中药饮片和检验知识培训专业知识培训专家讲座

中药饮片判别及检验相关

知识培训药检所夏春丽中药饮片和检验知识培训专业知识培训第1页《中华人民共和国药品管理法》第二章第十条第二款要求"中药饮片必须按照国家药品标准炮制；国家药品标准没有要求，必须按照省、自治区、直辖市人民政府药品监督管理部门制订炮制规范炮制。省、自治区、直辖市人民政府药品监督管理部门制订炮制规范应该报国务院药品监督管理部门立案。”中药饮片是中医临床方剂基本组成部分，也是中成药基本原料，其质量优劣将直接影响到中医药临床疗效表达，直接关系到人们用药安全、有效。不过，伴随中药饮片市场需求量不停增加，及部分外来中药饮片冲击，致使出现了大量不按要求炮制方法炮制中药饮片流入市场，从而造成了中药饮片整体质量有所下降。为深入提升从药人员业务能力，深入加大对药品生产、经营、使用中药饮片质量监督力度，提升真伪判别能力，有效打击制售假劣中药饮片违法违规行为，确保辖区群众用药安全，区药监局组织人员在药品生产企业举行涉药人员中药饮片判别及检验相关知识培训。

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近年来，中药材抽验不合格率居高不下，在这当中有大部分是一些不法分子有意造假（重金属超标虫草、模具压制人参、土豆染色做成天麻等)，售假。有则是中药材保管发生变质。中药材判别不含有一定中药判别常识是极难判别真伪。安排这次培训目标，为了方便从药人员能够对中药材进行简单快速判别，依据中药一些成份特征，快速判别一些中药。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第3页一、药用植物学知识1、药用植物分类现以黄连为例示其分类等级以下:界………………植物界

门………………被子植物门

纲………………双子叶植物纲

目………………毛茛目

科………………毛茛科

属………………黄连属

种………………黄连中药饮片和检验知识培训专业知识培训第4页2.植物组织类型

２.１分生组织：顶端分生组织、侧生分生组织、居间分生组织

位于植物体生长部位，因为分生组织细胞不停分裂、分化，使植物体得以生长

２.２薄壁组织：基本薄壁组织、同化薄壁组织、贮薄壁组织藏、吸收薄壁组织、通气薄壁组织

在植物体内担负着同化、贮藏、吸收、通气等营养功效，又称营养组织

２.３保护组织：表皮(毛茸（腺毛非腺毛）、气孔（平轴式直轴式不等式不定式环式）)周皮（由木栓层、木栓形成层和栓内层三种不一样组织复合体）

保护着植物内部组织，控制和进行气体交换，预防水分过分散失，病虫侵害以及机械损伤等。

２.４机械组织：厚角组织

厚壁组织：纤维、石细胞

２.５输导组织：管胞与导管；筛管、伴胞与筛胞

２.６分泌组织：外部分泌组织腺毛蜜腺

内部分泌组织:分泌细胞分泌腔（分泌囊）分泌道和乳汁管中药饮片和检验知识培训专业知识培训第5页3、植物细胞后含物３.１淀粉粒三种类型单粒淀粉复粒淀粉及半复粒淀粉３.２菊糖：多含在菊科和桔梗科植物细胞中，山茱萸果皮中亦有。能溶于水，不溶于乙醇。可将菊糖材料浸入乙醇中制片，置镜下观察看见球状、半球状或扇形菊糖结晶。３.３蛋白质以糊粉粒状态存于细胞任何部分，糊粉粒和淀粉粒常在同一细胞中相互混杂。３.４脂肪和脂肪油：它是由脂肪酸和甘油结合而成脂。在常温下呈固态或半固态称为脂。如柯柯豆脂；呈液体称为油，如大豆油、芝麻油、花生油等。存在于植物种子里，可达种子干重45%-60%；脂肪和脂肪油加苏丹Ⅲ试剂显橘红色、红色或紫红色；加紫草试液显紫红色；加四氧化锇显黑色。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第6页４、晶体：草酸钙结晶和碳酸钙结晶４.１草酸钙结晶：４.１.１单晶又称方晶或块晶豆科植物（甘草、苦参、葛根．红芪、合欢花等)、芸香科（黄柏)中常见４.１.２针晶普通存在于含粘液细胞中如薯蓣科、天南星科半夏白附子兰科白及石斛天麻百合科知母麦冬玉竹４.１.３簇晶蓼科（大黄、何首乌、拳参)——棱角短钝；五加科（人参、竹节参、三七)——棱角坚；

毛茛科（白芍、赤芍、牡丹皮)、桑科桑叶——簇晶排行４.１.４砂晶茄科（颠茄、地骨皮)苋科（牛膝)４.１.５柱晶鸢尾科（射干)

