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病理技师三基知识模考试题(附答案)一、单项选择题(每题1分,共30分)1.临床病理常规活检组织最常用的10%中性缓冲福尔马林固定液,其实际甲醛有效浓度为()A.1%B.4%C.10%D.40%2.按照病理技术操作规范,常规手术活检标本采用10%中性缓冲福尔马林固定时,适宜的固定时间范围为()A.1~2小时B.3~6小时C.6~72小时D.72~96小时3.常规石蜡组织脱水流程中,为避免组织过度收缩,乙醇梯度脱水的起始浓度通常为()A.30%B.50%C.70%D.95%4.常规石蜡制片流程中,兼具组织透明与切片脱蜡作用的常用试剂是()A.丙酮B.二甲苯C.氯仿D.正丁醇5.常规病理石蜡包埋最常用的石蜡熔点范围为(),可适配多数实验室常温操作条件A.42~44℃B.56~58℃C.62~64℃D.68~70℃6.常规HE染色石蜡切片的标准厚度为(),可保证镜下细胞层次清晰、无重叠A.2~3μmB.4~5μmC.8~10μmD.12~15μm7.HE染色中,苏木精主要使以下哪种结构呈蓝色()A.细胞质B.细胞外基质C.红细胞D.细胞核8.骨组织、钙化组织脱钙处理时,判断脱钙终点最准确可靠的方法是()A.针刺探测法B.X线摄片法C.化学滴定法D.肉眼观察法9.网状纤维染色最常用的方法是(),网状纤维可被染成黑色A.Gomori银浸染色法B.Masson三色染色法C.PAS染色法D.抗酸染色法10.PAS染色中,阳性反应产物的颜色为(),可显示糖原、真菌、基底膜等结构A.蓝色B.棕黄色C.紫红色D.黑色11.宫颈脱落细胞学涂片、痰涂片固定时,最常用的固定液为(),可快速固定细胞结构避免退变A.95%乙醇B.10%福尔马林C.2.5%戊二醛D.丙酮12.术中冷冻切片的适宜切片厚度为(),可兼顾切片完整性与诊断清晰度A.2~3μmB.5~7μmC.10~12μmD.15~20μm13.免疫组化染色中,辣根过氧化物酶(HRP)系统最常用的显色剂是(),阳性产物为棕黄色、不溶于有机试剂A.DAB(二氨基联苯胺)B.AECC.BCIP/NBTD.荧光素异硫氰酸酯14.甲醛固定石蜡包埋组织进行免疫组化染色时,最常用、抗原修复效果最稳定的方法是()A.胰酶消化法B.胃蛋白酶消化法C.高温高压热修复法D.室温放置修复15.临床病理科日常处理常规手术活检、细胞学标本的实验室,生物安全防护等级应达到()A.BSL-1级B.BSL-2级C.BSL-3级D.BSL-4级16.抗酸染色中,结核分枝杆菌等抗酸菌被染成的特征性颜色为(),不被盐酸酒精脱色A.蓝色B.绿色C.红色D.黑色17.Masson三色染色中,胶原纤维被染成的特征性颜色为(),可用于显示纤维化程度A.红色B.蓝/绿色C.黑色D.棕黄色18.组织中含铁血黄素颗粒检测最常用的特殊染色方法为(),阳性产物为蓝色A.普鲁士蓝反应B.刚果红染色C.油红O染色D.六胺银染色19.甲醛固定石蜡包埋组织用于核酸提取(PCR、测序等分子检测)时,固定时间超过()会因蛋白-核酸交联过度导致核酸片段化严重、检测失败A.6小时B.24小时C.72小时D.7天20.免疫组化染色中,常见的“边缘效应”(组织切片边缘非特异性深染)最常见的诱因是()A.抗体浓度过低B.孵育过程中切片干片C.显色时间过短D.固定过度21.中性缓冲福尔马林的标准pH值范围为(),可减少福尔马林色素形成、保护组织抗原A.4.0~5.0B.6.0~6.5C.7.2~7.4D.8.0~8.522.组织切片中常见的福尔马林色素,其形成的核心原因是()A.