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文档简介
实验六(一)材料新鲜的羊、牛、犬、鸡等动物粪便粪;饱和食盐水;甘油与水的(一)采集新鲜动物粪便实验操作。(一)肉眼观察法与直接涂片法(五)线虫幼虫检查法(六)各种虫卵和卵囊的形态五、注意事项1、检查的粪便应从直肠取出或刚排出检粪便置于冷处(不超过5℃)。如转寄检查。可浸于5~10%加热50~60℃而停止发育。虫卵盖住。6、注意虫卵与各种植物残渣、气泡、质的区别。六、作业要求绘吸虫卵、绦虫卵、线虫卵、棘头虫卵、球虫卵囊的结构图(一)肉眼观察法与直接涂片法直肠采集地面采集•寄生于动物消化道的绦虫会不断随宿主粪便排出呈断续面条状(白色)的孕卵节片。•其它一些消化道寄生虫有时也可随粪便排出体外。可直接挑出虫体,判明虫种或进一步鉴定。•检查时,先检查粪便的表面,看是否有大型虫体和较大的绦虫节片。•然后将粪便仔细捣碎,认真进行观察。对检查较小虫体或节片,将粪便置于较大的容器中(如金属桶、玻璃缸等加入5~10倍量的水,彻底搅拌后静置10分钟以上,然后倾去上层液,再重新加清水搅匀静置,如此反•最后倾去上层清亮液,将少量沉淀物放在黑色浅盘(或衬以黑色纸或黑布的玻璃容器)中检查,必要时采用放大镜或实体显微镜检查,发现的虫体和节片用镊子、针犬粪里的绦虫犬粪里的蛔虫取50%甘油水溶液或普通水1-2滴放于载玻片上 液体放在载玻片上,加上盖玻片镜检虫卵。 •优点:该方法操简便、快速、且不需要很淀为止(1L水大约可溶解400g盐)。方法(一)取5-10g粪样置于容器内,加少量的饱和食盐粪液上浮膜进行镜检。1.自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块,置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中加饱和盐水略高于管口但不超出为止4.取洁净载玻片一张分钟左右5.如图垂直向上提起载玻片•优点:操作简便,特别是对大多数的线虫•缺点:对比重较大的虫卵(如吸虫卵、棘此可利用自然沉淀的方法,将虫卵集中于水底便于检查。也可以采用离心的方法,加速虫卵的沉淀。沉淀法多用于比重较大的虫卵如吸虫卵和棘头虫卵的检查。2、水洗沉淀法步骤1.称取5-10g粪便捣碎后捣碎目铜筛或纱布过滤4.将制备好的粪液置于容器内约2∕3上清液上清液7.反复操作至液体透明为此了提高检出率,也可以滴加几滴染色液进行染色9.吸取沉淀物镜检•优点:多适用于检查吸虫卵、棘头虫卵和绦虫节片,特别是在同一种粪样收集量较多的时候,多•缺点:对比重较小的虫卵检出率则非常低,如线虫、球虫卵囊等。3尼龙网淘洗法取粪便5~10g置于烧杯(或塑料杯)中,加10倍量的水搅匀,先通过40目或60目的铜筛过滤。滤过液再通过260目锦纶筛兜过滤,并在筛兜中断续加水冲洗,直到洗出的液体清澈透明为止;然后挑取兜内粪渣抹片检查。此法适用于宽度大于60μm的虫卵。通过以上处理,粗大粪渣被铜筛扣留,纤细粪渣(直径小于40μm)和可溶性色素均被冲洗走而使虫卵集中。清水搅匀,经40-60孔铜筛过滤后在1000g下离心间隔距离为1.5mm,上面的盖玻片上一般有2个1平容量为0.15ml。原理在计数室内体积小、比重轻的虫卵漂浮在上面,而粪渣则沉于下面,当视野感觉模糊时往往所看到的是该室的由于有线条的规范,有效地防止了漏检或重检。1.称取2g粪便3.经40-60目铜筛或纱布过滤4.混匀后立即用吸管注入计数室内,静置2-5分钟6.计算每克粪便中的虫卵数计算公式每克粪便中的虫卵数=全部计数室的虫卵总数/2×200(五)线虫幼虫检查法),1.将粪便搅拌均匀3.将搅拌均匀的粪便转入到一新的容器内。4.将粪便放在放在合适的温度贝尔曼分离器装制:用一个直径为10-贝尔曼分离器装制:用一个直径为10-准备一个止水夹和铜滤筛。漏斗胶管试管滤筛置漏斗内3.通过漏斗加40℃温水至漏斗中部幼虫游走沉于试管底部。5.此时拿下小试管淀物镜检。检查。(六)各种虫卵和卵囊的形态•线虫卵大多数是卵生的,•颜色:绝大多数是无色透明的、少数是黑褐色的、棕褐色的。犬蛔虫卵猪蛔虫卵粪便中的虫卵有如下几种形式虫卵、蛔虫卵等;鞭虫卵马副蛔虫卵犬蛔虫卵犬钩虫卵钩虫卵蛲虫蛔虫肝片吸虫虫卵前后盘吸虫虫卵矛形双腔吸虫的虫卵3.绦虫卵的一般特征:常见到的“卵壳”,实际上是胚套。虫卵的中央有一个椭圆形的,并且具有三对胚钩的六钩蚴。六钩蚴的外面由一层膜包裹着,胚套与膜之间含有液体和颗粒膜壳绦虫虫卵莫尼茨绦虫虫卵4.棘头虫虫卵的一般特征5.原虫包囊或卵囊的
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