４.２碳酸钙结晶多存在于植物叶表层细胞中中药饮片和检验知识培训专业知识培训第7页５、

维管束及其类型

维管束是一个束状结构，贯通在植物体各种器官内，彼此相连形成一个输导系统，同时对植物器官起着支持作用。５.１外韧维管束:韧皮部位于外侧，木质部位于内侧，中间没有形成层。如单子叶植物茎维管束５.２双韧维管束:木质部内外两侧都有韧皮部。常见于茄科、葫芦科，夹竹桃科、萝摩科，旋花科桃金娘科等茎中维管束５.３周韧维管束:木质部位于中间，韧皮部围绕在木质部四面。如百合科、禾本科棕榈科、蓼科及蕨类一些植物５.４周木维管束:韧皮部位于中间，木质部围绕在韧皮部四面，常见于少数单子叶植物根状茎，如菖蒲，铃兰等。５.５辐射维管束:韧皮部和木质部相互间隔成辐射状排列，并形成一圈，总称为辐射维管束。是单子叶植物根和双子叶植物次生结构特点。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第8页二

、中药判定学知识1、中药加工及贮藏１.１惯用加工方法：拣洗切片蒸煮烫发汗熏硫（山药、白芷、干燥前用硫磺熏制，预防霉烂)干燥１.２贮藏保管中发生变质现象１.２.１虫蛀：果实种子类，花、叶类及含糖类易虫蛀。普通含脂肪油（苦杏仁桃仁等)淀粉（白芷山药)或蛋白质（蕲蛇等)易虫蛀，而含辛辣成份药材，普通不易虫蛀如荜茇、胡椒、花椒等。通常温度在16-35℃、湿度在60%以上、药材含水量在11%以下是虫害生长有力条件。１.２.２生霉：

大气中从有多量霉菌孢子，如散落在药材表面。在适当温度和湿度下，溶蚀药材内部组织，促使腐败、变质、失去药性。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第9页１.２.３变色

各种药材都有其固有颜色，贮藏不妥颜色改变，药材也可能变质。含鞣质类药材受到氧化，聚合等作用，产生大分子有色化合物，使原来色泽加深。１.２.４走油：

药材受潮、变色、变质后，表面展现油样物质改变；普通含脂肪油、挥发油或糖类成份药材，如苦杏仁、桃仁、当归、肉桂、麦冬、枸杞子等会产生"走油”现象。１.２.５其它。

有些药材在贮藏过程中所含有效成份会自然分解或起化学改变而降低疗效，如绵马贯众，不能久贮。樟脑冰片易挥发；芒硝(Na2SO4·10H2O)胆矾(CuSO4·5H2O)轻易风化，应密闭保留。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第10页1.3贮藏及保管：

常温0℃－30℃

阴凉库不超出20℃

冷库2℃－10℃（相对湿度45％－75％)