甲醛在酸性环境下与血红蛋白结合形成复合物B.组织中钙盐沉积C.真菌定植产生的色素D.炭末沉积23.石蜡制片脱水环节中,若组织在高浓度乙醇中停留时间过长,会导致的主要问题是()A.组织收缩变硬、变脆,切片时易碎裂B.组织透明不佳、浸蜡不充分C.细胞核染色过浅D.切片出现皱褶24.皮肤、胃肠道黏膜等分层结构组织包埋时,正确的包埋方向为()A.上皮面垂直于包埋盒底面,保证切片时可显示全层结构B.组织随意放置,无特殊要求C.切面朝上平贴于包埋盒底面,上皮面与切面平行D.组织折叠包埋,减少包埋空间占用25.淋巴结、肾穿刺活检等需要观察细微结构的组织,常规HE切片的适宜厚度为()A.2~3μmB.6~8μmC.10~12μmD.15μm以上26.按照国家病理专业医疗质量控制指标要求,三级医院病理科常规石蜡HE切片的优良率需达到()以上A.80%B.85%C.95%D.100%27.透射电镜标本观察时,最常用的初始固定液为(),可良好保存细胞超微结构A.10%福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.Bouin液28.淀粉样物质的特征性检测方法为刚果红染色,在偏光显微镜下阳性淀粉样物质呈()双折光A.苹果绿色B.红色C.蓝色D.金黄色29.下列脱钙液中,对组织抗原、核酸损伤最小,最适合用于需行免疫组化、分子病理检测的骨组织标本脱钙的是()A.5%硝酸脱钙液B.10%盐酸脱钙液C.10%EDTA脱钙液D.5%三氯醋酸脱钙液30.刚果红染色可特异性显示的组织内异常沉积物质是()A.含铁血黄素B.淀粉样蛋白C.黑色素D.脂褐素二、多项选择题(每题2分,共20分,多选、少选、错选均不得分)1.常规石蜡组织切片制备的完整流程包含以下哪些核心环节()A.标本固定B.梯度脱水、透明C.浸蜡、包埋D.切片、捞片、烤片E.染色、透明、封片2.下列关于10%中性缓冲福尔马林的描述,正确的有()A.由40%市售甲醛与pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液按1:9比例配制B.渗透压接近人体生理状态,组织固定收缩率低C.中性环境可减少福尔马林色素的形成D.可较好保存组织抗原与核酸结构,适配免疫组化、分子病理检测E.固定液使用体积需达到组织体积的10~20倍,保证固定充分3.HE染色中出现细胞核染色过浅、灰染的可能原因有()A.苏木精染液氧化失效,染色能力下降B.苏木精染色时间不足C.盐酸酒精分化时间过长,过度洗脱细胞核结合的染液D.组织固定不及时、固定不充分,核蛋白降解自溶E.伊红染色时间过长4.免疫组化染色过程中,可导致切片背景非特异性染色的原因包括()A.一抗工作浓度过高B.抗体孵育过程中切片干片C.内源性过氧化物酶、生物素未被充分封闭D.各步骤间缓冲液洗涤不充分E.DAB显色时间过短5.病理实验室生物安全防护的基本要求,以下描述正确的有()A.接触标本时需佩戴手套、穿工作服,取材、冷冻切片操作时需加戴护目镜、防水围裙B.处理新鲜传染性标本(如结核、特殊感染标本)需在生物安全柜内操作C.废弃组织标本需经10%福尔马林充分固定或高压灭菌后,按医疗废物规范处置D.实验结束后需用含氯消毒剂或75%乙醇擦拭操作台面E.二甲苯、甲醛等挥发性有毒试剂需在通风橱内操作6.下列特殊染色与临床应用的对应关系,正确的有()A.抗酸染色——检测结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌B.普鲁士蓝染色——检测组织内沉积极铁血黄素C.PAS染色——检测真菌、糖原、肾小球基底膜D.