ISO 218462025 通过毛细管气相色谱法 在植物油中测定三酰基甘油的组成和二酰基甘油的含量标准立项发展报告

植物油三酰基甘油与二酰基甘油毛细管气相色谱测定标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:VegetableFatsandOils—DeterminationofCompositionofTriacylglycerolsandCompositionandContentofDiacylglycerolsbyCapillaryGasChromatography摘要关键词：植物油；三酰基甘油；二酰基甘油；毛细管气相色谱法；国际标准；油脂品质检测Keywords:Vegetableoils;Triacylglycerols;Diacylglycerols;Capillarygaschromatography;Internationalstandard;Oilqualitydetermination1引言1.1研究背景植物油是人类膳食脂肪的主要来源，其品质直接关系到消费者的健康与安全。三酰基甘油是植物油中最主要的成分，通常占总质量的95%以上，其脂肪酸组成及位置分布决定了油脂的物理化学性质、营养功能和加工适用性。二酰基甘油作为油脂水解或生物合成过程中的重要中间产物，其含量不仅反映油脂的新鲜程度，还与油脂在煎炸、氢化等加工过程中的品质变化密切相关。研究表明，过量摄入二酰基甘油可能引起血脂代谢异常，因此其含量检测对于油脂产品的质量控制具有重要意义。1.2标准化需求分析当前，国际油脂贸易中对三酰基甘油组成及二酰基甘油含量的检测需求日益增长，但各国和各地区在检测方法上存在显著差异，导致不同实验室之间检测结果缺乏可比性。这种技术壁垒不仅增加了贸易成本，也为油脂掺假行为的监管带来了挑战。国际标准化组织（ISO）作为全球最具权威性的标准化机构之一，其下设的ISO/TC34/SC11（动植物油脂技术委员会）长期致力于油脂检测方法国际标准的制定与修订工作。在此背景下，ISO21846:2025的发布为全球植物油品质检测提供了统一的技术依据。1.3标准基本信息ISO21846:2025《Vegetablefatsandoils—Determinationofcompositionoftriacylglycerolsandcompositionandcontentofdiacylglycerolsbycapillarygaschromatography》由国际标准化组织（ISO）于2025年10月22日正式发布，标准状态为现行有效。该标准归口于ISO/TC34/SC11（动植物油脂技术委员会），分类号为动物和植物的脂肪和油。标准文本为英语版本，采用电子版加密PDF格式发布，售价808元人民币。该标准的发布标志着植物油中三酰基甘油和二酰基甘油检测方法在国际层面迈入了规范化、标准化的新阶段。2标准立项背景与市场需求分析2.1行业发展现状与技术需求近年来，全球植物油年产量已突破2亿吨，国际贸易规模持续扩大。棕榈油、大豆油、菜籽油和葵花籽油作为四大主要植物油品种，其品质检测需求尤为突出。三酰基甘油组成是植物油指纹图谱分析的核心指标，通过TAG组成可以有效地识别油脂品种、判定掺假行为、评估油脂的结晶特性和熔化行为。二酰基甘油含量则能够敏感地反映油脂的精炼程度、储存条件和氧化状态，是衡量油脂品质的关键参数之一。传统的高温气相色谱法和高效液相色谱法在分析TAG组成时存在分析时间较长、分离效率有限等问题。而毛细管气相色谱技术配备高温稳定型毛细管色谱柱，能够在较短时间内实现不同碳数和不同饱和度TAG分子的高效分离，同时可实现对DAG组分的准确定量。2.2现有标准分析与差距评估在ISO21846:2025发布之前，国际范围内关于TAG和DAG检测的方法标准较为分散。国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）曾推荐过部分TAG分析方法，但未形成系统的国际标准。欧盟、美国油脂化学家协会（AOCS）虽建立了相应的官方方法，但在样品前处理、色谱条件设置和结果计算方式上存在较大差异。国际橄榄油理事会（IOC）也制定了针对橄榄油中TAG分析的方法，但适用范围有限。这种标准割据的局面给国际贸易和跨国企业的质量控制带来了诸多不便。不同方法之间的系统差异导致检测结果难以互认，增加了重复检测的成本和时间。因此，制定一项适用于各类植物油的、统一的三酰基甘油及二酰基甘油检测国际标准，成为国际油脂行业的迫切需求。2.3标准制定的政策依据3标准主要内容3.1范围界定ISO21846:2025标准明确规定了采用毛细管气相色谱法测定植物油中三酰基甘油组成以及二酰基甘油组成和含量的方法。