１.３.１保管制度及保管经验

应有严格日常保管制度，保持经常性检验，确保库房干燥、清洁、通风。注意外界温湿度改变，及时采取有效办法，调整室内温湿度。药材入库前应详细检验有没有虫蛀，生霉现象，要经多名经验丰富专业人员过四关：一看性状，二闻气味，三品尝，四查药材产地、药用部位是否符合（也称“放心”程序)。凡有问题包件都应进行适当处理，只有合格包件才能入库贮藏。贮藏方法可依据药材特征分类保管。轻易吸湿霉变中药尤其注意通风干燥，必要时可翻晒或烘烤；含淀粉、蛋白质、糖类等营养成份易虫蛀中药应贮藏于容器中，放置通风干燥处，并经常检验。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第11页保管经验：牡丹皮与泽泻共存，牡丹皮不易变色，泽泻不易虫蛀；花椒、细辛与有腥味动物药共存，可预防动物药虫蛀。１.３.２贮藏保管方法：（a)充分干燥，预防虫卵繁殖。中药材切制成片、段、节、丝后，改变了原药形状，增大了表面积，极易受潮。饮片含水量在１１％以上，温度在１６℃－３５℃之间，药品中未除尽虫卵会在此条件下化为幼虫。故中药饮片必须充分干燥，以杀灭虫卵，此为储存基本要求。荆芥、薄荷、川芎、木香、羌活等芳香性药品不宜暴晒高温干燥，宜于３０℃－３５℃低温干燥后入库。花类含芳香油及花蜜成份，极易被虫蛀，应在梅雨季节之前分包压紧，烤至八成干，趁花热软时贮于石灰缸内，忌晒，以免散瓣退色。（b)控制温、湿度，预防发霉变质。空气中存在着大量霉菌孢子，若散落在药品表面，遇适当温湿度就会萌发成菌丝，产生蛋白酶，侵入药材组织内部造成药材霉烂变质。当药品内部水分蒸至表面，温度在20℃-35℃时，霉菌开始繁殖。故饮片贮藏应低温、通风、干燥、控制含水量在8%-10%，库房相对湿度在65%以下，温度在25℃以下为宜。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第12页（c)选择密闭容器，预防氧化变色。中药材天然色泽是质量好坏标志之一，色泽变异，说明药品内在质量已发生了改变。如含有苷类、羟基蒽醌类及鞣质等成份药品，因为贮藏过久或经常翻晒，其中所含有酶在适宜温度下，会发生氧化还原反应，使药材色泽发生改变。含有蛋白质药品，氨基酸与还原糖作用后也能引发中药变色。轻易变色药材如花类、全草、叶类等应贮于避光密闭容器中。如苏合香、藏红花等必须保持湿润状，不然易变色。加酒、醋炮制饮片，如大黄、黄芩、延胡素等，宜置密闭容器内，以防酒、醋味挥散而失效。盐制品易受潮或高温后析出盐分，故宜放阴凉干燥处，切忌用金属容器存放。（d)防止高温，克服走油现象。一些中药饮片因为受潮或在高温下表面溢出油状物，俗称走油。如含脂肪杏仁、桃仁、郁杏仁、柏子仁等，含挥发油当归、肉桂等，含有黏液性糖质麦冬、天冬、太子参、枸杞子等也轻易走油。干燥时不宜用高温烘烤或暴晒，宜贮于阴凉干燥处。又如种子、果实类含淀粉、脂肪油较多薏苡仁、麦芽、莱菔子、苏子等，炮制后可待蒸气散尽趁热装入容器内贮存；含油较多药品宜凉透干燥后，置容器内盖紧，放于阴凉干燥处。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第13页2.中药饮片性状判定法２.１形状指干燥药材形态。主要有片、丝、块、段、粒等性状，如观察皱缩全草、叶或花类，可先浸湿使软化，展平。２.２大小指药材长短、粗细和厚度，测量多用毫米刻度尺。如泽泻片比黄芪片大，当归头片比当归片大；甘草斜片比直片大。对细小种子，可放在毫米方格线纸上，每１０粒为一组测量平均值。２.３色泽应在日光灯下或常光下观察。如用复色，以后一个色调为主。药材色泽不但帮助判别真伪，其色泽深浅，有时也反应其质量优略，如丹参色红；黄柏色黄；玄参色黑。紫草深紫色者，紫草素含量较高。桔梗皮部白色，木部黄色，习称"金井玉栏”等。２.４表面特征：样品不作处理，直接观察或借助于放大镜观察。观察表面特征时，尤其是从属物，要注意其颜色、性状、纹理、分布等特点。如片面上何首乌"云锦花纹”、银柴胡"珍珠盘”、粉防己"车轮纹”、黄芪"菊花心”；段上纵纹、纵沟；丝、块上毛、刺等各种附生物形态、分布等。必要时可对光透视。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第14页２.５质地指药材软硬、坚韧、疏松、致密、黏性或粉性等。软硬坚韧多凭手感而定，疏松致密黏性粉性等全凭眼睛仔细观察。如山药片粉性足，郁金片坚硬，通草质松软，蜜炙饮片黏性大等。２.６断面包含折断时横断面纹理特征。如杜仲折断有橡胶丝（盐炙后橡胶丝不显著)；甘草易折断，断面纤维性等。２.７气味；普通可直接嗅闻或口尝。气味较弱者可采取折断或揉搓方法，也有需要热水湿润后才能闻到。２.８水试将药材浸泡一定量水中，观察形态改变。菟丝子吐丝现象２.８.１观察在水中沉浮如：丁香沉于水中为佳；进口沉香能沉于水或半浮半沉于水中，国产沉香大多不能沉于水中。２.８.２观察颜色改变如：西红花浸入水中，可见橙黄色成直线下降并逐步扩散，水被染成橙黄色，柱头呈喇叭状；熊胆粉末投入清水，即在水面旋转，并展现黄线下沉而不扩散；栀子水浸液为鲜黄色；玄参水浸液为淡黑色；秦皮水浸液日光下显碧蓝色荧光。２.８.３观察有没有粘性如：海藻水浸后藻体表面粘滑；葶苈子、车前子加水浸泡种子表面粘滑，水煮后溶液有粘性。２.８.４观察膨胀情况如：胖大海水浸泡快速膨大成海绵状，达原体积4倍，假胖大海水浸泡膨胀较慢，仅能达原体积2倍；蛤蟆油水浸可膨胀至１０~１５倍。２.８.５观察其它特殊改变如：菟丝子水浸加温后便逐步出现吐丝现象（种皮开裂可露出黄白色卷旋状胚，形如吐丝。)；水牛角热水浸泡有腥臭气；蟾酥遇水即泛出白色乳状液等。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第15页２.９火试将药材加热或燃烧观察产生现象。如火上燃烧海金沙，有爆鸣声且有闪光，而血竭于滤纸上烘烤，熔融呈血红色。２.９.１嗅气饮片燃烧过程中会产生各种不一样气味，如：砒石粉末燃烧时有蒜臭气;血竭燃烧时呛鼻，有苯甲酸样香气。２.９.２听声饮片燃烧会发出不一样声音，如：麝香用火烧时有轻微爆鸣声;海金沙燃烧时会出现爆鸣声及闪光现象。２.９.３观烟雾饮片燃烧过程中或燃烧后会产生不一样颜色烟雾，如：青黛用火烧时有紫红色烟雾出现;松香燃烧时发出粽黑色浓烟;马勃燃烧熄灭产生大量白色浓烟。２.９.４看颜色饮片在火焰上燃烧或燃烧后会显示不一样颜色，如：麝香灰化后残渣呈白色或灰白色;芒硝在火焰上燃烧火焰呈黄色;自然铜燃烧时产生蓝色火焰。２.９.５注意其它改变如：沉香燃之有油渗出;雄黄燃之易熔融成红紫色液体等。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第16页3其它判别方法３.１显微判别指用显微镜来观察饮片组织结构和粉末中组织形态及内含物特征等等，从微观角度判别饮片真伪优劣。３.２理化判别指用物理、化学或仪器分析方法，对饮片中所含成份进行定性。主要是经过显色、沉淀、升华物等饮片成份特殊反应，从内在质量方面判别饮片真伪优劣。３.３含量测定指对饮片中有效成份或主要成份含量测定，这是判别饮片和评价饮片质量最可靠、最准确方法。对药效成份明确饮片，要求其含量指标，并进行检测非常必要。三