网状纤维染色——辅助鉴别癌与肉瘤(癌巢周围见网状纤维包绕,肉瘤细胞间可见网状纤维分布)E.刚果红染色——检测组织内淀粉样物质沉积7.术中冷冻切片制备的操作注意事项,以下描述正确的有()A.送检标本需保持新鲜状态,严禁提前加固定液B.冷冻头温度通常维持在-18~-25℃,保证组织快速冷冻C.切片厚度一般控制在5~7μm,避免过厚导致细胞重叠D.切片贴片后需及时固定,防止细胞干燥退变E.组织冷冻时间过长会导致冰晶形成增多,破坏细胞结构、影响诊断8.甲醛固定石蜡包埋组织用于分子病理检测时,可影响核酸提取质量的因素有()A.使用Bouin液、酸性福尔马林等非标准固定液固定标本B.固定时间不足6小时或超过72小时C.骨组织采用强酸脱钙时间过长D.切片过厚、脱蜡不充分E.蜡块常温保存时间超过10年,核酸严重降解9.病理大标本取材的基本规范要求,以下描述正确的有()A.取材前需严格核对标本姓名、住院号、取材部位等信息,避免错号B.恶性肿瘤标本需记录肿瘤大小、浸润深度、与周围组织毗邻关系、切缘距离C.清扫淋巴结需逐枚切开、全部取材包埋,避免遗漏转移灶D.骨、钙化组织需经充分脱钙至软化后,方可进行切片处理E.取材刀具需锋利,避免过度挤压组织导致细胞形态变形10.病理切片中常见的人为假象包括()A.组织取材时过度挤压导致的细胞变形、核拉伸,易被误判为异型细胞B.固定不及时导致的组织自溶、细胞结构模糊C.切片刀缺口导致的刀痕、切片皱褶D.脱水过度导致的组织脆裂、切片碎屑多E.封片时树胶中残留气泡、杂质三、判断题(每题1分,共10分,正确打√,错误打×)1.组织固定的核心目的是抑制组织内溶酶体酶活性,防止细胞自溶、组织腐败,保持细胞原有形态结构。()2.常规HE切片厚度越厚,观察到的细胞数量越多,越有利于病理诊断。()3.二甲苯是病理制片常用的透明剂与脱蜡剂,具有挥发性神经毒性,操作时需做好通风防护。()4.免疫组化染色时设置阳性对照、阴性对照是验证染色体系有效性、避免假阳性/假阴性结果的关键质控措施。()5.术中冷冻切片诊断准确率与常规石蜡切片完全一致,可作为最终病理诊断依据。()6.PAS染色的基本原理是过碘酸氧化多糖分子中的邻二醇基为醛基,醛基与Schiff试剂结合生成紫红色不溶性产物。()7.病理科废弃的二甲苯、乙醇、染液等化学试剂,可直接倒入下水道排放,无需特殊处理。()8.标本离体后30分钟内放入足量固定液,是保证组织形态保存质量、减少自溶的关键环节。()9.液基薄层细胞学制片(TCT)通过去除标本中黏液、血细胞等杂质,可提高细胞学涂片的细胞满意率,降低假阴性率。()10.免疫组化DAB显色时,显色时间越长阳性信号越强,不会出现非特异性结果。()四、简答题(每题10分,共30分)1.简述10%中性缓冲福尔马林的标准配制方法,以及其作为常规固定液的核心优势。2.简述常规石蜡切片HE染色的标准操作流程,分析导致细胞核、细胞质染色对比度差的常见原因。3.结合病理科工作特点,简述实验室生物安全防护的核心要点。五、案例分析题(共10分)某院病理科常规技术岗技师完成当日32例手术标本HE染色封片后,镜下抽检发现所有批次切片存在共性质量问题:细胞核呈淡灰蓝色、色泽晦暗无鲜亮感,部分区域核浆分界不清,细胞质伊红染色暗淡不均,切片整体透光度差,在含血量丰富的脾、肝组织区域可见散在棕黑色细颗粒状沉积。请结合病理技师三基知识,逐一分析上述质量问题的可能诱因,并提出对应的整改措施。【参考答案】一、单项选择题1.B2.C3.C4.B5.B6.B7.D8.B9.A10.C11.A12.B13.A14.C15.B16.C17.B18.A19.C20.B21.C22.A23.A24.C25.A26.C27.B28.A29.C30.B二、多项选择题1.ABCDE2.ABCDE3.ABCD4.ABCD5.ABCDE6.ABCDE7.ABCDE8.ABCDE9.ABCDE10.ABCDE三、判断题1.