该标准适用于粗制、精制和深加工等各类植物油产品，包括棕榈油、棕榈仁油、大豆油、菜籽油、葵花籽油、玉米油、花生油等常见植物油脂。标准同时适用于动物脂肪的检测，具有较广泛的适用性。3.2规范性引用文件标准规范性引用了以下关键文件：-ISO661《动植物油脂—试样的制备》-ISO3696《分析实验室用水—规格和试验方法》-ISO5725系列标准《测量方法和结果的准确度（正确度与精密度）》-ISO6616《动植物油脂—通过气相色谱法测定脂肪酸甲酯》3.3术语和定义标准对以下核心术语进行了界定：-三酰基甘油（Triacylglycerols,TAG）：甘油分子中三个羟基均与脂肪酸发生酯化反应所形成的酯类化合物，是植物油的主要成分。-二酰基甘油（Diacylglycerols,DAG）：甘油分子中两个羟基发生酯化反应，剩余一个游离羟基的甘油酯化合物。-碳数（CarbonNumber,CN）：酰基甘油分子中脂肪酸部分所含碳原子的总数。-等价碳数（EquivalentCarbonNumber,ECN）：由CN减去2倍双键数所得的数值，用于描述TAG在不锈钢毛细管色谱柱上的色谱行为。3.4方法原理本标准所规定的检测方法基于毛细管气相色谱分离技术。其核心原理为：将油脂样品溶解于适宜的有机溶剂中，直接注入配备高温稳定型毛细管色谱柱（通常采用键合型聚二甲基硅氧烷固定相或含5%苯基的聚甲基硅氧烷固定相）的气相色谱仪。在程序升温条件下，不同碳数和饱和度的TAG和DAG分子依据其沸点差异和固定相分配系数的不同实现基线分离。经氢火焰离子化检测器（FID）检测后，各组分的峰面积百分比可直接反映其相对含量。对于DAG的定量分析，可利用内标法或外标法结合校正因子进行精确测定。3.5仪器设备与试剂标准对检测所需的仪器设备和试剂提出了明确规定，包括：-气相色谱仪：配备程序升温功能、分流/不分流进样器及FID检测器，具有足够的灵敏度和稳定性。-毛细管色谱柱：柱长一般为10m-30m，内径0.25mm-0.32mm，固定相膜厚0.1μm-0.5μm的高温型色谱柱，最高使用温度不低于370℃。-数据处理系统：具备自动积分和色谱数据处理功能。-试剂：正己烷、正庚烷等色谱纯级有机溶剂，以及TAG和DAG标准品（纯度≥95%）。3.6样品制备与前处理标准规定，油脂样品应按照ISO661的要求进行制备和保存。检测前，将油脂样品熔化并充分混匀，称取适量样品（通常为50mg-100mg），用正己烷或正庚烷溶解并定容至适当体积（一般为10mL），使最终溶液浓度约为5mg/mL-10mg/mL。样品溶液经无水硫酸钠干燥后，用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液进行气相色谱分析。如样品含有机械杂质或水分过高，需先进行脱水脱杂处理。3.7气相色谱分析条件标准推荐了如下典型色谱条件：-进样口温度：360℃-380℃-检测器温度：370℃-390℃-柱温箱程序升温：初始温度250℃-280℃，以3℃/min-5℃/min的速率升温至350℃-365℃，保持至分析完成-载气：高纯氦气或氢气，恒流模式，柱流量1mL/min-2mL/min-进样方式：分流进样，分流比1:50至1:100，进样量1μL3.8定性与定量方法定性分析：通过对比样品色谱峰与标准品的保留时间，结合等价碳数规律进行定性鉴定。对未知组分，可采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术进行辅助确认。定量分析：采用面积归一化法测定TAG各组分的相对百分比含量。对于DAG的定量分析，建议采用内标法以提升定量准确性，选用与目标分析物性质相近的合成TAG或DAG内标物。每组样品平行测定两次，取平均值作为最终结果，计算结果保留小数点后两位。3.9精密度要求标准依据ISO5725的要求，通过实验室间联合试验确定了方法的重复性限（r）和再现性限（R）。标准要求：-重复性（同一实验室，同一操作者，同一仪器，短时间内对同一试样进行两次测定）：两次独立测定结果的绝对差值不得超过重复性限r。-再现性（不同实验室对同一试样进行测定）：两个独立测定结果的绝对差值不得超过再现性限R。-数值的具体大小与样品中目标组分的含量水平相关，含量越高，允许的差值越大。4标准的关键技术内容与创新点4.1三酰基甘油组成的表征方法标准建立了基于ECN的TAG分组分析方法，能够将植物油中的TAG按照碳数和双键数进行系统分类和定量。该方法能够有效区分C48、C50、C52、C54等主要TAG组分，并可进一步通过色谱峰的精细分离获得更为详细的分子种信息。4.2二酰基甘油的定量分析DAG的定量分析是本次标准的重要新增内容。