高等医药院校教材药物分析

高等医药院校教材

（第一~三版)

主编：安登魁

中国药科大学、博士生导师

人民卫生出版社药物分析高等医药院校教材药物分析第1页普通高等教育"九五”国家级重点教材药品分析供药学类专业用第四版刘文英主编人民卫生出社

1996年6月高等医药院校教材药物分析第2页普通高等教育"十五”国家级规划教材药品分析供药学类专业用第五版刘文英主编人民卫生出社

年7月高等医药院校教材药物分析第3页普通高等教育"十五”国家级规划教材中药制剂分析

供中药类专业用中国中医药出社

年１月高等医药院校教材药物分析第4页

绪论一、分析性质和任务

药品分析是我国药学专业要求设置一门主要专业课程,是整个药学科学领域中一个主要组成部分。

它主要利用化学、物理化学或生物化学方法和技术研究化学结构已经明确合成药品或天然药品及其制剂质量控制方法,也研究中药制剂和生化药品及其制剂有代表性质量控制方法。药品分析任务是静态常规检验利用当代分析方法和技术,深入到工艺流程、反应历程、生物体内代谢过程和综合评价动态分析监控中。高等医药院校教材药物分析第5页二、国家药品标准

药典是国家监督管理药品质量法定技术标准。

《中华人民共和国药典》为我国药典全称,简称《中国药典》，其后以括号注明是哪一年版，如最新版药典能够表示为中国药典（年版）；如用英文表示，则ChinesePharmaco--poeia（缩写Ch.P）。

建国以来，我国已经出版了七版药典（1953、1963、1977、1985.1990、1995和年版）。高等医药院校教材药物分析第6页

使用药典需要注意问题：1)、立法作用。2)、与化学试剂标准不能混同使用。3)、符合药典质量标准药品是合格品而不是优质品。因为:药典是药品最低标准而不是最高标准。4)、新版药典生效之日起、旧版药典即自动失去其法律意义。高等医药院校教材药物分析第7页

主要国外药典

美国药典（TheUnitedStatesPharmacopoeia，缩写为USP)年为24版。

美国国家处方集（TheNationalFormulary，缩写为NF)年为19版。

英国药典（BritishPharmacopoeia，缩写为BP)，当前版本为年版，本书以BP（)表示。

日本药局方，当前为第十三版更正版，本书缩写为JP（13)。高等医药院校教材药物分析第8页

欧洲药典（EuropeanPharmacopoeia，缩写为Ph.Eup)，当前为第三版，分为三卷：第一卷（1979)为普通分析方法；第二卷（1981)和第三卷（1998)均为质量标准规格。

国际药典(TheInternationalPharmacopoeia，缩写为Ph.Int)

高等医药院校教材药物分析第9页三、药品质量管理规范

《药品非临床研究质量管理要求》（GoodLaboratoryPractice，GLP)

《药品生产质量管理规范》（GoodManufacturePractice，GMP)《药品经营质量管理规范》（GoodSupplyPractice，GSP)

《药品临床试验管理规范》（GoodClinicalPractice，GCP)GLP、GMP、GSP、GCP四个科学管理规范执行，加强了药品全方面质量控制，有利于加速我国医药产业发展，提升了药业国际竞争力。《分析质量管理》（AnalyticalQualityControl，AQC)。

高等医药院校教材药物分析第10页四、药品分析课程学习要求

学生经过《药品分析》第五版教材学习，应努力掌握以下六个方面基本内容：1、药典基本组成与正确使用：2、药品判别、检验和含量测定基本规律与基本方法；3、从药品结构分析出发，利用化学、物理化学以及其它必要技术与方法进行质量分析基本方法与原理；4、化学药品制剂分析特点与基本方法。生化药品和中药制剂质量分析普通规律与主要方法；5.药品质量标准制订基本标准、内容与方法；6、药品质量控制中当代化分析方法与技术。

高等医药院校教材药物分析第11页

在药品分析整个学习过程中,要求学生学会自学,善于独立思索,既重视药品质量分析基础理论知识学习,也重视基本试验技能严谨训练,同时加强创新能力基本素质培养。所以学生不但应研究探讨药品化学结构、理化特征、存在情况与分析方法选择之间关系,还应重视不一样分析样本选取最正确分析方法能力培养,最终要求学生在我国药品研究从仿制为主到创制为主历史性转变中,能够具备为提升药品质量所需独立分析问题和处理问题能力。

高等医药院校教材药物分析第12页

五、药品分析主要参考书目介绍（一）、书籍1、〈药品分析〉（第一版）、（第二版）、（第三版）、（第四版）人民卫生出版社、济南出版社2、体内药品分析3、生物药制分析4、医院药制分析5.中药制剂分析6、药典注释7、中成药分析（二）、期刊〈药学学报〉、〈中国药学杂志〉、〈药品分析杂志〉、《中国中药杂志》、《中草药》、《中成药》、《中药材》、〈中国当代应用药学杂志〉、〈中国医院药学杂志〉、〈中国试验方剂学杂志〉等等。

高等医药院校教材药物分析第13页

第一章药典概况

一、中国药典内容与进展

《中国药典》是国家监督管理药品质量法定技术标准。中国药典内容分为凡例、正文、附录和索引四部

。（一)凡例“凡例”是解释和使用《中国药典》正确进行质量检定基本标准，并把与正文品种、附录及质量检定相关共性问题加以要求，防止在全书中重复说明。高等医药院校教材药物分析第14页1、名称与编排2、检验方法和程度3、标准品、对照品系指用于判别、检验、含量测定标准物质。4.准确度“精密称定”系指称取重量应准确至所取重量千分之一；“称定”系指称取重量应准确至所取重量百分之一；“精密量取”系指量取体积准确度应符合国家标准中对该体积移液管精密要求；“量取”系指用量筒或按照量取体积有效数位选取量具。

