL至约[0596]实施方案16提供了实施方案1_13中任何一个的制剂，其包含约25mg/mL的抗ILT4[0597]实施方案17提供了实施方案1_13中任何一个的制剂，其包含约50mg/mL的抗ILT4[0598]实施方案18提供了实施方案1_13中任何一个的制剂，其包含约75mg/mL的抗ILT4[0601]实施方案21提供了实施方案1_20中任何[0602]实施方案22提供了实施方案1_21中任何[0603]实施方案23提供了实施方案1_22中任的制剂，其包含：(i)约50mg/mL至约100mg/mL的抗ILT4抗体或其抗原结合片段；(ii)约L_甲硫氨酸，其中所述抗ILT4抗体或其抗原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：和CDR_H3：LPTRWVTTRYFDL(SEQIDNO:18)；以及包含以下的轻链可变结构域：CDR_L1：合片段包括包含以下的可变轻链区：SEQIDNO:95的CDRL1、SEQID原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)，CDR_H2：原结合片段包括包含以下的重链可变结构域：CDR_H1：GYYWS(SEQIDNO:16)，CDR_H2：NO:58中所示的氨基酸序列的轻链可变结构原结合片段包含：包含SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列的重链和包含SEQIDNO:7中所NO:58中所示的氨基酸序列组成的轻链可变结构原结合片段包含：由SEQIDNO:80中所示的氨基酸序列组成的重链和由SEQIDNO:7中所基酸序列组成，并且所述两条重链由SEQIDNO:104_109中任何一个中所示的氨基酸序列[0617]实施方案37提供了实施方案1_36中任何一个的制剂，其中所述抗ILT4抗体与抗轻链≥95(iv)如通过非还原CE_SDS测量的，抗ILT4抗体的％完整IgG≥90和/或(v)[0619]实施方案39提供了实施方案1_38中任何一个的制剂，其中所述制剂是贮存于约3过高效离子交换层析确定的，抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％主峰为至少约63抗ILT4抗体或其抗原结合片段的％酸性变体为至多约23和/或抗ILT4抗体或其抗原结合[0621]实施方案41提供了实施方案1_34或37_41中任何一个的制剂，其中所述抗PD_1抗[0624]实施方案44提供了实施方案1_41中任何一个的制剂用于制备用于治疗癌症的药[0625]实施方案45提供了实施方案1_42中任何一个的制剂用于治疗人患者中的癌症的抗抗体的固定剂量组合。共制剂组合物通过将完全配制的抗ILT4单克隆抗体工艺2原料药醇酯80，pH5.5中的50.0mg/mL抗ILT4。派姆单抗原料药含有在0.29mg/mLL一组氨酸、光和200瓦特小时/m2的UV能量)，随后为关于在5℃下长达12周和在40℃下4周的稳定性进FeCl2和50ppbCuCl2的溶液[0642]31XICHQ1B暴露水平对应于120万勒克斯小时的白光和200瓦特小时/m2的UV能量4100ppb金属储备溶液包括50ppbFeCl2和50ppbCuCl2。过氧化物储备溶液包括等份的t_制剂、抗ILT4SE和派姆单抗SE储备制剂中，其比例为对于使用的每1mL储备制剂1μL稀释制小瓶中可用的氧量。使用2R小瓶代替预期的商业图像(20mL和30mL小瓶分别用于单一实[0647]对于抗ILT4/抗PD_1CF、抗ILT4SE和派姆单抗SE制备了相同的36种制剂(数据未显示)。储备制剂对应于相应共制剂或单一实体的制剂储备，并且取决于L_甲硫氨酸浓度[0655]高分子量种类(HMW)和低分子量种类(LMW)的增加指示了经由聚集和片段化的蛋[0662]图10的等高线图显示了关于在40℃下4周在不同因子水平下的共制剂中的抗ILT4含量)的不同设置下，来自模型拟合的预测值。等高线图显示了随着光应力增加，关于抗ILT4SE制剂中的抗ILT4的％酸性变体的预于抗ILT4SE制剂中的抗ILT4的％主要。该图说明了光应力和金属含量的增加减少了关于于抗ILT4SE制剂中的抗ILT4的％碱性变体。该图说明了光应力的增加增加了关于抗ILT4些情况下对于派姆单抗SE制剂具有显著作用。填充重量在大多数应答中没有任何显著效剂的最终两种组合物(分别具有10mM和15mML一[0676]如图19中所示的，对于所有三种制剂在所有稳定性时间点下的L_甲硫氨酸浓结果显示了来自所有不同因素对L_甲硫氨酸[0685]图21_25描绘了在初始和40℃条件下，关于单一实体和共制剂的肽图分析(PTM[0686]关于抗PD_1单克隆抗体组分的M105氧化是来自其它派姆单抗(抗PD_1单克隆抗体)共配制产物经验的已知不利因素，并且通过监测M105残基的变化来评估增加L_甲硫氨酸(15mM用于CF1)对稳定性的影响。图25描绘了关于CF1和CF[0688]如图26中所示的，当在5℃(圆圈)下贮存12个月、在25℃(向上的三角形)和40℃两种制剂在40℃贮存6个月