、中药饮片商品知识：

中药材品种据全国中药资源普查记载已达12807种，其中植物药11146种，动物药1581种，矿物药80种;版药典收载538种，其中植物470个;药动物药48个;矿物药20种;陕西省中药饮片第一册收载180个药材品种，323个饮片品种。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第17页1.中药饮片概念

所谓中药饮片，是指在中医药理论指导下，可直接用于调配或制剂中药材及中药材加工炮制品。这个概念表明，中药材、中药饮片并没有绝正确界限，中药饮片包含了部分经产地加工中药切片（包含切段、块、瓣)，原形药材饮片以及经过切制（在产地加工基础上)、炮炙饮片。对于前两类，管理上应视为中药材，只是依据中医药理论在配方、制剂时作饮片了解。而管理意义上饮片概念应了解为:“依据调配或制剂需要，对经产地加工净药材深入切制、炮炙而成成品称为中药饮片”。当前，中药饮片概念大致有三种观点：

（１）依据“饮片”一词出处，即清代吴仪洛在《本草从新》中“药肆中俱切为饮片”说法，很多人认为“凡动过刀即为饮片”；（２）一些中药材专业市场和城镇集贸市场药材经营户认为只有经过复杂加工炮炙工序成品才是饮片，仅经净制、切制方法加工而成应称为“切片”，而不应按“饮片”管理；三、依据《药典》定义，“饮片是指经过加工炮制中药材，可直接用于调配或制剂”。中药饮片是中药材经过按中医药理论、中药炮制方法，经过加工炮制后，可直接用于中医临床中药。

中药饮片和检验知识培训专业知识培训第18页2.考究使用道地药材：道地药材是药材中精华，它是指那些历史悠久，品种良好生产及加工技术成熟，质量优良著名药材。产于河南怀庆府“四大怀药”怀地黄怀牛膝怀山药怀菊花产于浙江“浙江八味”浙贝母浙玄参杭菊花杭白芍杭麦冬山茱萸延胡索白术产于东北“三宝”人参辽细辛北五味子产于云南“云药”云木香云茯苓产于贵州“贵药”贵天麻朱砂产于四川“川药”川乌川厚朴川黄柏产于广东