取用量为“约”若干时，系指取用量不得超出要求量10%。高等医药院校教材药物分析第15页（二)

正文

（1)品名（包含汉字名，汉语拼音名与英文名)；

（2)有机药品结构式；

（3)分子式与分子量；

（4)起源或有机药品化学名称；

（5)含量或效价要求；

（6)处方；

（7)制法；

（8)形状；

（9)判别；

（10)检验；

（11)含量或效价测定；

（12)类别；

（13)规格；

（14)贮藏；

（15)制剂等。高等医药院校教材药物分析第16页举例：苯

巴比妥BenbabtiuoPhenobarbital【形状】【判别】【检验】酸度;乙醇溶液澄清度中性或碱性物质;干燥失重;炽灼残渣.【含量测定】【类别】【贮藏】【制剂】（三）附录1、附录组成2.附录内容举例高等医药院校教材药物分析第17页（四）索引

（五）年版中国药典进展1、药典凡例和正文部分增修订2、药典附录增修订3.配套丛书

高等医药院校教材药物分析第18页

二、主要国外药典介绍（一）美国药典1、凡例（GeneralNoticesandRequirements）2、正文USP（24）-NF（19）收载药品品种为世界第一位到达3777个。3.附录USP（24）附录中普通检验和检定共分为6类。（二）英国药典

1、凡例2、正文3.附录（三）日本药局方JP（14）分为两部。

第一部包含凡例、制剂总则、普通试验法和各医药品。

第二部包含通则、生药总则、制剂总则、普通试验法和各医药品，还有原子量表、附录和索引。高等医药院校教材药物分析第19页三、药品检验工作机构和基本程序

药品检验工作基本程序普通为:

取样——分析{判别、检验、含量测定}——统计、写出检验汇报。1、取样基本标准——均匀、合理；有代表性，科学性，

真实性。2、分析次序不能颠倒。3、统计必须真实、简明、完整、详细。4.汇报应符合相关要求。高等医药院校教材药物分析第20页

第二章药品判别试验一、概述

药品判别试验（identificationtest）是依据药品分子结构、理化性质，采取化学、物理化学或生物化学方法来判断药品真伪。二、判别试验项目（一）

性状

药品性状（description）反应了药品特有物理性质，普通包含外观、溶解度和物理常数等。1、外观2.溶解度高等医药院校教材药物分析第21页3.物理常数物理常数是判定药品质量主要指标。其测定结果不但对药品含有判别意义，也反应了该药品纯杂程度。药典收载物理常数包含：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。（二）

普通判别试验

普通判别试验（generalidentificationtest）是依据某一类药品化学结构或理化性质特征，经过化学反应来判别药品真伪。对无机药品是依据其组成阴离子和阳离子特殊反应；对有机药品则大都采取经典官能团反应。高等医药院校教材药物分析第22页1、有机氟化物2、有机酸盐3、芳香第一胺类4、托烷生物碱类5.无机金属盐6、无机酸根（三）专属判别试验

药品专属判别试验（specificidentificationtest）是证实某一个药品依据，它是依据每一个药品化学结构差异及其所引发物理化学特征不一样，选取一些特有灵敏定性反应，来判别药品真伪。高等医药院校教材药物分析第23页

三、判别方法（一）化学判别方法

1、呈色反应判别法2、沉淀生成反应判别法3、荧光反应判别法4、气体生成反应判别法5.测定生成物熔点（二）

光谱判别法1、紫外光谱判别法2、红外光谱判别法红外光谱法是一个专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）判别方法。主要用于组分单一、结构明确原料药、尤其适合用于用其它方法不易区分同类药品，如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。高等医药院校教材药物分析第24页（三）色谱判别法

1.薄层色谱判别法

瑞士CAMAGSCANNER3薄层扫描仪岛津CS-9000双波长薄层扫描仪高等医药院校教材药物分析第25页2.高效液相色谱判别法

气相色谱判别法高等医药院校教材药物分析第26页3.纸色谱判别法（四）生物学法（五）药品判别方法新动向1、仪器方法用于药品判别数量大大增加，尤其是红外光谱法和高效液相色谱法。2、制剂广泛采取IR法判别。3.判别条目简练，选择专属方法进行判别，平均每个品种收载2条左右。高等医药院校教材药物分析第27页

四、判别试验条件

判别试验目标是判断药品真伪。

（一)溶液浓度

（二)溶液温度

（三)溶液酸碱度

（四)试验时间

（五)干扰成份存在

高等医药院校教材药物分析第28页五、判别试验灵敏度（一）反应灵敏度和空白试验

在一定条件下，能在尽可能稀溶液中观察出尽可能少许供试品，反应对这一要求所能满足程度，即称为反应灵敏度（sensitivity）。它以两个相互相关量，即最低检出量（minimumdetectablequantity）（又称检出限量）和最低检出浓度（minimumdetectableconcentration）（又称界限浓度）来表示。

所谓空白试验，就是在供试品判别试验完全相同条件下，除不加供试品外，其它试剂均一样加入而进行试验。（二）提升反应灵敏度方法1、加入与水互不相溶有机溶剂提取浓集2.改进观察方法高等医药院校教材药物分析第29页