√2.×3.√4.√5.×6.√7.×8.√9.√10.×四、简答题1.(1)配制方法:取40%浓度市售甲醛溶液100ml,加入0.01mol/L、pH7.2~7.4的磷酸盐缓冲液900ml,充分混匀后密封保存。其中磷酸盐缓冲液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠按比例配制,可稳定维持固定液pH值为中性。(4分)(2)核心优势:①渗透压与人体组织生理渗透压接近,固定过程中组织收缩率低,细胞形态保存完整;②中性环境可避免酸性条件下甲醛与血红蛋白结合形成福尔马林色素,减少人为假象;③对组织内蛋白抗原、核酸结构的保存效果好,固定后的组织可适配常规HE染色、特殊染色、免疫组化及分子病理检测,通用性强;④渗透速度均匀,适合不同大小、类型的组织标本固定;⑤配制方法简便、成本较低,适合病理科大批量标本的常规处理。(6分)2.(1)标准操作流程:①烤片后脱蜡至水:将切片置于60℃烤片机烤片30分钟,依次经二甲苯脱蜡2次(每次10分钟),再经100%、95%、80%、70%梯度乙醇下行各2分钟,最后入蒸馏水冲洗2分钟;②苏木精染核:切片入Harris苏木精染液染色5~10分钟,自来水冲洗去除多余染液;③分化:入1%盐酸酒精分化数秒,镜下观察至细胞核清晰、胞质无蓝染为度,自来水冲洗;④蓝化:入流动自来水冲洗5~10分钟,或入0.5%稀氨水蓝化30秒,至细胞核呈鲜亮蓝色;⑤伊红染胞质:入水溶性伊红染液染色1~3分钟,自来水快速冲洗;⑥脱水透明:经70%、80%、95%、100%梯度乙醇上行脱水各2分钟,再经二甲苯透明2次(每次5分钟);⑦封片:擦去切片多余二甲苯,滴加中性树胶,加盖玻片封固。(5分)(2)核质染色对比度差的常见原因:①染液因素:苏木精染液使用时间过长氧化过度,失去染色能力;伊红染液被乙醇、水稀释或pH值异常,导致染色暗淡;②操作因素:苏木精染色时间不足、分化过度导致核染色浅,或蓝化不充分导致核呈灰红色;伊红染色时间不足或脱水时被高浓度乙醇过度洗脱,导致胞质着色浅;染色后脱水不彻底、透明不足,导致切片浑浊;③组织前处理因素:标本固定不及时、固定液量不足导致组织自溶,核蛋白降解,无法正常着色;组织脱水、透明过度导致组织变脆,切片厚薄不均,染色不一致;④切片因素:切片过厚、有皱褶或出现脱片,导致染色深浅不均。(5分)3.病理科生物安全防护核心要点包括:①人员防护:工作人员进入实验室需穿戴工作服、工作帽,接触标本时佩戴一次性手套,取材、处理冷冻新鲜标本时加戴护目镜、双层手套、防水围裙;严禁在实验室内进食、饮水、存放私人物品,操作完成后及时按七步洗手法洗手。(2分)②操作规范:处理新鲜标本、传染性标本需在生物安全柜内进行,操作动作轻柔避免产生气溶胶;锐器使用后直接放入锐器盒,严禁徒手接触针头、刀片等锐器,避免锐器伤;实验结束后用500mg/L含氯消毒剂擦拭台面,定期对实验室环境进行消毒。(3分)③废物处置:废弃组织标本需经10%福尔马林充分固定或高压灭菌后装入黄色医疗废物袋,交由有资质的医疗废物处置单位处理;废弃二甲苯、甲醛、染液等化学试剂分类装入专用危废收集桶,交由危废处置机构处理,严禁直接倒入下水道;锐器盒装满3/4时及时密封更换。(2分)④应急管理:实验室配备洗眼器、应急冲淋装置、急救药箱
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