广西及海南“广药”广豆根阳春砂产于陕西

甘肃青海新疆及内蒙西部“西药”西大黄岷当归藏虫草产于湖北

湖南江苏安徽江西福建台湾“南药”江枳壳宣木瓜建泽泻产于河北

山东山西内蒙道地药材“北药”潞党参北柴胡多伦赤勺中药饮片和检验知识培训专业知识培训第19页3、适宜选取细贵药材：主要是指药材资源少，疗效显著，价格昂贵中药材。如人参鹿茸麝香牛黄虫草西红花海龙海马蛤蚧羚羊角三七天麻4.按要求使用毒性药材1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)1砒石（红砒、白砒)中药饮片和检验知识培训专业知识培训第20页麻醉中药有罂粟壳；使用时必须按照国家相关法规要求进行特殊管理。5.了解进口药材品种主产地域西洋参、鹿茸、“乳香、没药及血竭”是我国主要进口药材。经云南瑞丽口岸进入我国缅产药材主要有：补骨脂、槟榔、大腹皮、酸枣仁、壳绿砂、绿净砂、蔓荆子、黄草、郁金、木蝴蝶、姜黄、干姜、白扁豆、儿茶等30余种，我国需求量较大品种有十几个。

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薄层判别相关知识一、概述

薄层色谱法,系将适宜固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,与适宜对照物按同法所得色谱图作对比,用以进行药品判别、杂质检验或含量测定方法。1.仪器与材料(1)玻板除另有要求外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm规格,要求光滑、平整,洗净后不附水珠,晾干。(2)固定相或载体最惯用有硅胶G、硅胶GF[254]、硅胶H、硅胶HF[254],其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F[254]等。其颗粒大小,普通要求直径为10～40μm。薄层涂布,普通可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量粘合剂,普通惯用10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5～0.7％)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。也有含一定固定相或缓冲液薄层。(3)涂布器应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求均匀薄层。(4)点样器。(5)展开室应使用适合薄层板大小玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密盖子,除另有要求外,底部应平整光滑,应便于观察。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第22页2.操作方法(1)薄层板制备除另有要求外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面气泡后，倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm)，取下涂好薄层玻板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟，即置有干燥剂干燥箱中备用。使用前检验其均匀度（可经过透射光和反射光检视)。(2)点样除另有要求外，用点样器点样于薄层板上，普通为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径应小于或等于3mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。(3)展开展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶盖，使系统平衡。将点好样品薄层板放入展开室展开剂中,浸入展开剂深度为距薄层板底边0.5～1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,待展开至要求距离(普通为10～15cm),取出薄层板，晾干，按各品种项下要求检测。(4)如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量，则可用薄层扫描法。薄层扫描方法，除另有要求外，可依据各种薄层扫描仪结构特点及使用说明，结合详细情况，选择吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。因为影响薄层扫描结果原因很多，故应在确保供试品斑点在一定浓度范围内呈线性情况下，将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描，进行比较并计算定量，以降低误差。各种供试品，只有得到分离度和重现性好薄层色谱，才能取得满意结果。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第23页二、薄层判别操作规程1.方法原理

薄层色谱是一个微量分析分离过程，它将样品点在以玻璃板或铝、塑料等片材为载体多孔吸附剂薄层固定相上,利用流动相在特定展开室中将混合物中组份推移到不一样距离处，在色谱展开整个过程中，样品成份受到正反不一样力作用。

(1)流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。

(2)样品与固定相相互作用是指组份在移行过程中因为偶极-（诱导)-偶极相互作用，氢键和范德华力作用而产生不一样程度延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。

因为样品组份与流动相和固定相之间相互作用力程度不一样，整个毛细管流动过程中分离运动都在进行。基于这点，TLC系统（流动相和固定相)必须与样品很好地匹配。

用显色试剂处理，许多组份可在日光或紫外灯光下检视。色谱可用肉眼或使用光密度计和摄影机统计或影像系统方法来评价。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第24页2.薄层板2.1手工自制玻璃板要求:用于制备薄层板玻璃板要求表面光洁、平整，最好使用厚薄1~2mm优质平板玻璃，普通窗玻璃普通不宜用于制作薄层板，玻璃板需洗净至不挂水，晾干，贮存于干燥洁净处备用。玻璃板重复使用时，应注意经惯用洗液及碱液清洗，保持玻璃板面光洁是确保薄层板质量最基本要求2.2制作方法:除另有要求外，将1份吸附剂加适量水（如1份硅胶G普通加3份水)，在研钵中用研钵沿一个方向小心研磨至成均匀有适当粘稠度胶浆,马上倾入涂布器中,均匀地向前推进涂布在玻璃板上;或按照不一样涂布器要求操作涂布;涂布好薄层板于室温下在水平台上晾干,再在要求温度(普通为105℃~110℃)下烘约30分钟活化,贮于干燥器中备用。薄层板厚度普通为0.25~0.5mm.。2.2.1铺板