附一、折光率测定法

定义：

利用测定物质折光率来进行定性定量分析方法，叫折光法。

折光率是用折光计来测定，惯用阿贝折光计测定。（一)折光普通原理：

光线自一个透明介质进入另一个透明介质时候，因为两种介质密度不一样，光进行速度发生改变，所以，光线就发生如图折射：高等医药院校教材药物分析第30页高等医药院校教材药物分析第31页高等医药院校教材药物分析第32页高等医药院校教材药物分析第33页高等医药院校教材药物分析第34页高等医药院校教材药物分析第35页高等医药院校教材药物分析第36页高等医药院校教材药物分析第37页高等医药院校教材药物分析第38页高等医药院校教材药物分析第39页高等医药院校教材药物分析第40页高等医药院校教材药物分析第41页高等医药院校教材药物分析第42页高等医药院校教材药物分析第43页高等医药院校教材药物分析第44页高等医药院校教材药物分析第45页高等医药院校教材药物分析第46页高等医药院校教材药物分析第47页高等医药院校教材药物分析第48页第三章

药品杂质检验

药品杂质是指药品中存在无治疗作用、或影响药品稳定性和疗效、甚至对人体健康有害物质。

第一节概述

一、药品纯度要求

药品纯度即纯净程度，是反应药品质量一项主要指标。

对药品质量评价:三效:高效、长期有效、速效;

三小:毒性、用量、副作用小。高等医药院校教材药物分析第49页药品纯度

通常能够从（１)药品结构，（２)外观性状，（３)理化常数，（４)杂质检验，（５)含量测定等方面作为一个有联络整体来表明和评定药品纯度。所以在药品质量标准中就要求药品纯度要求。不过杂质多了：

１)药品理化常数改变

２)外观性状改变

３)稳定性下降

４)含量下降、活性下降

５)毒副作用上升

高等医药院校教材药物分析第50页二、杂质起源和种类

（一）杂质起源1、生产过程中引入杂质：起源于制备——原料、溶剂、试剂、中间产品、副产品、器械等等。

2.贮存过程中引入杂质：起源于外界条件——包装、运输、保管不妥（受光线、温度、空气、微生物影响等等）。高等医药院校教材药物分析第51页

（二)杂质种类

药品中杂质起源可分为普通杂质和特殊杂质。

普通杂质是指在自然界分布较广泛，在各种药品生产和贮藏过程中轻易引入杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。

特殊杂质是指在特定药品生产和贮藏过程中引入杂质。允许量。高等医药院校教材药物分析第52页三、杂质限量检验

（一)、没有必要把药品中杂质完全除去从杂质起源考虑，完全除去药品中杂质，即不可能也没有必要。

（二)、药品中杂质允许最大程度标准：

在不影响药品疗效和不发生毒性前提下，允许药品中存在有一定量杂质。这一允许量被称为杂质限量。

杂质限量——指药品中所含杂质最大允许量。

药品中杂质检验多数采取限量检验（limittest)，该检验不要求测定杂质含量，而只检验其是否超出限量。

因为以上原因，所以，药品杂质检验又称纯度检验，程度（限量)检验。高等医药院校教材药物分析第53页

A.取一定量供试品——————结果

（产生色或浑浊）B.取一定量与被检杂质相同同上处理

纯物质或其它对照品标准液————结果

（色或浑浊）

药品限量检验方法:比色法或比浊法当A>B时:本项不合格。当A<B时:本项合格。当A=B时:重做。依法处理然后比较A和B:高等医药院校教材药物分析第54页

杂质限量

通惯用百分之几(%)或百万分之几(10-6)来表示。1μg=10-6g=10-3mg杂质限量计算：

杂质限量（L）=———————×100%

杂质限量=×100%

L=—————×100%杂质最大允许量供试品量标准溶液体积（V）×标准溶液浓度（C）供试品量（S）CV

S高等医药院校教材药物分析第55页

应用示例一对乙酰氨基酚中氯化物检验

取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml时，加热溶解后冷却，滤过，取滤液25ml，依法检验氯化物（中国药典，附录VIIIA)，所发生浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml（每1ml相当于10µgcl-)制成对照液比较，不得更浓。问氯化物限量是多少？L=C·VS

×100%=0.01×52×103×25100×100%=0.01%高等医药院校教材药物分析第56页第二节

普通杂质检验方法

一、氯化物检验法1.原理：中国药典对氯化物检验是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定标准氯化钠溶液在相同条件下生成氯化银浑浊液比较，浊度不得更大。Cl-AgCl（微量时浑浊）

稀HNO3AgNO3高等医药院校教材药物分析第57页2、方法：比浊法A.取一定量供试品产生AgCl(浑浊）

依法处理稀HNO3AgNO3同上处理B.取一定量标准NaCI液同上

（标准NaCI浓度C=0.01mgCI-/ml）

（如A浊度比B小则本项合格）。高等医药院校教材药物分析第58页3、注意点：（1）加HNO3目标；A、AgCI不溶于HNO3可在HNO3中产生最好

乳化浑浊；B、加速AgCI产生；C.预防产生Ag20，Ag3PO4,Ag2CO3因为

这些溶于HNO3这么就能够预防CO32-，OH-，PO43-干扰。（2）加HNO3量要适当

（3）CI-浓度（4）温度高等医药院校教材药物分析第59页（6）有干扰物必须消除。A.如：（有色）取两分等量供试品：a、一份做供试液（A管）———依法检验

b、另一份AgCI滤液（B管加入

要求量标准NaCI溶液作为对照管）。

加稀HNO3过滤B、用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含

有硝酸水溶液洗净后使用。

C.Br-、I-与AgNO3作用均能生成Ag（卤化银）；

硫氰酸盐能与AgNO3作用生成硫氰酸银，

以上都有干扰。所以，必须排除。（5)严格按照操作次序进行AgNO3高等医药院校教材药物分析第60页D.存在于有机物结构中氯化物检验。

方法：必须使结状态氯变为游离状态氯。

如有机破坏方法：

一些药品含有有机氯杂质能够采取本法。ClCl-（7)、溶于水有机药品（如有机酸碱金属盐)按药典附录方法直接检验氯化物。不溶于水有机药品，多数加水振摇，使所含氯化物溶解，滤过，取滤液依法检验（也有用丙酮溶解后检验)。高等医药院校教材药物分析第61页SO42-BaSO4（SO42-微量时浑浊)二、