标准中详细规定了DAG的色谱分离条件、定性鉴定方法和定量计算方式。由于DAG在植物油中通常以1,2-DAG和1,3-DAG两种异构体形式存在，标准要求色谱条件能够实现两种异构体的基线分离，并分别定量。4.3方法适用性验证标准在制定过程中经过了严格的实验室间协同验证试验。来自多个国家的十几个实验室参与了验证工作，针对棕榈油、大豆油等典型油脂样品进行了方法性能评估。验证结果显示，该方法在TAG组成分析方面具有良好的重复性和再现性，在DAG定量方面可达到较低检出限和定量限。5标准实施的预期效益与应用前景5.1国际贸易便利化ISO21846:2025作为统一的国际检测标准，将有效消除各国在TAG和DAG检测方法上的技术壁垒，促进检测结果在国际间的互认。对于植物油出口国而言，遵循该标准进行产品检测将更容易获得进口国监管部门和采购商的认可，降低重复检测成本，提升贸易效率。据估算，这一标准在全球范围内的推广应用，每年可为油脂贸易行业节省数亿美元的检测相关成本。5.2质量监管能力提升对于食品安全监管部门而言，该标准的实施将提供更统一、更可靠的技术支撑。通过TAG组成的指纹图谱分析，监管机构可以更有效地识别油脂掺假行为，如高价值油脂中掺杂低价油脂等问题。同时，DAG含量的检测为评估油脂精炼程度和储存品质提供了量化指标，有助于完善油脂质量安全监管体系。5.3产业技术升级推动标准的实施还将推动油脂加工企业的技术升级和质量控制水平提升。企业可以依据标准建立统一的内部质量检测体系，优化生产过程的品质管控，提高产品的稳定性和市场竞争力。同时，该标准的技术要求也将引导仪器设备制造商开发性能更优的气相色谱系统，推动相关检测技术的持续进步。5.4在油脂科学研究中的应用在学术研究领域，该标准为油脂化学、食品科学和营养学等领域的研究人员提供了规范化的分析方法，有助于不同研究团队之间数据的横向比较和成果共享。特别是在食用油营养功能评价、新型油脂资源开发以及油脂加工工艺优化等前沿研究方向上，该标准的应用将显著提升研究效率和数据的可信度。6标准主要参与单位介绍6.1国际标准化组织（ISO）国际标准化组织（InternationalOrganizationforStandardization,ISO）成立于1947年，总部位于瑞士日内瓦，是全球最大的非政府性国际标准化机构。ISO由165个国家的国家标准机构组成，其制定的国际标准在全球范围内具有广泛的影响力。截至2025年，ISO已发布超过25000项国际标准，涵盖从传统制造业到信息技术、食品安全、环境保护等各个领域。6.2ISO/TC34/SC11动植物油脂技术委员会本标准的起草归口单位为ISO/TC34/SC11（Foodproducts—Animalandvegetablefatsandoils），即国际标准化组织食品技术委员会动植物油脂分技术委员会。该分委会成立于1952年，秘书处由马来西亚标准局（DepartmentofStandardsMalaysia）承担，是国际油脂标准化领域最权威的技术组织。ISO/TC34/SC11的职责范围包括动植物油脂领域的术语、取样、检测方法、产品质量规格等标准的制定与修订工作。该分委会的成员包括来自各成员国家的注册专家，以及AOCS、IUPAC、国际橄榄油理事会等国际组织的联络代表。分委会通常每年召开一次全体会议，各工作组根据项目进展不定期召开工作组会议。ISO/TC34/SC11已发布了一系列在油脂行业广泛采用的国际标准，如ISO660（酸值测定）、ISO3961（碘值测定）、ISO3657（皂化值测定）等，这些标准构成了全球油脂检测方法的基础框架。ISO21846:2025正是该分委会近年来在油脂组分分析领域取得的重要标准化成果之一。6.3马来西亚标准局与棕榈油产业背景值得关注的是，ISO/TC34/SC11的秘书处由马来西亚承担，这反映了马来西亚作为全球第二大棕榈油生产国和最大棕榈油出口国在油脂标准化领域的重要地位。马来西亚棕榈油局（MalaysianPalmOilBoard,MPOB）作为该领域的权威研究机构，深度参与了ISO21846:2025的技术研究和验证工作。MPOB在TAG和DAG分析方法研究方面积累了丰富经验，为标准技术内容的确定提供了坚实的科研基础。此外，来自德国、荷兰、英国、印度尼西亚、哥伦比亚等主要油脂生产贸易国的技术专家也在标准的制定过程中发挥了重要作用。各国专家通过多轮工作组会议和技术讨论，在方法参数优化、精密度验证结果分析等方面贡献了重要力量。7标准实施建议与未来展望7.1标准实施建议为确保ISO21846:2025在各国的有效实施，建议如下：1.加快标准转化：建议各国标准化机构尽快将该国际标准转化为本国标准，或在国际贸易中直接采纳该标准，以减少贸易摩擦。