铺板用匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板轻易出现拖动或停顿造成层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。匀浆配比普通是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆时间，依据经验来定，与空气湿度相关，普通经过拿起研棒时匀浆下滴情况来判断，越稠越难下滴。匀浆稀稠除影响板平滑外，也影响板涂层厚度，深入影响上样量。涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么显著。通常，板质量对薄层判别影响不是很大，影响最大是展开剂配制和展开系统饱和。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第25页2.2.2点样

尽可能用小点样管。假如有足够耐性，最好只用1微升点样管。这么，点斑点较小，展开色谱图分离度好，颜色分明。样品溶液含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。样品溶液溶剂普通是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。点好样薄层板用电吹风热风吹干或放入干燥器里晾干。2.2.3展开剂配制

选择适当量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，假如分层，取用体积大一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。混合不均匀和没有分液展开剂，会造成层析完全失败。各组成溶剂百分比准确度对不一样分析任务有不一样要求，尽可能到达试验室仪器最高准确度，比如:取1ml溶剂，应使用1ml单标移液管，移液管应符累计量认证要求，尽管多数时候这不是必须。2.2.4展开系统饱和

普通使用是双槽展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨水或硫酸。把待展开板放入两槽间平台，斜架着，盖上展开缸盖子。让展开剂蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气到达饱和，预防边缘效应，饱和时间在半个小时左右。展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气吸附平衡影响不大，当然动作应该尽可能轻、快中药饮片和检验知识培训专业知识培训第26页2.2.5温湿度控制

温湿度对薄层影响都很大。不冻结前提下，通常温度越低分离越好，较难分离需在低温下分离，比如人参皂苷。湿度影响，预计主要是影响薄层板吸附能力，造成选择性（容量因子)改变，湿度应依据实际情况确定。温度控制使用空调器或冰柜，湿度控制是经过在另一展开槽放置对应浓度硫酸。2.2.6显色

喷显色剂显色最主要是有好雾化器。3.样品点样3．1点状点样和条带状点样

每次点样前，TLC/HPTLC板应在正常光线下和紫外灯下用肉眼检验薄层损伤情况和杂质，只有没有损伤、清洁TLC/HPTLC板方可使用。样品可进行点状或条带状点样。要想取得最正确薄层分辨率，必须确保移行方向中起点要小，常规TLC薄层点状点样每次点0.5至5微升，相比之下，HPTLC薄层最大点样量为1µl。点样量较大样品可使用自动化装置点样，喷雾成条带状是一个能够点样量大而同时又能促成最有效分离点样方法。在常规操作过程中，人工点样普通使用微量毛细管（0.5/1/2/3和5µl)，点样时毛细管必须完全充满和完全排空，要以垂直方向小心接触TLC/HPTLC板面，不要损伤薄层，受损薄层会造成溶剂不规律地流动而在色谱上产生失真TLC谱带。

中药饮片和检验知识培训专业知识培训第27页3.2样品点样位置

起点最正确位置距侧边2.0cm。起点下缘最小距离点样基线距底边2.0cm。两个起点之间距离必须令平行移行主成份不会相互触及。点状点样时原点直径应小于或等于3mm（高效板原点直径应更小),条带长度由点样样品体积或样品种类和相对于板尺寸点样数目来决定。到板侧边距离必须足够大以防止分离区失真变形。4.层析4.1展开室4.1.1直立式双槽展开室含有节约溶剂、便于预平衡、可控制展开箱内湿度等优点4.1.2水平展开室能够从薄层板两侧向中间水平地展开，这么可使一块薄层板所承受样品个数比常规上行展开薄层板增加一倍。4.1.3自动展开室(AMD)可使用五种溶剂对同一薄层进行屡次展开，自动控制预饱和、展开方式、展开距离和干燥条件，分离效率比传统方式提升三倍（可在80mm之内分离40种成份)，符合GLP/GMP要求。4.2.溶剂

使用溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯”，溶剂组成采取体积量比（如正丁醇-冰乙酸-水=4：1：1，V/V/V)，或者绝对量（如18ml甲苯+2ml甲醇)。其总量应足以使TLC/HPTLC板浸入深度约为5mm。展开剂要求新鲜配制，不要屡次重复使用,如需分层，则按要求放置分层后取需要一相（上层或下层)，备用。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第28页5.参数5.1温度

薄层色谱分析普通在室温中进行。在这过程，温度在20-25ºC算不上是临界值。在这过程中无短期温度波动才是更为主要（防止抽风)。展开室应放置在无直射阳光和不通风处。温度波动对层析结果不利，故将展开室放在靠近窗口或热源处是欠妥。5.2空气湿度