硫酸盐检验法

1.原理：药品中存在微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件生成浑浊比较，浊度不得更大。

2、方法：比浊法依法处理A.供试品一定量产生BaSO4浑浊HCl，25%BaCI2

同上B.取一定量K2SO4标准液同上HCl25%BaCI2高等医药院校教材药物分析第62页3.注意点：

（1）加HCI要适量,预防BaCO3,Ba3（PO4）2等生成。

（2）本法适宜比浊浓度为0.1~0.5mgSO42-/50ml。

（3）BaCl2试液浓度在10%~25%范围内。

（4）供试液如需滤过，应先用盐酸使成酸性蒸馏水洗净滤纸中硫酸盐。

（5）有色供试品溶液处理及其它注意事项与氯化物检验法相同。

高等医药院校教材药物分析第63页1、原理铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子,再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈颜色比较,颜色不得更深。

H+3-移至50mI纳氏比色管稀HCI4mI过硫酸铵50mg按上法三、铁盐检验法:Fe3++6SCN-２、方法:比色法（１)供试品＋水２５mI加水稀释或约35mI后[Fe（SCN)6］液（30100)3mI，再加水适量稀释成50mI，摇均如显色与标准溶液比较。（2)标准铁溶液处理显色（一)硫氰酸盐法加硫氰酸铵溶高等医药院校教材药物分析第64页（二)

巯基醋酸法（“巯”音“球”)BP采取巯氰醋酸（mercaptoaceticacid)法检验药品中铁盐。

原理硫氰醋酸还原Fe3＋为Fe2＋，在氨碱性溶液中深入与Fe2＋作用生成红色配位离子，与一定量标准铁溶液经同法处理后产生颜色进行比较，以限制铁量。3)注意点：1)加HCI预防铁盐水解2)加过硫酸铵[（NH4)2S2O8]氧化剂，氧化供试品中F2+生成Fe3+;预防光线使硫氰酸铁还原或分解退色。

3)有干扰要排除。高等医药院校教材药物分析第65页2Fe3＋＋2HSCH2COOH2Fe2＋＋SCH2COOH＋2H＋SCH2COOH2Fe3＋＋2HSCH2COOHFe（SCH2COOH)2＋H＋

Fe（SCH2COOH)2[Fe（SCH2COO)2]2－＋2H20

2OH-

红色高等医药院校教材药物分析第66页1.原理H+（1）Pb2+PbS（量少时，呈色黄黑）H2S（2）、凡溶于碱不溶于稀酸药品，如磺胺类，巴比妥类等，均在碱性溶液中以硫化钠试液为显色剂。四、重金属检验法:OH-

Pb2+

PbS

Na2S（3)含芳环或杂环有机药品，先进行结构破坏，使共价铅变为游离铅，再采取上述（1)或者（2)法检验。高等医药院校教材药物分析第67页

２.方法

第一法硫代乙酰胺法

原理硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液)条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色硫化物均匀混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所展现颜色比较，颜色不得更深。CH3CSNH2＋H20CH3CONH2＋H2SH2S＋Pb2＋PbS＋2H＋

pH3.5高等医药院校教材药物分析第68页操作方法（比色法）：

依法处理A、一定量供试品PbSHAC.H2S

注意点：

pH：pH3.5在此条件下沉淀完全;不溶于HAC检品在OH-中进行。

同上B.取一定标准铅液PbSPb(NO3)2高等医药院校教材药物分析第69页

第二法适合用于在水、乙醇中难溶,或能与金属离子形成配位化合物有机药品。

原理将供试品炽灼破坏后,加硝酸加热处理,使有机物分解,破坏完全后,再按第一法进行检验。

第三法适合用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液药品,如磺胺类、巴比妥类药品等。

原理在碱性介质中,以硫化钠为显色剂,使Pb2＋生成PbS微粒混悬液,与一定标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较不得更深。高等医药院校教材药物分析第70页

注意点：

A.加HNO3目标：

水解

盐+H2O酸+碱

中和B.临用前配制：溶液愈释愈易水解，所以临用前稀释。（3）排除干扰物质（4）含芳环或杂环有机物，按药典方法先炽灼破环使

与有机物分子结合重金属游离，再依法检验。（5）微孔滤膜过滤法。

高等医药院校教材药物分析第71页

第四法微孔滤膜法。适合用于重金属限量低药品。（含2～5μg重金属)检验。。

原理使重金属生成硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量标准铅溶液同法处理后产生色斑深浅，确定重金属是否超出限量。

试验装置图见下页

高等医药院校教材药物分析第72页高等医药院校教材药物分析第73页五、

砷盐检验法

（一)古蔡（Gutzeit)氏法

原理金属锌与酸作用产生新生态氢，与药品中微量砷盐反应生成含有挥发性砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色砷斑，与一定量标准砷溶液所生成砷斑比较，颜色不得更深。高等医药院校教材药物分析第74页原理：