空气湿度极高或极低主要影响有非极性溶剂体系无机涂层。相对空气湿度高于70-80%会影响薄层钝化，使Rf值增加。样品点样后，TLC薄层可置放在适当硫酸和水混合物上面不少于30分钟，调整至指定相对湿度。相关这方面更多资料可从HPTLCVario系统操作手册中取得。

另首先，在样品点样前，TLC/HPTLC板可在105ºC再活化30分钟进行干燥。然后薄层必须用一块玻璃板保护起来，只有起点区露出方便于样品点样。

若空气太干燥，可在干燥器中将TLC/HPTLC薄层置于水上方以到达所要求情况。

确定适当层析条件有效方法（用要求湿度，溶剂蒸汽或溶剂调整使薄层到达要求情况)是使用HPTLCVario体系。

控制相对湿度用硫酸溶液下表：

相对湿度所需硫酸浓度（V/V)

硫酸（ml)+水（ml)

32%47%42%58%65%72%88%68.010050.010057.010039.510034.010027.510010.8100中药饮片和检验知识培训专业知识培训第29页6．层析后衍生作用

若层析板分离物质肉眼看不见又不能被紫外光活化，需加试剂方能显色或发射荧光者，则需使用适当试剂浸渍或均匀喷洒于薄层板面上，直接观察或加热显色后观察。加热显色者须注意加热时间和温度，尤其含羧甲基纤维素钠薄层板，加热温度过高或时间过长，轻易引发板面焦化，如用硫酸等显色剂更易造成板面炭化而影响显色效果。有成份加试剂后，如挥发油成份经香草醛硫酸显色，加热温度和时间长短不一样或放置时间不一样均可能使斑点显色有所改变。

有品种可熏以试剂或试液蒸气（如碘蒸气、氨蒸气)显色。6.1喷雾

试剂溶液以气溶胶形式均匀地喷洒在薄层上。电动TLC喷雾器用最少试剂溶液产生几近理想气溶胶。6.2浸渍

使用适当设备如色谱浸渍设备III（ChromotogramImmersionDeviceIII),TLC/HPTLC板浸渍含有重现结果。经过设定垂直方向速度（进入，抽出)和要求停留时间，浸渍条件可被准确地标准化。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第30页7．检测7.1定性分析（同一性试验)在相同状态下（相同类型TLC/HPTLC板、相同溶剂体系组成、相同组份点样体积和其它TLC设备系统)，样品成份Rf值、颜色、与专用或特殊基因衍生化试剂反应和参考物或标准物在同一TLC/HPTLC板同时层析所得结果相符时，未知物就可认为是存在而被判别出来。分析结果能够采取照片，照片复制品，影像统计（如：CAMAG薄层色谱数码成像系统)或TLC扫描仪方法统计下来。

为增加测试物与参考物同一性可信度，采取TLC扫描仪实时统计其紫外光和可见光图谱并进行比较。7.2定量分析

（仪器：CAMAGscanner-3；详细操作请参考操作手册或教学软件)

定量分析采取光密度扫描法来评价。用winCATS软件控制薄层色谱扫描仪以及进行扫描结果数据处理，计算出各成份峰高和峰面积及其平均值和离散系数（CV)。经过单水平或多水平校准计算出结果。最终以汇报形式将全部扫描参数、原始资料及图像结果保留及打印。

扫描狭缝宽度依据被测成份斑点大小来调整（1)点状点样得到TLC中各成份，扫描其全宽度；（2)条带状点样，通常能够扫描其色谱带同心部分50-70%。

物质扫描波长能够经过光谱扫描来决定。

TLC/HPTLC板空白部位漫射反射光用光电倍增器（PM)来搜集并定其值为10%。扫描吸光物质时，其吸收伴随物质量而增加。

对于含有荧光或可转变成具旋光性衍生物物质测定。光源普通使用发射光谱在254-578nm之间高压汞蒸汽灯，在254，302，313，366，405，436，546和578nm处有尤其高强度谱线。吸收了选择性激发波长后TLC中各成份发射出较长波长荧光由光倍增器统计下来，使用锐截止滤波器或窄带滤波器将会阻止TLC/HPTLC板反射激发波长光抵达光电倍增器。和吸附测定一样，荧光强度作为板上定位函数作图得模拟曲线（荧光定位曲线)。TLC扫描仪测定原理在相关设备文件中有报导。

荧光测定比吸收测定优越在于以下几点：（1)检出极限低1-3个数量级；（2)在较宽浓度范围内校准曲线呈线性；（3)选择性较高。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第31页8.影响薄层色谱分析原因（１)样品预处理及供试液制备