ASO33-（亚砷酸盐)ASH3————

AsH（HgBr)2黄色

As（HgBr)3棕色Zn+HCI新生态H2HgBr2试纸砷斑:高等医药院校教材药物分析第75页As3＋＋3Zn＋3H＋3Zn2＋＋AsH3AsO3-＋3Zn＋9H＋3Zn2+＋3H2O＋AsH3AsH3＋3HgBr23HBr＋As（HgBr）3（黄色）

2As（HgBr）3＋AsH33AsH（HgBr）2（棕色）

As（HgBr）3＋AsH33HBr＋As2Hg3（棕黑色）高等医药院校教材药物分析第76页装置:高等医药院校教材药物分析第77页

方法

注意事项

供试品处理

含锑药品，如葡萄糖酸锑钠，用古蔡氏法检验时，锑盐也可被还原为锑化氢，与溴化汞试纸作用，产生灰色锑斑，干扰砷斑检出：

SbH3＋HgBr2SbH2（HgBr)＋HBr

可改用白道田夫（Betterdorff)法检验砷盐。方法原理是氯化亚锡在盐酸中将砷盐还原成棕褐色胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理后颜色比较，可控制

高等医药院校教材药物分析第78页

供试品中砷量：2As3＋＋3SnCl2＋6HCl2As＋3SnCl4＋6H＋

此法反应灵敏度以As2O3计20µg。少许二氯化汞加入，能提升反应灵敏度达20µg/10ml。（二)二乙基二硫代氨基甲酸银法（silvediethyldithiocarbamate)[简称Ag（DDC)法]

本法为中国药典和USP（24)收载方法。不但可用于砷盐限量检验，也可用作微量砷盐含量测定。原理金属锌与酸作用，产生新生态氢，与微量砷盐反应，生成含有挥发性砷化氢；砷化氢遇二乙基二硫代氨基甲酸银，高等医药院校教材药物分析第79页AsH3＋6Ag（DDC)＋3As（DDC)3＋6Ag＋3·HDDC使其还原产生红色胶态银,用目视比色法或在510nm波优点测定吸收度,再以一定量标准砷溶液用同法处理后得到有色溶液进行比较。

高等医药院校教材药物分析第80页高等医药院校教材药物分析第81页六、

溶液颜色检验法

有色杂质可能在药品生产过程中引入，也可能由贮藏过程产生。对溶液颜色进行检验，可控制药品中有色杂质含量。中国药典采取检验方法有三种。

（一)目视比色法

（二)分光光度法

（三)色差法

原理

方法高等医药院校教材药物分析第82页七、

易炭化物检验法

易炭化物检验法是检验药品中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色微量有机杂质。这类杂质多数结构未知,用硫酸呈色方法能够简便地控制他们总量。方法注意事项八、

溶液澄清度检验法

澄清度可反应药品溶液中微量不溶性杂质存在情况,在一定程度上可反应药品质量和生产工艺水平,对于供制备注射液用原料药品纯度检验尤为主要。

高等医药院校教材药物分析第83页原理

乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成不溶于水甲醛白色浑浊。（CH2)6N4＋6H2O 6HCHO＋4NHSHCHO＋H2NNH2H2C=NNH2＋H2O

方法

注意事项高等医药院校教材药物分析第84页九、

炽灼残渣检验法

中国药典和美国药典对炽灼残渣（residueonignition)定义：有机药品经炭化或挥发性无机药品加热分解后，高温炽灼，所产生非挥发性无机杂质硫酸盐。英国药典称去其为硫酸灰分（sulphatedash)。炽灼残渣检验用于控制有机药品和挥发性无机药品中存在非挥发性无机杂质。方法注意事项高等医药院校教材药物分析第85页十、

干燥失重测定法

干燥失重系指药品在要求条件下，经干燥后所降低量，以百分率表示。干燥失重量应恒重。由干燥至恒重第二次及各次称重均应在要求条件下继续干燥1h后进行。

（一)常压恒温干燥法

本法适合用于受热较稳定药品。

方法

注意事项高等医药院校教材药物分析第86页（二)

干燥剂干燥法

本法适合用于受热分解、或易于挥发供试品。干燥剂：（1)硅胶(吸水力大于硫酸,使

用方便,价廉,变色,能够重复使用)

（2)硫酸（吸水次之，较廉价)

（3)五氧化二磷（吸水力强，但价高)（三)减压干燥法

本法适合用于熔点低、受热不稳定或难驱除水分药品。原理方法注意事项高等医药院校教材药物分析第87页（四)热分析法

在程序控制温度情况下，测定物质物理、化学改变与温度关系一类仪器分析方法称为热分析法。该方法含有样品用量少，灵敏、快速等优点，在药品分析中广泛用于物质熔点、多晶型、纯度、溶剂化物、水分及热解产物测定。依据测定物理量不一样，热分析法又有不一样名称。药品分析中惯用热分析方法是：热重分析法、差示热分析法、差示扫描量热法。高等医药院校教材药物分析第88页1．热重分析法（thermogravimetricanalysis，TGA)2．差示热分析法（differentialthermalanalysis)3．差示扫描量热法（differentialscanningcalorimetry，DSC)高等医药院校教材药物分析第89页十一、有机溶剂残留量测定中国药典附录收载残留溶剂测定法有溶液直接进样法和顶空进样法两种。第一法溶液直接进样法方法注意事项第二法顶空进样法方法注意事项应用示例一壬苯醇醚中二氧六环检验应用示例

二秋水仙碱中氯仿和醋酸乙酯检验高等医药院校教材药物分析第90页

第三节特殊杂质检验方法

一、利用药品和杂质在物理性质上差异

（一)臭味及挥发性差异

（二)颜色差异

（三)溶解行为差异

（四)旋光性质差异

（五)

对光吸收性质差异1．紫外分光光度法2．原子吸收分光光度法3．红外分光光度法4．荧光分析法高等医药院校教材药物分析第91页（六)

吸附或分配性质差异1．薄层色谱法2．纸色谱法3．高效液相色谱法4．气相色谱法二、利用药品和杂质在化学性质上差异

（一)酸碱性差异1．

要求消耗滴定液体积2．

PH值法3．指试剂法高等医药院校教材药物分析第92页（二)氧化还原性差异（三)杂质与一定试剂反应产生沉淀（四)

杂质与一定试剂反应产生颜色（五)

杂质与一定试剂反应产生气体（六)

药品经有机破坏后检验杂质1．硒检验法2．氟检验法高等医药院校教材药物分析第93页第四章药品定量分析与分析方法验证第一节

定量分析样品前处理方法一、概述

含金属或卤素药品，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁、碘苯酯、磺溴酞钠等，在分析前需要经过不一样方法处理之后，方可进行测定。处理方法因金属或卤素在分子中结合牢靠程度而异，如：有机卤素药品，所含卤素原子均直接与碳原子相连，但不一样药品中卤素所处位置不一样，则与碳原子结合牢靠程度就有差异。假如卤素和芳环相连接，则结合牢靠，与脂肪链碳原子相连接，则结合不牢靠;高等医药院校教材药物分析第94页而含金属有机药品，有两种情况：一是金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及酚金属盐或配位化合物，称为含金属有机化合物，其分子结构中金属原子结合不够牢靠，在水溶液中既可离解出金属离子，如有机结构部分不干扰分析时，可在溶液中直接进行其金属判别或含量定；二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接，结合状态比较牢，称为有机金属药品，在溶液中其金属普通不能解离成离子状态，应该依据共价键牢靠程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析状态，应该依据共价键牢靠程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析状态（多转变为无机金属盐或离子)，方可进行其金属判别或含量测定。高等医药院校教材药物分析第95页二、不经有机破坏分析方法（一)

直接测定法

凡金属原子不直接与碳原子相连含金属药品或一些C-M（金属原子直接与碳原子相连)键结合不牢靠有机金属药品，在水溶液中能够电离，因而不需有机破坏，可直接选取适当方法进行测定。（二)经水解后测定法1．直接回流后测定法2．用硫酸水解后测定法（三)经氧化还原后测定法1．

碱性还原后测定高等医药院校教材药物分析第96页2．

酸性还原后测定3．

利用药品中可游离金属离子氧化性测定含量三、

经有机破坏分析方法（一)湿法破坏1．

硝酸-高氯酸法2．

硝酸-硫酸法3．

硫酸-硫酸盐法4．

其它湿法（二)干法破坏高等医药院校教材药物分析第97页

（三)氧瓶燃烧法氧瓶燃烧法（oxygenflaskcombustionmethod)系将有机药品放入充满氧气密闭燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生欲测物质吸收于适当吸收液中，然后依据欲测物质性质，采取适宜分析方法进行判别、检验或测定含卤素有机药品或含硫、氮、硒等其它元素有机药品。

高等医药院校教材药物分析第98页

本法是快速分解有机物简单方法，它不需要复杂设备，就能使有机化合物中待测元素定量分解成离子型。该方法被各国药典所收载。1．

仪器装置燃烧瓶为500ml、1000ml、或ml磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空心、底部熔封铂丝一根（直径为1mm)，铂丝下端做成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度2∕3，如图

高等医药院校教材药物分析第99页2.

称样3.

燃烧分解操作法4.

吸收液选择高等医药院校教材药物分析第100页

第二节

定量分析方法特点

一、

容量分析法（一)

容量分析法特点（二)

容量分析法计算问题1．

滴定度2．

滴定度（T)计算3．

百分含量计算

（1)直接滴定法含量%=V×T´W×100%=V×T×FW×100%

（2)回滴定法（剩下滴定法)高等医药院校教材药物分析第101页

二、

光谱分析法（一)紫外-可见分光光度法1．特点紫外-可见分光光度法是依据物质分子对波长为200nm～760nm这一范围电磁波吸收特征所建立起来光谱分析方法。主要特点以下：（1)灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml。（2)准确度高，相对误差为2%～5%。（3)仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。含量%=（VA×FA—VB×FB）×T

W×100%高等医药院校教材药物分析第102页2．郎伯-比耳定律3．仪器校正和检定4．对溶剂要求5．测定法（二)

荧光分析法1．特点2．荧光分析仪3．含量测定高等医药院校教材药物分析第103页

三、

色谱分析法

色谱分析法（又称层析法)依据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。又可依据分离方法分为：纸色谱、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。（一)高效液相色谱法

1．对仪器普通要求２．系统适用性试验

（1)色谱柱理论塔板数（n)

（2)分离度高等医药院校教材药物分析第104页

３.

测定法

（1)内标法加校正因子测定供试品中主成份含量：AS/CS

AR/CR

Ax校正因子（f）=含量（C×）=f․A´S/C´S

（2)外标法测定供试品中主成份含量：

外标法可分为标准曲线法和外标一点法。1)标准曲线法：2)外标一点法：高等医药院校教材药物分析第105页(二)

气相色谱法1.

对仪器普通要求2.

系统适应性试验3.