制备样品供试液所用溶剂溶解度不宜太大，粘度不宜太高，沸点适中。如一捻金中人参二醇及人参三醇判别，若用稀酸水解后直接用氯仿萃取，点样层析，色谱因大黄成份干扰，斑点极难识别，经碱性氧化铝小住吸附净化后，除去了大部分干扰，结果色谱清楚，人参二醇及人参三醇很轻易辩认。（２)薄层色谱点样技术

点样是薄层色谱分析非常关键步骤。它既关系到能否得到能够重新有良好分离度薄层色谱，也关系到定量测定结果准确。（３)吸附剂活性与相对湿度对薄层色谱影响（４)溶剂蒸气在薄层色谱中作用

应注意：预平衡、预饱和、完全饱和三者区分

只需要展开剂蒸气在展开箱中预平衡一定时间，称预平衡

预吸附：薄层板干燥板面对展开箱空间气体分子任何程度吸附称预饱和

吸附饱和：薄层板干燥板面与展开箱饱和气体空间到达平衡状态称完全饱和（５)薄层色谱优化及溶剂系统（６)温度对薄层色谱影响（７)影响薄层色谱其它原因

操作技巧和熟炼程度以及全部器材、溶剂、试剂等质量。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第32页高效液相相关知识一、HPLC应遵照几条标准1、一次性标准：当系统出现了故障，可试探地改变一些状态，一次改变一个参数。比如限制峰拖尾问题，可依次改变流动相换保护柱换分析柱。2、二次比较标准：动手之前已经找到处理方法。比如在进样过程中发觉内标物峰度值低，可重新进样，假如是偶然变低，是否定量管里进了气泡。此规则可用于考查系统改变后情况。更换了流动相后在正式进样前可测定两次标准品以检验保留时间稳定情况和色谱峰稳定性。3、取代规则：用好部件换下可疑部件，是查找故障最好方法。4.换回规则：此规则和取代规则一起利用，好部件取代可疑部件后情况并未得到改进，应重新换上原部件。这条规则仅适合单一故障。换回规则不适应于以下情况：（1）取下是新部件易损坏（如泵密封圈）；（2）部件价格低（如柱内衬过滤片）（3）重新装上原部件要冒损坏风险；（4）定时更换部件。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第33页5参考条件规则：通常由两种参考条件（1)标准参考条件（2)试验参考条件。标准参考条件也叫标准试验条件。是从一个系统到另一个系统易于验证条件。试验参考条件适合用于检验正常系统天天工作情况。天天能够打印两张校正用色谱图作对照，检验保留时间，峰宽、系统压力等方面改变。发觉峰斜率、色谱柱塔板数和其它参考值与原来色谱图相比有了变换，系统运行中可能发生了问题。6统计规则：在每次维护和故障排除后都做统计。每台仪器都应备有维护纪录本，内容包含日期故障部位现象产生原因，处理方法和结果等。试过或换下部件都要贴上标志。7预测标准平时多保养，系统会降低故障，消除连锁性地损坏。比如：因平时不注意保养，泵密封圈坏了，造成流动相渗漏，会腐蚀泵和其它部件。天天开始工作或结束工作时发觉灯寿命引发基线漂移时换灯，以免停机造成损失。8缓冲液规则：停机时一定要洗净系统中缓冲物。系统中缓冲液残留会造成腐蚀，磨损和阻塞。理想冲洗液是不含缓冲物相同组成流动相。不要让纯水贮藏于系统中，以防生长细菌。冲洗程序：纯水冲洗30－60（ml\min)再用甲醇冲洗30分钟后关机。千万不能一开机就用有机溶剂冲洗。不然无机盐就会沉淀在系统中，造成不良后果。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第34页二、HPLC故障预防1、能够定时更换密封垫圈（预防性保养）；系统常因为保护柱问题而产生压力升高，一旦发觉系统压力升高，就能够换上新保护柱（预防故障发生）。2.统计建立：（1）系统使用统计（2）色谱柱统计（3）个人试验统计或测定样品统计。即使我们不可能完全预防故障出现，但能够降低所以而造成麻烦，每次试验在系统统计本上都要有仪器情况与维护统计。(1)系统使用情况：A．系统中各组件商品牌号，型号，系列号，购进日期，安装日期，每个组件许可证信息（自动进样器泵色谱柱检测器数据处理装置等）。B.依照表1－3标准条件测量标准参数和标准色谱图。要注意流动相流速压力温度检测器参数样品量等。中药饮片和检验知识培训专业知识培训第35页流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流动相极性大于固定相极性色谱（反相)流