测定法高等医药院校教材药物分析第106页第三节

药品质量标准分析方法验证

验证内容有：准确度、精密度（包含重复性、中间精密度和重现性)、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

一、

准确度

（一)含量测定准确度

准确度系指用该方法测定结果与真实值或参考值靠近程度，普通以回收率（%)表示。准确度应在要求范围内建立。回收率计算可按下式：

回收率%=测定平均值-空白值加入量×100%(二)

数据要求高等医药院校教材药物分析第107页二

、精密度

精密度系指在要求测定条件下,同一个均匀样品,经过多次取样测定所得结果之间靠近程度。(一)

精密度表示方法1.

偏差(deviation,d)

２.标准偏差(standarddeviation,SD)S=Σ（Xi－X）2n－1√高等医药院校教材药物分析第108页3.相对标准偏差(relativestandarddeviation,RSD),也称变异系数(coefficientofvaration,CV)RSD=标准偏差平均值×100%=SX×100%(二)

重复性、中间精密度及重现性1.重复性在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果

精密度称为重复性。2.中间精密度同一个试验室，不一样时间由不一样分析人员用不

同设备测定结果精密度，称为中间精密度。3.重现性在不一样试验室由不一样分析人员测定结果精密度，称为重现性。高等医药院校教材药物分析第109页(三)

数据要求三、专属性

专属性系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采取方能准确测定出被测物特征。(一)

判别反应(二)

含量测定和杂质测定四、

检测限

检测限（limitofdetection，LOD)是试样中被测物能被检测出最低浓度或量。LOD是一个程度检验效能指标，即反应方法与仪器灵敏度和噪音大小，也表明样品经处理后空白（本底)值高低。它无需定量测定，只要指出高于或低于该要求浓度或量即可。依据所采取方法来确定检测限。

高等医药院校教材药物分析第110页(一)

惯用方法1.非仪器分析目视法2.仪器分析时测定法（二)数据要求五、定量限

定量限（limitofquantitation，LOQ)是指样品中被测物能被定量测定最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定定量限。六、线性

线性系指在设计范围内,测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系程度。

高等医药院校教材药物分析第111页七、范围

范围是指能抵达一定精密度、准确度和线性、测试方法适用高低限浓度或量区间。八、耐用性

耐用性系指在测定条件有小变动时，测定结果不受影响承受程度，为常规检验提供依据。1.用于判别试验2.用于原料药中杂质测定或制剂中降解产物测定方法3.用于原料药中主成份或制剂中有效组分含量测定及溶出度测定

高等医药院校教材药物分析第112页第四节

生物样品分析方法基本要求一、惯用样品种类、采集和储贮藏

生物样品包含各种体液和组织，但实际上最惯用是比较轻易得到血液（血浆、血清、全血)尿液、唾液。(一)

血样血浆（plasma)和血清（serum)是最惯用生物样品。(二)

唾液(三)

尿液二、生物样品分析前处理技术(一)

去除蛋白质高等医药院校教材药物分析第113页1．加入与水相混溶有机溶剂2．加入中性盐3．加入强酸4．加入含锌盐及铜盐沉淀剂5．酶解法（二)缀合物水解（三)分离、纯化与浓集1．液-液提取法(liquid-liquidextraction,LLE)2．液-固提取法(liquid–solidextraction,LSE)3．被测组分浓集高等医药院校教材药物分析第114页(四)

化学衍生化1.GC中化学衍生化法2.HPLC中化学衍生化法三、

定量分析方法验证(一)

特异性

必须证实所测定物质是原形药品或特定活性代谢物，内原性物质和对应代谢物及同时服用其它药品不得干扰样品测定。对于色谱法最少要提供空白样品色谱图、空白生物样品加标准物质色谱图及用药后样品色谱图。高等医药院校教材药物分析第115页(二)

标准曲线与线性范围

所测定物质浓度与响应相关性，用回归分析方法所得回归方程来评价。普通控制相关系数r≥0.9900。标准曲线高低浓度范围为线性范围，在线性范围内浓度测定结果应到达试验要求精密度和准确度。(三)

精密度与准确度

要求选择三个浓度质控样品同时进行方法精密度和准确度考查，低浓度选择在最低定量限（LOQ)附近，高浓度在标准曲线上限附近，中间选一个浓度，每一个浓测定五个样品。

高等医药院校教材药物分析第116页

精密度用质控样品日内和日间相对标准偏差（RSD)表示，普通RSD应小于15%，在LOQ附近RSD应小于20%。

准确度是指用特定方法测得生物样品浓度与真实浓度靠近程度，可用相对回收率表示，即采取“回收率”或“加样回收率”得到药品自样品中回收率。其值普通应在85%～115%范围内，在LOQ附近应在80%～120%范围内。高等医药院校教材药物分析第117页(四)

最底定量限

最低定量限指标准曲线最低浓度点,也称灵敏度,表示测定样品中符合准确度和精密度要求最低药品浓度,要求LOQ最少能满足测定3～5个半衰期时样品中药品浓度或Cmax1/10～1/20时药品浓度。(五)

样品稳定性(六)

提取回收率(七)

质控样品(八)质量控制高等医药院校教材药物分析第118页第五章

巴比妥类药品分析

一、巴比妥类药品结构剖析

巴比妥类药品为环状酰脲类镇静催眠药，是巴比妥酸衍生物，其基本结构通式为:因为5位取代基R1和R2不一样,形成不一样巴比妥类药品。NHNHOOOR1R2213456高等医药院校教材药物分析第119页二、巴比妥类药品理化性质（一)弱酸性：巴比妥类药品母核环状结构中含有1，3-二酰亚胺基团，能使其分子发生酮式-稀醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离。

+H+–H+pK1=8–H+–H+pK2=12高等医药院校教材药物分析第120页（二)水解反应1．巴比妥类药品水解本类药品分子结构中含酰亚胺基团，与碱溶液共沸即水解释放氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。2．巴比妥类药品钠盐水解本类药品钠盐，在吸湿情况下也能水解。(三)与重金属离子反应1．与银盐反应巴比妥类药品分子结构中含有酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，

生成钠盐而溶解，再与硝酸银反应，首先生成可溶性一银盐，加入过量硝酸银溶液，则生成难溶性二银盐白色沉淀。此反应可用于本类药品判别和含量测定。高等医药院校教材药物分析第121页+AgNO3Na2CO3++NaHCO3

NaNO3

++AgNO3NaNO3+高等医药院校教材药物分析第122页2．与铜盐反应3．与钴盐反应4．与汞盐反应（四)与香草醛(Vanillin)反应

巴比妥类药品分子结构中丙二酰脲基团中氢比较活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。（五)紫外吸收光谱特征（六)薄层色谱行为特征1.薄层色谱法2.高效液相色谱法高等医药院校教材药物分析第123页（七)显微结晶1．药品本身晶形2．反应产物晶形三、判别试验

巴比妥类药品结构特征和含有理化特征，如分子结构中含有酰亚胺基，硫元素与不一样取代基等均可用于本类药品判别试验。惯用判别试验方法有丙二酰脲类判别试验，制备衍生物测定熔点，芳环反应，不饱和键反应，硫和钠元素等。另外，巴比妥类药品光谱和色谱行为特征也可用于本类药品判别。高等医药院校教材药物分析第124页（一)丙二酰脲类判别反应1．银盐反应方法2．铜盐反应方法（二)测定熔点1．司可巴比妥钠判别2．苯巴比妥钠判别3．巴比妥判别（三)利用特殊取代基或元素判别试验1．利用不饱和取代基判别试验（1)与碘试液反应：（2)与高锰酸钾反应高等医药院校教材药物分析第125页2．利用芳环取代基判别试验（1)硝化反应（2)与硫酸-亚硝酸钠反应（3)与甲醛-硫酸反应3．硫元素判别试验四、特殊杂质检验(一)苯巴比妥特殊杂质检验1．酸度2．溶液澄清度3．中性或碱性物质高等医药院校教材药物分析第126页(二)司可巴比妥钠特殊杂质检验1.溶液澄清度2.中性或碱性物质五、

含量测定(一)

银量法

基于巴比妥类药品在适当碱性溶液中，可与银离子定量成盐。

其测定反应见本章理化特征项下。所以，可采取银量法测定本类药品及其制剂含量。如苯比妥及其钠盐异戊巴比妥及其钠盐以及他们制剂，中国药典均采取银量法测定其含量。高等医药院校教材药物分析第127页

在滴定过程中,巴比妥类药品首先形成可溶性一银盐,当被测定巴比妥类药品完全形成一银盐后,稍过量银离子就与巴比妥类药品形成难溶性二银盐沉淀使溶液变浑浊,以此指示滴定终点。(二)

溴量法

凡在5位取代基含有不饱和键巴比妥类药品,其不饱和键能与溴定量地发生加成反应,故可采取溴量法测定其含量。

高等医药院校教材药物分析第128页（三)酸碱滴定法

巴比妥类药品呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。此法即使未被中国药典收载，但也可用于本类药品含量测定，惯用方法以下：1．在水-乙醇混合溶剂中滴定基于本类药品在水中溶解度较小，滴定时多在醇溶液或含水醇溶液中进行，这样可防止反应中产生弱酸盐易水解而影响滴定终点。常以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。高等医药院校教材药物分析第129页2.胶束水溶液中测定方法本法是在有机表面活性剂胶束水溶液中进行进行滴定，用指示剂或电位法指示终点。因表面活性剂能改变巴比妥类药品离解平衡，使药品Ka增大，即使巴比妥类药品酸性增强，所以使滴定终点改变显著。3.非水溶液滴定法巴比妥类药品在非水溶液中酸性增强，用碱性标准溶液滴定时，终点较为显著，可取得比较满意结果。高等医药院校教材药物分析第130页（四)紫外分光光度法

巴比妥类药品在酸性介质中几乎不电离，无显著紫外吸收。但在碱性介质中电离为含有紫外吸收特征结构，

因而可采取紫外分光光度法测定其含量。1．直接测定紫外分光光度法2．提取分离后紫外分光光度法3．差示紫外分光光度法（五)高效液相色谱法1．色谱条件2．样品预处理3．线性范围和最底检测限高等医药院校教材药物分析第131页第六章

芳酸及其酯类药品分析第一节

经典药品分类与理化性质一、水杨酸类(一)

经典药品(二)

主要理化性质二、

苯甲酸类(一)

经典药品(二)

主要理化性质三、

其它芳酸类（一)经典药品（二)主要理化性质高等医药院校教材药物分析第132页第二节

判别试验一、与铁盐反应1.水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物。2.苯甲酸碱性水溶液或苯甲酸中性溶液，与三氯化铁试液生成碱式苯甲酸铁赭色沉淀。3.丙磺舒加少许氢氧化钠试液使生成钠盐后，在PH约5.0～6.0水溶液中与三氯化铁试液反应，既生成米黄色沉淀。

高等医药院校教材药物分析第133页4.布落芬无水乙醇溶液，加入高氯酸羟胺-无水乙醇试液及N,N’-双环已基羧二亚胺(DCC)-无水乙醇试液，